引起白化的巴马香猪MC1R突变基因及其应用的制作方法

文档序号:11145289阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种引起白化的巴马香猪MC1R突变基因,其特征在于,MC1R基因的第894位之后新插入CC两个碱基,该突变可引起巴马香猪白化并呈现隐性遗传。

2.一种利用权利要求1所述的引起白化的巴马香猪MC1R突变基因在制备医用动物模型中的应用。

3.一种利用权利要求1所述的引起白化的巴马香猪MC1R突变基因在制备白化宠物用猪的应用。

4.一种利用权利要求1所述的引起白化的巴马香猪MC1R突变基因在制备一种遗传标记,作为评判品种的纯度、遗传稳定性、亲缘关系及在遗传育种配套系培育中确定亲本的杂交组合类型中的应用。

5.一种检测巴马香猪隐性白化位点的基因型的方法,其特征在于,是以检测巴马香猪MC1R基因第894位脱氧核糖核酸是否有CC插入,即第889位脱氧核糖核酸为起始的六个连续C是否突变为八个连续C,确定待测巴马香猪的基因型是--/--、CC/--或者CC/CC,其中CC/CC基因型的巴马香猪的毛色呈现全白,而--/--和CC/--基因型的巴马香猪的毛色呈现两头乌黑中间白;所述--/--基因型的个体为巴马香猪MC1R基因的自5’末端第894位脱氧核糖核酸无CC插入的纯合体;所述CC/CC基因型的个体为巴马香猪MC1R基因的自5’末端第894位脱氧核糖核酸有CC插入的纯合体;所述CC/--基因型的个体则为两个等位基因中仅有一个基因有CC插入的杂合体。

6.根据权利要求5所述的检测巴马香猪隐性白化位点的基因型的方法,其特征在于,确定待测巴马香猪MC1R基因第894位脱氧核糖核苷酸后是否插入CC的方法可采用测序分析方法。

7.根据权利要求6所述的检测巴马香猪隐性白化位点的基因型的方法,其特征在于,测序分析包括PCR扩增和对PCR扩增产物进行测序;所述PCR扩增用的引物对设计:以巴马香猪基因组DNA为模板进行PCR扩增的产物含有巴马香猪MC1R基因的第889位至第896位脱氧核糖核苷酸;PCR扩增得到的DNA片段为序列1所示的核苷酸序列或序列2所示的核苷酸序列。

8.根据权利要求7所述的检测巴马香猪隐性白化位点的基因型的方法,其特征在于,测序方法中,设计引物如下:

正向引物F:5’-GGAGAGGAGGCTGCTGG-3’

反向引物R:5’-TGGACACCTCCAGGCACT-3’

用上述引物对在巴马香猪基因组DNA中进行PCR扩增,PCR反应体系为:2×Taq Unicorn Premix 12.5μl,DNA(1/100)1.0μl,Primer F2(10μM)0.5μl,Primer R2(10μM)0.5μl,Add H2O To 25.0μl;PCR反应程序:94℃4min;94℃20sec,57℃20sec,72℃20sec,20cycles;72℃3min;10℃。

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