一种耐酸互营丙酸产甲烷菌系的驯化方法与流程

文档序号:12248602阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种耐酸互营丙酸产甲烷菌系的驯化方法,其特征在于,所述耐酸互营丙酸产甲烷菌系包括丙酸氧化细菌群、互营丙酸氧化菌群、乙酸裂解产甲烷菌群、氢营养型产甲烷菌群,该方法以沼气发酵液为接种物,以丙酸为碳源,通过循环阶梯性降低培养基中pH的方法驯化沼气发酵液来获得耐酸互营丙酸产甲烷菌系,该方法包括以下步骤:在氮气和二氧化碳体积比为4:1的混合气氛中,按体积比为19:1-9:1将接种物接种到丙酸钠浓度为0.7g/L的新鲜培养基中,放入试剂瓶中37℃进行培养,每24h置换新鲜的培养基,10-15天为一个培养周期,每个循环包括3-4个培养周期,4个培养周期的pH设置为依次为7.5-7.0、7.0-6.5、6.5-6.0、6.0-5.5;3个培养周期的pH设置依次为7.5~7.0,7.0~6.5,6.5~6.0;完成一个循环的培养后,再将pH升回7.5-7.0,进入第二个循环培养,如此循环,直至获得在pH为6.0-5.5条件下稳定产气的耐酸互营丙酸产甲烷菌系;所述试剂瓶配有带两个孔的橡胶塞,其中一个孔中插有橡胶管至试剂瓶中下部作为进出料的通道,另一个孔连接收集气体的气袋;所述新鲜培养基配制方法为:在1L水中加入0.7g丙酸钠、400mg NH4Cl、250mg MgSO4·6H2O、400mg KCl、120mg CaCl2·2H2O、80mg(NH4)2HPO4、55mg FeCl3·6H2O、5000mg NaHCO3,还加入CoCl2·6H2O、NiCl2·6H2O、MnCl2·4H2O、CuCl2·2H2O、AlCl3·6H2O、ZnCl2、Na2WO4·2H2O、H3BO3、Na2SeO3、Ma2MoO4·2H2O各0.0005mg。

2.一种耐酸互营丙酸产甲烷菌系的应用,其特征在于,将权利要求1得到的耐酸互营丙酸产甲烷菌系在pH为6.0-5.5条件下稳定产气。

3.一种耐酸互营丙酸产甲烷菌系固体菌剂的制备方法,其特征在于,将权利要求1驯化后得到的耐酸互营丙酸产甲烷菌系菌液经离心弃去液体部分后置于厌氧环境下室温风干,收集固体粉末并真空密封保存得到耐酸互营丙酸产甲烷菌系固体菌剂。

4.一种液体浓缩耐酸互营丙酸产甲烷菌剂的制备方法,其特征在于,将权利要求1驯化后得到的耐酸互营丙酸产甲烷菌系菌液经离心,收集全部的固体沉淀及少许上清液,利用灭菌的液体甘油封液面,-20℃保存。

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