一种富血小板血浆及其制备方法与应用与流程

文档序号:12411396阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种白膜层细胞来源的富血小板血浆的制备方法,其特征在于,所述方法包括从白膜层细胞中分离富血小板血浆的步骤。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法具体包括以下步骤:将白膜层细胞与血小板激活剂混合、孵育后形成的凝胶破碎、离心,收集上层清液,即为白膜层来源的富血小板血浆;

优选的,所述白膜层细胞为全血分离后剩余的白膜层细胞。

3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述血小板激活剂包括CaCl2和凝血酶的混合物、ADP、肾上腺素、胶原、瑞斯托霉素或花生四烯酸中的一种或多种。

4.如权利要求2或3所述的方法,其特征在于,所述白膜层细胞和所述血小板激活剂按体积比1:5~10混合,优选地,按体积比1:9混合。

5.如权利要求2或3所述的方法,其特征在于,孵育温度为25~37℃,优选为37℃,孵育时间为0.5~1.5h,优选为1h。

6.如权利要求2或3所述的方法,其特征在于,离心力为2500~3500×g,优选为3000×g,离心时间为10~30min,优选为20min,离心温度为4~8℃,优选为8℃。

7.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述血小板激活剂由CaCl2和凝血酶混合而成,其中,用于制备血小板激活剂的CaCl2的质量分数为5~15%,优选为10%,凝血酶的加入量为10-30U/mL白膜层细胞,优选为20U/mL白膜层细胞。

8.由权利要求1~7任一项所述方法制备的白膜层细胞来源的富血小板血浆。

9.权利要求8所述白膜层细胞来源的富血小板血浆在间充质干细胞增殖中的应用。

10.如权利要求9所述的应用,其特征在于,所述间充质干细胞为人源、鼠源、猪源或兔源,所述间充质干细胞为骨髓间充质干细胞、脐血间充质干细胞或脂肪间充质干细胞。

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