用于检测脲酶的试剂盒的制作方法

本发明涉及一种用于检测脲酶的试剂盒和形成该试剂盒的部分的工具和组合物。

发明背景

人类肠胃系统的许多疾病至少部分是由细菌引起的。此类细菌包括弯曲杆菌属(campylobacter)的那些，并且具体地为幽门螺杆菌(helicobacterpylori)。例如，幽门螺杆菌可引起胃粘膜表面的细菌感染。由幽门螺杆菌引起的慢性胃病包括消化性溃疡、胃炎和癌症。进一步众所周知的是，幽门螺杆菌大量产生脲酶。

因此，一旦患者显示胃病症状，可以使用几种测试来诊断幽门螺杆菌的存在。获得普遍流行的一种此类测试是快速脲酶测试，也称为clo测试(弯曲杆菌类生物测试)。

clo测试是基于脲酶将尿素转化为氨和二氧化碳的能力。因此，clo测试包括将胃组织样品与如下凝胶组合物接触的步骤，该凝胶组合物含有尿素以及当ph上升时颜色改变的ph指示剂。酚红经常用作合适的指示剂，因为它经历明显的黄色至红色的颜色变化。如果脲酶存在于胃内物质中，则尿素将被分解成氨以使ph值升高并最终导致ph指示剂改变颜色。

尽管clo测试在早期检测肠胃道疾病方面提供了巨大进步，但凝胶组合物内含有的尿素和其他试剂具有随时间降解的趋势。因此，一旦配制，凝胶组合物的保质期相对较短。

为了延长clo测试试剂盒的保质期，将其进行冷藏以减缓该组合物的降解。事实上，许多国家规定在允许国际运输之前，clo测试试剂盒必须冷藏到低于10℃。这种冷藏需要大型制冷设备，这会增加存储成本，无论是购买设备的资金成本，还是运行和维护成本。正因为如此，许多发展中国家买不起这样的clo测试试剂盒。此外，许多远程医院没有可靠的电力供应来为靠近内窥镜室的制冷供电。出于这个原因，需要专门的发电机来为冷冻机供电，从而导致发生额外的成本。可替代地，冷冻机必须位于远离内窥镜室的医院的中央，这是不方便的，因为它增加了取来clo测试试剂盒所需的时间并且需要额外的护士做取物跑腿工作而延迟了患者的诊断。

鉴于上述情况，需要具有改进的保质期的clo测试试剂盒。

此外，脲酶测试正常只构成对患有肠胃道疾病的患者的诊断的一部分。在大多数情况下，用于dna测试的另外的细菌培养可以大大改进诊断水平。不幸的是，上述当前clo测试试剂盒不能保存细菌样品。出于这个原因，一旦使用过clo测试，含有细菌样品的clo测试试剂盒无非被丢弃。对于根除治疗失败的患者，需要另外的内窥镜检查以获得进一步的组织样品，供细菌培养和dna测试用。显然这可能是有问题的，因为患者必须再次预约才能看专科医生。这不仅增加了专科医生和护士的工作量，而且延迟和延长了患者的治疗时间，导致等待内窥镜检查的患者数目增加。

因此进一步需要能够保存细菌样品。

上述背景技术并非意在限制本文公开的试剂盒的应用。

发明概述

根据本发明的一个方面，提供了一种用于检测脲酶的试剂盒，该试剂盒包括：

含有指示剂的组合物；

递送工具，其被安排成递送组织样品以与该组合物接触；以及

该递送工具上携带的尿素，由此将该尿素安排成与该组织样品一起递送至该组合物。

该组合物可以包括凝胶。

该组合物的ph值可低于6.8。

该组合物可以包括缓冲剂。

该组合物可以包括防腐剂，该防腐剂被安排成保存递送至该组合物中的组织样品。

该防腐剂可以是苯酚。

该指示剂可以是酚红。

该递送工具可以包括保持部件和采样部件。

该递送工具可以包括使该采样部件能够与该保持部件分离的易碎连接件。

该保持部件可以包括细长杆，该细长杆被安排成在该采样部件分离后形成尖端。

该易碎连接件可以包括该杆中的凹痕。

该凹痕可以是凹槽、凹口或凹陷。

该凹痕可以环绕该杆。

该采样部件可以包括远离该保持部件延伸的一个或多个突出构件。

该突出构件可以远离该保持部件轴向延伸。

该突出构件可以是脆性的。

该突出构件可以包括一个或多个齿状物。

该突出构件可以被安排成限定用于接收组织样品的捕集区域。

该突出构件可以包括安排成刷状结构的许多刷毛。

可以在该突出构件上提供尿素。

该尿素可以作为该递送工具上的粉末涂层提供。

该尿素可以作为从施加到该递送工具的液体溶液获得的沉积物提供。

该尿素可以作为该递送工具的一体成型部件提供。

该尿素可足以导致在该尿素已经被递送至该组合物之后在使用期间每ml组合物中约20mg尿素的有效浓度。

该尿素可以包括0.1至100mg。

该尿素可以包括5至20mg。

该组合物可以被包含在容器中形成的孔中。

该孔可以被安排成含有0.3ml的该组合物。

该容器可以包括被安排成接合该递送工具的干涉突起(interferenceprotrusion)。

该干涉突起可以被提供在该容器的基底上，使得该干涉突起延伸到该孔中。

该干涉突起可以被安排成接合该递送工具以辅助将该组织样品递送至该组合物中。

该容器可以包括被安排成在使用之前保持该递送工具的腔室。

该容器可以包括其中具有至少三个离散孔的托盘。

该孔中的两个可以含有该组合物，并且第三个孔可以含有尿素供应。

该容器可以包括标签，该标签被可移除地附接到该托盘以可重封地覆盖所有孔。

该标签可以被安排成选择性地被移除以打开含有该组合物的孔中的任一个或一起打开其他孔。

该标签可以包括与该托盘的紧固附接，该紧固附接被安排成防止该标签被移除并同时打开所有孔。

该紧固附接可以包括该标签与该托盘之间的焊接接头。

该托盘可以包括与该孔中的一个相关联的放大镜。

根据本发明的另一方面，提供了一种与组合物一起用于检测脲酶的递送工具，该递送工具包括：

保持部件；

采样部件；以及

在该保持部件与该采样部件之间的易碎连接件，在使用期间该易碎连接件使该采样部件能够与该保持部件分离。

根据本发明的另一方面，提供了一种与组合物一起用于检测脲酶的递送工具，该递送工具包括：

凝胶；

在该凝胶中提供的指示剂；以及

防腐剂，该防腐剂在该凝胶中被提供并被安排成保存递送至该凝胶中的组织样品。

附图简述

现在将参照所附示意图通过举例的方式描述本发明，其中：

图1是用于检测脲酶的试剂盒的第一实施方案的透视图，该试剂盒包括递送工具和装有组合物的容器；

图2是图1所示的递送工具的放大侧视图；

图3是图1中以箭头iii所示区域的放大透视图，示出该递送工具的采样部件；

图4是该递送工具的采样部件的可替代实施方案；

图5是图1所示容器的放大透视图；

图6是使用期间示出的图1至图5的试剂盒的截面侧视图；

图7是用于检测脲酶的试剂盒的第二实施方案的透视图；

图8是显示为以第一配置使用的图7试剂盒的透视图；并且

图9是显示为以第二配置使用的图7试剂盒的替代透视图。

发明详述

参考图1至图6，示出了用于检测脲酶的试剂盒10的第一实施方案。试剂盒10包括递送工具12，该递送工具用于使胃活检组织样品与容器40中供应的组合物14接触。

递送工具12在图2中更详细地示出，并且包括保持部件16和采样部件18。保持部件16呈细长圆柱形杆20的形式，该杆的一端具有手柄22。手柄22具有扩大的扁平矩形刀片的形状，从杆20沿轴向和径向向外延伸，并适配为使人能够容易地抓握和操纵递送工具12。应理解，手柄22可以具有任何其他合适的形状或尺寸，并且应该仅能够相对舒适地由人抓握。这样，手柄22可以是圆盘形的，具有扁平的圆形外观，或者可以具有通常与用于由人的手指抓握的器具相关联的任何其他形状。可替代地，手柄22可以完全省略，使得递送工具12类似于牙签；只要杆20足够长和厚，使其能够被舒适地抓握即可。在示例性实施方案中，杆20具有约3mm的直径，而保持部件16具有约50至80mm的长度。

采样部件18设置在杆20的与手柄22相反的一端。采样部件18被安排成用于采集组织样品并将该组织样品插入到组合物14中。采样部件18上面包括尿素沉积物，使得在使用中该尿素连同组织样品一起被递送至组合物14。

在一个实施方案中，在图1至图3中示出，采样部件18包括与杆20一体成型的头部24。在头部24与杆20之间设有颈部26，该颈部26限定易碎连接件，允许头部24在使用期间与杆20分离。颈部26包括杆20的将其直径减小到约1至2mm的环形收缩。然而，设想了在其他实施方案中，颈部26可以由简单的凹痕形成，如中途切入杆20的凹槽、凹口或凹陷。

头部24具有包括基底28的冠部外观，该基底被安排成横向于杆20，其中许多突起30远离基底28向杆20的远侧轴向地延伸。基底28是圆盘形的并且突起30呈渐缩齿状物32的形式，该渐缩齿状物围绕基底28的周边沿周向间隔开。尽管仅示出了三个齿状物32，但可以提供另外的齿状物。可替代地，应理解，基底28可以以其他形状提供，如为多边形，其中可以沿多边形的每一侧提供一个或多个齿状物32。类似地，齿状物32可以包括任何尖头形状，例如圆锥形。基底28和齿状物32一起限定了部分封闭的捕集区域34，该捕集区域被安排成在使用期间接收并保持组织样品。在示例性实施方案中，齿状物32具有约2.5mm的长度。

在另一个实施方案中，基底28可以是平面的，使得齿状物32沿着共同的平面对齐，从而使得头部24具有叉状外观。在这种情况下，可以通过将齿状物32刺穿组织样品或通过将组织样品楔入齿状物32之间而保持组织样品，从而将组织样品摩擦地保持在齿状物32之间的间隙空间中。

在又另一实施方案中，在图4中示出，采样部件18呈刷状物形式，该刷状物包括从与杆20一体成型的基底28延伸的许多刷毛36。在该实施方案的一种改编中，刷毛36可以直接从杆20轴向延伸，例如，在外观上呈鱿鱼样。在该实施方案的又另一种改编中，刷毛36可以从杆20径向或球状延伸，例如在外观上类似于针垫。在这些实施方案中的每一个中，刷毛36也将具有约2.5mm的长度。刷毛是相对刚性的，使得在使用中，软的组织样品可被刷毛36刺穿并保持在刷毛36之间的间隙空间中。

在上述实施方案中，尿素提供在基底28和齿状物32(或刷毛36)上。该尿素可以使用尿素粉末作为粉末涂层提供。可替代地，可以通过将基底28和齿状物32浸入尿素溶液并使液体涂层干燥而将尿素作为液体涂层提供。此外，该尿素可以通过使整个头部24或至少齿状物32由尿素一体成型来提供。

采样部件18含有约0.1至100mg，优选约5至20mg的量的尿素。

组合物14被包含在容器40中，其在图5中更详细地示出。容器40包括容器基底42，圆柱形侧壁44从该容器基底延伸以限定含有组合物14的孔46。在示例性实施方案中，孔46的深度为约8mm，并且含有约0.3ml的组合物14。尽管附图中未示出，但容器40可以包括可移除的盖，如塑料膜，以用于气密密封孔46以防止在使用之前污染组合物14。

容器40任选地包括延伸到孔46中的干涉突起48。突起48可以是任何形式的支撑件，其被适配为与齿状物32或与刷毛36接合。这样，突起48可以从基底42或从侧壁44延伸。在示例性实施方案中，突起48是从基底42延伸的多个圆锥形结构。

组合物14包括以水基凝胶形式提供的含有ph指示剂的湿试剂。该ph指示剂被选择为适合于测试在使用试剂盒10期间尿素被脲酶分解时形成的氨。虽然有很多这样的合适指示剂，但通常在脲酶测试试剂盒中使用酚红。为此，该组合物的示例性实施方案包括作为ph指示剂的酚红。酚红在ph约6.9时经历从黄色(指示酸性状态)到红色(指示碱性状态)的颜色变化。因此，组合物14被缓冲以维持低于6.8的ph值，使得归因于氨形成的任何ph上升导致指示剂经历从黄色到红色的颜色变化。

组合物14还包含有效浓度的防腐剂，以在组织样品被插入孔46中并浸入组合物14内时保存组织样品。在本实施方案中，该防腐剂是苯酚。

现在将参照图6描述试剂盒10的用以检测组织样品中脲酶的存在的用途。

组织样品52是通过胃活检获得，并通过使递送工具12的采样部件18穿过该组织样品而将其从活检钳取出，使得至少一些组织样品52被捕获在采样部件18上。因为该组织样品固有地含有一些水分，涂覆齿状物32或刷毛36的干燥尿素粉末将开始溶解。随后将组织样品52递送至与组合物14接触并浸入其中。当将采样部件18插入到组合物14中时，组合物14的凝胶中的湿试剂溶解齿状物32上的任何剩余的尿素粉末。

应理解，在递送工具12与组织样品52接触或插入组合物14之前，将齿状物32上的尿素涂层保持干燥。尿素仅与组织样品一起被递送至组合物14，但在使用前与其保持分离。

递送工具12上提供的尿素粉末的量是预先确定的，以便当尿素溶解或混合到组合物14中时，组合物14内尿素的有效浓度为每毫升约20mg。在此浓度下，有足够的尿素引起酚红指示剂足够明显的颜色变化。

通过将尿素在使用前维持为处于与组合物14分离的粉末形式，该尿素保持更稳定。此外，通过将尿素维持为与组合物14分离，试剂盒10的处理要求变得更加宽松。例如，通过将尿素维持为与组合物14分离，在使用之前，如在储存或运输期间，不需要冷却递送工具或组合物14。用于制造组合物14的工艺条件也由于其改进的稳定性而变得更加宽松。

当将采样部件18插入孔46中时，齿状物32和/或刷毛36与容器40的侧壁44或基底42接触，以在孔46内将它们折断，导致组织样品保持浸入组合物14中。因此，在图4所示的递送工具12的实施方案中，相对较薄的刷毛36可以通过将它们简单地压靠在基底42上而相当容易地折断。刷毛36可以由相对较脆的材料制成，其中刷毛具有足够的弹性，当将其刮擦通过组织样品以捕获组织样品时，其不会折断，但又足够脆，这样使得当它们被压靠在基底42上时会折断。

类似地，如果可以向图3中所示的递送工具12的实施方案施加足够的力，齿状物32也可以被折断。然而，由于齿状物32更坚固，因此预期它们不会那么容易折断。出于这个原因，齿状物32可以被操纵以与干涉突起48接合并且相对扭曲，使得头部24在颈部26处从杆20脱离。尖端50保留在杆20上，其可以用于获得另外的组织样品以进行第二测试，或尖端50可用于刮擦清洁活检钳。

设想了递送工具12可由塑料或木材制成，使得头部24在使用期间可相对容易地脱离。

关于其中头部24整体由尿素制成的实施方案，不需要将头部24脱离。作为替代，可以允许整个头部24溶解在组合物14中，使得杆20可以被去除而将组织样品52留在组合物14中。

随后，组织样品52保留在组合物14中并且被苯酚保存，允许容器40被密封(例如用它的盖子重封)，并被派送到测试实验室以便对组织样品52进行进一步测试。

现在参考图7至图9，显示了用于检测脲酶的试剂盒100的第二实施方案。

试剂盒100包括托盘102，其中设有细长腔室104，其尺寸适合于容纳递送工具106。递送工具106具有与递送工具12类似的结构，并且因此递送工具106的对应部分是使用如与递送工具12相关所用的相同参考号来指示。然而，递送工具106是无菌工具并且在其采样部件18上不含且没有提供任何尿素。

腔室104是通过可移除的盖108密封，使得递送工具106最初保持在腔室104内的无菌环境中。然而，如果需要，递送工具106可以封闭在腔室104内气密密封的小袋内。指形凹陷110设置在托盘102的与腔室104相邻的一端。凹陷110在盖108的边缘112下方延伸，使得在使用中，边缘112可易于被人的手指抓握以将盖108从托盘102上松开，以使得能够将递送工具106从腔室104移除。可以在腔室104中提供多于一个递送工具106。

标签114附接到托盘102以便密封托盘102中设置的许多孔。这些孔包括朝向托盘102的一端定位的第一测试孔116，朝向托盘102的相反端定位的第二测试孔118以及在第二测试孔118附近定位的供应孔120。第一和第二测试孔116、118与孔46的相似之处在于它们各自含有一定体积的组合物14，即包括含有凝胶、ph指示剂和防腐剂的湿试剂。类似地，尽管在图7至图9中未示出，但第一和第二测试孔116、118也设有与图5和图6中所示的突起48等效的突起。相比之下，供应孔120含有尿素供应并且其中没有任何突起。

应该理解的是，在其他实施方案中，盖108和标签114可以一体成型为单个物品。

标签114可重封地附接到托盘102，并且这样标签114具有合适的粘合剂涂层，以使该标签能够从托盘102分离并重新附接到该托盘上。该粘合剂可允许标签114至少完全重新附接一次，优选超过一次。标签114的形状基本上是矩形的，并且被安排成使得它可以从其相反的两端被选择性地从托盘102上剥离。图8示出了标签114从托盘102剥离，以便打开并允许可及第一测试孔116；而图9示出标签114从托盘102剥离，以便打开并允许可及第二测试孔118和供应孔120二者。

在一个实施方案中，设想标签114将沿着其中心部分(在图7中由虚线122指示)紧固地附接到托盘102。这将防止标签114被无意地剥离得太远或从托盘102完全移除，由此第一和第二孔116、118同时被打开。这种紧固附接可以通过将标签114焊接到托盘102的线122附近来实现，例如，通过热焊接或超声波焊接。可替代地，翻折接片(fold-overtab)可以在线122附近从标签114向外延伸以便翻折并粘附到托盘102。

指形凹陷124设置在托盘102的两相反端以在标签114的相反边缘126、128下方延伸。因此，在使用中，如图8和图9所示，标签114的边缘126、128可易于抓握以临时提升标签114的关联部分远离托盘102，之后标签114可以重新附接到托盘102以重封第一或第二孔116、118。

在该示例性实施方案中，标签114被着色为白色或者至少具有附接到托盘102的白色下表面。此外，托盘102由透明材料制成，使得可以通过托盘102看到标签114的下表面。由此，标签114提供白色背景，使第一和第二孔116、118中的组合物14的颜色可以在该白色背景上容易看到，并且在使用期间组合物14中的指示剂的任何颜色变化可以相对容易地辨别。

在使用中，在从腔室104移除递送工具106之后，在采样部件18上捕获组织样品。在提升标签114的相关部件并且随后将标签114重新附接到托盘102以关闭孔116、118之后，该组织样品可以选择性地沉积到第一或第二测试孔116、118中。

在大多数情况下，设想将分开的组织样品放置到第一和第二测试孔116、118中的每一个中。因此，最初第一组织样品将沉积到第一测试孔116中。这通过在采样部件18上捕获第一组织样品并且然后在第一测试孔116中折断递送工具106的采样部件18来实现。在捕获第二组织样品之前，递送工具106的剩余尖端50首先被浸入供应孔120中含有的尿素中，使得尿素与第二组织样品一起沉积到第二测试孔118中。显然应当理解，如果在腔室104中提供多于一个的递送工具106，那么第二组织样品(连同尿素)也可以被递送至第二测试孔118中(通过在其中折断该递送工具的采样头部18)。通过在第一和第二测试孔116、118中的每一个中提供单独的组织样品，第一组织样品可以被保存在无菌环境中以用于随后的测试(如果需要的话，例如dna测试)，而第二组织样品可以提供脲酶测试的即时结果。

沉积组织样品的上述顺序被视为优选的，以避免尿素进入第一测试孔116(这可导致第一组织样品的更短的保存期)的可能性。就此而言，应理解的是，谨慎使用的情况下，可以通过以下方式来颠倒沉积顺序：仅将采样部件18部分地浸入尿素中并且然后在第二测试孔118中折断带有第一组织样品的采样部件18，此后尖端50被用于将第二组织样品沉积到第一测试孔116中。然而，这确实具有将一些尿素可能无意地沉积到第一测试孔116中的风险。将进一步理解，如果提供多于一个递送工具106，则可以使用单独的递送工具来沉积第一和第二组织样品中的每一个，并且在这种情况下，沉积的顺序并不重要。

通过在第二测试孔118内检查组织样品与尿素之间的反应来进行初始脲酶测试。随后，可以将托盘102派送到测试实验室，其中标签114可以被重复分离并重新附接到托盘102以允许第一测试孔116中的一部分组织样品被移除。这可能发生在多个场合，如对组织样品进行不同的测试或在不同实验室进行测试。

在一些情况下，当试剂盒100保持未使用并且储存很长时间时，测试孔116、118中的组合物14可能老化并且缓慢地改变颜色。例如，新鲜的组合物14可以具有相对浅的淡黄色，随着其老化而变得越来越深至更加像蜂蜜的颜色。在进行脲酶测试时，这种较深的颜色有时会妨碍对第二测试孔118的视觉检查，因为辨别颜色从较深的黄色变为红色并不总是很容易。因为第一和第二测试孔116、118的每一个中的组合物14应当以相同的速率老化，所以试剂盒100具有部分缓解此困难的优点。因此，第一测试孔116中的组合物14可以用作对照，使脲酶测试期间第二测试孔118中的组合物14的任何颜色变化都可以进行比较。这有助于鉴定任何小的颜色变化。

在附图中未示出的又另一个实施方案中，设想第二测试孔118的底部可以凸出地弯曲以便形成一类型放大镜，以在透视时提供视觉放大效果。这将有助于在脲酶测试期间辨别组合物14中的任何颜色变化。可以设置凸形弯曲以远离第二测试孔118向外弯曲或向内弯曲进入该第二测试孔。

本领域技术人员应理解，在不偏离广泛描述的本发明的精神或范围的情况下，可以对如具体实施方案所示的发明做出众多的变化和/或修改。因此，这些实施方案在所有方面都被认为是说明性的而非限制性的。

例如，虽然标签114显示为从托盘102的两相反端提升，同时测试孔116、118基本上在托盘102中居中对齐，但是可以重新安排各孔，使得它们跨托盘102沿对角线对齐，从而标签114将被安排成从托盘102的沿对角线的相对角提升。此外，代替将标签114焊接到托盘102，可以在标签114上提供中央翼部，其可以围绕托盘102折叠以防止标签114打开的程度太大。

在本发明的前述说明之后的权利要求和本发明的前述说明中，除非上下文需要，否则归因于表达语言或必要的含义，词语“包括(comprise)”、或变化形式如“包括(comprises)”或“包括(comprising)”用于包括性意义，即用于指明所述特征的存在，但是不排除在本发明的不同实施方案中其他特征的存在或增加。