一种环状转座子复合物及其应用的制作方法

文档序号:12544962阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种环状转座子复合物,其特征在于:所述环状转座子复合物包含Tn5转座酶和插入DNA。

2.根据权利要求1所述的环状转座子复合物,其特征在于:所述插入DNA包含转座子末端序列、2个标签序列和含酶切位点的DNA序列;所述插入DNA两端为转座子末端序列,在转座子末端序列内侧则是2个标签序列;所述2个标签序列之间为含酶切位点的DNA序列。

3.根据权利要求2所述的环状转座子复合物,其特征在于:所述含酶切位点的DNA序列为含U的单链或双链DNA序列、含限制性酶切位点的DNA序列或含有不互补碱基对的双链DNA序列。

4.根据权利要求1所述的环状转座子复合物,其特征在于:所述环状转座子有且仅有一个插入DNA。

5.权利要求1-4任一所述环状转座子复合物在构建DNA文库中的应用。

6.一种DNA文库的构建方法,其特征在于,该方法包括:获取靶DNA;制备环状转座子复合物:所述环状转座子复合物包含Tn5转座酶和插入DNA;将靶DNA与环状转座子复合物孵育,酶解反应;即得DNA文库。

7.根据权利要求6所述的构建方法,其特征在于:所述插入DNA包含转座子末端序列、2个标签序列和含酶切位点的DNA序列;所述插入DNA两端为转座子末端序列,在转座子末端序列内侧则是2个标签序列;所述2个标签序列之间为含酶切位点的DNA序列。

8.根据权利要求7所述的构建方法,其特征在于:所述含酶切位点的DNA序列为含U的单链或双链DNA序列、含限制性酶切位点的DNA序列或含有不互补碱基对的双链DNA序列。

9.根据权利要求8所述的构建方法,其特征在于:当所述2个标签序列之间的DNA序列为含U的单链或双链DNA序列,加入UDG酶进行酶解反应;

当所述2个标签序列之间为含限制性酶切位点的DNA序列,加入限制性内切酶进行酶解反应;

当所述2个标签序列之间为含有不互补碱基对的双链DNA序列,加入核酸外切酶进行酶解反应。

10.根据权利要求6所述的构建方法,其特征在于:所述环状转座子有且仅有一个插入DNA。

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