一种用于检测DNA错配修复系统的试剂盒及其用途的制作方法

文档序号:12109257阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于检测DNA错配修复系统的试剂盒,其特征在于,该试剂盒包含一扩增体系,该扩增体系包含PCR引物混合液和PCR反应液;所述的PCR引物混合液包含微卫星位点,该微卫星位点包含:NR-21、NR-24、BAT-25、BAT-26、MONO-27、BAT-48、BAT-49a、BAT-49b、BAT-50a、BAT-50b、BAT-51a、BAT-51b、BAT-51c、BAT-51d、BAT-51e、BAT-51f、BAT-52a、BAT-52b、BAT-53a、BAT-53b、BAT-53c、BAT-54、BAT-55、BAT-56a、BAT-56b、BAT-57、BAT-59、BAT-59b、BAT-60a、BAT-60b、BAT-60c、BAT-62、BAT-63a、BAT-63b、BAT-68a、BAT-68b、BAT-69、BAT-72、BAT-73、BAT-79、BAT-83、BAT-90、BGT-60、Penta C、Penta D、Penta E中的任意一种或两种以上串联重复位点单核苷酸A或者G大于40个重复;

所述的微卫星位点具体如下表所示:

2.根据权利要求1所述的用于检测DNA错配修复系统的试剂盒,其特征在于,所述的PCR引物混合液包含核苷酸序列SEQ ID NO:1-92中的任意一种或两种以上。

3.根据权利要求1所述的用于检测DNA错配修复系统的试剂盒,其特征在于,所述的核苷酸序列SEQ ID NO:1-92的5’末端用荧光标记物标记,该荧光标记物包含FL、JOE、TMR、ROX、ET-CXR、ET-TMR或FAM中的任意一种或两种以上。

4.根据权利要求1所述的用于检测DNA错配修复系统的试剂盒,其特征在于,所述的扩增体系还包含DNA模板,该扩增体系的组分的体积比为PCR反应液:PCR引物混合液:DNA模板:水=1~2:1~2:1~4:2~7。

5.根据权利要求1所述的用于检测DNA错配修复系统的试剂盒,其特征在于,所述的PCR反应液包括:10-100mM Tris-HCl,10-250mM KCl,1-10mM MgCl2,0.1-10mM dNTP,0.1-10U/μL Taq DNA聚合酶。

6.一种根据权利要求1-5中任意一项所述的用于检测DNA错配修复系统的试剂盒的检测方法,其特征在于,该检测方法采用荧光标记毛细管电泳法确定微卫星位点突变的存在。

7.根据权利要求6所述的用于检测DNA错配修复系统的试剂盒的检测方法,其特征在于,所述的突变包含:插入突变或缺失突变。

8.一种根据权利要求1-5中任意一项所述的用于检测DNA错配修复系统的试剂盒的用途,其特征在于,所述的微卫星位点能够用于检测DNA错配修复系统,该DNA错配修复系统包括癌症组织中的DNA错配修复系统。

9.根据权利要求8所述的用于检测DNA错配修复系统的试剂盒的用途,其特征在于,所述的癌症包括:结肠直肠癌,子宫内膜癌,胃癌,胰腺癌,肺癌,以及乳腺癌中的任意一种。

10.根据权利要求8所述的用于检测DNA错配修复系统的试剂盒的用途,其特征在于,所述的微卫星位点用于检测癌症的微卫星的不稳定性,使该试剂盒能作为检测癌症DNA错配修复系统的试剂盒。

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