一种发酵生产去甲万古霉素的方法与流程

文档序号:12545058阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种发酵生产去甲万古霉素的方法,其特征在于:包括以下步骤:

a、制备河北拟无枝酸菌菌种的种子液

将河北拟无枝酸菌菌种的斜面培养物或孢子液接种于种子培养基,26-30℃、在摇瓶或发酵罐中培养48-72h获得种子液;

其中所述的种子培养基按以下方法制得:玉米淀粉2.0-4.0克、葡萄糖10.0-40.0克、热榨黄豆饼粉2.0-10.0克、酵母粉5.0-10.0克、玉米浆2.0-8.0克、氯化钠0.5-2.0克、七水硫酸镁0.5-2.0克、碳酸钙3.0-6.0克,加水定容至1000mL,pH6.5-7.0,121℃灭菌30min;

b、制备河北拟无枝酸菌菌种的发酵液

将上述种子液以体积百分比6-10%的接种量接种于发酵培养基,在摇瓶或发酵罐中发酵,发酵48-72小时之间添加超顺磁性微球,继续发酵,总发酵时间168-192 h,发酵温度27-29 ℃,得到发酵液;

其中所述发酵培养基按以下方法制得:葡萄糖20.0-30.0克、玉米粉20.0-40.0克、热榨黄豆饼粉0-20.0克、棉籽蛋白粉0-10.0克、酵母粉0-10.0克、玉米浆5.0-10.0克、磷酸二氢钾3.0-5.0克、氯化钠1.0-2.0克、七水硫酸镁1.0-1.5克,加水定容至1000mL,pH6.5-7.0,121℃灭菌30min。

2.根据权利要求1所述的方法,步骤b中所述超顺磁性微球的粒径为5-30μm,粒径分布为单分散,孔径为20-30nm,表面的功能基团为羧酸基团,羧基含量为200μmol/g。

3.根据权利要求1或2所述的方法,步骤b中所述超顺磁性微球添加量为每升发酵液添加5-15g。

4.根据权利要求3所述的方法,超顺磁性微球添加量为每升发酵液添加8-12g。

5.根据权利要求2所述的方法,超顺磁性微球的粒径为10-20μm。

6.根据权利要求1所述的方法,所述步骤b中发酵压力为0.05±0.01Mpa、搅拌速度为300-400rpm,通气比为1:0.8-1.2vvm。

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