本发明涉及食品加工领域，更具体的说，是一种利用沸石分离醇溶蛋白组分的方法。
背景技术：
醇溶蛋白是面筋的主要成分，通过分离其组分进而研究各组分性质可以深入了解醇溶蛋白对相关食品加工性能的作用机理。常用高效液相色谱法色谱层析方法是鉴定和分离醇溶蛋白组分的主要方法，该方法虽然具有准确性高、重现性好等有点，但该方法制备醇溶蛋白组分价格昂贵、分离时间长、分离产物少。
技术实现要素：
本发明是为了克服现有技术中的不足之处，提供一种利用沸石分离醇溶蛋白组分的方法，本方法不需要昂贵的设备，仅采用沸石柱层析制备不同分子量醇溶蛋白组分，简化了不同分子量醇溶蛋白分离过程，提高了制备产率。
本发明通过下述技术方案实现：
利用沸石分离醇溶蛋白组分的方法，其特征在于：包括下述步骤：
将谷朊粉和65％的乙醇按照质量比1:6-1:10配比混合，在35-45℃水浴锅里搅拌浸提2-3h使谷朊粉中醇溶蛋白溶于乙醇中；浸提后溶液用离心机在3500r/min条件下离心5min，上清液即为醇溶蛋白溶液；将醇溶蛋白溶液加入装有沸石的层析柱中吸附30-120min，之后采用浓度为40-100％乙醇洗脱剂进行洗脱，收集不同时段蛋白得到不同分子量的醇溶蛋白组分溶液；该溶液经旋转蒸发仪浓缩后冷冻干燥得到固体醇溶蛋白组分。
填充层析柱的沸石是天然沸石或人造沸石，沸石的直径范围为1-6mm。
所述旋转蒸发温度为60℃，真空度0.09MPa；进而采用3500r/min离心5min得到湿蛋白，湿蛋白进行冷冻干燥得到固体蛋白组分，冷冻干燥温度为-65℃，时间为3d。
天然沸石和人造沸石常被用来吸附水中氨氮和有机物，醇溶蛋白可通过液膜扩散和粒子扩散被沸石吸附，分子量越大的醇溶蛋白组分吸附力越强，洗脱出来时间越长。选择合适浓度的乙醇进行洗脱，分子量较小的醇溶蛋白分子先洗脱下来，分子量大的醇溶蛋白分子后洗脱下来，收集不同时段的蛋白就可得到分子量不同的醇溶蛋白组分。得到的醇溶蛋白组分可再次进行多次吸附、洗脱，就可以得到分子量范围分布更窄的醇溶蛋白组分。
本发明具有下述技术效果：
本发明的方法利用天然沸石和人造沸石可吸附有机大分子的特性，根据分子量大小不同吸附强度不同的特点选择合适洗脱剂将不同分子量醇溶蛋白组分在不同时段洗脱下来收集，再通过旋转蒸发仪挥发乙醇、离心沉淀将醇溶蛋白组分分离出来，本方法不需要昂贵设备，可高效分离出不同分子量的醇溶蛋白组分，简化了不同分子量醇溶蛋白组分的制备过程。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
将谷朊粉和65％的乙醇按照质量比1:6配比混合，在35℃水浴锅里搅拌浸提2h使谷朊粉中醇溶蛋白溶于乙醇中。浸提后溶液用离心机(3500r/min、5min)离心，上清液即为醇溶蛋白溶液。将5Kg天然沸石填充到层析柱中，沸石的直径范围为1-3mm。将3000mL醇溶蛋白溶液倒入层析柱吸附30min，之后采用浓度为40％乙醇洗脱剂进行洗脱，收集不同时段蛋白得到不同分子量的醇溶蛋白组分溶液。该溶液经旋转蒸发仪浓缩后冷冻干燥得到固体醇溶蛋白组分。旋转蒸发温度为60℃，真空度0.09MPa。进而采用3500r/min离心5min得到湿的蛋白，蛋白进行冷冻干燥得到固体蛋白组分，冷冻干燥温度为-65℃，时间为3d。分离得到3种醇溶蛋白组分4.8g、3.7g和3.9g，采用高效液相离子交换法测定其平均分子量分别为52649、54663、1078544。
实施例2
将谷朊粉和65％的乙醇按照质量比1:10配比混合，在45℃水浴锅里搅拌浸提3h使谷朊粉中醇溶蛋白溶于乙醇中。浸提后溶液用离心机(3500r/min、5min)离心，上清液即为醇溶蛋白溶液。将5Kg人造沸石填充到层析柱中，沸石的直径范围为3-6mm。将5000mL醇溶蛋白溶液倒入层析柱吸附120min，之后采用浓度为100％乙醇洗脱剂进行洗脱，收集不同时段蛋白得到不同分子量的醇溶蛋白组分溶液。该溶液经旋转蒸发仪浓缩后冷冻干燥得到固体醇溶蛋白组分。旋转蒸发温度为60℃，真空度0.09MPa。进而采用3500r/min离心5min得到湿的蛋白，蛋白进行冷冻干燥得到固体蛋白组分，冷冻干燥温度为-65℃，时间为3d。分离得到4种醇溶蛋白组分6.2g、4.5g、3.2和2.1g，采用高效液相离子交换法测定其平均分子量分别为52431、56842、64598、1048223。