一种塞来昔布杂质B的制备方法与流程

本发明涉及药学技术领域，具体地说，涉及一种塞来昔布工艺杂质b的制备方法。该方法不仅增加了塞来昔布杂质b的含量，而且提高了纯化的收率及产品的纯度。

背景技术：

专利us5760068描述了塞来昔布的合成方法，4,4,4-三氟-1-(4-甲基苯基)丁烷-1,3-二酮与4-肼基苯磺酰胺盐酸盐经过加成、关环反应合成塞来昔布；反应过程会产生一定的副产物杂质b。在该步反应过程中，1,3-二酮化合物有两个亲电位点，4-肼基苯磺酰胺盐酸盐有两个亲核位点。根据位点活性不同，首先活性较高的位点nu1和e1缩合，然后nu2和e2关环生成塞来昔布，反之，nu1和e2缩合，nu2和e1关环则生成杂质b。杂质b的化学名为4-[3-(4-甲基苯基)-5-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯磺酰胺。

目前，研究发现塞来昔布原料药中主要杂质有7种，其结构式分别为：

黄萍等(“塞来昔布有关物质的合成”，《中国药物化学杂志》，第22卷，第6期，2012年12月，p503-506)报道了化合物d和化合物b的制备方法，其中化合物b是通过回收塞来昔布制备过程的滤液，再经过液相色谱分离(流动相：乙腈-水，体积比为60:40，流速：3ml/min)得到的，收率为3.0％；按照该方法通过重结晶回收滤液的方法富集到粗品中杂质b的含量为12.4％，而且hplc检测与主峰相对保留时间为1.11。通过该方法制得的化合物b的收率较低，而且使用反相色谱分离纯化，收集的馏分水和乙腈的混合溶剂的沸点较高，后续处理需要大量时间甚至冻干处理，极大地增加了生产成本，不适合于实际生产应用。

技术实现要素：

本发明人开发了一种塞来昔布杂质b的制备方法，不仅将粗品中杂质b的含量提高至30％以上，而且通过sfc法对粗品进行分离纯化，使得得到的产品为甲醇溶液，通过简单的减压浓缩就可得到产品，简化了操作，降低成本，而且得到的产品纯度达到99％以上，与现有技术例如黄萍等报道的方法对比将产品的收率提高了10倍。

本发明的目的是提供一种塞来昔布杂质b的制备方法。

在本发明的实施方案中，本发明提供了一种塞来昔布杂质b的制备方法，包括以下步骤：

a、氮气保护下，以4-甲基苯乙酮、三氟乙酸乙酯为原料，在强碱的作用下经claisen缩合反应，得到化合物4,4,4-三氟-1-(4-甲基苯基)丁烷-1,3-二酮，该化合物4,4,4-三氟-1-(4-甲基苯基)丁烷-1,3-二酮与4-肼基苯磺酰胺盐酸盐加成关环反应合成杂质b粗品；

这里，所述claisen缩合反应中的强碱，选自甲醇钠的甲醇溶液、乙醇钠的乙醇溶液、叔丁醇钠的叔丁醇溶液、或叔丁醇钾的叔丁醇溶液；

所述的claisen缩合反应是在极性非质子性溶剂或者c1-c4烷醇中进行的，所述极性非质子性溶剂选自四氢呋喃、乙腈、乙酸乙酯、或甲基叔丁基醚；所述c1-c4烷醇选自甲醇、乙醇、或异丙醇；

所述的claisen缩合反应的后处理为稀盐酸调节ph值，ph值范围为5～8；

所述的加成关环反应是在c1-c4烷醇或者c1-c4烷醇和纯化水的混合溶剂中进行的，所述的c1-c4烷醇选自无水甲醇、无水乙醇、异丙醇；或者，所述的混合溶剂选自无水甲醇、无水乙醇、或无水异丙醇与纯净水的混合溶剂；而且，c1-c4烷醇与纯化水的体积比为1：1、2：1、3：1、4：1或3：2；

b、杂质b粗品分离纯化，采用超临界流体色谱技术：

应用手性色谱柱，所述手性色谱柱选自chiralpaka.y.、chiralpaki.c.、chiralpako.j.、chiralpaki.d.；

所用流动相为超临界二氧化碳与c1-c4烷醇的混合物，其中所述c1-c4烷醇为甲醇、乙醇或异丙醇。

在本发明的优选实施方案中，本发明提供的一种塞来昔布杂质b的制备方法，其中，所述claisen缩合反应中的强碱为20重量％乙醇钠的乙醇溶液。

在本发明的优选实施方案中，本发明提供的一种塞来昔布杂质b的制备方法，其中，所述的claisen缩合反应是在极性非质子性溶剂中进行的，所述极性非质子性溶剂为甲基叔丁基醚。

在本发明的优选实施方案中，本发明提供的一种塞来昔布杂质b的制备方法，其中，所述的claisen缩合反应的后处理为稀盐酸调节ph值至7～8；

在本发明的优选实施方案中，本发明提供的一种塞来昔布杂质b的制备方法，其中，所述的加成关环反应是在c1-c4烷醇和纯化水的混合溶剂中进行的，所述的混合溶剂为无水乙醇和纯净水的混合溶剂；而且，所述无水乙醇与所述纯净水的体积比为4：1。

在本发明的优选实施方案中，本发明提供的一种塞来昔布杂质b的制备方法，其中，所述超临界流体色谱技术的手性色谱柱为chiralpaki.d.。

在本发明的优选实施方案中，本发明提供的一种塞来昔布杂质b的制备方法，其中，所述超临界流体色谱技术的流动相为超临界二氧化碳和甲醇的混合物。

附图说明

图1表示的是实施例2所得塞来昔布杂质b的hplc含量图谱，附图中横坐标表示保留时间(min)，纵坐标表示吸收强度(mau)。

图2表示的是实施例4所得塞来昔布杂质b的hplc含量图谱，附图中横坐标表示保留时间(min)，纵坐标表示吸收强度(mau)。

图3表示的是实施例5所得塞来昔布杂质b的hplc含量图谱，附图中横坐标表示保留时间(min)，纵坐标表示吸收强度(mau)。

图4表示的是实施例2所得塞来昔布杂质b采用手性色谱柱o.j.制备结果图谱。

图5表示的是实施例2所得塞来昔布杂质b采用手性色谱柱i.c.制备结果图谱。

图6表示的是实施例6所得塞来昔布杂质b采用手性色谱柱i.d.制备结果图谱，附图中横坐标表示保留时间(min)，纵坐标表示吸收强度(μv)。

图7表示的是实施例6所得塞来昔布杂质b的含量图谱，附图中横坐标表示保留时间(min)，纵坐标表示吸收强度(μv)。

具体实施方式

下面的实施例是为了详细描述本发明的具体实施方式，而不是为了对本发明保护范围的任何限制。

hplc仪器：高效液相agilent1260,dad检测器；条件：参考usp36版塞来昔布原料药有关物质检测法。

实施例1：4,4,4-三氟-1-(4-甲基苯基)丁烷-1,3-二酮的合成

在氮气保护下，分别加入甲基叔丁基醚(3.0l)和20重量％乙醇钠的乙醇溶液(3.55kg,10.43mol)，置换氮气3次。控制温度不超过25±5℃，机械搅拌，依次分批加入三氟乙酸乙酯(3)(1.27kg,8.94mol)和对甲基苯乙酮(4)(1.0kg,7.45mol)。氮气保护下，控制反应温度为25±5℃，机械搅拌24h。tlc检测至原料消失反应完毕(展开剂：石油醚/乙酸乙酯，体积比为1/1)。

停止反应，反应液中加入5重量％盐酸溶液(6.5l)调节ph为7.0～8.0，静置15min，分层，收集有机相，水相用乙酸乙酯(2.0l)萃取；合并有机相，依次用纯净水(8l)和饱和食盐水(5.0l)洗涤，有机相用无水硫酸钠(1.0kg)干燥，抽滤，滤饼用少量乙酸乙酯淋洗，滤液于45℃减压浓缩至干，得化合物1棕红色油状粗品。收率99.8％，hplc检测纯度为98.4％。

实施例2：塞来昔布杂质b的制备

反应釜中分别加入无水乙醇(19.2l)、纯净水(4.8l)和4,4,4-三氟-1-(4-甲基苯基)丁烷-1,3-二酮(1.6kg，6.84mol)，溶解完全，加入4-肼基苯磺酰胺盐酸盐(1.61kg，7.18mol)，机械搅拌，升温至回流，反应20h，hplc检测化合物1消失，停止加热。反应混合物降温，析晶，当温度达到20℃，保持温度搅拌3h。离心，滤饼用少量混合溶剂(无水乙醇/水：1/1)淋洗，收集固体湿品，湿品于45℃鼓风干燥16h得到粗品，hplc检测粗品中杂质b的含量为32.8％(附图1)。

实施例3：塞来昔布杂质b的制备

取10g4,4,4-三氟-1-(4-甲基苯基)丁烷-1,3-二酮，加入乙醇(120ml)溶解完全，测其ph值为7～8，然后加入纯净水(30ml)和4-肼基苯磺酰胺盐酸盐(10.2g，46.0mmol)，搅拌，升温，回流20h后，取样hplc检测杂质b含量达到26.1％，停止反应，减压浓缩至干。

实施例4：塞来昔布杂质b的制备

取10g化合物4,4,4-三氟-1-(4-甲基苯基)丁烷-1,3-二酮，加入乙酸乙酯溶解完全，测其ph值为7～8，加入5％盐酸调节ph为1～2，分液，收集有机相，干燥，浓缩得酸化后的化合物1，然后加入无水乙醇(120ml)、纯净水(30ml)和4-肼基苯磺酰胺盐酸盐(10.2g，46.0mmol)，搅拌，升温，回流20h后，取样，hplc检测杂质b含量达到2.43％，停止反应，降温析晶，按照黄萍等报道，固体用甲醇重结晶，母液浓缩后得到粗品，hplc检测杂质b的含量为12.39％(附图2)。

实施例5：塞来昔布杂质b的制备

反应瓶中分别加入无水乙醇(120ml)、纯净水(30ml)、4,4,4-三氟-1-(4-甲基苯基)丁烷-1,3-二酮(10.0g，43mmol)、三乙胺(4.62g，46mmol)和4-肼基苯磺酰胺盐酸盐(10.2g，46mmol)，机械搅拌，升温，回流20h，取样，hplc检测杂质b含量达到1.38％(附图3)，停止反应，降温，减压浓缩至干。

实施例6：塞来昔布杂质b的制备

称量实施例2中得到的粗品30.06g，采用sfc法进行杂质b的分离，具体条件为色谱柱：chiralpaki.d.；色谱柱规格:0.46cm×15cml；流动相:meoh/co2＝20/80(v/v)；波长:uv254nm；流速:2.0ml/min；温度:25℃；得到杂质b的甲醇溶液，经减压浓缩得4-[3-(4-甲基苯基)-5-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯磺酰胺(杂质b)9.7g，收率为32.3％，纯度为99.57％(附图7)。esi-msm/z：382.08[m+h]⁺。¹h-nmr(500mhz,dmso)δ：8.04(dd，j＝6.5hz，1.5hz，2h)，7.85(d，j＝8.5hz，2h)，7.83(d，j＝8.5hz，2h)，7.75(s，1h)，7.60(s，2h)，7.29(d，j＝8.0hz，2h)，2.35(s，3h)。¹³c-nmr(500mhz,dmso)δ：152.13，145.30，141.38，138.98，133.26，129.98，128.65，127.46，126.68，126.06，120.07，107.99，21.35。

塞来昔布杂质b分离的对比