一种利伐沙班对映异构体杂质的制备方法与流程

本发明属于药物技术领域，具体涉及一种利伐沙班对映异构体杂质的制备方法。

背景技术：

利伐沙班(rivaroxaban)，化学名为5-氯-n-[[(5s)-2-氧-3-[4-(3-氧-4-吗啉基)苯基]-1,3-噁唑烷-5基]甲基]-2-噻吩甲酰胺，是德国bayer公司开发的噁唑烷酮类凝血因子xa直接抑制剂，于2008年9月首次在加拿大上市，商品名xarelto，临床上主要用于预防髋或膝关节置换术患者静脉血栓栓塞，本品作为新型口服抗凝血药物具有生物利用度高，量效关系稳定，出血风险低特点，已成为预防血栓栓塞性疾病的首选药物。

利伐沙班具有1个手性中心，其对映异构体杂质的控制直接关系到利伐沙班的质量。利伐沙班及其对映异构体的化学结构式如下：

现有技术不乏对映异构体杂质的合成路线，但是这些合成路线都比较长，有些合成路线还使用到危化品，危险性大。现有技术中有很多药品的杂质是通过对药品原料直接降解再分离纯化而得，这种方法简便、工艺开发成本低、不涉及危险化学反应，而且更环保。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种利伐沙班对映异构体杂质的制备方法，以利伐沙班为原料，通过高温等处理使其异构化得到对映异构体，再分离纯化。

本发明通过下面的技术方案得以实现：

一种利伐沙班对映异构体杂质的制备方法，包括如下步骤：

步骤s1，水热反应异构化：

先称取利伐沙班原料，加吡啶水溶液溶解制成利伐沙班溶液，然后水热反应，反应温度为160-180℃，反应时间为4-6h，冷却后浓缩去除溶液中的吡啶，最后冷冻干燥得异构化样品；其中，所述吡啶水溶液中吡啶的体积百分浓度为30-40％；

步骤s2，制备液相色谱分离：

用制备液相色谱对上述异构化样品进行分离，固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相a相为甲醇体积百分浓度5％的甲醇水溶液(含l-赖氨酸1.5g/l)，b相为甲醇体积百分浓度45％的甲醇水溶液(含l-赖氨酸1.5g/l)，梯度洗脱程序为：0～10min，20％b；10～15min，20％→80％b；15～30min，80％b；30～35min，80％→20％b；35～40min，20％b；流速为8ml/min；波长为250nm；根据色谱图收集利伐沙班对映异构体对应的洗脱流分，脱盐即得。

优选地，所述脱盐采用制备液相色谱脱盐，具体方法为：将利伐沙班对映异构体对应的洗脱流分浓缩，用制备液相色谱进行脱盐，固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，以甲醇-水(体积比35:65)为流动相等度洗脱；流速为8ml/min；波长为250nm；根据色谱图收集利伐沙班对映异构体对应的洗脱流分，浓缩干燥得利伐沙班对映异构体杂质。

优选地，利伐沙班溶液中利伐沙班浓度为15mg/ml。

优选地，所述制备液相色谱中的制备液相色谱柱优选agilentzorbaxsb-c18柱(250mm×21.2mm，7μm)。

优选地，制备液相色谱的柱温优选30℃。

l-赖氨酸作为反相液相色谱流动相添加剂在分离利伐沙班及其对映异构体中的应用。

本发明的优点：

本发明以利伐沙班为原料通过异构化直接制备其异构体，再通过制备液相分离、脱盐得到利伐沙班异构体纯品。该方法步骤简单，不依赖传统的化学合成方法，也不需要使用危险、剧毒化学试剂，非常环保。

附图说明

图1为实施例1制备液相色谱分离效果图；

图2为对比实施例2制备液相色谱分离效果图。

具体实施方式

下面结合具体实施例进一步介绍本发明的技术方案。

实施例1利伐沙班异构体的制备和分离纯化

一、实验材料

shimadzulc-8a高效制备液相色谱仪(日本岛津)；

电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)；

制备液相色谱柱：agilentzorbaxsb-c18柱(250mm×21.2mm，7μm)；

利伐沙班原料购于石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司。

二、实验方法和结果

步骤s1，水热反应异构化：

先称取利伐沙班原料，加吡啶水溶液溶解制成利伐沙班溶液，然后水热反应，反应温度为170℃，反应时间为5h，冷却后浓缩去除溶液中的吡啶，最后冷冻干燥得异构化样品；其中，所述吡啶水溶液中吡啶的体积百分浓度为35％；

利伐沙班溶液中利伐沙班浓度为15mg/ml；

步骤s2，制备液相色谱分离：

用制备液相色谱对上述异构化的样品进行分离纯化，色谱柱为agilentzorbaxsb-c18柱(250mm×21.2mm，7μm)，流动相a相为甲醇体积百分浓度5％的甲醇水溶液(含l-赖氨酸1.5g/l)，b相为甲醇体积百分浓度45％的甲醇水溶液(含l-赖氨酸1.5g/l)，梯度洗脱程序为：0～10min，20％b；10～15min，20％→80％b；15～30min，80％b；30～35min，80％→20％b；35～40min，20％b；流速为8ml/min；波长为250nm；柱温为30℃；根据色谱图收集利伐沙班对映异构体对应的洗脱流分(色谱图如图1所示)，脱盐即得。

脱盐采用制备液相色谱脱盐，具体方法为：将利伐沙班对映异构体对应的洗脱流分浓缩，用制备液相色谱进行脱盐，色谱柱为agilentzorbaxsb-c18柱(250mm×21.2mm，7μm)，以甲醇-水(体积比35:65)为流动相等度洗脱；流速为8ml/min；波长为250nm；柱温为30℃；根据色谱图收集利伐沙班对映异构体对应的洗脱流分，浓缩干燥得利伐沙班对映异构体杂质。

结果利伐沙班对映异构体的收率为45.9％，hplc归一化纯度98.4％。

实施例2利伐沙班异构体的制备和分离纯化

一、实验材料

shimadzulc-8a高效制备液相色谱仪(日本岛津)；

电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)；

制备液相色谱柱：agilentzorbaxsb-c18柱(250mm×21.2mm，7μm)；

利伐沙班原料购于石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司。

二、实验方法和结果

步骤s1，水热反应异构化：

先称取利伐沙班原料，加吡啶水溶液溶解制成利伐沙班溶液，然后水热反应，反应温度为160℃，反应时间为6h，冷却后浓缩去除溶液中的吡啶，最后冷冻干燥得异构化样品；其中，所述吡啶水溶液中吡啶的体积百分浓度为30％；

利伐沙班溶液中利伐沙班浓度为15mg/ml；

步骤s2，制备液相色谱分离：

用制备液相色谱对上述异构化的样品进行分离纯化，色谱柱为agilentzorbaxsb-c18柱(250mm×21.2mm，7μm)，流动相a相为甲醇体积百分浓度5％的甲醇水溶液(含l-赖氨酸1.5g/l)，b相为甲醇体积百分浓度45％的甲醇水溶液(含l-赖氨酸1.5g/l)，梯度洗脱程序为：0～10min，20％b；10～15min，20％→80％b；15～30min，80％b；30～35min，80％→20％b；35～40min，20％b；流速为8ml/min；波长为250nm；柱温为30℃；根据色谱图收集利伐沙班对映异构体对应的洗脱流分(色谱图与实施例1基本一致)，脱盐即得。

脱盐采用制备液相色谱脱盐，具体方法为：将利伐沙班对映异构体对应的洗脱流分浓缩，用制备液相色谱进行脱盐，色谱柱为agilentzorbaxsb-c18柱(250mm×21.2mm，7μm)，以甲醇-水(体积比35:65)为流动相等度洗脱；流速为8ml/min；波长为250nm；柱温为30℃；根据色谱图收集利伐沙班对映异构体对应的洗脱流分，浓缩干燥得利伐沙班对映异构体杂质。

结果利伐沙班对映异构体的收率为43.7％，hplc归一化纯度98.8％。

实施例3利伐沙班异构体的制备和分离纯化

一、实验材料

shimadzulc-8a高效制备液相色谱仪(日本岛津)；

电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)；

制备液相色谱柱：agilentzorbaxsb-c18柱(250mm×21.2mm，7μm)；

利伐沙班原料购于石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司。

二、实验方法和结果

步骤s1，水热反应异构化：

先称取利伐沙班原料，加吡啶水溶液溶解制成利伐沙班溶液，然后水热反应，反应温度为180℃，反应时间为4h，冷却后浓缩去除溶液中的吡啶，最后冷冻干燥得异构化样品；其中，所述吡啶水溶液中吡啶的体积百分浓度为40％；

利伐沙班溶液中利伐沙班浓度为15mg/ml；

步骤s2，制备液相色谱分离：

用制备液相色谱对上述异构化的样品进行分离纯化，色谱柱为agilentzorbaxsb-c18柱(250mm×21.2mm，7μm)，流动相a相为甲醇体积百分浓度5％的甲醇水溶液(含l-赖氨酸1.5g/l)，b相为甲醇体积百分浓度45％的甲醇水溶液(含l-赖氨酸1.5g/l)，梯度洗脱程序为：0～10min，20％b；10～15min，20％→80％b；15～30min，80％b；30～35min，80％→20％b；35～40min，20％b；流速为8ml/min；波长为250nm；柱温为30℃；根据色谱图收集利伐沙班对映异构体对应的洗脱流分(色谱图与实施例1基本一致)，脱盐即得。

脱盐采用制备液相色谱脱盐，具体方法为：将利伐沙班对映异构体对应的洗脱流分浓缩，用制备液相色谱进行脱盐，色谱柱为agilentzorbaxsb-c18柱(250mm×21.2mm，7μm)，以甲醇-水(体积比35:65)为流动相等度洗脱；流速为8ml/min；波长为250nm；柱温为30℃；根据色谱图收集利伐沙班对映异构体对应的洗脱流分，浓缩干燥得利伐沙班对映异构体杂质。

结果利伐沙班对映异构体的收率为45.2％，hplc归一化纯度98.2％。

对比实施例1

与实施例1基本一致，仅仅是在水热反应时，溶剂中使用dmso替代吡啶。

结果利伐沙班对映异构体的收率为13.7％，hplc归一化纯度98.9％。

结果证明dmso不利于利伐沙班异构化，使用吡啶进行水热反应收率较高。

对比实施例2

与实施例1基本一致，仅仅是在用制备液相分离利伐沙班及其异构体时，流动相a相和b相中均不添加l-赖氨酸。色谱图如图2所示，利伐沙班与其异构体不能实现基线分离。

上述实施例可见，本发明以利伐沙班为原料通过异构化直接制备其异构体，再通过制备液相分离、脱盐得到利伐沙班异构体纯品。该方法步骤简单，不依赖传统的化学合成方法，也不需要使用危险、剧毒化学试剂，非常环保。