一种疏水化葡聚糖及其制备方法和应用与流程

本发明涉及有机合成技术领域，尤其涉及一种疏水化葡聚糖及其制备方法和应用。

背景技术：

载药纳米粒子一般指粒径在500纳米以下，以具有亲水性和疏水性高分子材料为载体，药物包于核心，亲水性链段分布于壳层形成的微粒子。本发明所合成的疏水化多糖，不仅具有疏水的端基，还带有脲基和酯基，与所装载的药物不仅产生疏水样作用，还有氢键的键和作用，因此，很容易装载氨基酸、肽类和蛋白类药物。同时也可以装载其他类型的药物。本载体对于由肽聚糖构成细胞壁的细菌类，亦有亲和作用，单独用药，可起抗菌作用。

技术实现要素：

本发明的第一个目的是提供一种疏水化葡聚糖，以下简称疏水化多糖。所述疏水化多糖是对多糖是以丁二酸为连接臂，将端基用环己基脲修饰的丁二酸以酯键与葡聚糖的羟基相连接。所述疏水化多糖的分子量没有特殊限制。

所述疏水化多糖，具有自乳化性，可以作为乳化剂载药、也可以单独用药。

本发明的第二个目的是提供上述疏水化多糖的制备方法，所述制备方法的步骤及反应历程为：

(1)制备葡聚糖丁二酸酯：在溶液中以吡啶为催化剂将葡聚糖与丁二酸酐反应得到丁酸化葡聚糖；

(2)制备疏水化多糖：在溶剂中，所述丁酸化葡聚糖与环己基脲按照重量比为20：(1-10)发生反应，得到所述疏水化多糖。

优选地，步骤(2)的具体操作为：按照多糖与环己基脲的重量比为20：(1-10)计，将所述多糖溶于溶剂中，向所述溶剂中加入环己基脲，在10-80℃条件下反应，反应完全后向反应液中加入水，向所述滤液中加入醇类溶剂析出固体，所述固体即为疏水化肝素。

其中，所述溶剂为二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或二氯甲烷。

所述醇类溶剂为乙醇。

本发明的第三个目的是提供上述疏水化多糖作为药物载体在药物制备中的应用。

优选地，所述疏水化多糖适用于单独作为蛋白、多肽、氨基酸类、抗菌类、农药类、抗炎类、喜树碱及其衍生物类药物的载体。

所述疏水化多糖也适合于单独作为疫苗类药物的载体。所述疫苗的抗原来源于细菌、病毒、真菌和病原虫对动物的感染，比如微生物influenzaa型、influenzab型、c型肝炎病毒、a型肝炎病毒、b型肝炎病毒、rotavirus病毒、cytomegalovirus：cmv病毒、rs病毒、咽头结膜热、hiv、水痘带状疱疹病毒、单纯herpes病毒1型·2型、atl(成人型t细胞白血病)病毒、coxsackie病毒、entero病毒、突发性发疹病毒(hhv-6)、麻疹病毒、风疹病毒、流行性耳下腺炎病毒、急性灰白髓炎病毒、日本脑炎病毒、狂犬病病毒、c型肝炎病毒、norwalk病毒、狂犬病病毒、rs病毒、cytomegalovirus病毒、口蹄疫病毒、传染性胃肠炎病毒、风疹病毒、atl病毒、adeno病毒、echovirus、herpes病毒、天然痘病毒、denguefever热病毒、黄热病毒、westnilevirus、sars(病毒)、埃博拉出血热病毒、marburghemorrhagicfever、lassafever病毒、hantavirus、nipahvirusinfection等病原性病毒等；所述菌为肠管出血性大肠菌等病原性大肠菌、黄色葡萄球菌、髓膜炎菌、绿脓杆菌、虫齿连锁球菌、cholera菌、typhus菌、chlamydophilafelis赤痢菌、肺炎球菌、百日咳菌、corynebacteriumdiphtheriae菌、破伤风菌、influenza菌、pestis菌、botulinum菌、bacillusanthracis炭俎菌、野兔病菌、salmonella菌、vre(肠球菌)、结核菌、赤痢菌、salmonellatyphi肠菌、salmonellaparatyphia菌、chlamydophilafelis菌、ameba赤痢、legionella菌、lymeborreliosis菌、brucellosis病(波状热)菌等病原性细菌；coxiellaburnetiiq热、chlamydia等rickettsia；malaria病原虫、cryptosporidiumtyzzer等原虫类；cryptococcosis·aspergillosis等真菌等微生物的蛋白质抗原。病原微生物蛋白抗原也包括氨基酸、酶、激素和免疫调节物质，这些物质的分子量没有限定。

本发明的第四个目的是提供一种以上述任一疏水化多糖为载体制备载药粒子的方法：氨基酸与所述疏水化多糖在水溶液中进行乳化处理即得所述载药粒子。

优选地，氨基酸与所述疏水化多糖的重量比为10:1-10:100，优选为10:3-10:50。

本发明提供一种较佳的以上述任一疏水化多糖为载体制备载药粒子的方法：按照氨基酸与疏水化多糖的重量比为10:3-10:10计，先将氨基酸溶于水中，然后加入疏水化多糖，在1-50℃条件下使用乳化机乳化处理直至形成纳米粒子，得混合溶液，即得所述载药粒子，粒子径大多在400纳米以下，有少量微米级的聚合体。而疏水化葡聚糖水溶液未见有微米级粒子。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1多糖的制备方法

一种多糖的制备方法，所述制备方法具体为：将葡聚糖20g溶于200ml二甲基亚砜，加丁酐10g、吡啶2ml于室温反应4h，加去离子水中止反应。加2.54l乙醇。静止3h，析出沉淀，用乙醇重新精制，减压干燥得丁酸化多糖。

实施例2以多糖为原料制备疏水化多糖的方法

将实施例1制备得到的丁酸化多糖200mg溶于二甲基亚砜中，加环己基脲50mg，在10℃条件下反应1h，反应完全后，向反应液中加20ml水溶液，使用1000ml去离子水进行透析去除杂质，得透析液，然后向所述透析液中加入500ml乙醇，析出的物质即为所述疏水化多糖。

实施例3载药粒子的制备

本实施例提供以实施例2制备得到的疏水化多糖为载体，制备载药粒子的方法，所述方法为：

将疏水化多糖10mg，溶于水中，加5mg甘氨酸，乳化即得装载氨基酸的纳米粒子。

本疏水化多糖载药纳米粒子呈多分散状态。图1、图2为疏水化葡聚糖甘氨酸载体药物以及疏水化多糖用粒度分布仪所测的粒子径及其分布。

附图说明

图1为疏水化葡聚糖加载甘氨酸后在水溶液中形成的粒子径及其分布。检测仪器为zetasizernano粒度分析仪。图2为疏水化葡聚糖水溶液粒子径及其分布。疏水化葡聚糖加载甘氨酸后在水溶液中形成的粒子径大多在400纳米以下，有少量微米级的聚合体。而疏水化葡聚糖水溶液未见有微米级粒子。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

技术特征：

技术总结
本发明涉及有机合成技术领域，尤其涉及一种疏水化葡聚糖及其制备方法和应用，所述疏水化葡聚糖是对葡聚糖的羟基与丁二酸酐反应，先制备带丁酸基团的葡聚糖丁酸酯，再与环己基脲反应，使得羧基被环己基脲修饰，得疏水化葡聚糖。所述疏水化葡聚糖具有自乳化性，适宜作为蛋白类药物、氨基酸类药物、疫苗类药物、农药、抗炎、抗菌药的载体，也可以单独用药。

技术研发人员：梁颖;王元元;段贵新;刘浩
受保护的技术使用者：蚌埠医学院
技术研发日：2017.10.25
技术公布日：2018.03.23