本发明属于食品添加剂制备技术领域，具体涉及一种使用嗜热侧孢霉的酶液提取江蓠卡拉胶的方法。
背景技术：
嗜热侧孢霉（sporotrichumthermophile）是一种嗜热霉菌，在自然界中存在范围较广。该霉生长快、分泌的酶液在高温下仍有活性，不容易失活，因而具有较高的应用前景。且其酶液中还含有特殊高活力的内切纤维素酶，更增添了工业应用潜力。
随着国家对工业排放污水的重视，采用传统碱法处理江蓠来获得卡拉胶的方法存在污染大、废水量多的缺点，这就使开发新的安全、环保、便捷的卡拉胶提取技术成为了一种迫切需要。针对这个问题，本发明开发了一种使用嗜热侧孢霉的酶液提取江蓠卡拉胶的方法，其可有效避免碱处理带来的环境污染。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种使用嗜热侧孢霉的酶液提取江蓠卡拉胶的方法，其可有效避免传统碱法提取卡拉胶带来的环境污染的问题，具有十分广阔的应用前景。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种使用嗜热侧孢霉的酶液提取江蓠卡拉胶的方法，其包括以下步骤：
1）将嗜热侧孢霉于培养液中培养10-12天，然后于冷冻离心机中离心5-10分钟，收集上层酶清液；
2）将干江蓠磨成粉，过100-200目筛，加入步骤1）所得酶清液混合，在50-70℃下放置2-5天，然后过滤，滤渣洗涤3-5次后加入与干江蓠等重量的水，煮沸至粘稠，再加等量水稀释，经冷冻后加入体积浓度30%的双氧水煮沸，并保持煮沸状态3-10分钟，抽滤，即得卡拉胶。
步骤1）中所述培养液的原料组成按重量份计为：蔗糖1-3份、(nh4)2so40.1-0.3份、kh2po40.1-0.3份、mgso4•7h2o0.01-0.05份、cacl20.01-0.05份、蛋白胨0.1-0.5份、1m尿素0.1-0.5份、一水柠檬酸0.1-0.5份、na2hpo4•12h2o0.5-1份、蒸馏水80-100份。
步骤2）各原料的用量按重量份计包括：干江蓠10-30份、酶清液100份、双氧水5-10份。
本发明的显著优点在于：
（1）嗜热侧孢霉较其它酶的热稳定性强，在高温下的催化活性高，具有优良的特性。本发明利用嗜热侧孢霉酶液中含有的大量内切纤维素酶，结合反复冷冻加热以进一步破坏细胞壁，从而有效提取江蓠细胞中的卡拉胶，且其过程中没有使用对环境可能造成污染的酸或者碱试剂，可有效避免传统碱法提取卡拉胶带来的环境污染的问题，是一种对环境友好的卡拉胶提取方法。
（2）本发明中煮沸时间较短，可大量节约能源，且产生污水少，可以大大减少企业水处理成本。
（3）本发明反应条件温和，无需高温高压，不需要特制的反应器。
具体实施方式
为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是本发明不仅限于此。
实施例1
一种使用嗜热侧孢霉的酶液提取江蓠卡拉胶的方法，其包括以下步骤：
1）将1重量份蔗糖、0.14重量份(nh4)2so4、0.2重量份kh2po4、0.03重量份mgso4•7h2o、0.03重量份cacl2、0.1重量份蛋白胨、0.5重量份1m尿素、0.15重量份一水柠檬酸、0.9重量份na2hpo4•12h2o、100重量份蒸馏水配成培养液；将嗜热侧孢霉于培养液中培养10天，然后于冷冻离心机中离心10分钟，收集上层酶清液；
2）将20重量份干江蓠磨成粉，过100目筛，加入100重量份步骤1）所得酶清液混合，在50℃下放置5天，然后过滤，滤渣洗涤3次后加入20重量份的水，煮沸至粘稠，再加20重量份的水稀释，经冷冻后加入5重量份、体积浓度30%的双氧水煮沸，并保持煮沸状态5分钟，抽滤，即得卡拉胶，其提取率为33%，较传统碱法（10%-20%）明显提高。
实施例2
一种使用嗜热侧孢霉的酶液提取江蓠卡拉胶的方法，其包括以下步骤：
1）将1重量份蔗糖、0.1重量份(nh4)2so4、0.1重量份kh2po4、0.01重量份mgso4•7h2o、0.01重量份cacl2、0.2重量份蛋白胨、0.1重量份1m尿素、0.2重量份一水柠檬酸、0.5重量份na2hpo4•12h2o、80重量份蒸馏水配成培养液；将嗜热侧孢霉于培养液中培养11天，然后于冷冻离心机中离心5分钟，收集上层酶清液；
2）将10重量份干江蓠磨成粉，过100目筛，加入100重量份步骤1）所得酶清液混合，在65℃下放置3天，然后过滤，滤渣洗涤3次后加入10重量份的水，煮沸至粘稠，再加10重量份的水稀释，经冷冻后加入8重量份、体积浓度30%的双氧水煮沸，并保持煮沸状态3分钟，抽滤，即得卡拉胶，其提取率为37%，较传统碱法（10%-20%）明显提高。
实施例3
一种使用嗜热侧孢霉的酶液提取江蓠卡拉胶的方法，其包括以下步骤：
1）将3重量份蔗糖、0.3重量份(nh4)2so4、0.3重量份kh2po4、0.05重量份mgso4•7h2o、0.05重量份cacl2、0.5重量份蛋白胨、0.3重量份1m尿素、0.5重量份一水柠檬酸、1重量份na2hpo4•12h2o、90重量份蒸馏水配成培养液；将嗜热侧孢霉于培养液中培养12天，然后于冷冻离心机中离心8分钟，收集上层酶清液；
2）将30重量份干江蓠磨成粉，过200目筛，加入100重量份步骤1）所得酶清液混合，在70℃下放置2天，然后过滤，滤渣洗涤3次后加入30重量份的水，煮沸至粘稠，再加30重量份的水稀释，经冷冻后加入10重量份、体积浓度30%的双氧水煮沸，并保持煮沸状态10分钟，抽滤，即得卡拉胶，其提取率为39%，较传统碱法（10%-20%）明显提高。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。