一种培养亚心型扁藻的方法与流程

本发明属于藻类培养
技术领域：
，具体涉及一种培养亚心型扁藻的方法。
背景技术：
：亚心型扁藻（marinemicroalga），属团藻目，衣藻科，藻类植物。拉丁名称platymonassubcordiformis，分布于海洋，沿海池沼和风浪较平静的港湾。亚心型扁藻对盐度的适应范围很广，在盐度为8-80‰的海水中均能生长繁殖。最适盐度范围为30-40‰，对温度的适应范围也很广，在7℃-30℃范围内均能生长繁殖，最适温度约为20℃-28℃，温度上升到33℃以上生长繁殖受到较大的抑制，出现黄委状态，温度接近35℃时扁藻即大量死亡，因此在南方夏季培养比较困难；亚心型扁藻在光度强度1000-20000lux范围内均能生长繁殖，最适光强度约为5000-10000lux，在最适光强下，扁藻表现为趋光性。亚心型扁藻对酸碱度的适应范围一般在ph值为6-9，最适ph值为7.2-8.0。亚心型扁藻是许多贝类幼体（特别是后期幼体）的良好饵料。但因其个体较大，运动迅速，在贝类早期幼体（d形幼体）期较难摄食，若和较理想的早期幼体饵料（如等鞭金藻）配合使用，能取得较好的育苗效果。目前，亚心型扁藻培养存在的主要问题是培养液成本高、藻细胞生长缓慢等缺陷。如何降低培养成本、提高藻细胞生长速度是我们需要解决的技术问题。技术实现要素：本发明的目的是解决现有技术亚心型扁藻培养液成本高、藻细胞生长缓慢等缺陷，提供了一种培养亚心型扁藻的方法。本发明是通过如下技术方案来实现的：一种培养亚心型扁藻的方法，其包括如下步骤：取对数生长期的亚心型扁藻，按照5-7%的接种量接种到含有培养液的容器中进行培养，光强在5000-10000lx，光暗比为12:12，水温25-26℃,调ph值7.5-8，培养6-8天。进一步地，所述培养液按照如下工艺制备而得：取维生素b60.1-0.2mg，维生素b120.1-0.2mg，六水氯化钴15-30mg，亚硒酸钠20-40mg，柠檬酸铁50-100mg，七水硫酸镁100-200mg，七水硫酸锌100-200mg，麦麸提取液20-40ml，农业秸秆提取液30-50ml，余量为水，定容至1l。优选地，所述麦麸提取液按照如下工艺制备而得：将麦麸研磨粉碎，然后置于反应罐中,加入2-3倍重量的5-6m的盐酸，在55-60℃温度下搅拌水解8-12小时，搅拌速度为100rpm，过滤收集滤液，然后用2-3m的氢氧化钠溶液中和残余盐酸，调整ph为7.5-8.0，即得；优选地，所述农业秸秆提取液按照如下工艺制备而得：将农业秸秆置于粉碎机中粉碎，然后添加到1-2倍重量的浓度为3-5m的koh溶液中，搅拌均匀，加热至50-60℃，然后保温条件下浸泡3-5h，过滤收集滤液，再往滤液中添加浓度为3-4m的磷酸溶液，调整ph为7.2-7.5，即得。优选地，所述农业秸秆为水稻秸秆、小麦秸秆、玉米秸秆或者任意二者以上的混合物。本发明取得的有益效果主要包括但是并不限于几个方面：本发明培养方法简单可行，藻细胞增殖速度快，培养液成本低廉；本发明培养液使用了农产品副产物以及农业废弃物，使得培养基成本大大降低，实现了变废为宝，提高了工业附加值，企业利润大大提高；麦麸属于农产品加工副产物，其含有蛋白质，脂肪，糖、矿物质以及维生素等，但是藻类利用率较低，通过处理后，提高了各养分的浸出率，利用率大大提高；本发明对农业废弃物秸秆进行了粉碎和水解处理，使得氮、磷、钾、钙、镁以及多糖等得到有效利用；提取工艺中采用酸碱中和方式，在平衡ph度的同时，增加了氮源以及钠钾离子的供应量，一举两得；使用本发明培养液培养亚心型扁藻，生长速度加快，产量提高，效果明显优于不添加麦麸提取液或秸秆提取液的培养液，也优于常规的f/2海水培养液；说明麦麸提取液和秸秆提取液相互协同性能好，可以有效促进藻细胞增殖，而且本发明培养液优于现有技术常用的培养液，并且原料组分相对较少，有效利用了农业废弃物，成本更加低廉。附图说明图1：麦麸提取液对藻细胞增殖的影响；图2：秸秆提取液对藻细胞增殖的影响。具体实施方式本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的产品及方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
发明内容、精神和范围内对本文所述的产品及方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明进行详细说明。实施例1一种培养亚心型扁藻的方法，其包括如下步骤：取对数生长期的亚心型扁藻，按照7%的接种量接种到含有培养液的容器中进行培养，光强在6000lx，光暗比为12:12，水温25-26℃,调ph值7.5，培养8天。所述培养液按照如下工艺制备而得：取维生素b60.1mg，维生素b120.1mg，六水氯化钴30mg，亚硒酸钠40mg，柠檬酸铁50mg，七水硫酸镁100mg，七水硫酸锌200mg，麦麸提取液20ml，水稻秸秆提取液50ml，余量为水，定容至1l。所述麦麸提取液按照如下工艺制备而得：将麦麸研磨粉碎，然后置于反应罐中,加入2倍重量的6m的盐酸，在60℃温度下搅拌水解8小时，搅拌速度为100rpm，过滤收集滤液，然后用2-3m的氢氧化钠溶液中和残余盐酸，调整ph为7.5，即得；所述水稻秸秆提取液按照如下工艺制备而得：将水稻秸秆置于粉碎机中粉碎，然后添加到2倍重量的浓度为5m的koh溶液中，搅拌均匀，加热至50℃，然后保温条件下浸泡5h，过滤收集滤液，再往滤液中添加浓度为3m的磷酸溶液，调整ph为7.5，即得。实施例2一种培养亚心型扁藻的方法，其包括如下步骤：取对数生长期的亚心型扁藻，按照6%的接种量接种到含有培养液的容器中进行培养，光强在5000lx，光暗比为12:12，水温25℃,调ph值7.7，培养6天。所述培养液按照如下工艺制备而得：取维生素b60.2mg，维生素b120.2mg，六水氯化钴20mg，亚硒酸钠30mg，柠檬酸铁70mg，七水硫酸镁150mg，七水硫酸锌150mg，麦麸提取液20ml，小麦秸秆提取液40ml，余量为水，定容至1l。所述麦麸提取液按照如下工艺制备而得：将麦麸研磨粉碎，然后置于反应罐中,加入2倍重量的5m的盐酸，在55-60℃温度下搅拌水解8小时，搅拌速度为100rpm，过滤收集滤液，然后用2-3m的氢氧化钠溶液中和残余盐酸，调整ph为7.6，即得；所述小麦秸秆提取液按照如下工艺制备而得：将小麦秸秆置于粉碎机中粉碎，然后添加到2倍重量的浓度为5m的koh溶液中，搅拌均匀，加热至50℃，然后保温条件下浸泡5h，过滤收集滤液，再往滤液中添加浓度为3m的磷酸溶液，调整ph为7.2，即得。实施例3一种培养亚心型扁藻的方法，其包括如下步骤：取对数生长期的亚心型扁藻，按照5%的接种量接种到含有培养液的容器中进行培养，光强在10000lx，光暗比为12:12，水温25℃,调ph值7.8，培养7天。所述培养液按照如下工艺制备而得：取维生素b60.1mg，维生素b120.1mg，六水氯化钴20mg，亚硒酸钠20mg，柠檬酸铁50mg，七水硫酸镁100mg，七水硫酸锌150mg，麦麸提取液40ml，玉米秸秆提取液40ml，余量为水，定容至1l。所述麦麸提取液按照如下工艺制备而得：将麦麸研磨粉碎，然后置于反应罐中,加入2倍重量的5m的盐酸，在57℃温度下搅拌水解10小时，搅拌速度为100rpm，过滤收集滤液，然后用2-3m的氢氧化钠溶液中和残余盐酸，调整ph为7.9，即得；所述玉米秸秆提取液按照如下工艺制备而得：将玉米秸秆置于粉碎机中粉碎，然后添加到1.5倍重量的浓度为4m的koh溶液中，搅拌均匀，加热至57℃，然后保温条件下浸泡3h，过滤收集滤液，再往滤液中添加浓度为3m的磷酸溶液，调整ph为7.4，即得。实施例4本发明培养效果测试：培养方法参照实施例1的方法，每隔天通过细胞计数来记录培养液中亚心型扁藻的细胞密度。以实施例1作为实验组，设置对照组，其中，对照组1：不添加麦麸提取液，其余同实施例1；对照组2：不添加水稻秸秆提取液，其余同实施例1；对照组3：常规海水f/2培养基。具体结果见表1（万个/ml）：表1天数实验组对照组1对照组2对照组3013.713.713.713.7230.925.627.128.3461.449.252.854.7684.666.170.669.8898.781.286.980.1结论：如上表1所示，本发明培养液的培养效果最佳，尤其培养到4天之后，效果较不添加麦麸提取液或秸秆提取液的培养液大幅提高，也大大优于常规的f/2海水培养液；说明麦麸提取液和秸秆提取液具备较好的协同性能，可以有效促进藻细胞增殖，替代常规的硝酸钠等培养液组分，降低了原料成本。实施例5以实施例2为例，检测了麦麸提取液或秸秆提取液的添加量对藻细胞增殖的影响。设置麦麸提取液的添加量为5ml、10ml、20ml、40ml、60ml，如图1所示，藻细胞增殖速度随着麦麸提取液添加量的增加而提高，当添加量增加到20ml以后，藻细胞增殖速度放缓，增加到40ml以后，并没有明显增加，因此，选择20-40ml的添加量最佳。设置秸秆提取液的添加量为10ml、20ml、30ml、40ml、50ml、60ml，如图1所示，藻细胞增殖速度随着秸秆提取液添加量的增加而提高，当添加量增加到30ml以后，藻细胞增殖速度放缓，增加到50ml以后，并没有明显增加，因此，选择30-50ml的添加量最佳。最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明实施例技术方案的精神和范围。当前第1页12