韩国芽孢八叠球菌CGMCCNo.5915应用及脂肽类表面活性素制备方法和组合物与流程

本发明涉及微生物领域，具体涉及韩国芽孢八叠球菌cgmccno.5915在产脂肽类表面活性素中的应用以及一种脂肽类表面活性素的制备方法。
背景技术：
：某些芽孢杆菌在生长繁殖代谢的过程中能够产生一种生物的表面活性剂——表面活性素(surfactin)，它具有极强的表面活性，还有抗细菌、抗病毒等功效，而且将生物类表面活性剂和合成的化学表面活性剂相比较，其不仅对生态系统的毒性低，同时也可被生物所降解。因此在食品、医药、农业、化妆品等很多其他领域具有很大的潜力。但是由于表面活性素的产量很低以及生产成本非常高，这些限制了表面活性素实现工业化的生产以及在工业生产中的应用。技术实现要素：本发明的目的是为了克服现有技术中的如上缺陷，提供一株更具有产脂肽类表面活性素优势的韩国芽孢八叠球菌的应用，以及一种脂肽类表面活性素的制备方法。为了实现上述目的，本发明提供了保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在产脂肽类表面活性素中的应用第二方面，本发明还提供了保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在土壤保湿中的应用。第三方面，本发明还提供了保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在降解农药中的应用。第四方面，本发明还提供了保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在抑细菌、抑病毒和抑农业害虫中的应用。第五方面，本发明还提供了保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在用于保湿的化妆品中的应用。第六方面，本发明还提供了保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在洗涤用品中的应用。第七方面，本发明还提供了保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在降解石油烃中的应用。第八方面，本发明还提供了一种脂肽类表面活性素的制备方法，该方法包括：(1)将韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)的发酵液进行固液分离，得到上清液；(2)在所述上清液中加入盐酸，在ph值1.5-2.5且温度2-6℃的条件下保持8-20小时，之后固液分离，得到沉淀物。优选的，该方法还包括：(3)将所述沉淀物进行干燥，并将干燥产物溶于无水甲醇中，得到所述脂肽类表面活性素的粗提液；(4)将所述脂肽类表面活性素的粗提液中的溶剂减压去除，将获得的固相溶于蒸馏水中，得到脂肽类表面活性素的水溶液；(5)将所述脂肽类表面活性素的水溶液ph值依次调节至6.5-7.5和1.5-2.5，之后在温度2-6℃的条件下保持8-20小时并固液分离得到脂肽类表面活性素的固态产物。第八方面，本发明还提供了含有保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)的组合物。本发明取得了如下的技术效果：1.在农业领域的应用在保持土壤湿度、均匀分散化肥、清洁、杀虫剂的制作以及降解农药等方面，产脂肽类表面活性素的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)有着十分重要的使用价值。另外，本发明韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)产生的表面活性素除了有着强表面活性，还在抗细菌、病毒等方面有着很好的效果，可以使植物免受病虫害的危害。2.在医药领域的应用最近这些年来，由于抗生素的滥用，导致一些致病菌的耐药性变强。所以寻找一种新型的抗生素或者是新型治疗手段就尤为重要了，而本发明的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)产生的表面活性素在无毒、可生物降解、抗病毒、细菌和真菌方面则表现出极大的发展潜力。研究发现，本发明的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)产生的表面活性素可抑制某些真菌、细菌以及肿瘤的活性，也可抑制病毒tmev、hsv-1和hsv-2，同时可用来医治心肌、肺部及大脑等的急性溶栓。另外，还有着在人体白细胞中遏制hiv病毒生长繁殖的作用，与此同时其还有抗真菌的特点，能使人体内的真菌永久的失活，也不会对身体产生毒害作用。3.在化妆品领域的应用本发明的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)产生的表面活性素无毒，因而可在化妆品及日化工业领域得到广泛的应用。在化妆品中，它主要可用作保湿剂、乳化剂、分散剂、抗氧化剂等。4.在洗涤用品的应用本发明的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)产生的表面活性素因其强表面活性，可将其作为洗涤用品的添加剂添加到洗涤用品中，以此来使洗涤用品的去污渍能力增强。5.在食品领域的应用本发明的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)产生的表面活性素在食品领域中可以用作乳化剂，其次充分运用表面活性素的抗菌、抗病原体的能力可将其用作食品中防腐剂。且因其能改变面粉的流变性质以及使破碎脂肪组织乳化，同样也被应用在大麦和一些肉制品当中。另外，它还可抑制嗜热链球菌(能产异味)的生长繁殖，因而也可用于减少或消除某些地方的异味。6.在环境保护领域的应用近些年来，工业及农业不断发展，环境的污染问题越来越严重，研究表明，在被污染的地方加入本发明的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)或直接加入本发明的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)产生的表面活性素，能使污染物(例如，石油烃)被降解掉，从而达到修复土壤有机物污染，保护环境的作用。本发明的其它特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。附图说明图1为原位酸水解-茚三酮显色前韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)产表面活性素的图谱。图2为原位酸水解-茚三酮显色后韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)产表面活性素的图谱。具体实施方式以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。本发明的发明人发现，相比于同属的其它芽孢八叠球菌，保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)能够产生脂肽类表面活性素，且在土壤保湿、农药降解、抑菌、抑病毒、抑农业害虫、用于保湿的化妆品以及降解石油烃中的效果更为显著，从而完成了本发明。其中，保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)公开于cn102703341b的授权专利中，本发明通过引用将其合并于此。根据本发明的第一方面，提供保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在产脂肽类表面活性素中的应用。本发明的发明人在研究中发现，现有产生脂肽类表面活性素的微生物一般集中在枯草芽孢杆菌、假单胞菌等，尚未发现芽孢八叠球菌能够产生脂肽类表面活性素以及其在产表面活性素中的应用。因此，本发明提供了芽孢八叠球菌属一种全新的应用。同时，基于本领域技术人员对脂肽类表面活性素的认知以及结合本发明的发明人在研究过程中的发现，本发明还提供了保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在如下几个方面中的应用。1)保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在土壤保湿中的应用。2)保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在降解农药中的应用。其中，所述农药可以为常规的各种农药，例如，可以为但不限于，杀虫剂(例如，a有机磷类：磷酸酯、一硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、膦酸酯、磷酰胺、硫代磷酰胺、焦磷酸酯；b氨基甲酸酯类：n－甲基氨基甲酸酯类、二甲基氨基甲酸酯；c有机氮类：脒类、沙蚕毒类、脲类；d拟除虫菊酯类：光不稳定性拟除虫菊酯、光稳定性拟除虫菊酯；e有机氯类；f有机氟类)、杀菌剂(a有机磷类：二硫代氨基甲酸盐类、氨基磺酸类、硫代磺酸酯类、三氯甲硫基类；b有机磷酸酯类；c有机砷类；d有机锡类；e有机硫类；f苯类；g杂环类：苯并咪唑类、噻英类、嘧啶类、三唑类、吗啉类、吩嗪类、吡唑类、哌嗪类、喹啉类、苯并噻唑类、呋喃类)、除草剂(a酰胺类；b二硝基苯胺类；c氨基甲酸酯类；d脲类；e酚类；f二苯醚类；g三氮苯类；h苯氧羧酸类；i有机磷类；j杂环类；k磺酰脲类；l咪唑啉酮类)、杀鼠剂(a有机磷酸酯类；b杂环类；c脲类、硫脲类；d有机氟类；e无机有毒化合物；f急性杀鼠剂；g抗血凝杀鼠剂)等。根据本发明一种具体的实施方式，所述农药为百菌清。3)保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在抑细菌、抑病毒和抑农业害虫中的应用。其中，所述细菌可以为各种细菌，例如，可以为但不限于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜热链球菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉等。并且根据其无毒的特性，还可以将所述保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)应用在食品中，以作为防腐剂。所述病毒可以为但不限于tmev(特勒尔鼠脑脊髓炎病毒)、hsv-1(单纯疱疹病毒-1)和hsv-2(单纯疱疹病毒-2)、hiv等。所述农业害虫可以为稻飞虱、白粉病、玉米螟、棉铃虫、小麦锈病、棉蚜、稻纹枯病、稻瘟病、麦蚜、麦红蜘蛛、蝗虫、麦类赤霉病等。4)保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在用于保湿的化妆品中的应用。保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)所产生的脂肽类表面活性素用在保湿性的化妆品中可以赋予肌肤持久保湿的效果。此外，其还可以在化妆品中用于乳化剂、分散剂和抗氧化剂等。5)保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在洗涤用品中的应用。保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)所产生的脂肽类表面活性素还具有起泡、乳化、柔软、分散以及清洗等作用，因此，将其用于洗涤用品中可以起到很强的去污渍能力。6)保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)在降解石油烃中的应用。其中，石油烃是指在原油中发现的含有碳氢化合物的混合物。石油烃是目前环境中广泛存在的有机污染物之一，包括汽油、煤油、柴油、润滑油、石蜡和沥青等，是多种烃类(正烷烃、支链烷烃、环烷烃、芳烃)和少量其它有机物，如硫化物、氮化物、环烷酸类等的混合物。具体的可以为苯酚、石蜡、正十六烷、正十二烷等。本发明还提供了一种脂肽类表面活性素的制备方法，该方法包括：(1)将韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)的发酵液进行固液分离，得到上清液；(2)在所述上清液中加入盐酸，在ph值1.5-2.5且温度2-6℃的条件下保持8-20小时，之后固液分离，得到沉淀物。其中，可以通过本领域任何已知的方法获得所述韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)的发酵液，例如，在lb液体培养基(酵母浸粉5g/l，胰蛋白胨10g/l，氯化钠10g/l)中培养(4℃-37℃、ph7-9.5、12-60h)获得的发酵液。所述固液分离可以通过本领域常规的技术手段进行，例如，过滤、离心等。本发明优选通过离心的方式进行分离，所述离心的条件可以包括：转速8000-12000rpm，时间20-30min。离心所获得的上清液即为含有脂肽类表面活性素的溶液。之后通过加入盐酸，将ph值调节至1.5-2.5且温度调节至2-6℃，保持8-20小时，之后固液分离，得到含有脂肽类表面活性素的沉淀物。如上获得的沉淀物可以直接使用，也可以进行纯化后使用，所述进一步纯化的方法可以包括：(3)将所述沉淀物进行干燥，并将干燥产物溶于无水甲醇中，得到所述脂肽类表面活性素的粗提液；其中，可以通过超声振荡的方法将含有脂肽类表面活性素的干燥产物溶液无水甲醇中。其中，所述干燥的条件包括：50-65℃烘干至恒重(4)将所述脂肽类表面活性素的粗提液中的溶剂减压去除，将获得的固相溶于蒸馏水中，得到脂肽类表面活性素的水溶液；所述减压的条件包括：水泵抽真空，抽空效率约1067-3333pa(8-25mmhg)。(5)将所述脂肽类表面活性素的水溶液ph值依次用5mol/l的naoh溶液调节溶液的ph至7.0左右，另外用浓度为6mol/l的盐酸溶液调节ph至2.0左右，之后在温度2-6℃的条件下保持8-20小时并固液分离得到脂肽类表面活性素的固态产物。另一方面，本发明还提供了一种含有保藏编号为cgmccno.5915的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)作为活性成分的组合物。根据本发明，在所述组合物中含有如上所述动物韩国芽孢八叠球菌是活菌体和/或死菌体作为活性成分。优选地，含有所述韩国芽孢八叠球菌的活菌体或者活菌体和死菌体的混合菌体作为活性成分。当使用活菌体或死菌体的混合菌体作为活性成分时，活菌体的数量优选高于死菌体的数量。优选地，以每克所述组合物为基准，所述韩国芽孢八叠球菌的含量为106-1011cfu。根据本发明，本发明的组合物可以以多种形式而存在，例如，可以以药物的形式存在，也可以以食品的形式存在，这根据本领域技术人员的实际需求而定。cfu(colony-formingunits，菌落形成单位)指活菌个数。在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落，称为菌落形成单位，以其表达活菌的数量，可以通过平板菌落计数法获得。本发明中，当韩国芽孢八叠球菌的死菌体的浓度以cfu/ml表示时，是指韩国芽孢八叠球菌的活菌体死亡后得到相应数量的死菌体，并将其溶于缓冲液中配制成所需浓度。以下的实施例将对本发明作进一步的说明，但并不因此限制本发明。实施例1韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)产脂肽类表面活性素的制备方法以及鉴定(1)表面活性素的制备将韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)单个菌落在37℃条件下在发酵培养基(lb液体培养基：酵母浸粉5g，胰蛋白胨10g，氯化钠10g，添加蒸馏水搅拌溶解，并用5mol/l的naoh调节ph至7.2左右，蒸馏水定容至1000ml，121℃灭菌20min)中发酵培养48小时得到发酵菌液。将发酵液在10000rpm的条件下离心25min，除去沉淀，收集上清液。再在收集的上清液中加入浓度为6mol/l的盐酸，用玻璃棒搅拌使之混匀，调节上清液的ph至2.0左右。然后放在4℃的冰箱冷藏过夜，隔天在10000rpm的条件下离心25min，并除去上清液收集沉淀。将收集的沉淀干燥后用50ml的无水甲醇抽取，并用超声波清洗器使所得沉淀充分溶解于无水甲醇中，得表面活性素甲醇粗提取液。然后将提取液用重结晶的方法进行纯化，先减压去除提取物的溶剂，收集沉淀，将沉淀溶于蒸馏水中，混匀；再用5mol/l的naoh溶液调节溶液的ph至7.0左右，另外用浓度为6mol/l的盐酸溶液调节ph至2.0左右，并在4℃的冰箱冷藏过夜；最后就是在离心收集10000rpm的条件下离心5min收集沉淀(灰白色)，即得到细菌产表面活性素的提取产物。提取物产量为12.5mg/l发酵液。(2)表面活性素的鉴定薄层层析法检测表面活性物质将表面活性素的甲醇溶液(分析纯)及浓度为500mg/l的标准表面活性素(surfactin，品牌sigma-aldrich，货号s3523)分别点样于硅胶薄板上，以氯仿(chcl3)：甲醇(ch3oh)：水＝65:25:4的比例为展开溶剂，使硅胶薄板在展开溶剂中展开完毕。层析具体操作步骤如下：1)硅胶薄板的准备：取两块硅胶预制板，用铅笔做好起点线以及点样处的标志。2)点样：控制各点样孔之间的相互间隔大约为1.5cm左右，并使点样的时间尽可能短，点样后，将点好样的硅胶薄板放入烘箱里让其烘干或者用吹风机的热风将其吹干。3)展层：将按比例配制好的展开溶剂强烈振荡使混合液充分混匀，然后将其倒入层析缸中，盖好盖子放置30min，使层析缸中充满展开溶剂的蒸气，并使硅胶薄板吸附展开溶剂的蒸气以达到饱和，防止硅胶薄板出现边沿效应。展开的时候，把硅胶薄板放入展开溶剂中，把接近点样孔的硅胶薄板的一端浸入展开溶剂中，其深度大约为0.5-1cm，当展开溶剂的前端移至硅胶薄板前端约0.5cm处时，停止展层，并将硅胶薄板快速取出并放平，同时用铅笔记下此时展开溶剂的前端位置。4)显色：将展层结束的硅胶薄板用电吹风的冷风吹干，然后在展开完毕的硅胶薄板上用喷雾器喷洒0.5％的茚三酮显色溶液进行显色处理，通常采用人工吹气的方法来使显色剂喷洒均匀(此操作在通风橱中进行)，再用电吹风将硅胶薄板上的显色溶剂吹干，将其放入95℃的干燥箱中加热10min使溶剂挥发。若没有产生特征性的斑点则采用原位酸水解-茚三酮显色方法处理，即把硅胶薄板放在层析缸中，在层析缸中预先准备一个约盛有1ml的浓盐酸小杯，在温度调节为110℃的立式鼓风干燥箱中熏蒸1h进行原位酸水解，然后在通风橱中进行冷却，待盐酸挥发后茚三酮试剂即显色，观察斑点颜色并拍照进行记录。薄层层析的结果与分析：茚三酮能与含游离—nh2的多肽、蛋白质以及氨基酸发生显色反应，这是一种能定性检测蛋白质以及氨基酸的重要的化学反应。对本发明菌株产生的表面活性素甲醇溶液与浓度为0.5mg/ml标准表面活性素进行薄层层析(tlc)分析，将展层完毕的硅胶薄板上的溶剂晾干后直接喷含0.5％的茚三酮溶液在95℃条件下加热进行显色，韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)的tlc分析如图1(水解前)和图2(水解后)所示，韩国芽孢八叠球菌所产样品出现两处粉红色的斑点，这说明韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)发酵液中所提取出来的表面活性素甲醇溶液中含有游离—nh2。另外经原位酸水解后，再喷含0.5％的茚三酮溶液加热进行显色，韩国芽孢八叠球菌所产样品均产生橙红色斑点。这说明经酸水解后，韩国芽孢八叠球菌所产物质会产生游离—nh2。表明韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)所产表面活性物质为脂肽类物质。实施例2本实施例用于说明发酵液排油圈表面活性分析将1g苏丹红ⅲ加入300ml液体石蜡中，用玻璃棒搅拌混匀后，用真空泵减压抽滤除去不溶性的杂质。取25ml经苏丹红ⅲ染色后的液体石蜡倒入直径约为9cm的培养皿中，待整个培养皿被染色后的液体石蜡平铺后，用1ml的移液枪在培养皿的中心分别缓慢加入1ml韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)产生的表面活性素(浓度为2％)、1ml0.1％十二烷基硫酸钠溶液以及1ml浓度为0.5mg/ml的标准表面活性素(surfactin，品牌sigma-aldrich，货号s3523)溶液，用直尺测量排油圈的直径并照相进行记录，以在培养皿的中心加入1ml的空白甲醇作为空白对照，每种物质排油圈实验重复三次，结果见表1。染色的液体石蜡会被加入的表面活性剂挤向四周而形成一个圆圈。表1排油圈直径cmr1r2r3r0.1％十二烷基硫酸钠2.01.91.91.93韩国芽孢八叠球菌发酵液1.81.81.91.830.5mg/ml标准表面活性素2.52.62.82.63由表1可以看出，l韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)发酵液(含有脂肽类表面活性剂)能够有效形成排油圈。实施例3本实施例用于说明韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)的抑菌活性试验用菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉。实验方法：(1)配置不同添加量(见表2所示)条件下各测试样品的水溶液，备用；(2)分别称量适量营养琼脂加入不同三角瓶中，各加入少量蒸馏水加热溶解，备用；(3)用接种环挑取各试管斜面的菌种分别置于带含无菌水的试管中，用振荡器将试管中的细胞分散，制得菌悬液；(4)用移液器吸取0.5ml菌悬液分别注入不同培养皿中；(5)向各培养皿内注入15ml-20ml的熔化状的培养基(约45℃)，将菌液与培养基混合均匀待其冷却；(6)将牛津杯垂直放入培养基，轻轻压入，后向杯内加满测试样品水溶液(约240微升)，盖上培养皿盖子置于适宜温度下，培养24小时，观察牛津杯周围抑菌圈的有无及大小。(7)由于牛津杯所吸附的测试样品慢慢向四周扩散，因此在牛津杯的周围就出现清晰的抑菌圈。抑菌圈的大小代表测试样品抗菌力的高低。抑菌圈直径越大表明防腐体系的防腐效能越强，实验结果见表2所示。表2由表2可以看出，韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)发酵液能够有效抑制金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌和黑曲霉的生长，其中，对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌的抑制水平与0.10％的氯霉素效果相当，而对黑曲霉的抑制水平与0.5％的氯霉素相当。同时可观察到，使用实施例1纯化后的2％的表面活性素溶液的抑菌效果与1％的氯霉素相当。实施例4本实施例用于说明韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)的化妆品保湿性能选取20个30-40岁的女性，分为2组，每组10人，将双手清洗后，实验组1左手使用本发明实施例1制备的脂肽类表面活性素(溶于水中，浓度为2重量％)，实验组2左手使用本发明实施例1制备的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)的发酵液，右手不作任何处理。0小时、2小时、8小时和12小时，使用皮肤水分测试仪(cm820couragekhazakaelectronicgmbh，德国)测定每个受试者的双手的水分含量。测定结果示于下表3中。表3由以上可以看出，韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)发酵液及产生的脂肽类表面活性素具有皮肤保湿的效果。实施例5本实施例用于说明韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)发酵液的洗涤效果选取30名实验者，平均分为3组，每组10人，进行了本发明实施例1制备的韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)的发酵液，和韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)的脂肽类表面活性素(溶于水中，浓度为2重量％)的清洁效果的问卷调查。使用5点等级评估所述效果，对评估值(5点等级)取平均并示于下表3中。其中，5：非常有效；4：稍微有效；3：适中；2：几乎没有效果；1：没有效果，结果见表4所示。表4测试材料清洁效果发酵液4.1脂肽类表面活性素4.8清水2.6由上表4中的结果可以看出，韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)发酵液及其产生的脂肽类表面活性素具有较好的清洁效果。实施例6用于说明韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)发酵液对农药百菌清的降解效果及土壤保湿效果土壤中百菌清的测定方法：称量5g烘干土，加入体积比例为1:1的丙酮和水10ml，静置30分钟，振荡5分后离心取上清液，加入5ml石油醚振荡萃取5分，如此重复三次，静置后取上清液10ml向其中加入无水硫酸钠0.4g，脱水振荡1分，之后取4ml于40℃旋转蒸发仪旋转至干，再用2ml色谱纯丙酮溶解再稀释10倍，使用气相色谱进行检测。用于检测的气相色谱条件为：柱子：ht-pesticides1；检测器：ecd检测器；进样口温度：260℃；柱温：240℃；检测器温度：280℃；分流比：60；进样量：1μl；尾吹60ml/min；柱压：60kpa；载气流量：1.25ml/min。百菌清降解率＝(未处理的样本中百菌清的含量-处理后样本中百菌清的含量)/未处理的样本中百菌清的含量×100％土壤中水含量的测定方法：称取一定量的土壤，于100℃烘箱中烘干8小时，再次测定土壤重量。土壤水含量＝(烘干前的土壤重量-烘干后的土壤重量)/烘干前的土壤重量×100％在土相中对百菌清的降解性以及土壤保湿效果在没有受百菌清污染的土壤中加入百菌清，并使得相对于1kg的土壤，百菌清的含量为10mg，然后加入2％的实施例1制备的表面活性素，各物质的加入量使得土壤中水含量为18％，在37℃下进行降解，并分别在第2天、第4天和第6天测定土壤中的百菌清浓度以及土壤水含量，并计算降解率，同时以不加入韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)发酵液的土壤作为对照，保证其初始含水量为18％。结果见表5。由上表5中的结果可以看出，韩国芽孢八叠球菌(sporosarcinakoreensis)产生的脂肽类表面活性素可有效降解土壤中的农药残留，同时具有较好的土壤保湿效果。以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合。为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。当前第1页12