技术总结
本发明属于多肽制备方法技术领域，特别涉及一种利拉鲁肽中间体多肽GLP‑1(7‑37)的制备方法。其主要步骤包括构建重组利拉鲁肽工程菌，通过大肠杆菌诱导以包涵体形式表达利拉鲁肽中间体融合蛋白，再经过变性、复性、酶切和分离纯化得到利拉鲁肽中间体多肽GLP‑1(7‑37)。此发明通过改变重组序列信号肽，表达方式变为胞内不溶性包涵体表达，表达量大大增加；洗涤后的包涵体采用碱溶，无需使用大量的变性剂，以蛋白浓度为20‑30g/L的高浓度加入包涵体溶解缓冲液，变复性时间不超过1h，溶解后既可以酶切；减少了工序，缩小操作体积，降低试剂成本，利于工业化放大；采用UniSP‑50XS阳离子交换分离纯化，分离度高。本发明制备的利拉鲁肽中间体多肽纯度达到87％以上，收率大于85％。
技术研发人员：潘尚书;汤传根;李宬;刘晓锐;崔怀言;陈松;张昊宁
受保护的技术使用者：美药星（南京）制药有限公司
技术研发日：2018.02.06
技术公布日：2018.06.22