本发明属于药物化学领域，具体涉及一类cdk抑制剂、其药物组合物、制备方法及用途。
背景技术
周期蛋白依耐性激酶(cdk)是一类丝氨酸(ser)/苏氨酸(thr)激酶，作为细胞内重要的信号转导分子和周期素(cyclin)形成的cdk-cyclin复合物，参与细胞的生长、增殖、休眠或者凋亡。细胞周期的过程中，cyclins周期性连续的表达和降解，并分别结合到由它们瞬时活化的cdk上，通过cdk活性，催化不同底物磷酸化，实现对细胞周期不同时相的推进和转化作用。
过去的数十年中，以cdk激酶为靶点的药物开发已取得广泛的关注，有些药物进入不同阶段的临床研究。然而这些cdk抑制剂对各cdk家族亚型抑制活性不高，或者选择性差，或者体内吸收不佳，或者有一定的毒副作用等限制了其临床应用。近几年，由于提高了cdk抑制剂对各cdk家族亚型的选择性及抑制活性，尤其是靶向cdk4/6的选择性抑制剂的发现，使得这一领域的药物研发再次成为热点。
cdk4/6在许多癌症中均过度表达，导致细胞增殖失控，因此，抑制cdk4/6可以实现从信号通路的下游抑制细胞增殖。目前辉瑞的cdk4/6抑制剂palbociclib成为第一个上市的cdk4/6抑制剂，被fda批准作为一线药物治疗er阳性、her2阴性乳腺癌，同类药物礼来的abemaciclib和诺华公司的ribociclib也已上市。
因此，研究和开发具有良好的cdk调节活性，适于药用的cdk激酶抑制剂具有较大的社会意义。
技术实现要素：
为了改善上述问题，本发明提供下式a所示的化合物、其立体异构体、消旋体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂合物、或其药学上可接受的盐，
其中，每一个r1相同或不同，彼此独立地代表h、-f、-cl、-br、-i、无取代或被一个或多个ra取代的c1-40烷基；
r2、r4、r5相同或不同，彼此独立地代表h、-f、-cl、-br、-i、-cn、-no2、无取代或任选被一个或多个rb取代的下列基团：c1-40烷基、c1-40烷氧基、c3-20环烷基、3-20元杂环基、c6-20芳基、5-20元杂芳基、或-nrcrd；
r3、r6相同或不同，彼此独立地代表h、无取代或任选被一个或多个re取代的c1-40烷基；
x为crf；
每一个ra、rb相同或不同，彼此独立地选自-f、-cl、-br、-i、-cn、＝o、-no2、或下列基团：c1-40烷基、c1-40烷基氧基、c1-40烷基硫基、c2-40烯基、c2-40烯基氧基、c2-40烯基硫基、c2-40炔基、c2-40炔基氧基、c2-40炔基硫基、c3-20环烷基、c3-20环烷基氧基、c3-20环烷基硫基、3-20元杂环基、3-20元杂环基氧基、3-20元杂环基硫基、c6-20芳基、c6-20芳基氧基、c6-20芳基硫基、5-20元杂芳基、5-20元杂芳基氧基、5-20元杂芳基硫基；
每一个rc、rd、re相同或不同，彼此独立地选自h、或下列基团：c1-40烷基、c2-40烯基、c2-40炔基、c3-20环烷基、3-20元杂环基、c6-20芳基、5-20元杂芳基；
或者，rc和rd与其所连接的氮原子一起形成选自无取代或任选被一个或多个rg取代的下列环系：3-20元杂环基、5-20元杂芳基；
rg选自-f、-cl、-br、-i、-cn、＝o、-no2、或下列基团：c1-40烷基、c2-40烯基、c2-40炔基、c3-20环烷基、3-20元杂环基、c6-20芳基、5-20元杂芳基；
rf选自h、＝o、或任选被一个或多个ra取代的c1-40烷基。
根据本发明示例性的实施方案，每一个r1相同或不同，彼此独立地代表h、-f、-cl、-br、-i、无取代或被一个或多个c1-12烷基取代的c1-12烷基，例如r1选自h、-f、-cl、或-br；
根据本发明示例性的实施方案，r2、r4、r5相同或不同，彼此独立地代表h、-cn、无取代或任选被一个或多个c1-12烷基取代的下列基团：c1-12烷基、c3-8环烷基、3-8元杂环基、二-(c1-12烷基)氨基-、c1-12烷基氨基-，或者二-(c1-12烷基)氨基中两个c1-12烷基还可以与其所连接的氮原子一起形成选自无取代或任选被一个或多个c1-12烷基取代的3-20元杂环基；
例如r2、r4、r5相同或不同，彼此独立地代表h、-cn、或如下基团：
其中，
根据本发明示例性的实施方案，r3、r6代表h、无取代或任选被一个或多个c1-12烷基取代的c1-12烷基；
例如r3、r6相同或不同，彼此独立地代表-ch3、-ch2ch3、-ch(ch3)2、或-c(ch3)3；
根据本发明示例性的实施方案，x选自crf，其中rf独立地代表h、＝o、或c1-12烷基；
例如rf选自h、＝o、-ch3、或-ch2ch3。
作为实例，所述式a所示的化合物选自包括但不限于如下化合物：
本发明还提供一种药物组合物，其包含治疗有效量的式a所示的化合物、其立体异构体、消旋体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂合物或其药学上可接受的盐中的一种或者多种。
根据本发明，所述药物组合物还任选包含其药学上可接受的辅料，例如载体、赋形剂；所述辅料选自下列中的一种或多种：崩解剂、助流剂、润滑剂、稀释剂或填充剂、粘合剂、着色剂。
本发明还提供式a所示的化合物、其立体异构体、消旋体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂合物或其药学上可接受的盐中的一种或者多种在制备药物中的用途。
根据本发明的实施方案，所述药物为cdk抑制剂。
根据本发明的实施方案，所述cdk抑制剂用于治疗和/或预防乙型肝炎病。
本发明还提供一种治疗和/或预防疾病的方法，其包括向需要此种治疗和/或预防的患者给予治疗有效量的式a所示的化合物、其立体异构体、消旋体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂合物或其药学上可接受的盐中的一种或者多种。
根据本发明的实施方案，所述疾病为乙型肝炎病。
本发明还提供所述式a化合物的制备方法，包括：
(1)化合物v与化合物vi进行反应得到化合物a；
其中，r1、r2、r3、r4、r5、r6、x具有如上所述定义。
步骤(1)中，
所述反应可以为buchwald反应；
所述反应可以在20℃至100℃温度下进行；
所述反应可以在溶剂中进行，所述溶剂选自酰胺类溶剂、醚类溶剂、芳烃类溶剂中的一种、两种或更多种；例如选自dmf、二氧六环、四氢呋喃、甲苯等中的一种、两种或更多种；
所述反应可以在催化剂和配体的存在下进行；所述催化剂选自pdcl2(pph3)2、pd(pph3)4、pd(dba)2、pd(oac)2、pd(dppf)2cl2中的一种、两种或更多种；所述配体选自2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(xphos)、2-双环己基膦-2',6'-二甲氧基联苯(sphos)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(xantphos)中的一种、两种或更多种；
所述反应还可以在碱的存在下进行；所述碱选自碳酸铯、叔丁醇钠、叔丁醇钾、磷酸钾、醋酸钠中的一种、两种或更多种。
根据本发明，如上所述方法还包括式v化合物的制备，包括：
(2)中间体iii的合成
化合物i与化合物ii反应得到化合物iii；
(3)中间体iv的合成
步骤(2)得到的化合物iii与化合物r3i反应得到化合物iv；
(4)中间体v的合成
步骤(3)得到的化合物iv反应得到化合物v；
步骤(2)中，
所述反应可以为缩合反应；
所述缩合反应可以在20℃至100℃温度下进行；
所述缩合反应可以在缩合剂的存在下进行；使用的缩合剂可以选自edci.hcl(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐)、hatu(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯)、bop-cl(双(2-氧代-3-恶唑烷基)次磷酰氯)、dcc(n,n'-二环己基碳酰亚胺)中的一种、两种或更多种；
缩合反应中使用的碱可以选自三乙胺、二异丙基乙胺、n-甲基吗啉、dmap中的一种、两种或更多种；
步骤(3)中，
所述反应可以在20℃至100℃温度下进行；
所述反应可以在碱的存在下进行；所述碱选自氢化钠、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾、六甲基氨基锂、六甲基氨基钠中的一种、两种或更多种；
所述反应可以在溶剂中进行，所述溶剂选自酰胺类溶剂、醚类溶剂、芳烃类溶剂中的一种、两种或更多种；例如选自dmf、二氧六环、四氢呋喃、甲苯等中的一种、两种或更多种；
步骤(4)中，
所述反应可以在镁粉及易斯酸的存在下进行；
所述反应可以在20℃至100℃温度下进行；
所述路易斯酸选自氯化锂、氯化锌中的一种、或两种；
所述反应可以在溶剂中进行，所述溶剂选自醚类溶剂；例如选自乙醚、二氧六环、四氢呋喃中的一种、两种或更多种。
有益效果
本发明化合物具有良好的cdk调节活性，适于药用，具有临床应用价值。并且，本发明化合物合成步骤简单，因此具备良好的经济利用价值。
术语定义和说明
除非另有说明，本申请说明书和权利要求书中记载的基团和术语定义，包括其作为实例的定义、示例性的定义、优选的定义、表格中记载的定义、实施例中具体化合物的定义等，可以彼此之间任意组合和结合。这样的组合和结合后的基团定义及化合物结构，应当属于本申请说明书记载的范围内。
术语“c1-40烷基”应理解为优选表示具有1～40个碳原子的直链或支链饱和一价烃基，优选为c1-10烷基。“c1-10烷基”应理解为优选表示具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子的直链或支链饱和一价烃基。所述烷基是例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、1,2-二甲基丙基、新戊基、1,1-二甲基丙基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、2-乙基丁基、1-乙基丁基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基或1,2-二甲基丁基等或它们的异构体。特别地，所述基团具有1、2、3、4、5、6、个碳原子(“c1-6烷基”)，例如甲基、乙基、丙基、丁基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基，更特别地，所述基团具有1、2或3个碳原子(“c1-3烷基”)，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基。
术语“c2-40烯基”应理解为优选表示直链或支链的一价烃基，其包含一个或多个双键并且具有2～40个碳原子，优选“c2-10烯基”。“c2-10烯基”应理解为优选表示直链或支链的一价烃基，其包含一个或多个双键并且具有2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子，特别是2或3个碳原子(“c2-3烯基”)，应理解，在所述烯基包含多于一个双键的情况下，所述双键可相互分离或者共轭。所述烯基是例如乙烯基、烯丙基、(e)-2-甲基乙烯基、(z)-2-甲基乙烯基、(e)-丁-2-烯基、(z)-丁-2-烯基、(e)-丁-1-烯基、(z)-丁-1-烯基、戊-4-烯基、(e)-戊-3-烯基、(z)-戊-3-烯基、(e)-戊-2-烯基、(z)-戊-2-烯基、(e)-戊-1-烯基、(z)-戊-1-烯基、己-5-烯基、(e)-己-4-烯基、(z)-己-4-烯基、(e)-己-3-烯基、(z)-己-3-烯基、(e)-己-2-烯基、(z)-己-2-烯基、(e)-己-1-烯基、(z)-己-1-烯基、异丙烯基、2-甲基丙-2-烯基、1-甲基丙-2-烯基、2-甲基丙-1-烯基、(e)-1-甲基丙-1-烯基、(z)-1-甲基丙-1-烯基、3-甲基丁-3-烯基、2-甲基丁-3-烯基、1-甲基丁-3-烯基、3-甲基丁-2-烯基、(e)-2-甲基丁-2-烯基、(z)-2-甲基丁-2-烯基、(e)-1-甲基丁-2-烯基、(z)-1-甲基丁-2-烯基、(e)-3-甲基丁-1-烯基、(z)-3-甲基丁-1-烯基、(e)-2-甲基丁-1-烯基、(z)-2-甲基丁-1-烯基、(e)-1-甲基丁-1-烯基、(z)-1-甲基丁-1-烯基、1,1-二甲基丙-2-烯基、1-乙基丙-1-烯基、1-丙基乙烯基、1-异丙基乙烯基。
术语“c2-40炔基”应理解为表示直链或支链的一价烃基，其包含一个或多个三键并且具有2～40个碳原子，优选“c2-c10炔基”。术语“c2-c10炔基”应理解为优选表示直链或支链的一价烃基，其包含一个或多个三键并且具有2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子，特别是2或3个碳原子(“c2-c3-炔基”)。所述炔基是例如乙炔基、丙-1-炔基、丙-2-炔基、丁-1-炔基、丁-2-炔基、丁-3-炔基、戊-1-炔基、戊-2-炔基、戊-3-炔基、戊-4-炔基、己-1-炔基、己-2-炔基、己-3-炔基、己-4-炔基、己-5-炔基、1-甲基丙-2-炔基、2-甲基丁-3-炔基、1-甲基丁-3-炔基、1-甲基丁-2-炔基、3-甲基丁-1-炔基、1-乙基丙-2-炔基、3-甲基戊-4-炔基、2-甲基戊-4-炔基、1-甲基戊-4-炔基、2-甲基戊-3-炔基、1-甲基戊-3-炔基、4-甲基戊-2-炔基、1-甲基戊-2-炔基、4-甲基戊-1-炔基、3-甲基戊-1-炔基、2-乙基丁-3-炔基、1-乙基丁-3-炔基、1-乙基丁-2-炔基、1-丙基丙-2-炔基、1-异丙基丙-2-炔基、2,2-二甲基丁-3-炔基、1,1-二甲基丁-3-炔基、1,1-二甲基丁-2-炔基或3,3-二甲基丁-1-炔基。特别地，所述炔基是乙炔基、丙-1-炔基或丙-2-炔基。
术语“c3-20环烷基”应理解为表示饱和的一价单环或双环烃环，其具有3～20个碳原子，优选“c3-10环烷基”。术语“c3-10环烷基”应理解为表示饱和的一价单环或双环烃环，其具有3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子。所述c3-10环烷基可以是单环烃基，如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基或环癸基，或者是双环烃基如十氢化萘环。
术语“3-20元杂环基”意指饱和的一价单环或双环烃环，其包含1-5个独立选自n、o和s的杂原子，优选“3-10元杂环基”。术语“3-10元杂环基”意指饱和的一价单环或双环烃环，其包含1-5个，优选1-3个选自n、o和s的杂原子。所述杂环基可以通过所述碳原子中的任一个或氮原子(如果存在的话)与分子的其余部分连接。特别地，所述杂环基可以包括但不限于：4元环，如氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基；5元环，如四氢呋喃基、二氧杂环戊烯基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡咯啉基；或6元环，如四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基或三噻烷基；或7元环，如二氮杂环庚烷基。任选地，所述杂环基可以是苯并稠合的。所述杂环基可以是双环的，例如但不限于5,5元环，如六氢环戊并[c]吡咯-2(1h)-基环，或者5,6元双环，如六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1h)-基环。含氮原子的环可以是部分不饱和的，即它可以包含一个或多个双键，例如但不限于2,5-二氢-1h-吡咯基、4h-[1,3,4]噻二嗪基、4,5-二氢噁唑基或4h-[1,4]噻嗪基，或者，它可以是苯并稠合的，例如但不限于二氢异喹啉基。根据本发明，所述杂环基是无芳香性的。
术语“c6-20芳基”应理解为优选表示具有6～20个碳原子的一价芳香性或部分芳香性的单环、双环或三环烃环，优选“c6-14芳基”。术语“c6-14芳基”应理解为优选表示具有6、7、8、9、10、11、12、13或14个碳原子的一价芳香性或部分芳香性的单环、双环或三环烃环(“c6-14芳基”)，特别是具有6个碳原子的环(“c6芳基”)，例如苯基；或联苯基，或者是具有9个碳原子的环(“c9芳基”)，例如茚满基或茚基，或者是具有10个碳原子的环(“c10芳基”)，例如四氢化萘基、二氢萘基或萘基，或者是具有13个碳原子的环(“c13芳基”)，例如芴基，或者是具有14个碳原子的环(“c14芳基”)，例如蒽基。
术语“5-20元杂芳基”应理解为包括这样的一价单环、双环或三环芳族环系：其具有5～20个环原子且包含1-5个独立选自n、o和s的杂原子，例如“5-14元杂芳基”。术语“5-14元杂芳基”应理解为包括这样的一价单环、双环或三环芳族环系：其具有5、6、7、8、9、10、11、12、13或14个环原子，特别是5或6或9或10个碳原子，且其包含1-5个，优选1-3各独立选自n、o和s的杂原子并且，另外在每一种情况下可为苯并稠合的。特别地，杂芳基选自噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻-4h-吡唑基等以及它们的苯并衍生物，例如苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、吲唑基、吲哚基、异吲哚基等；或吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等，以及它们的苯并衍生物，例如喹啉基、喹唑啉基、异喹啉基等；或吖辛因基、吲嗪基、嘌呤基等以及它们的苯并衍生物；或噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基等。
除非另有说明，杂环基、杂芳基或亚杂芳基包括其所有可能的异构形式，例如其位置异构体。因此，对于一些说明性的非限制性实例，吡啶基或亚吡啶基包括吡啶-2-基、亚吡啶-2-基、吡啶-3-基、亚吡啶-3-基、吡啶-4-基和亚吡啶-4-基；噻吩基或亚噻吩基包括噻吩-2-基、亚噻吩-2-基、噻吩-3-基和亚噻吩-3-基。
可以根据已知的方法，例如通过萃取、过滤或柱层析来分离目标化合物。
根据其分子结构，本发明的化合物可以是手性的，因此可能存在各种对映异构体形式。因而这些化合物可以以消旋体形式或光学活性形式存在。本发明的化合物或其中间体可以通过本领域技术人员公知的化学或物理方法分离为对映异构体化合物，或者以此形式用于合成。在外消旋的胺的情况中，通过与光学活性的拆分试剂反应，从混合物制得非对映异构体。适当的拆分试剂的示例是光学活性的酸，例如r和s形式的酒石酸、二乙酰酒石酸、二苯甲酰酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸、适当的n-保护的氨基酸(例如n-苯甲酰脯氨酸或n-苯磺酰基脯氨酸)或各种光学活性的樟脑磺酸。借助光学活性的拆分试剂(例如固定在硅胶上的二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸、三乙酸纤维素或其它碳水化合物的衍生物或手性衍生化的异丁烯酸酯聚合物)，也可有利地进行色谱对映体拆分。用于此目的的适当的洗脱剂是含水或含醇的溶剂混合物，例如，己烷/异丙醇/乙腈。
药学上可接受的盐可以是例如在链或环中具有氮原子的具有足够碱性的本发明的化合物的酸加成盐，例如与如下无机酸形成的酸加成盐：例如盐酸、氢氟酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、焦硫酸、磷酸或硝酸，或硫酸氢盐、或者与如下有机酸形成的酸加成盐：例如甲酸、乙酸、乙酰乙酸、丙酮酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、己酸、庚酸、十一烷酸、月桂酸、苯甲酸、水杨酸、2-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、樟脑酸、肉桂酸、环戊烷丙酸、二葡糖酸、3-羟基-2-萘甲酸、烟酸、扑酸、果胶酯酸、过硫酸、3-苯基丙酸、苦味酸、特戊酸、2-羟基乙磺酸、衣康酸、氨基磺酸、三氟甲磺酸、十二烷基硫酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、2-萘磺酸、萘二磺酸、樟脑磺酸、柠檬酸、酒石酸、硬脂酸、乳酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、己二酸、藻酸、马来酸、富马酸、d-葡糖酸、扁桃酸、抗坏血酸、葡庚酸、甘油磷酸、天冬氨酸、磺基水杨酸、半硫酸或硫氰酸。
由于本发明的化合物可存在多个成盐位点，所述“药学上可接受的盐”不仅包括本发明化合物其中1个成盐位点上形成的盐，而且还包括其中2、3或全部成盐位点上形成的盐。为此，所述“药学上可接受的盐”中式(i)化合物与成盐所需的酸的根离子(阴离子)或碱的阳离子摩尔比可以在较大的范围内变化，例如可以是4:1～1:4，如3:1、2:1、1:1、1:2、1:3等。
根据本发明，药学上可接受的阴离子包括选自由无机酸或有机酸电离生成的阴离子。所述“无机酸”包括但不限于盐酸、氢氟酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、焦硫酸、磷酸或硝酸。所述“有机酸”包括但不限于甲酸、乙酸、乙酰乙酸、丙酮酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、己酸、庚酸、十一烷酸、月桂酸、苯甲酸、水杨酸、2-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、樟脑酸、肉桂酸、环戊烷丙酸、二葡糖酸、3-羟基-2-萘甲酸、烟酸、扑酸、果胶酯酸、过硫酸、3-苯基丙酸、苦味酸、特戊酸、2-羟基乙磺酸、衣康酸、氨基磺酸、三氟甲磺酸、十二烷基硫酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、2-萘磺酸、萘二磺酸、樟脑磺酸、柠檬酸、酒石酸、硬脂酸、乳酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、己二酸、藻酸、马来酸、富马酸、d-葡糖酸、扁桃酸、抗坏血酸、葡庚酸、甘油磷酸、天冬氨酸、磺基水杨酸、半硫酸或硫氰酸。
术语“互变异构体”是指因分子中某一原子在两个位置迅速移动而产生的官能团异构体。本发明化合物可表现出互变异构现象。互变异构的化合物可以存在两种或多种可相互转化的种类。质子移变互变异构体来自两个原子之间共价键合的氢原子的迁移。互变异构体一般以平衡形式存在，尝试分离单一互变异构体时通常产生一种混合物，其理化性质与化合物的混合物是一致的。平衡的位置取决于分子内的化学特性。例如，在很多脂族醛和酮如乙醛中，酮型占优势；而在酚中，烯醇型占优势。本发明包含化合物的所有互变异构形式。
术语“有效量”或者“治疗有效量”是指足以实现预期应用(包括但不限于如下定义的疾病治疗)的本发明所述化合物的量。治疗有效量可以取决于以下因素而改变：预期应用(体外或者体内)，或者所治疗的受试者和疾病病症如受试者的重量和年龄、疾病病症的严重性和给药方式等，其可以由本领域普通技术人员容易地确定。具体剂量将取决于以下因素而改变：所选择的特定化合物、所依据的给药方案、是否与其它化合物组合给药、给药的时间安排、所给药的组织和所承载的物理递送系统。
术语“辅料”是指可药用惰性成分。赋形剂种类的实例非限制性地包括粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、稳定剂、填充剂和稀释剂等。赋形剂能增强药物制剂的操作特性，即通过增加流动性和/或粘着性使制剂更适于直接压缩。适用于上述制剂的典型的药学上可接受的载体的实例为：糖类，例如乳糖、蔗糖、甘露醇和山梨醇；淀粉类，例如玉米淀粉、木薯淀粉和土豆淀粉；纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠，乙基纤维素和甲基纤维素；磷酸钙类，例如磷酸二钙和磷酸三钙；硫酸钠；硫酸钙；聚乙烯吡咯烷酮；聚乙烯醇；硬脂酸；硬脂酸碱土金属盐，例如硬脂酸镁和硬脂酸钙；硬脂酸；植物油类，例如花生油、棉籽油、芝麻油、橄榄油和玉米油；非离子、阳离子和负离子表面活性剂；乙二醇聚合物；脂肪醇类；和谷物水解固形物以及其它无毒的可相容的填充剂、粘合剂、崩解剂、缓冲剂、防腐剂、抗氧剂、润滑剂、着色剂等在药物制剂中常用到的辅料。
具体实施方式
下文将结合具体实施例对本发明的通式化合物及其制备方法和应用做更进一步的详细说明。下列实施例仅为示例性地说明和解释本发明，而不应被解释为对本发明保护范围的限制。凡基于本发明上述内容所实现的技术均涵盖在本发明旨在保护的范围内。
除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。
实施例1
6-甲基-10-((5-(4-甲基哌啶-1-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
(1)中间体1c合成
将化合物1a(21.6g，100mmol)，1b(15.9g，100mmol)，dipea(19.4g，150mmol)溶于dmf(200ml)中，室温下加入hatu(45.6g，120mmol)，搅拌反应4小时，tlc检测反应，反应完毕后加入水(200ml)淬灭反应，乙酸乙酯提取(300mlx2)，合并有机层，有机层干燥，过滤，浓缩，柱层析分离得到类白色固体28.5g，收率79.9％。
(2)中间体1d合成
化合物1c(28.0g，75.8mmol)溶于dmf(200ml)中，冰浴下加入氢化钠(3.8g，94.2mmol)，搅拌反应30分钟，室温下加入碘甲烷(10.8g，75.8mmol)搅拌反应6小时，tlc检测反应，反应完毕后，加入水(100ml)淬灭反应，乙酸乙酯(500mlx2)提取，合并有机层，干燥，浓缩，柱层析分离得到类白色固体23.2g，收率82.6％。
(3)中间体1e合成
将化合物1d(23.0g，62.1mmol)、氯化锂(0.5g，12.4mmol)溶于四氢呋喃(200ml)中，室温下加入镁粉(1.8g，74.5mmol)水溶液(300ml)，升温至50℃搅拌反应8小时，tlc检测反应，反应完毕后加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，加入乙酸乙酯(300mlx2)提取，合并有机层，浓缩，柱层析分离得到类白色固体12.4g，收率68.9％。
(4)化合物1的合成
化合物1e(1.2g，4.1mmol)、化合物1f(0.8g，4.1mmol)、碳酸铯(2.0g，6.2mmol)、pd(dba)2(120mg，0.2mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(120mg，0.2mmol)溶于dmf(20ml)中，升温至100℃搅拌反应12小时，tlc检测反应，反应完毕后将反应液倒入水(20ml)中，乙酸乙酯(500mlx2)提取，合并有机相干燥，过滤，浓缩，柱层析分离得到类白色固体760mg，收率41.2％。ms-esi:m/z＝446.5[m+1]。
实施例2
10-((5-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-6-甲基-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法制备，ms-esi:m/z＝460.5[m+1]。
实施例3
6-甲基-10-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法制备，ms-esi:m/z＝432.4[m+1]。
实施例4
6-甲基-10-((5-吗啉基吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法制备，ms-esi:m/z＝433.4[m+1]。
实施例5
6-甲基-10-((5-(哌嗪-4-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法制备，ms-esi:m/z＝431.5[m+1]。
实施例6
2,2-二氟-6-甲基-10-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法制备，ms-esi:m/z＝482.5[m+1]。
实施例7
10-((5-(4-乙基哌啶-1-基)吡啶-2-基)氨基)-2,2-二氟-6-甲基-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法制备，ms-esi:m/z＝496.5[m+1]。
实施例8
2,2-二氟-6-甲基-10-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法制备，ms-esi:m/z＝468.4[m+1]。
实施例9
2,2-二氟-6-甲基-10-((5-吗啉基吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮
参考实施例1的方法制备，ms-esi:m/z＝469.4[m+1]。
实施例10
2,2-氟-6-甲基-10-((5-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法制备，ms-esi:m/z＝467.5[m+1]。
实施例11
6-异丙基-10-((5-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法制备，ms-esi:m/z＝459.2[m+1]。
实施例12
6-异丙基-10-((5-(1-甲基-哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法，ms-esi:m/z＝473.2[m+1]。
实施例13
6-异丙基-10-((5-(1-乙基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法，ms-esi:m/z＝487.2[m+1]。
实施例14
6-异丙基-10-((5-(四氢-2h-吡喃-4-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法，ms-esi:m/z＝460.2[m+1]。
实施例15
6-异丙基-10-((5-(2,6-二甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法，ms-esi:m/z＝487.2[m+1]。
实施例16
2,2-二氟-6-异丙基-10-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法，ms-esi:m/z＝496.2[m+1]。
实施例17
2,2-二氟-6-异丙基-10-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法，ms-esi:m/z＝510.2[m+1]。
实施例18
2,2-二氟-6-异丙基-10-((5-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法，ms-esi:m/z＝524.2[m+1]。
实施例19
2,2-二氟-6-异丙基-10-((5-吗啉基吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法，ms-esi:m/z＝497.2[m+1]。
实施例20
2,2-二氟-6-异丙基-10-((3,5-二甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法，ms-esi:m/z＝524.2[m+1]。
实施例21
2,2-二氟-6-异丙基-10-((5-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法，ms-esi:m/z＝495.2[m+1]。
实施例22
2,2-二氟-6-异丙基-10-((5-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-[1,3]二氧戊烷并[4,5-f]嘧啶并[5,4-c]喹啉-7(6h)-酮的制备
参考实施例1的方法，ms-esi:m/z＝509.2[m+1]。
实施例23生物活性测定
cdk/6酶活性测定
采用calipermobilityshiftassay方法测试化合物对cdk/6酶的抑制活性，该技术将毛细管电泳的基本理念应用到维流体环境中，在不加入终止试剂的情况下检测酶学实验。用于实验的底物是带荧光标记的多肽，在反应体系中酶的作用下，底物转变为产物，其所带电荷也发生了相应的变化，caliper-shiftassay利用底物和产物所带电荷的不同，将二者进行分离并分别进行检测。
实验方法：
测定mobilityshift上的atp表观km，384微孔板中加入5μl/孔的2xenzy&peptide混合液。加入5μl/孔三倍梯度的2xatp溶液，启动反应。室温离心1分钟，放入23℃培养箱温育60分钟后，加入5μl/孔3xstopbuffer(100mmhepes,ph7.5；0.015％brij-35；0.2％coatingreagent#3；50mmedta)终止反应，置于caliperezreaderi上进行检测；在96微孔板中对化合物在5μm浓度进行4倍梯度稀释，加入1005μl100％dmso作为无化合物无激酶对照组，取10μl化合物加入到一个新的96微孔板，再加入905μl，1xkinasebasebuffer(20mmhepes,ph7.5；0.01％tritonx-100；10mmmgcl2；2mmdtt)，将该板放置在摇床上10分钟以将化合物混匀；每孔取5μl混合液加入到384微孔中。然后在微孔中加入10μl,2.5xenzymesolution。室温下孵育10分钟后再在各孔中加入10μl,2.5x的多肽溶液(1xkinasebasebuffer中加入fam-labeledpeptide和atp)。激酶反应，指定时间停止，孵育30℃，加25μlstopbuffer终止反应。置于caliperezreaderi上进行检测。
结果显示，本发明化合物抑制cdk4/6激酶的ic50值通常在25μm以下。实施例1-22化合物抑制cdk4激酶的ic50值低于1μm，其中实施例1、2、6、9、11、14、16和19化合物抑制cdk4激酶的ic50低于10nm，特别是实施例6、9、19化合物的ic50低于8nm。
以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。