本发明涉及化学生物学技术领域，特别是涉及与vista具有亲和力的短肽及其用途。
背景技术：
t细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(v-domainimmunoglobulinsuppressoroft-cellactivation，vista)是可抑制t细胞免疫应答的负向免疫检查点。vista又称为pd-1h、c10orf54和dies1，是ⅰ型跨膜蛋白，主要表达于造血细胞、粒细胞和t细胞，其天然结合受体为vsig8(v-setandimmunoglobulindomaincontaining8，vsig8)/vsig3(v-setandigdomain-containingprotein3，vsig3)。vista具有受体和配体的双重功能，在肿瘤微环境和肿瘤浸润淋巴结中表达升高，可抑制t细胞对肿瘤抗原的应答，抑制t细胞分化为调节性t细胞(treg)，降低白细胞介素2(il-2)的产生，具有免疫抑制和免疫调节的功能，但是vista并不会对b细胞的增殖产生影响。
vista与转移性黑素瘤、诱导性黑素瘤和年龄相关的炎症表型的发生相关，并且具有不同于程序性死亡蛋白1及配体1(pd-1/pd-l1)信号通路。此外，vista在自身免疫性疾病和器官移植排异反应上也表现出显著的调节作用，如小鼠系统性红斑狼疮模型和急性移植物抗宿主疾病模型。在小鼠鳞状上皮细胞肿瘤模型上联用vista和细胞毒t淋巴细胞相关(cytotoxictlymphocyte-associatedantigen-4，ctla-4)单克隆抗体可有效的将静歇期t细胞和被耗竭的t细胞转变分化为效应t细胞，临床研究证实，vista在人类胃癌、口腔鳞状细胞癌和非小细胞肺癌上表达显著升高，而在使用伊匹木治疗前列腺癌后vista的表达会明显上升。
因此，在蛋白层面筛选与vista蛋白有亲和力的短肽，并得到可与vista蛋白结合的多肽氨基酸序列，开发特异性vista靶点抑制剂是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明通过构建elisa法筛选模型，提供了与vista具有亲和力的短肽及其用途，为特异性vista靶点抑制剂的药物开发提供实验依据，为vista靶点抗肿瘤药物、治疗自身免疫性疾病的免疫抑制类药物或抗炎药物的开发奠定基础。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
与vista具有亲和力的短肽，所述短肽的氨基酸序列如下：
进一步地，所述短肽与所述vista的结合率均大于15％。
包含所述短肽的多肽变体，其中所述多肽变体为对所述短肽进行一种或多种修饰；所述修饰包括与人免疫球蛋白fc片段或其变体融合；与人血清白蛋白或其变体融合；与肿瘤穿透肽融合；与肿瘤靶向性单链或单域抗体融合；或与聚乙二醇、xtenylation、pasylation或hesylation融合。
包含所述短肽的药物组合物，所述药物组合物还包括与所述短肽相适配的载体、治疗因子、赋形剂和稀释剂；其中药物组合物可以为本发明中各物质直接混合得到的溶剂化合物；也可以是将各物质溶解于水中，通过冻干得到的冻干粉；
其中，赋形剂为葡萄糖；稀释剂为氯化钠或碳酸氢钠；载体为有机物质。
包含所述多肽变体的药物组合物，所述药物组合物还包括与所述多肽变体相适配的载体、治疗因子、赋形剂和稀释剂；其中，赋形剂为葡萄糖；稀释剂为氯化钠或碳酸氢钠；载体为有机物质；其中药物组合物可以为本发明中各物质直接混合得到的溶剂化合物；也可以是将各物质溶解于水中，通过冻干得到的冻干粉。
所述短肽的应用，所述短肽在开发vista靶点抗肿瘤药物、治疗自身免疫性疾病的免疫抑制类药物或抗炎药物中应用。
其中，所述多肽变体在开发vista靶点抗肿瘤药物、治疗自身免疫性疾病的免疫抑制类药物或抗炎药物中的应用
进一步地，所述肿瘤包括纤维肉瘤、粘膜肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、骨肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、滑膜肉瘤、间皮瘤、尤文氏瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、结肠癌、胰腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌、乳头状腺癌、支气管癌、髓样癌、肾细胞癌、肾母细胞癌、肾癌、肝癌、胆管癌、绒毛膜癌、精原细胞癌、胚胎癌、宫颈癌、睾丸肿瘤、肺癌、小细胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、胶质瘤、星形细胞瘤、髓母细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、血管母细胞瘤、听神经瘤、脑膜瘤、少突胶质细胞瘤、黑色素瘤、神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、血液癌症、胃肠癌、食道癌或泌尿系统癌症；
所述自身免疫性疾病包括红斑狼疮或银屑病；
所述炎症包括哮喘、关节炎或器官移植排斥。
所述短肽的筛选模型构建方法，包括以下步骤：
(1)表达制备出vista融合蛋白；
(2)利用竞争性elisa法，筛选vista蛋白的亲和分子；
avista蛋白通过包被缓冲液，经过物理吸附作用包被在酶标板上，过夜；
b弃去包被蛋白液，利用洗涤缓冲液清洗，后加入封闭液，室温封闭处理2h后弃去封闭液，利用所述洗涤缓冲液清洗，去除板底未被蛋白饱和的非特异性结合位点；
c将样品溶液与vista特异性抗体1:9混合配制成反应液加入，室温反应2h后弃去反应液，并利用所述洗涤缓冲液清洗；
d加入二抗室温孵育1h，清洗后加入tmb显色液暗处孵育9min，最后加入终止液检测吸光度值。
其中，步骤(1)表达制备出vista融合蛋白的具体方法为：
aexpicho-stm细胞的复苏培养；
b细胞转染；
cwesternblot蛋白鉴定；
d蛋白浓缩后进行层析纯化。
e收集蛋白并进行bca定量。
筛选出结合率大于15％的短肽，其中
结合率％＝(1-(od-od阴性对照)/(od阳性对照-od阴性对照))×100％。
进一步地，步骤(2)c中所述vista特异性抗体为绵羊抗vista抗体，反应终浓度为0.5μg/ml-1μg/ml；所述样品溶液终浓度为1μg/ml-10μg/ml。
进一步地，所述洗涤缓冲液为0.01％pbst；所述包被缓冲液为50mm碳酸盐缓冲液；所述封闭液为2.5％bsa的pbs溶液；所述终止液为2nh2so4。
其中所述洗涤缓冲液的配制方法为：取1ml吐温20溶于100mlpbs中，0.22μm滤膜过滤，制备成1％pbst的母液，室温保存，临用前用pbs稀释成0.01％的pbst；
其中所述包被缓冲液(50mm碳酸盐缓冲液)的配制方法为：
na2co30.375g
nahco30.7325g
溶于超纯水中，定容至250ml，ph为9.6，4℃保存；
其中所述封闭液/抗体稀释液(2.5％bsa的pbs溶液)的配制方法为：
bsa0.1g
pbs10ml
现配现用，过0.22μm滤头后使用，4℃保存；
其中反应终止液(2nh2so4)的配制方法为：
取18n浓硫酸4ml超纯水稀释至36ml，室温保存。
经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明提供了与vista具有亲和力的短肽及其用途，具有如下技术优点：
本发明通过构建elisa法筛选模型，提供了与vista具有亲和力的短肽及其用途，为特异性vista靶点抑制剂的药物开发提供实验依据，为vista靶点抗肿瘤药物、治疗自身免疫性疾病的免疫抑制类药物或抗炎药物的开发奠定基础。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1附图为本发明提供的vista蛋白表达量随表达时间变化图。
其中，d2、d3、d4、d5和d6分别为转染后第2天、第3天、第4天、第5天、第6天。
图2附图为本发明提供的westernblot鉴定洗脱组分中vista蛋白分布图。
图3附图为本发明提供的考马斯亮蓝染色鉴定洗脱组分中vista蛋白与杂蛋白分布图。
图4附图为本发明提供的vista蛋白包被浓度优化曲线图。
图5附图为本发明提供的植瘤后小鼠肿瘤体积变化图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
小鼠vista融合蛋白的制备
本实施例使用的vista蛋白为实验室表达制备。vista蛋白的表达选用商品化高产量的蛋白表达系统，以哺乳动物细胞即中国仓鼠卵巢细胞(chinesehamsterovarycell,cho)为表达载体，从细胞上清中浓缩目的蛋白，再通过蛋白亲和层析柱达到纯化蛋白的目的。
其中，蛋白表达细胞株expicho-stmcells(gibco，a29127)购自于thermofisherscientific公司；expichotm表达培养基(gibco，a2910001)；expifectaminetmchotransfectionkit(gibco，a29129)；optiprotmsfmcomplexationmedium(gibco，12309-050)；single-usepetgerlenmeyerflaskswithplainbottom(nalgene，4115-0125)；小鼠vista-fc蛋白质粒由美国威斯康辛医学院lilywang实验室赠送。
temed(a610508-0100)、30％丙烯酰胺/交叉丙烯酰胺溶液(b546017-0500)、甘氨酸(a502065-0005)、三(羟甲基)氨基甲烷(a501492-0005)、sds(a600485-0500)、吐温20(a100777-0500)购自上海生工生物生物工程技术服务有限公司；过硫酸铵(a3678-25g)购自sigma-aldrich公司；甲醇(67-56-1)购于南京化学试剂股份有限公司；0.22μmpvdf醋酸纤维素膜购于美国bio-rad公司；ecl发光液(180-5001)、蛋白质分子量标准(180-6003)购于上海天能科技有限公司；脱脂奶粉购于光明乳业股份有限公司；绵羊抗vista抗体(af7005)购于美国r&dsystems；绵羊二抗(cw0240s)购自康为世纪生物科技有限公司；增强型bca蛋白浓度检测试剂盒(p0009)购于碧云天生物科技有限公司。
本实施例中各试剂的配制方法如下：
10×转膜缓冲液：tris，60.6g；甘氨酸，288g；加超纯水定容至2000ml，室温保存，使用时取10×电泳缓冲液100ml加700ml超纯水和200ml甲醇。
10×tbs缓冲液(ph7.5)：tris，160.1g；甘氨酸，48.4g；加超纯水溶解后，用浓盐酸调ph为7.6，再用馏水定容至2000ml。
tbst缓冲液(含0.1％tween20的tbs缓冲液)：10×tbs，100ml；
超纯水，900ml；tween20，1ml混匀后即可使用，现用现配。
封闭液(含5％脱脂奶粉的tbst缓冲液)：脱脂奶粉，5g；tbst，100ml溶解后4℃保存。
10×电泳缓冲液(ph＝8.3)：tris，30.3g；甘氨酸，144.0g；sds，10.0g加超纯水定容至1000ml，室温保存。用时取10×电泳缓冲液100ml加900ml超纯水。
10％过硫酸铵(ap)：ap，1g；超纯水，10ml；溶解后，4℃避光保存，保存时间为1周。
平衡缓冲液(ph8.0)：nacl，2.19g；na2hpo4·12h20，1.79g；加超纯水溶解后，用浓盐酸调ph为8.0，再用超纯水定容至250ml，0.22μm滤膜过滤后使用，室温保存。
洗脱缓冲液(ph2.5)：甘氨酸，1.88g；加超纯水溶解后，用浓盐酸调ph为2.5，再用馏水定容至250ml。0.22μm滤膜过滤后使用，室温保存。
中和缓冲液(ph8.5)：tris，30.285g加超纯水溶解后，用浓盐酸调ph为8.5，再用馏水定容至50ml。0.22μm滤膜过滤后使用，室温保存。
pbs缓冲液：nacl，8.0g；kcl，0.2g；na2hpo4，1.15g；kh2po4，0.2g溶于超纯水中，定容至1l，ph为7.4，121℃20min高温高压灭菌，0.22μm滤膜过滤后使用，室温保存。
expicho-stm细胞的复苏培养
冻存细胞从液氮出取出，将细胞浸于38℃水浴中融化并一直不停摇动使其快速融化至管中只剩下非常少量的冰块，将细胞从水浴中取出，喷过75％酒精后于超净台中打开，将冻存管中的细胞悬液(1ml)转移到事先准备有29mlexpicho表达培养基的细胞摇瓶中，将细胞摇瓶置于37℃，8％co2浓度，摇床转速为130rpm的孵箱中培养。
复苏三天后，当细胞密度达到4×106–6×106个活细胞/ml时进行细胞传代，将细胞以密度为0.3×106个活细胞/ml接种于expicho表达培养基中，细胞培养体积为30ml。将细胞放回37℃，8％co2浓度，摇床(振幅为19mm)转速为130rpm的孵箱中培养。
细胞转染
进行细胞传代，直到expicho-stm细胞达到密度为4×106–6×106个活细胞/ml；
当经上述传代处理的细胞达到4×106–6×106个活细胞/ml时，对细胞进行分瓶(此时为d1天)，使分瓶后细胞的终密度为3×106–4×106个活细胞/ml，将细胞放回孵箱中生长过夜。
第二天检查细胞的密度和活细胞率。细胞应该达到7×106–10×106个活细胞/ml，活细胞率在95％-99％。将细胞用新鲜预热至37℃的expi-cho表达培养基稀释至6×106个活细胞/ml，保证转染体积为25ml，其中各试剂的添加量见表1。轻轻旋动细胞培养瓶以混匀细胞。轻柔的上下颠倒充分混匀expifectaminechoreagent。用optiprosfm稀释质粒dna和转染试剂，晃动离心管混匀。一边旋动离心管一边向dna稀释液中加入稀释过的expifectaminechoreagent。室温孵育expifectaminecho/dna复合物5min，然后把复合物溶液慢慢加入细胞培养瓶中，边加边轻轻摇动细胞瓶。最后将细胞放回37℃，8％co2孵箱中，摇床转速130rpm。
转染20h后，向细胞培养瓶中加入150μlexpichoenhancer和6mlexpichofeed，然后把培养瓶放回孵箱继续培养。
表125ml转染体积时各试剂添加量
westernblot蛋白鉴定
取100μl细胞悬液1000rpm4℃离心5min，吸取上清。按照5×loadingbuffer与β-巯基乙醇按照4：1配制成上样缓冲液(5×loadingbuffer20μl、β-巯基乙醇5μl)，再按上样缓冲液：样品体积比为1：4(25μl上样缓冲液加入到100μl样品中)混合，将样品至于100℃下热变性10min。完成后冷却离心，于-20℃冻存。
根据visya-fc的质粒图谱判断出蛋白的预估分子量为83.25kd，按照不同浓度分离胶的最佳分离能力，选择8％的分离胶，不同浓度分离胶的最佳分离范围见表2。根据表3，按各种试剂的体积制备分离胶，充分混匀后倒入1.5mm的玻璃板中，加水液封，等待20min待分离胶充分凝结。倒去液封用水，并用滤纸吸干，再按照5％的浓缩胶配方制胶，其中浓缩胶配方，插入梳子，等待20min即可。
将配好的胶片固定于电泳槽内，倒入电泳缓冲液，清洗各个上样孔之后，将制备的转染后第2天至第6天的细胞上清样品依次加入孔中(每孔10μl)。电泳条件为恒压80v，40min；100v，1.5h。电泳结束之后将胶片取出，按照“黑胶白膜”的顺序将pvdf膜、凝胶、滤纸放在转膜夹的中间，转膜时在转膜槽内放入冰盒以保证低温。转膜条件为固定电流200ma，转膜时间2.5h。
转膜结束后将膜置于封闭液中，室温条件下摇床缓慢封闭1h，封闭结束后，倒去封闭液，加入绵羊抗vista抗体(按抗体母液：封闭液＝1：200稀释)4℃过夜孵育。第二天，回收抗体，以tbst缓冲液洗膜，80rpm清洗五次，每次10min。再将膜以兔抗绵羊二抗(按抗体母液：封闭液＝1：10000稀释)孵育1h；回收抗体，以tbst洗膜，80rpm洗10min，操作五次。最后将膜置于曝光仪中，均匀涂上发光液(a液：b液＝1：1)，进行曝光。结果如图1所示，图1结果表明细胞上清中成功表达出鼠vista蛋白，并从第2天开始，随着表达时间的延长，上清中vista蛋白的含量逐渐增多。
表2不同浓度分离胶的最佳分离范围
表38％sds-page凝胶配制
蛋白浓缩后进行层析纯化
将摇瓶中的培养基收集到50ml离心管里，1000rpm低温离心10min，取上清，再7000rpm低温离心40min，收集上清并用0.45μm滤头过滤，滤液收集在50ml离心管中。根据蛋白分子量选用10kd超滤管浓缩细胞上清液，7000rpm离心30min，收集超滤管内管中的浓缩液。
过柱前，先用平衡缓冲液将蛋白浓缩液的体积置换成缓冲液成分。置换通过超滤管进行，将蛋白浓缩液与平衡缓冲液1:1稀释后，7000rpm低温离心30min，反复两次。
充分摇匀以重悬树脂，吸取2ml浆液至新的层析柱中，层析柱中预先加入2ml平衡缓冲液。让树脂自然沉降，流出平衡缓冲液。加入10ml平衡缓冲液至层析柱中平衡树脂，按约1ml/min的流速流出平衡缓冲液。
将样品按照约1ml/min的流速上样至层析柱中，收集流出液，标记为flowthrough，即ft。用30ml的平衡缓冲液洗涤树脂，流速维持约2ml/min，每2ml收集为一个组分。用15ml洗脱缓冲液洗脱抗体，流速维持约1ml/min，并立刻加入1/10洗脱缓冲液体积的中和缓冲液，调节ph至7.4，每2ml收集为一个组分。
纯化过程中收集到的组分都要经过westernblot鉴定和考马斯亮蓝染色鉴定，结果如图2和图3所示，由图2可知，图2中ft组分没有检测到目的蛋白，说明样品全部结合在柱材上，经过平衡缓冲液冲洗后和洗脱缓冲液洗脱后，vista蛋白被成功的从柱材上洗脱下来。由图3可知，图3洗脱组分中只有目的蛋白分子量位置有蛋白条带，未见其他杂蛋白条带，说明纯化得到的蛋白纯度较高。
蛋白收集与定量
收集经westernblot验证过含有目的蛋白的洗脱组分，并用10kd超滤管浓缩，离心条件为7000rpm低温离心40min。浓缩后，再将蛋白保存体系置换成pbs缓冲液，即将浓缩液与pbs缓冲液1:14混合，7000rpm低温离心40min，反复两次。最后收集蛋白，分装后冻存于-80℃。
根据试剂盒的说明配置蛋白标准品。将工作液a和b以50:1的比例配成混合液，向96孔板中每孔加入20μl的蛋白标准品，再向每孔中加入200μl的混合液，每个浓度做3个副孔，37℃孵育30min后，在562nm波长处测定od值，根据标准曲线计算目的蛋白浓度。成功的表达制备出vista融合蛋白，其浓度为2.3mg/ml。
实施例2
本实施例中的试剂nacl(a501218-0001)、吐温20(a100777-0500)购自上海生工生物生物工程技术服务有限公司；kcl(分析纯)、na2hpo4(分析纯)、kh2po4(分析纯)、na2co3(分析纯)、nahco3(分析纯)、浓硫酸(分析纯)购自南京化学试剂有限公司；tmb(p0209)显色液购自碧云天生物试剂公司；bsa(10735078001)购于biosharp公司；nuncmaxisorptmflat-bottom酶标板(thermofisherscientific，439454)；绵羊抗vista抗体(af7005)购于美国r&dsystems；绵羊二抗(cw0240s)购自康为世纪生物科技有限公司。
本实施例中试剂配制方法如下：
洗涤缓冲液(0.01％pbst)
取1ml吐温20溶于100mlpbs中，0.22μm滤膜过滤，制备成1％pbst的母液，室温保存，临用前用pbs稀释成0.01％的pbst；
包被缓冲液(50mm碳酸盐缓冲液)
na2co30.375g
nahco30.7325g
溶于超纯水中，定容至250ml，ph为9.6，4℃保存；
封闭液/抗体稀释液(2.5％bsa的pbs溶液)
bsa0.1g
pbs10ml
现配现用，过0.22μm滤头后使用，4℃保存；
反应终止液(2nh2so4)
取18n浓硫酸4ml超纯水稀释至36ml，室温保存。
实验组别设计见表4：实验中所用到的蛋白为实验室表达制备。实验时短肽由pbs配置至所需浓度，短肽母液为10mg/ml，筛选浓度为1μg/ml。阴性对照为不孵育一抗的组别，此时板底vista蛋白结合位点未被占据，该组理论结合率为0％；阳性对照组中，加入了一抗和二抗，板底vista的结合位点应被一抗完全饱和，该组理论结合率为100％；实验组中加入的短肽若能与vista蛋白结合，则该组的吸光度值应下降，结合率在0％-100％。
表4实验组别
利用包被缓冲液将纯化后的小鼠胞外段融合蛋白稀释成0.09818μg/ml，每孔加入100μl的蛋白溶液，4℃包被过夜。第二天弃去包被蛋白液，pbst洗3次，每孔加入200μl封闭液，室温封闭2h后弃去封闭液，pbst洗5次。将样品溶液与抗体1:9混合后加入(混合后样品终浓度为1μg/ml，一抗终浓度为0.5μg/ml)，每孔100μl，室温反应2h后弃去反应液，pbst洗5次。加入二抗anti-sheep-hrp(1:10000)，每孔100μl，室温孵育1h后pbst洗5次。加入100μltmb显色液，暗处孵育9min，再加入50μl反应终止液后于450nm处读板测吸光度值。结果如图4，其中结合率％＝(1-(od-od阴性对照)/(od阳性对照-od阴性对照))×100％
本发明筛选短肽318个，其中结合率大于15％的短肽氨基酸序列与具体活性数据见表5。
表5短肽氨基酸序列与具体活性数据汇总
其中h—组氨酸；d—天冬氨酸；r—精氨酸；f—苯丙氨酸；a—丙氨酸；c—半胱氨酸；g—甘氨酸；q—谷酰胺；e—谷氨酸；k—赖氨酸；l—亮氨酸；m—蛋氨酸；n—天冬酰胺；s—丝氨酸；y—酪氨酸；t—苏氨酸；i—异亮氨酸；w—色氨酸；p—脯氨酸；v—缬氨酸。
实施例3
短肽对小鼠黑色素瘤生长的影响
b16-f10细胞培养在1640完全培养基(含10％fbs)，待细胞处于对数生长期，生长融合度为80％～90％时，胰酶消化传代。其中，b16-f10细胞由军事科学研究院提供。
以pbs为空白对照，以小肽为药物，一共8组，包括对照组、seqidno:1-seqidno:7组(20μg/只)，给药体积200μl，每组6只小鼠，实验重复3次。
1)麻醉小鼠：将装有细胞的ep管颠倒混匀6次，去掉注射器针头吸细胞培养液至0.4ml；
2)给每只小鼠的两边腹股沟皮内注射b16f10细胞，每边100μl。植瘤当天记为d0天，d3天开始给药，每隔1天给药，每组每只小鼠腹腔注射蛋白200μl。
d9天开始，用异氟烷将小鼠麻醉，称重，用游标卡尺测量左右边个肿瘤大小。待对照组的肿瘤体积约为2000mm3时，停止给药，处死小鼠，终止动物实验。植瘤后小鼠肿瘤体积见表6和图5，由表6和图5可知，seqidno:1-seqidno:7的短肽均对有抑制小鼠肿瘤的作用。
表6植瘤后小鼠肿瘤体积
本发明通过构建elisa法筛选模型，提供了与vista具有亲和力的短肽及其用途，为特异性vista靶点抑制剂的药物开发提供实验依据，为vista靶点抗肿瘤药物、治疗自身免疫性疾病的免疫抑制类药物或抗炎药物的开发奠定基础。
本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。对于实施例公开的装置而言，由于其与实施例公开的方法相对应，所以描述的比较简单，相关之处参见方法部分说明即可。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
序列表
<110>中国药科大学
<120>与vista具有亲和力的短肽及其用途
<160>7
<170>siposequencelisting1.0
<210>1
<211>15
<212>prt
<213>artificialsequence
<400>1
ilevalasnproglyglyserasnleuthrtyrthrilegluarg
151015
<210>2
<211>9
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<213>artificialsequence
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aspasnleuprotyrleuvalalatyr
15
<210>3
<211>17
<212>prt
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151015
lys
<210>4
<211>7
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15
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15
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