卡奇霉素衍生物及其抗体药物缀合物的制作方法

文档序号：19156715发布日期：2019-11-16 00:54阅读：561来源：国知局

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本发明涉及可用作抗体-药物-缀合物（adc's）中的有效负荷的新型卡奇霉素（calicheamicin）衍生物，并涉及包含其的有效负荷-连接基团(linker)化合物和adc化合物。本发明进一步涉及包含上述有效负荷、有效负荷-连接基团和adc's的组合物，并涉及使用这些有效负荷、有效负荷-连接基团和adc's来治疗诸如癌症的病理状况的方法。

背景技术：

抗体疗法为患有各种疾病（诸如癌症和免疫疾病）的患者提供靶向疗法的治疗，并因此在生物学研究中发挥了重要作用。已经探索了靶向抗体疗法的不同方法，包括抗体-药物缀合物（adcs）。chari,r.v.,miller,m.l.及widdison,w.c.(2014)antibody-drugconjugates:anemergingconceptincancertherapy.angewandtechemie53,3796-827；senter,p.d.及sievers,e.l.(2012)在adcs（在某些环境下也称为免疫缀合物）的情况中，通常是细胞毒性小分子（药物部分）的小分子“有效负荷”与抗体共价连接（缀合）用于靶向局部递送所述药物部分至肿瘤。

直接或通过连接基团将药物与抗体缀合涉及多种因素的考虑，包括用于药物缀合的化学基团的识别和定位、药物释放机制、提供药物释放的结构元素和对释放的游离药物进行结构修饰。此外，如果在抗体内化后释放药物，则药物释放机制必须与缀合物的细胞内运输一致。因此，给定的抗体药物缀合物的性质，包括其有效负荷释放曲线，可能取决于诸如有效负荷的性质、共价连接基团、抗体和引入adc的生物系统等因素。

尽管已尝试将许多不同的药物类别用于经由抗体递送，但仅几种药物类别已证明作为抗体药物缀合物有效，同时具有合适的毒性特征。一种此类别是卡奇霉素，也称为ll-e33288复合物，它是源自细菌棘孢小单孢菌（micromonosporaenchinospora）的抗细菌和抗肿瘤剂的有效家族。卡奇霉素衍生物的实例公开在美国专利no.4,970,198中。mylotarg®（吉妥珠单抗奥唑米星（gemtuzumabozogamicin））是抗体药物缀合物的一个实例，其包含抗cd33的单克隆抗体，其通过可酸水解的连接基团与卡奇霉素结合。该商业产品作为第一种抗体-靶向化学治疗剂上市，并被批准用于治疗老年患者中的急性髓性白血病（aml）。包含卡奇霉素的抗体药物缀合物的另一个实例是奥英妥珠单抗（inotuzumabozogamicin），一种与卡奇霉素连接的cd22抗体，并且其目前正处于治疗某些类型癌症的临床试验中。获得卡奇霉素的抗体-药物缀合物的方法的一个实例是通过使卡奇霉素甲基三硫化物与合适的硫醇反应形成二硫化物，同时引入官能团如酰肼或类似的亲核试剂，参见例如美国专利no.5,053,394。

仍然需要开发进一步的卡奇霉素衍生物。这样的衍生物可具有与已知的卡奇霉素衍生物不同的性质，例如另外的化学性质、物理性质、有效负荷释放曲线和/或可具有不同的生物活性曲线。

发明简述

本发明涉及式(i)化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

r¹选自br和i;

r²选自h和；

r³选自-ch3、-ch2ch3和-ch(ch3)2；

r⁴是h;

x选自：

(i)任选被一个r¹⁰取代的–ch3；

(ii)任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基；

(iii)–(c0-c6烷基)-c3-c10碳环基，其所述c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代；

(iv)–(c0-c6烷基)-3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述3至10元杂环基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

(v)–(c0-c6烷基)-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代；和

(vi)–(c0-c6烷基)-5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

并且该x任选进一步被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r¹⁰是-r^10a-r^10b，其中

r^10a不存在或是–(ch2)n-，该r^10a任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^10b选自：

(i)–oh；

(ii)–cn；

(iii)-po3h；

(iv)-co2h；

(v)-co2c1-c4烷基，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(vi)–co-r¹¹；

(vii)–nh-r¹¹；

(viii)–n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(ix)–conh-r¹¹；

(x)–con(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xi)–conhnh-r¹¹；

(xii)–conhn(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiii)–con(c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiv)–con(c1-c4烷基)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xv)–con(r¹¹)nh2；

(xvi)–con(r¹¹)nh(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xvii)–con(r¹¹)n(c1-c4烷基)2，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xviii)–conhn=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xix)–con(c1-c4烷基)n=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xx)–n(r¹¹)co(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxi)–ch(co2h)nh-r¹¹；

(xxii)–ch(co2c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxiii)–ch(nh2)co-r¹¹；

(xxiv)–ch(nh(c1-c4烷基))co-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxv)–ch(n(c1-c4烷基)2)co-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxvi)-ch(co-r¹¹)nh-r¹¹；和

(xxvii)-ch(co-r¹¹)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

r¹¹选自-r^11a-r^11b-r^11c和-r^11d-r^11e-r^11f，其中

r^11a不存在，或选自、、和；

r^11b不存在，或选自、和aar，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸;

r^11c不存在或选自-h、-c1-c4烷基和-coc1-c4烷基；

r^11d不存在或是–(ch2)t-，当存在时，该r^11d任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^11e不存在或选自-o-和-nh-；

r^11f选自c6-c12芳基和5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子，并且该r^11f任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

n是1、2、3、4、5或6；

r是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；

t是1、2、3、4、5或6；

g对于每次出现独立地选自-f、-cl、-cn、-oh、-nh2、-nh-c1-c4烷基、-n(c1-c4烷基)2、-no2、-co2h、-c1-c4烷基、-c1-c4烷基oh、-c1-c4烷基nh2、-c1-c4卤代烷基、-c1-c4烷氧基、=o、–co2c1-c4烷基、-oc(o)c1-c4烷基、-nhc(o)c1-c4烷基、–c(o)nhc1-c4烷基和-c(o)n(c1-c4烷基)2；和

e对于每次出现独立地选自-f、-cl、-cn、-oh、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-no2、-co2h、-och3、-ocf3和-cf3。

本发明的另一方面涉及式(ii)化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

r¹选自br和i；

r²选自h和；

r³选自-ch3、-ch2ch3和-ch(ch3)2；

x选自：

(i)任选被一个r¹⁰取代的–ch3；

(ii)任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基；

(iii)–(c0-c6烷基)-c3-c10碳环基，其所述c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代；

(iv)–(c0-c6烷基)-3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述3至10元杂环基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

(v)–(c0-c6烷基)-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代；和

(vi)–(c0-c6烷基)-5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

并且该x任选进一步被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中

r^10a不存在或是–(ch2)n-，该r^10a任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^10b选自：

(i)–oh；

(ii)–cn；

(iii)-po3h；

(iv)-co2h；

(v)-co2c1-c4烷基，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(vi)–co-r¹¹；

(vii)–nh-r¹¹；

(viii)–n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(ix)–conh-r¹¹；

(x)–con(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xi)–conhnh-r¹¹；

(xii)–conhn(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiii)–con(c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiv)–con(c1-c4烷基)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xv)–con(r¹¹)nh2；

(xvi)–con(r¹¹)nh(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xvii)–con(r¹¹)n(c1-c4烷基)2，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xviii)–conhn=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xix)–con(c1-c4烷基)n=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xx)–n(r¹¹)co(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxi)–ch(co2h)nh-r¹¹；

(xxii)–ch(co2c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxiii)–ch(nh2)co-r¹¹；

(xxiv)–ch(nh(c1-c4烷基))co-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxv)–ch(n(c1-c4烷基)2)co-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxvi)-ch(co-r¹¹)nh-r¹¹；和

(xxvii)-ch(co-r¹¹)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

r¹¹选自-r^11a-r^11b-r^11c和-r^11d-r^11e-r^11f，其中

r^11a不存在，或选自、、和；

r^11b不存在，或选自、和aar，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

r^11c不存在或是选自-h、-c1-c4烷基和-coc1-c4烷基；

r^11d不存在或是–(ch2)t-，当存在时，该r^11d任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^11e不存在或选自–o-和–nh-；

n是1、2、3、4、5或6；

r是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；

t是1、2、3、4、5或6；

e对于每次出现独立地选自-f、-cl、-cn、-oh、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-no2、-co2h、-och3、-ocf3和-cf3；和

l是[连接基团]。

本发明的另一方面涉及式(iii)化合物，

或其药学上可接受的盐，其中：

r¹选自br和i；

r²选自h和；

r³选自-ch3、-ch2ch3和-ch(ch3)2；

x选自：

(i)任选被一个r¹⁰取代的–ch3；

(ii)任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基；

(iii)–(c0-c6烷基)-c3-c10碳环基，其所述c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代；

(iv)–(c0-c6烷基)-3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述3至10元杂环基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

(v)–(c0-c6烷基)-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代；和

(vi)–(c0-c6烷基)-5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

并且该x任选进一步被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中

r^10a不存在或是–(ch2)n-，该r^10a任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^10b选自：

(i)–oh；

(ii)–cn；

(iii)-po3h；

(iv)-co2h；

(v)-co2c1-c4烷基，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(vi)–co-r¹¹；

(vii)–nh-r¹¹；

(viii)–n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(ix)–conh-r¹¹；

(x)–con(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xi)–conhnh-r¹¹；

(xii)–conhn(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiii)–con(c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiv)–con(c1-c4烷基)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xv)–con(r¹¹)nh2；

(xvi)–con(r¹¹)nh(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xvii)–con(r¹¹)n(c1-c4烷基)2，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xviii)–conhn=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xix)–con(c1-c4烷基)n=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xx)–n(r¹¹)co(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxi)–ch(co2h)nh-r¹¹；

(xxii)–ch(co2c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxiii)–ch(nh2)co-r¹¹；

(xxiv)–ch(nh(c1-c4烷基))co-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxv)–ch(n(c1-c4烷基)2)co-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxvi)-ch(co-r¹¹)nh-r¹¹；和

(xxvii)-ch(co-r¹¹)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

r¹¹选自-r^11a-r^11b-r^11c和-r^11d-r^11e-r^11f，其中

r^11a不存在，或选自、、和；

r^11b不存在，或选自、和aar，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸;

r^11c不存在或选自-h、-c1-c4烷基和-coc1-c4烷基；

r^11d不存在或是–(ch2)t-，当存在时，该r^11d任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^11e不存在或选自–o-和–nh-；

n是1、2、3、4、5或6；

r是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；

t是1、2、3、4、5或6；

e对于每次出现独立地选自-f、-cl、-cn、-oh、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-no2、-co2h、-och3、-ocf3和-cf3；

l^r是[连接基团]；和

ab是抗体。

本发明的另一方面涉及式(iv)化合物,

或其药学上可接受的盐，其中：

r¹选自br和i；

r²选自h和；

r³选自-ch3、-ch2ch3和-ch(ch3)2；

x选自：

(i)任选被一个r¹⁰取代的–ch3；

(ii)任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基；

(iii)–(c0-c6烷基)-c3-c10碳环基，其所述c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代；

(iv)–(c0-c6烷基)-3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述3至10元杂环基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

(v)–(c0-c6烷基)-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代；和

(vi)–(c0-c6烷基)-5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

并且该x任选进一步被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中

r^10a不存在或是–(ch2)n-，该r^10a任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^10b选自：

(i)–oh；

(ii)–cn；

(iii)-po3h；

(iv)-co2h；

(v)-co2c1-c4烷基，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(vi)–co-r¹¹；

(vii)–nh-r¹¹；

(viii)–n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(ix)–conh-r¹¹；

(x)–con(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xi)–conhnh-r¹¹；

(xii)–conhn(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiii)–con(c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiv)–con(c1-c4烷基)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xv)–con(r¹¹)nh2；

(xvi)–con(r¹¹)nh(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xvii)–con(r¹¹)n(c1-c4烷基)2，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xviii)–conhn=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xix)–con(c1-c4烷基)n=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xx)–n(r¹¹)co(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxi)–ch(co2h)nh-r¹¹；

(xxii)–ch(co2c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxiii)–ch(nh2)co-r¹¹；

(xxiv)–ch(nh(c1-c4烷基))co-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxv)–ch(n(c1-c4烷基)2)co-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxvi)-ch(co-r¹¹)nh-r¹¹；和

(xxvii)-ch(co-r¹¹)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

r¹¹选自-r^11a-r^11b-r^11c和-r^11d-r^11e-r^11f，其中

r^11a不存在，或选自、、和；

r^11b不存在，或选自、和aar，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

r^11c不存在或选自-h、-c1-c4烷基和-coc1-c4烷基；

r^11d不存在或是–(ch2)t-，当存在时，该r^11d任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^11e不存在或选自–o-和–nh-；

n是1、2、3、4、5或6；

r是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；

t是1、2、3、4、5或6；

e对于每次出现独立地选自-f、-cl、-cn、-oh、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-no2、-co2h、-och3、-ocf3和-cf3；

l^r是[连接基团]；

ab是抗体；和

b是1-20。

本发明的另一方面涉及药物组合物，其包括有效量的任何一种前述化合物和/或任何一种前述抗体药物缀合物和药学上可接受的载体或媒介物。

本发明的另一方面涉及通过向需要其的患者施用有效量的所述化合物和/或缀合物使用有效量的任何一种前述化合物和/或任何一种前述抗体药物缀合物治疗癌症的方法。

本发明的另一方面涉及治疗癌症的方法，其中所述癌症包括肿瘤、转移或以不受控制的细胞生长为特征的其它疾病或病症，其中所述癌症选自膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、胶质瘤、子宫内膜癌、肾癌、肺癌、食道癌、卵巢癌、前列腺癌、胰腺癌、黑色素瘤、胃癌和睾丸癌。

附图简述

图1显示了得自表6的与以1mg/kg给药的mylotarg和pbs媒介物相比，以0.01、0.05和0.1mg/kg剂量给药的卡奇霉素adcs（实施例50、69和84）的数据的图。

图2显示了得自表7的以0.01、0.05和0.1mg/kg给药的抗-cd33adccd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp19（实施例85）、以0.1mg/kg给药的带有相同连接基团有效负荷的对照neg-8.8adc（实施例86）、以1mg/kg给药的mylotarg、和pbs媒介物的数据的图。

图3显示了得自表8的以0.01、0.03和0.1mg/kg给药的抗-cd33adccd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp1（实施例51）、以0.1mg/kg给药的带有相同连接基团有效负荷的对照neg-8.8adc（实施例52）、以1mg/kg给药的mylotarg、和pbs媒介物的数据的图。

图4显示了得自表9的以0.03、0.1和0.3mg/kg给药的抗-cd33adccd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp13（实施例70），以0.3mg/kg给药的带有相同连接基团有效负荷的对照neg-8.8adc（实施例71）、以1mg/kg给药的mylotarg、和pbs媒介物的数据的图。

图5显示了得自表10的以0.01、0.05和0.1mg/kg给药的抗-cd33卡奇霉素adcs（实施例60、61和67）、以1mg/kg给药的mylotarg、和pbs媒介物的数据的图。

图6显示了得自表11的均以0.3mg/kg给药的下述抗-cd33adcs：cd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp1（实施例51）、cd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp13（实施例70）、cd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp19（实施例85），它们各自的阴性对照adcs（分别为实施例52、71和86），以1mg/kg给药的mylotarg®，和pbs媒介物的数据的图。

图7显示了得自表12的以0.005、0.01、0.05和0.3mg/kg给药的抗-cd33adccd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp1(实施例51)和pbs媒介物的数据的图。

图8显示了得自表13的以0.03、0.1和0.3mg/kg给药的抗-cd33adccd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp19(实施例85)和pbs媒介物的数据的图。

图9显示了得自表14的以0.005、0.01、0.05和0.3mg/kg给药的抗-cd33adccd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp13(实施例70)和pbs媒介物的数据的图。

发明详述

本发明涉及用作抗体-药物-缀合物（adc's）中的有效负荷的新型卡奇霉素衍生物，和涉及包含其的有效负荷-连接基团化合物和adc化合物。本发明进一步涉及包含上述有效负荷、有效负荷-连接基团和adc's的组合物，和涉及使用这些有效负荷、有效负荷-连接基团和adc's来治疗诸如癌症的病理状况的方法。本发明还涉及在体外、在原位和在体内使用这样的化合物和/或缀合物用于检测、诊断或治疗哺乳动物细胞或相关病理状况的方法。

通过参考以下详细描述的本发明优选实施方案和包含于本文中的实施例，可以更容易地理解本发明。应理解的是，在本文中使用的术语仅用于描述具体实施方案的目的，而并非意在限制。还应理解的是，除非本文中具体定义，否则在本文中使用的术语以其在相关领域中已知的传统含义给出。

为所有目的，在此将本文引用的所有出版物、专利和专利申请均通过引用以其全文并入本文中，其程度如同将每个单独的出版物、专利和专利申请具体地和单独地指出通过引用并入本文中一样。如果所并入的文献和类似材料中的一个或多个与本申请，包括但不限于定义的术语、术语用法、所描述的技术等，不同或相矛盾，则参照本申请。

定义和缩写

除非另有说明，否则在本文中使用的以下术语和短语意在具有以下含义。当在本文中使用商品名时，除非上下文另有说明，该商品名包括该商品名产品的产品制剂、通用名药和一种或多种活性药物成分。

本文的术语“抗体”（或“ab”）以最广泛的意义来使用，并且具体涵盖完整单克隆抗体、多克隆抗体、单特异性抗体、多特异性抗体（例如双特异性抗体）和表现出所需生物活性的抗体片段。完整抗体主要具有两个区：可变区和恒定区。可变区与靶抗原结合并与靶抗原相互作用。可变区包括识别并结合至特定抗原上的特异性结合位点的互补决定区（cdr）。恒定区可以被免疫系统识别并与免疫系统相互作用（参见，例如，janeway等，2001,immuno.biology,第5版,garlandpublishing,newyork）。抗体可以是任何类型或类别（例如igg、ige、igm、igd和iga）或亚类（例如igg1、igg2、igg3、igg4、iga1和iga2）。抗体可以衍生自任何合适的物种。在一些实施方案中，抗体是人或鼠来源的。抗体可以是，例如，人、人源化或嵌合的。

术语“特异性结合（specificallybinds）”和“特异性结合（specificbinding）”指与预定抗原结合的抗体。通常，抗体以至少约1x10⁷m^-1的亲和力结合，并且与预定抗原结合的亲和力是其用于与除预定抗原或密切相关的抗原之外的非特异性抗原（例如，bsa、酪蛋白）结合的亲和力的至少两倍。

如本文中所用的术语“单克隆抗体”指从基本上同质的抗体群体获得的抗体，即构成群体的各个抗体除了可能以少量存在的可能的天然发生的突变之外是相同的。单克隆抗体是高度特异性的，针对单个抗原位点。修饰语“单克隆”表明抗体的特征为从基本上同质的抗体群体获得的，并且不应被解释为需要通过任何特定的方法产生该抗体。

术语“单克隆抗体”特别包括“嵌合”抗体，其中重链和/或轻链的一部分与衍生自特定物种或属于特定抗体类别或亚类的相应抗体序列相同或同源，而链的其余部分与衍生自另一物种或属于另一抗体类别或亚类的相应抗体序列相同或同源，以及包括这样的抗体的片段，只要它们表现出所需的生物活性。

如本文中所用，“h(c)-”指曲妥珠单抗（trastuzumab）（商品名herceptin^®），其为干扰her2/neu受体的单克隆抗体，通过其半胱氨酸之一与本发明的化合物结合。如本文中所用，“h(k)-”指指曲妥珠单抗（trastuzumab），其为干扰her2/neu受体的单克隆抗体，通过其赖氨酸之一与本发明的化合物结合。

“完整抗体”是包含对抗体类适合的抗原结合可变区以及轻链恒定结构域(cl)和重链恒定结构域ch1、ch2、ch3和ch4的抗体。恒定结构域可以是天然序列恒定结构域（例如，人天然序列恒定结构域）或其氨基酸序列变体。

完整抗体可具有一种或多种“效应子功能”，其指可归因于抗体的fc区（例如，天然序列fc区或氨基酸序列变体fc区）的那些生物活性。抗体效应子功能的实例包括补体依赖性细胞毒性、抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（adcc）和抗体依赖性细胞介导的吞噬作用。

“抗体片段”包含完整抗体的一部分，优选包含其抗原结合或可变区。抗体片段的实例包括fab、fab'、f(ab')2和fv片段、双链抗体、三链抗体、四链抗体、线性抗体、单链抗体分子、scfv、scfv-fc、由一个或多个抗体片段形成的多特异性抗体片段、由fab表达文库产生的一个或多个片段、或任何上述免疫特异性地与靶抗原（例如、癌细胞抗原、病毒抗原或微生物抗原）结合的表位结合片段。

在抗体的情况下的术语“可变的”指抗体的可变结构域的某些部分，其在序列中广泛不同并且用于每种特定抗体对其特定抗原的结合和特异性。这样的可变性集中在轻链和重链可变结构域中称为“高变区”的三个部分中。可变结构域的更高保守部分被称为构架区（frs）。天然重链和轻链的可变结构域各自包含通过三个高变区连接的四个frs。

当在本文中使用时，术语“高变区”指抗体的负责抗原结合的氨基酸残基。高变区通常包含来自“互补决定区”或“cdr”的氨基酸残基（例如，在轻链可变结构域中的残基24-34(l1)、50-56(l2)和89-97(l3)和在重链可变结构域中的31-35(h1)、50-65(h2)和95-102(l3);kabat等人(sequencesofproteinsofimmunologicalinterest,第5版，publichealthservice,nationalinstitutesofhealth,bethesda,md.(1991))和/或来自“高变环”的那些残基（例如，在轻链可变结构域中的残基26-32(l1)、50-52(l2)和91-96(l3)和在重链可变结构域中的26-32(h1)、53-55(142)和96-101(h3)；chothia和lesk,1987,j.mol.biol.196:901-917)。fr残基是除在本文中定义的高变区残基之外的那些可变结构域残基。

“单链fv”或“scfv”抗体片段包含抗体的vh和vl结构域，其中这些结构域存在于单条多肽链中。通常，fv多肽还包含在vh和vl结构域之间的多肽连接基团，其使得scfv能够形成用于抗原结合的所需结构。关于scfv的评述，参见pluckthuninthepharmacologyofmonoclonalantibodies,第113卷,rosenburg和moore编辑,springer-verlag,newyork,第269-315页(1994)。

术语“双链抗体”指具有两个抗原结合位点的小抗体片段，该片段包含在同一多肽链中与可变轻链结构域(vl)连接的可变重链结构域(vh)。通过使用过短而不允许在同一链上的两个结构域之间配对的连接基团，所述结构域被迫与另一条链的互补结构域配对并产生两个抗原结合位点。在例如ep0404097；wo93/11161；和hollinger等人,1993,proc.natl.acad.sci.usa90:6444-6448中更全面地描述了双链抗体。

非人（例如啮齿动物）抗体的“人源化”形式是嵌合抗体，其含有源自非人免疫球蛋白的最小序列。在大多数情况下，人源化抗体是人免疫球蛋白（受体抗体），其中来自受体高变区的残基被来自非人物种（供体抗体）的高变区的残基取代，所述非人物种如具有所需特异性、亲和力和能力的小鼠、大鼠、兔或非人灵长类动物。在一些情况下，人免疫球蛋白的构架区（fr）残基被相应的非人残基替代。此外，人源化抗体可包含在受体抗体或供体抗体中未发现的残基。进行这些修饰以进一步改善抗体性能。通常，人源化抗体将包含至少一个，并且通常两个可变结构域的基本上所有，其中相应于非人免疫球蛋白的那些的高变环的所有或基本上所有和fr的所有或基本上所有是人免疫球蛋白序列的那些。人源化抗体任选还将包含至少一部分免疫球蛋白恒定区（fc），通常是人免疫球蛋白的恒定区。进一步的细节参见jones等人,1986,nature321:522-525；riechmann等人,1988,nature332:323-329；和presta,1992,curr.op.struct.biol.2:593-596。

如本文中所用，“分离的”意指与（a）天然来源（如植物或动物细胞或细胞培养物）或（b）合成有机化学反应混合物的其它组分分离。如本文中所用，“纯化的”意指当分离时，分离物含有按分离物重量计至少95％，在另一方面至少98％的化合物（例如，缀合物）。

“分离的”抗体是已经从其天然环境的组分中识别出并分离和/或回收的抗体。其天然环境的污染组分是会干扰抗体的诊断或治疗用途的物质，并且可包括酶、激素和其它蛋白质的或非蛋白质的溶质。在优选的实施方案中，将抗体纯化（1）至如通过lowry方法测定大于抗体的95重量％，且最优选大于99重量％，（2）至足以通过使用旋转杯测序仪获得至少15个n-末端或内部氨基酸序列的残基，或（3）使用考马斯蓝或优选银染色在还原或非还原条件下通过sds-page至均质。分离的抗体包括由于抗体的天然环境的至少一种组分将不存在而在重组细胞内原位的抗体。然而，通常，分离的抗体将通过至少一个纯化步骤来制备。

“诱导细胞凋亡”的抗体是诱导程序性细胞死亡的抗体，其通过膜联蛋白v的结合、dna的碎片化、细胞收缩、内质网的扩张、细胞碎片化和/或膜囊泡（称为凋亡小体）的形成来确定。所述细胞是肿瘤细胞，例如乳房、卵巢、胃、子宫内膜、唾液腺、肺、肾、结肠、甲状腺、胰腺或膀胱细胞。多种方法可用于评估与细胞凋亡相关的细胞事件。例如，可通过膜联蛋白结合测量磷脂酰丝氨酸（ps）易位；可通过dna梯度评估dna碎片化；和可通过亚二倍体细胞中的任何增加来评估核/染色质凝聚以及dna碎片化。

术语“治疗有效量”指有效治疗哺乳动物中疾病或病症的药物量。在癌症的情况中，药物的治疗有效量可以减少癌细胞的数量；减小肿瘤大小；抑制（即，在一定程度上减缓，和优选地停止）癌细胞浸润到周围的器官中；抑制（即，在一定程度上减缓，和优选地停止）肿瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；和/或在一定程度上缓解与癌症相关的一种或多种症状。为达到药物可抑制存在的癌细胞的生长和/或杀死存在的癌细胞的程度，它可以是细胞抑制性的和/或细胞毒性的。对于癌症治疗，功效可以例如通过评估疾病进展时间（ttp）和/或确定响应率（rr）来测量。

术语“实质的量”指混合物或样品的群体的大多数，即大于50％。

术语“细胞内代谢物”指由在抗体-药物缀合物（adc）上的在细胞内的代谢过程或反应产生的化合物。代谢过程或反应可以是酶促过程，例如adc的肽连接基团的蛋白水解解离。细胞内代谢物包括但不限于在进入、扩散、摄取或转运到细胞中后经受细胞内裂解的抗体和游离药物。

术语“细胞内裂解的”和“细胞内裂解”指在adc等上的在细胞内的代谢过程或反应，由此药物部分和抗体之间的共价连接例如连接基团断裂，产生游离药物或从细胞内的抗体解离的缀合物的其它代谢物。因此，adc的裂解部分是细胞内代谢物。

术语“生物利用度”指施用于患者的药物的给定量的全身利用度（即血液/血浆水平）。生物利用度是一个绝对术语，表示测量从施用的剂型到达大循环（thegeneralcirculation）的药物的时间（速率）和总量（程度）这两者。

术语“细胞毒活性”指adc或所述adc的细胞内代谢物的杀死细胞、抑制细胞生长或抗增殖效果。细胞毒活性可以表示为ic50值，其是每单位体积的浓度（摩尔或质量），在该浓度下一半细胞存活。

“病症”是将受益于用药物或抗体-药物缀合物治疗的任何状况。这包括慢性和急性病症或疾病，所述病症或疾病包括使哺乳动物易患所讨论的病症的那些病理状况。本文中待治疗的病症的非限制性实例包括良性和恶性癌症；白血病和恶性淋巴瘤、神经元的、神经胶质的、星形胶质细胞的、下丘脑和其它腺体的、巨噬细胞的、上皮的、基质的和囊胚腔的病症；和炎症性的、血管生成的和免疫性的病症。

术语“癌症”和“癌性”指或描述哺乳动物中通常以不受控制的细胞生长为特征的生理状况或病症。“肿瘤”包含一种或多种癌细胞。

“患者”的实例包括但不限于人、大鼠、小鼠、豚鼠、猴、猪、山羊、牛、马、狗、猫、鸟和家禽。在示例性实施方案中，患者是人。

除非上下文另有说明，术语“治疗（treat）”或“治疗（treatment）”指预防复发的治疗性治疗和预防性措施，其中目的是抑制或减缓（减轻）不希望的生理变化或病症，例如癌症的发展或扩散。对于本发明的目的而言，有益或期望的临床结果包括但不限于缓解症状、减轻疾病程度、稳定（即，不恶化）疾病状态、延迟或减缓疾病进展、改善或缓和疾病状态和缓解（无论是部分还是全部），无论是可检测的还是不可检测的。“治疗”还意味着与如果不接受治疗的预期存活相比延长存活。需要治疗的那些患者包括那些已经具有状况或病症的患者以及容易具有状况或病症的患者。

在癌症的情况下，术语“治疗”包括下述的任一或所有：抑制肿瘤细胞、癌细胞的生长或肿瘤的生长；抑制肿瘤细胞或癌细胞的复制，减轻总的肿瘤负荷或减少癌细胞的数量，并改善与该疾病相关的一种或多种症状。

在自身免疫疾病的情况下，术语“治疗”包括下述的任一或所有：抑制与自身免疫疾病状态相关的细胞（包括但不限于产生自身免疫抗体的细胞）的复制、减轻自身免疫抗体负担和改善自身免疫疾病的一种或多种症状。

在传染病的情况下，术语“治疗”包括下述的任一或所有：抑制引起传染病的病原体的生长、增殖或复制并改善传染病的一种或多种症状。

术语“药品说明书”用于指通常包括在治疗产品的商业包装中的说明书，其包含关于使用这样的治疗产品的一种或多种适应症、用法、剂量、施用、禁忌症和/或警告的信息。

如本文中所用，术语“细胞”、“细胞系”和“细胞培养物”可互换使用，并且所有这些名称包括后代。措辞“转化体”和“转化细胞”包括原代受试细胞和由其衍生的培养物或后代，而不考虑转移的数量。还应理解，由于有意或无意的突变，所有后代在dna含量方面可能不会精确地相同。具有与在最初转化细胞中筛选的相同功能或生物活性的突变后代包括在内。在意指不同名称时，将从上下文清楚地看出。

除非另有说明，否则术语“烷基”本身或作为另一术语的一部分指具有所表明的碳原子数的直链或支链的饱和烃（例如，"c1-c8"烷基指具有1至8个碳原子的烷基；“c0-c6”烷基指具有0个碳原子（指不存在烷基）至6个碳原子的烷基）。类似地，当没有表明碳原子数时，所述烷基具有1-8个碳原子。代表性的直链c1-c8烷基包括但不限于甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基和正辛基；而支链c1-c8烷基包括但不限于-异丙基、-仲丁基、-异丁基、-叔丁基、-异戊基和-2-甲基丁基；不饱和c2-c8烷基包括但不限于乙烯基、烯丙基、1-丁烯基、2-丁烯基、异丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-甲基-1-丁烯基、2-甲基-2-丁烯基、2,3-二甲基-2-丁烯基、1-己基、2-己基、3-己基、乙炔基、丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基和3-甲基-1-丁炔基。本文中描述的为任选被取代的烷基可以被一个或多个取代基取代，除非另有说明，否则这些取代基是独立选择的。取代基的总数可以等于烷基部分上的氢原子的总数，达到使这样的取代具有化学意义的程度。任选取代的烷基通常含有1至6个任选的取代基，有时1至5个任选的取代基，优选1至4个任选的取代基，或更优选1至3个任选的取代基。在一些情况下，取代的烷基可以参考取代基特别地命名。例如，“卤代烷基”指具有给定碳原子数的烷基，其被一个或多个卤素取代基取代并且通常含有1-6个碳原子和1、2或3个卤素原子（即，“c1-c6卤代烷基”）或有时含有1-4个碳原子和1、2或3个卤素原子（即，“c1-c4卤代烷基”）。因此，c1-c4卤代烷基包括三氟甲基（-cf3）和二氟甲基（-cf2h）。更具体地，氟化的烷基可特别地称为氟代烷基，例如，c1-c6或c1-c4氟代烷基。类似地，“羟烷基”指具有给定碳原子数的烷基，其被一个或多个羟基取代基取代并且通常含有1-6个碳原子和1、2或3个羟基（即，“c1-c6羟烷基”）。因此，c1-c6羟烷基包括羟甲基（-ch2oh）和2-羟乙基（-ch2ch2oh）。“烷氧基烷基”指具有给定碳原子数的烷基，其被一个或多个烷氧基取代基取代。烷氧基烷基通常在烷基部分含有1-6个碳原子并被1、2或3个c1-c4烷氧基取代基取代。这样的基团在本文中有时描述为c1-c4烷氧基-c1-c6烷基。“氨基烷基”指具有给定碳原子数的烷基，其被一个或多个取代或未取代的氨基取代，这样的基团在本文中被进一步定义。氨基烷基通常在烷基部分中含有1-6个碳原子并被1、2或3个氨基取代基取代。因此，c1-c6氨基烷基包括，例如，氨基甲基（-ch2nh2）、n,n-二甲基氨基-乙基（-ch2ch2n(ch3)2）、3-(n-环丙基氨基)丙基（-ch2ch2ch2nh-^cpr）和n-吡咯烷基乙基（-ch2ch2-n-吡咯烷基）。

除非另有说明，否则“链烯基”本身或作为另一术语的一部分指由至少一个碳-碳双键组成的烷基。通常，链烯基具有2至20个碳原子（“c2-c20链烯基”），优选2至12个碳原子（“c2-c12链烯基”），更优选2至8个碳原子（“c2-c8链烯基”），或2至6个碳原子（“c2-c6链烯基”），或2至4个碳原子（“c2-c4链烯基”）。代表性实例包括但不限于乙烯基，1-丙烯基，2-丙烯基，1-、2-、3-丁烯基等。链烯基可以是未取代的或被本文中所述的适合于烷基的相同基团取代。

“炔基”指烷基，如本文中所定义，其由至少两个碳原子和至少一个碳-碳三键组成。炔基具有2至20个碳原子（“c2-c20炔基”），优选2至12个碳原子（“c2-c12炔基”），更优选2至8个碳原子（“c2-c8炔基”），或2至6个碳原子（“c2-c6炔基”），或2至4个碳原子（“c2-c4炔基”）。代表性实例包括但不限于乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-、2-、或3-丁炔基等。炔基（akynyl）可以是未取代的或取代的。

“烷氧基”指一价的-o-烷基，其中烷基部分具有给定数目的碳原子。烷氧基通常含有1至8个碳原子（“c1-c8烷氧基”），或1至6个碳原子（“c1-c6烷氧基”），或1至4个碳原子（“c1-c4烷氧基”）。例如，c1-c4烷氧基包括–och3、-och2ch3、-och(ch3)2、-oc(ch3)3等。这样的基团在本文中也可被称为甲氧基、乙氧基、异丙氧基、叔丁氧基等。烷氧基可以是未取代的或在烷基部分上被本文中所述的适合于烷基的相同基团取代。特别地，烷氧基可以被一个或多个卤素基团取代，最多为存在于烷基部分上的氢原子总数。因此，c1-c4烷氧基包括卤化的烷氧基，例如三氟甲氧基和2,2-二氟乙氧基（即，-ocf3和-och2chf2）。在一些情况下，这样的基团可称为“卤代烷氧基”（或者，在氟化的情况下，更具体地为“氟代烷氧基”），其具有给定的碳原子数且被一个或多个卤素取代基取代，并且通常含有1-6碳原子和1、2或3个卤素原子（即，“c1-c6卤代烷氧基”）或有时含有1-4个碳原子和1、2或3个卤素原子（即，“c1-c4卤代烷氧基”）。因此，c1-c4卤代烷氧基包括三氟甲氧基（-ocf3）和二氟甲氧基（-ocf2h）。更具体地，氟化的烷基可特别地被称为氟代烷氧基，例如c1-c6或c1-c4氟代烷氧基。类似地，“烷硫基”指一价的-s-烷基，其中烷基部分具有给定数目的碳原子，并且可以任选地在烷基部分上被本文中所述的适合于烷基的相同基团取代。例如，c1-c4烷硫基包括–sch3和-sch2ch3。

除非另有说明，否则“c3-c10碳环基”本身或作为另一术语的一部分，是3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-或10-元一价的、取代或未取代的、饱和或部分不饱和的、非芳族单环、双环、螺环、桥连、稠合或通过从母体环体系的环原子除去一个氢原子衍生的多环碳环。代表性的c3-c10碳环基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊二烯基、环己基、环己烯基、1,3-环己二烯基、1,4-环己二烯基、环庚基、1,3-环庚二烯基、1,3,5-环庚三烯基、环辛基、环辛二烯基、双环(1.1.1.)戊烷和双环(2.2.2.)辛烷。碳环基可以是未取代的或被本文中所述的适合于烷基的相同基团取代。

除非另有说明，否则术语“杂烷基”本身或与另一术语组合表示（除非另有说明）完全饱和或含有1至3个不饱和度的稳定的直链或支链烃或其组合，其由给定数目的碳原子和一至三个选自o、n、si和s的杂原子构成，并且其中氮和硫原子可任选被氧化，并且氮杂原子可任选被季铵化。一个或多个杂原子o、n和s可以位于杂烷基的任何内部位置。杂原子si可以位于杂烷基的任何位置，包括烷基与分子其余部分连接的位置。最多两个杂原子可以是连续的。

除非另有说明，否则术语“亚杂烷基”本身或作为另一取代基的一部分表示衍生自杂烷基（如上所述）的二价基团。对于亚杂烷基，杂原子也可占据链末端中的任一个或两个。

除非另有说明，否则“杂环基”本身或作为另一术语的一部分，指含有给定数目的环原子的一价的取代的或部分未取代的芳族或非芳族单环、双环或三环环体系，其包含选自n、o和s的至少一个杂原子作为环成员，其中环s原子可以任选地被一个或两个氧代基团取代（即，s(o)q，其中q是0、1或2）并且其中杂环的环通过环原子（可以是c或n）连接至基础分子。杂环的环可以螺环、桥连或稠合至一个或多个其它杂环或碳环，其中这样的螺环、桥连或稠合的环本身可以是饱和的、部分不饱和的或芳香性的，其程度为所述不饱和度或芳香性具有化学意义，条件是与基础分子的连接点是环体系的杂环部分的原子。优选地，杂环的环含有1至4个选自n、o和s(o)q的杂原子作为环成员，且更优选1至2个环杂原子，条件是这样的杂环的环不含有两个连续的氧原子。包含杂原子的环可以是芳香性或非芳香性的。除非另有说明，否则杂环基在产生稳定的结构的任何杂原子或碳原子处与其侧基连接。“杂环基”的代表性实例包括但不限于四氢呋喃基、氧杂环丁烷基、吡喃基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、苯并呋喃基、苯并噻吩、苯并噻唑基、吲哚基、苯并吡唑基、吡咯基、噻吩基（噻吩（thiopene））、呋喃基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、包括例如1,2,3,4-四氢（tetrshyhro）喹啉基的基团的喹啉基、嘧啶基、吡啶基、吡啶酮基、吡嗪基、哒嗪基、异噻唑基、异噁唑基、四唑基、环氧化物和氧杂环丁烷。杂环基可以是未取代的或被合适的取代基取代的，所述合适的取代基例如为本文中所述的适合于烷基、芳基或杂芳基的相同基团。这样的取代基可以存在于与基础分子连接的杂环的环上，或在与其连接的螺环、桥接或稠合的环上。此外，环n原子可以任选地被适合于胺的基团取代，例如烷基、酰基、氨基甲酰基、磺酰基取代基等。

除非另有说明，否则“芳基”本身或另一术语的一部分意指取代或未取代的通过从母体芳香环体系的单个碳原子除去一个氢原子衍生的一价的6-20，优选6-14个碳原子的碳环芳香烃基团。“芳基”基团可以是单环的或稠合的。典型的芳基包括但不限于衍生自苯的基团，包括苯基、取代的苯、萘、蒽、联苯等。“亚芳基”是相应的二价基团。“亚芳基”的实例是–c6h4-、已形成苯的二价基团以使其可以被二取代的亚苯基。芳基可以是未取代的或取代的。

类似地，“杂芳基”或“杂芳香性的”指具有众所周知的芳香性特征的单环或稠合双环或多环的环体系，其含有给定数目的环原子并且包含至少一个选自n、o和s的杂原子作为芳香环中的环成员。包含杂原子允许5元环以及6元环中的芳香性。通常，杂芳基含有5至20个环原子（“5-20元杂芳基”），优选5至14个环原子（“5-14元杂芳基”），且更优选5至10个环原子（“5-10元杂芳基”）。杂芳基环通过杂芳香环的环原子与基础分子连接，从而保持芳香性。因此，6元杂芳基环可以通过环c原子与基础分子连接，而5元杂芳基环可以通过环c或n原子与基础分子连接。杂芳基也可以与另一个芳基或杂芳基环稠合，或与饱和或部分不饱和的碳环或杂环稠合，条件是与这样的稠环体系上的基础分子的连接点是环体系的杂芳香部分的原子。未取代的杂芳基的实例通常包括但不限于吡咯、呋喃、噻吩、吡唑、咪唑、异噁唑、噁唑、异噻唑、噻唑、三唑、噁二唑、噻二唑、四唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、苯并呋喃、苯并噻吩、吲哚、苯并咪唑、吲唑、喹啉、异喹啉、嘌呤、三嗪、萘啶(naphthryidine)和咔唑。在经常优选的实施方案中，5或6元杂芳基选自吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、异噻唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基、吡嗪基或哒嗪基环。杂芳基可以是未取代或取代的。

除非另有说明，否则“芳烷基”本身或另一术语的一部分意指被如上定义的芳基取代的如上定义的烷基。

除非另有说明，否则“杂芳烷基”本身或另一术语的一部分意指被如上定义的芳香族杂环基取代的如上定义的烷基。亚杂芳烷基（heteroaralklo）是相应的二价基团。

类似地，“芳基烷氧基”和“杂芳基烷氧基”指通过亚杂烷基连接基团（即，-o-亚烷基-）与基础分子连接的芳基和杂芳基，其中根据结合的环和连接基团中非氢原子（即c、n、s和o原子）的总数来描述该基团。因此，-o-ch2-苯基和–o-ch2-吡啶基分别称为c8-芳基烷氧基和c8-杂芳基烷氧基。

除非另有说明，否则通常理解的是，通常不多于两个n、o或s原子连续连接，除了氧代基团与n或s连接形成硝基或磺酰基，或者在某些杂芳香性的环，例如三嗪、三唑、四唑、噁二唑、噻二唑等的情况下以外。

"羟基"指-oh基团。

“酰氧基”指一价基团–oc(o)烷基，其中该烷基部分具有给定数目的碳原子（通常c1-c8，优选c1-c6或c1-c4），并且可以任选地被适合于烷基的基团取代。c1-c4酰氧基包括–oc(o)c1-c4烷基取代基，例如-oc(o)ch3。

“酰基”指一价基团–c(o)烷基，其中该烷基部分具有给定数目的碳原子（通常c1-c8，优选c1-c6或c1-c4）并且可以任选地被适合于烷基的基团取代，例如，被f、oh或烷氧基取代。因此，任选取代的-c(o)c1-c4烷基包括未取代的酰基，例如-c(o)ch3（即，乙酰基）和-c(o)ch2ch3（即，丙酰基），以及取代的酰基，例如-c(o)cf3（三氟乙酰基）、-c(o)ch2oh（羟基乙酰基）、-c(o)ch2och3（甲氧基乙酰基）、-c(o)cf2h（二氟乙酰基）等。

“酰氨基”指一价基团，-nhc(o)烷基或–nrc(o)烷基，其中该烷基部分具有给定数目的碳原子（通常c1-c8，优选c1-c6或c1-c4）并且可以任选地被适合于烷基的基团取代。因此，c1-c4酰氨基包括–nhc(o)c1-c4烷基取代基，例如-nhc(o)ch3。

“芳氧基”或“杂芳氧基”指任选取代的-o-芳基或-o-杂芳基，在每种情况下芳基和杂芳基如本文中进一步定义的。

“芳基氨基”或“杂芳基氨基”指任选取代的-nh-芳基、nr-芳基、-nh-杂芳基或-nr-杂芳基，在每种情况下芳基和杂芳基如本文中进一步定义的且r表示适合于胺的取代基，例如，烷基、酰基、氨基甲酰基或磺酰基等。

"氰基"指-c≡n基团。

"未取代的氨基"指基团–nh2。

“卤素”或“卤代（halo）”指氟、氯、溴和碘（f、cl、br、i）。优选地，卤代指氟代或氯代（f或cl）。

“任选的”或“任选地”意指随后描述的事件或情况可能但未必发生，并且该描述包括事件或情况发生的实例和不发生的实例。术语“任选取代的”和“取代的或未取代的”可互换使用以表示所描述的特定基团可以不具有非氢取代基（即，未取代的），或该基团可以具有一个或多个非氢取代基（即，取代的）。如果没有另外说明，可能存在的取代基的总数等于存在于所述基团的未取代形式上的h原子的数目。在任选的取代基是通过双键连接的情况下，例如氧代（=o）取代基，该基团占据两个可用的化合价，因此可以包括的其它取代基的总数减少2。在任选的取代基独立地选自另选列表的情况下，所选择的基团可以相同或不同。在整个公开中，应理解任选取代基的数目和性质将限于这样的取代基具有化学意义的程度。典型的取代基包括卤素、-oh、c1-c4烷氧基、-o-c6-c12芳基、-cn、-no2、=o、-coor^x、-oc(o)r^x、-c(o)nr^xr^y、-nr^xc(o)r^y、–nr^xr^y、-so3h、-s(=o)2r^x、-os(=o)2or^x、-s(=o)2nr^x、-s(=o)r^x、-op(=o)(or^x)2、-p(=o)(or^x)2、-po3^2-、po3h2、-aso2h2、-c(=o)r^x、c3-c8环烷基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基和3-12元杂环基；其中每个r^x和r^y独立地为h或c1-c4烷基，或者r^x和r^y可以与它们连接的n一起形成3-12元杂环基或5-12元杂芳基的环，各自任选地含有1、2或3个选自o、n和s(o)q的额外的杂原子，其中q为0-2；其中各自所述的c3-c8环烷基、c6-c12芳基、5-12元杂芳基和3-12元杂环基任选被1至3个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、-oh、=o、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c6卤代烷基、c1-c6羟烷基、c1-c4烷氧基-c1-c6烷基、-cn、-nh2、-nh(c1-c4烷基)和-n(c1-c4烷基)2。

术语“手性”指具有镜像配偶体的不可重叠性的分子，而术语“非手性”指可与其镜像配偶体重叠的分子。

术语“立体异构体”指具有相同化学组成但在原子或基团在空间中的排列方面不同的化合物。

“非对映异构体”指具有两个或更多个手性中心并且其分子不是彼此的镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理性质，例如熔点、沸点、光谱性质和反应性。非对映异构体的混合物可以在高分辨率分析方法如电泳和色谱法下分离。

本文中使用的立体化学的定义和惯例通常遵循s.p.parker,编辑,mcgraw-hilldictionaryofchemicalterms,mcgraw-hillbookcompany,newyork(1984)；以及eliel和wilen,stereochemistryoforganiccompounds,johnwiley&sons,inc.,newyork(1994)。许多有机化合物以光学活性形式存在，即，它们具有旋转平面偏振光的平面的能力。在描述光学活性化合物时，前缀d和l或者r和s用于表示分子针对其手性中心的绝对构型。前缀d和l或者（+）和（-）用于指明化合物的旋转平面偏振光的符号，用（-）或l表示该化合物是左旋的。前缀为（+）或d的化合物是右旋的。对于给定的化学结构，除了它们是彼此的镜像而外，这些立体异构体是相同的。特定的立体异构体也可称为对映异构体，这样的异构体的混合物通常被称为对映异构体混合物。对映体的50:50混合物被称为外消旋混合物或外消旋体，其可以在化学反应或过程中没有立体选择性或立体特异性的情况下发生。术语“外消旋混合物”和“外消旋体”指两种对映异构体物质的等摩尔混合物，没有光学活性。

本文中所用的氨基酸（“aa”）指含有与胺官能团、羧基官能团和侧链结合的中心碳原子的化合物。术语氨基酸包括天然氨基酸、非天然氨基酸、天然氨基酸的衍生物或非天然氨基酸的衍生物。

除非上下文另有说明，否则“天然氨基酸”指由通用遗传密码的密码子直接编码的氨基酸，并且包括精氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、赖氨酸、甘氨酸、丙氨酸、组氨酸、丝氨酸、脯氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、亮氨酸、天冬酰胺、异亮氨酸和缬氨酸。

“非天然氨基酸”指不由通用遗传密码的密码子编码的氨基酸。“非天然氨基酸”的一个实例是“氨基酸的衍生物”。

“氨基酸的衍生物”包括通过母体氨基酸的共价连接而具有取代或修饰的氨基酸，诸如例如通过烷基化、糖基化、乙酰化、磷酸化等。“衍生物”的定义中还包括，例如，具有取代键合以及本领域已知的其它修饰的氨基酸的一种或多种类似物。

“保护基团”指当与分子中的反应性基团连接时掩蔽、降低或防止该反应性基团的反应性的基团。保护基团的实例可见于t.w.greene和p.g.m.wuts，protectivegroupsinorganicsynthesis，第3版，johnwiley＆sons，newyork，1999，以及harrison和harrison等人，compendiumofsyntheticorganicmethods，第1-8卷（johnwileyandsons，1971-1996），将其以其全文通过引用并入本文中。代表性的羟基保护基包括酰基、苄基和三苯甲基醚、四氢吡喃基醚、三烷基甲硅烷基醚和烯丙基醚。代表性的氨基保护基包括甲酰基、乙酰基、三氟乙酰基、苄基、苄氧基羰基（cbz）、叔丁氧基羰基（boc）、三甲基甲硅烷基（tms）、2-三甲基甲硅烷基-乙磺酰基（ses）、三苯甲基和取代的三苯甲基、烯丙氧基羰基、9-芴基甲氧基羰基（fmoc）、硝基-藜芦氧基羰基（nvoc）等。

“羟基保护基团”的实例包括但不限于甲氧基甲基醚、2-甲氧基乙氧基甲基醚、四氢吡喃基醚、苄基醚、对甲氧基苄基醚、三甲基甲硅烷基醚、三乙基甲硅烷基醚、三异丙基甲硅烷基醚、叔丁基二甲基甲硅烷基醚、三苯基甲基甲硅烷基醚、乙酸酯、取代的乙酸酯、新戊酸酯、苯甲酸酯、甲磺酸酯和对甲苯磺酸酯。

“离去基团”指可以被另一个官能团取代的官能团。这样的离去基团是本领域中公知的，并且实例包括但不限于卤化物（例如氯化物、溴化物、碘化物）、甲磺酰基（甲磺酰基（mesyl））、对甲苯磺酰基（甲苯磺酰基（tosyl））、三氟甲基磺酰基（三氟甲磺酸酯）和三氟甲基磺酸酯。

本文所用短语“药学上可接受的盐”指化合物的药学上可接受的有机或无机盐。所述化合物通常含有至少一个氨基，并因此可以用该氨基形成酸加成盐。示例性的盐包括但不限于硫酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、丹宁酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、糖酸盐（saccharate）、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐（即1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸盐)）。药学上可接受的盐可以涉及包含另一种分子，例如乙酸根离子、琥珀酸根离子或其它抗衡离子。抗衡离子可以是稳定母体化合物上的电荷的任何有机或无机基团。此外，药学上可接受的盐在其结构中可具有多于一个带电原子。其中多个带电原子是药学上可接受的盐的一部分的情况可具有多个抗衡离子。因此，药学上可接受的盐可具有一个或多个带电原子和/或一个或多个抗衡离子。

“药学上可接受的溶剂化物”或“溶剂化物”指一种或多种溶剂分子与本发明的化合物或缀合物的缔合。形成药学上可接受的溶剂化物的溶剂的实例包括但不限于水、异丙醇、乙醇、甲醇、dmso、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。

术语“负载量（loading）”或“药物负载量”或“有效负荷负载量”表示或指adc分子中每个抗体的有效负荷的平均数（“有效负荷（payload）”和“有效负荷（payloads）”在本文中可与“药物（drug）”和“药物（drugs）”互换使用）。药物负载量可以在每种抗体1至20种药物之间变化。这有时被称为dar，或药物与抗体的比率。本文中所述的adcs的组合物通常具有1-20的dar，并且在某些实施方案中具有1-8、2-8、2-6、2-5和2-4的dar。典型的dar值是2、4、6和8。每个抗体的药物平均数或dar值可以通过常规方法来表征，例如uv/可见光谱、质谱、elisa测定和hplc。也可以确定定量dar值。在一些情况下，具有特定dar值的均质adcs的分离、纯化和表征可以通过诸如反相hplc或电泳的方法来实现。dar可能受抗体上连接位点的数目的限制。例如，在连接是半胱氨酸硫醇的情况下，抗体可能仅具有一个或几个半胱氨酸硫醇基团，或者可能仅具有一个或几个具有足够反应性的硫醇基团，通过该硫醇基团可连接连接基团单元。在一些实施方案中，半胱氨酸硫醇是形成链间二硫键的半胱氨酸残基的硫醇基团。在一些实施方案中，半胱氨酸硫醇是不形成链间二硫键的半胱氨酸残基的硫醇基团。通常，在缀合反应期间，少于理论最大值的药物部分与抗体缀合。抗体可含有，例如，许多不与连接基团或连接基团中间体反应的赖氨酸残基。只有最具反应性的赖氨酸基团可与反应性连接基团试剂反应。

通常，抗体不含有许多（如果有的话）可以通过连接基团与药物连接的游离和反应性的半胱氨酸硫醇基团。抗体中的大多数半胱氨酸硫醇残基作为二硫桥存在，并且必须用还原剂如二硫苏糖醇（dtt）还原。可以使抗体经受变性条件以显示反应性亲核基团，如赖氨酸或半胱氨酸。adc的负载（药物/抗体比率）可以以几种不同的方式来控制，包括：（i）限制药物-连接基团相对于抗体的摩尔过量，（ii）限制缀合反应时间或温度，和（iii）用于半胱氨酸硫醇改性的部分或限制性还原条件。在多于一个亲核基团与药物-连接基团反应的情况下，所得产物是adc的混合物，其中每种抗体具有一个或多个药物部分的分布。每种抗体的药物平均数可以通过例如对抗体具有特异性并且对药物具有特异性的双重elisa抗体测定由所述混合物计算。单个的adc可以通过质谱法在混合物中识别，并通过hplc，例如，“疏水性相互作用色谱法”分离。

以下是本申请中缩写和定义的列表（另有定义或描述的除外）：dmso（指二甲基亚砜）、dma（指二甲基乙酰胺）、pbs（指磷酸盐缓冲盐水）、dtt（指二硫苏糖醇）、dad（指二极管阵列检测）、mw（指分子量）、etc.（指等等）、三苯甲基（指1,1',1''-乙烷-1,1,1-三基三苯）、thf(指四氢呋喃),nhs(指1-羟基-2,5-吡咯烷二酮)、cbz(指羧基苄基)、eq.(指当量)、n-buli(指正丁基锂)、oac(指乙酸酯)、meoh(是指甲醇)、i-pr(指异丙基或丙-2-基)、nmm(指4-甲基吗啉)、和“-”(在表中指目前没能获得数据)。

式（i）化合物及其衍生物

本发明的一个方面涉及式(i)化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

r¹选自br和i；

r²选自h和；

r³选自-ch3、-ch2ch3和-ch(ch3)2；

r⁴是h；

x选自：

(i)任选被一个r¹⁰取代的–ch3；

(ii)任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基；

(iii)–(c0-c6烷基)-c3-c10碳环基，其所述c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代；

(iv)–(c0-c6烷基)-3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述3至10元杂环基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

(v)–(c0-c6烷基)-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代；和

(vi)–(c0-c6烷基)-5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基任选被一个r¹⁰取代,并且其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

并且该x任选进一步被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r¹⁰是–r^10a-r^10b,其中

r^10a不存在或是–(ch2)n-,该r^10a任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^10b选自：

(i)–oh；

(ii)–cn；

(iii)-po3h；

(iv)-co2h；

(v)-co2c1-c4烷基，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(vi)–co-r¹¹；

(vii)–nh-r¹¹；

(viii)–n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(ix)–conh-r¹¹；

(x)–con(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xi)–conhnh-r¹¹；

(xii)–conhn(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiii)–con(c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiv)–con(c1-c4烷基)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xv)–con(r¹¹)nh2；

(xvi)–con(r¹¹)nh(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xvii)–con(r¹¹)n(c1-c4烷基)2，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xviii)–conhn=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xix)–con(c1-c4烷基)n=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xx)–n(r¹¹)co(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxi)–ch(co2h)nh-r¹¹；

(xxii)–ch(co2c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxiii)–ch(nh2)co-r¹¹；

(xxiv)–ch(nh(c1-c4烷基))co-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxv)–ch(n(c1-c4烷基)2)co-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxvi)-ch(co-r¹¹)nh-r¹¹；和

(xxvii)-ch(co-r¹¹)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

r¹¹选自-r^11a-r^11b-r^11c和-r^11d-r^11e-r^11f，其中

r^11a不存在，或选自、、和；

r^11b不存在，或选自、和aar，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

r^11c不存在或选自-h、-c1-c4烷基和-coc1-c4烷基；

r^11d不存在或是–(ch2)t-，该r^11d当存在时任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^11e不存在或选自–o-和–nh-；

n是1、2、3、4、5或6；

r是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；

t是1、2、3、4、5或6；

e对于每次出现独立地选自-f、-cl、-cn、-oh、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-no2、-co2h、-och3、-ocf3和-cf3。

在一个实施方案中，式（i）化合物不是(2s)-2-氨基-5-{[(2r)-1-[(羧基甲基)氨基]-3-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-1-氧代丙-2-基]氨基}-5-氧代戊酸

。

在式（i）的一些实施方案中，r¹是i，r²是h，r³是ch2ch3，和r⁴是h。

在式（i）的一些实施方案中，r¹是br，r²是，r³是ch(ch3)2，和r⁴是h。

在式（i）的一些实施方案中，r¹是i，r²是，r³是ch(ch3)2，和r⁴是h。

在式（i）的一些实施方案中，r¹是br，r²是，r³是ch2ch3，和r⁴是h。

在式（i）的一些实施方案中，r¹是i，r²是，r³是ch2ch3，和r⁴是h。

在式（i）的一些实施方案中，r¹是i，r²是，r³是ch3，和r⁴是h。

在式（i）的一些实施方案中，r³是-ch2ch3。

在式（i）的一些实施方案中，x是-ch3，该ch3任选被一个r¹⁰取代，并且该ch3任选被1、2或3个g取代。在一些实施方案中，当x是-ch3时，如此选择x上的任何任选的取代基，使得式（i）的二硫键与存在的任何杂原子之间存在至少两个碳原子。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的-ch3。

在式（i）的一些实施方案中，x是-ch3。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该–c2-c8烷基任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c2-c8烷基，例如–ch(ch3)2或–c(ch3)3。

在式（i）的一些实施方案中，x是–ch(ch3)2。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)3。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是-oh，以形成例如–ch(ch3)-ch2oh。

在式（i）的一些实施方案中，x是–ch(ch3)-ch2oh。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是cn，以形成例如–c(ch3)2-cn。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-cn。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是-po3h，以形成例如–ch(ch3)-po3h或–ch(ch2ch3)-po3h。

在式（i）的一些实施方案中，x是–ch(ch3)-po3h。

在式（i）的一些实施方案中，x是–ch(ch2ch3)-po3h。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是-co2h，以形成例如–ch(ch3)-co2h或–c(ch3)2-co2h。

在式（i）的一些实施方案中，x是–ch(ch3)-co2h。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-co2h。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，其中r¹⁰是–r^10a-r^10b，该r^10a不存在且r^10b是-co2h，以形成例如–c(ch3)2-(ch2)-co2h或–c(ch3)2-(ch2)2-co2h。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-(ch2)-co2h。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-(ch2)2-co2h。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是-co2h，并且该–(c2-c8烷基)-r¹⁰任选被1个g例如–co2h取代，以形成例如-ch(co2h)-ch2co2h。

在式（i）的一些实施方案中，x是-ch(co2h)-ch2co2h。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是-co2c1-c4烷基，以形成例如–ch(ch3)-co2ch2ch3。

在式（i）的一些实施方案中，x是–ch(ch3)-co2ch2ch3。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是–co-r¹¹，其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a不存在，r^11b是aar其中r是1和aa是赖氨酸，和r^11c不存在，以形成例如–c(ch3)2-(ch2)2-co-nh-(ch2)4-ch(nh2)-co2h。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-(ch2)2-co-nh-(ch2)4-ch(nh2)-co2h。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是–nh-r¹¹，其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a是，例如，不存在，r^11b是，例如，不存在且r^11c是，例如，-h，以形成例如–c(ch3)2-(ch2)2nh2。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-ch2ch2nh2。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是–nh-r¹¹，其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a是，例如，不存在，r^11b是，例如，不存在且r^11c是，例如，-h，并且该–(c2-c8烷基)-r¹⁰任选被1个g例如–co2h取代，以形成例如–c(ch3)2-ch(co2h)-nh2。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-ch(co2h)-nh2。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是–n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5、或6个e取代，其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a是，例如，不存在，r^11b是，例如，不存在且r^11c是，例如，-h，以形成例如–c(ch3)2-(ch2)nh(c1-c4烷基)，其中e是例如–co2h。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-ch2nh-ch2ch2co2h。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是–nh-r¹¹，其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a是，r^11b是aar，其中r是，例如2，和r^11c是-coc1-c4烷基，例如–coch3，以形成例如；或者其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a不存在，r^11b是aar，其中r是，例如2，和r^11c是-coc1-c4烷基，例如–coch3，以形成例如。

在式（i）的一些实施方案中，x是。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是–nh-r¹¹，其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a不存在，r^11b是aar，其中r是，例如1，和r^11c不存在，以形成例如-–c(ch3)2-(ch2)2nh-co-(ch2)2-ch(nh2)-co2h。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-(ch2)2nh-co-(ch2)2-ch(nh2)-co2h。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，r¹⁰是–r^10a-r^10b，r^10a不存在且r^10b是–nh-r¹¹，其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a是，r^11b是，和r^11c不存在，以形成例如。

在式（i）的一些实施方案中，x是。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，该r^10a不存在且r^10b是–nh-r¹¹，其中r¹¹是-r^11d-r^11e-r^11f，其中r^11d是–(ch2)t-，其中t是例如2，以形成例如，–(ch2)2-，r^11e是–o-，和r^11f是-苯基，以形成例如–c(ch3)2-(ch2)-nh-(ch2)2-oph。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-(ch2)-nh-(ch2)2-oph。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是–conh-r¹¹，r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a是，例如，不存在，r^11b是，例如，不存在且r^11c是，例如，-h，以形成例如–c(ch3)2-ch2conh2。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-ch2conh2。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是–con(c1-c4烷基)-r¹¹，其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a是，例如，不存在，r^11b是，例如，不存在且r^11c是，例如，–c1-c4烷基，例如ch3，以形成例如–c(ch3)2-ch2con(ch3)2。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-ch2con(ch3)2。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是–conhnh-r¹¹，r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a是，例如，不存在，r^11b是，例如，不存在且r^11c是，例如，-h，以形成例如–c(ch3)2-ch2conhnh2。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-ch2conhnh2。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是–n(r¹¹)co(c1-c4烷基)，r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a是，例如，不存在，r^11b是，例如，不存在且r^11c是，例如，-h，以形成例如–c(ch3)2-(ch2)2-nhcoch3。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-(ch2)2-nhcoch3。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是–ch(nh2)co-r¹¹，r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a是，例如，不存在，r^11b是，例如，不存在且r^11c是，例如，–c1-c4烷基，例如–ch3，以形成例如–c(ch3)2-ch(nh2)coch3。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-ch(nh2)coch3。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是–ch(co2h)nh-r¹¹，其中例如r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a是，r^11b是aar，其中r是，例如，2，和r^11c是-coc1-c4烷基，例如–coch3，以形成例如，或者其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a是，例如，不存在，r^11b是aar，其中r是，例如2，和r^11c是-coc1-c4烷基，例如–coch3，以形成例如。

在式（i）的一些实施方案中，x是。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在且r^10b是–conhn=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，例如–conhn=c(ch3)-c6h4-och3，以形成例如–c(ch3)2-ch2conhn=c(ch3)-c6h4-och3。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-ch2conhn=c(ch3)-c6h4-och3。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的–(c0-c6烷基)-c3-c10碳环基，并且该–(c0-c6烷基)-c3-c10碳环基任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是-c3-c10碳环基，其所述-c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代，该-c3-c10碳环基选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、金刚烷基。

在式（i）的一些实施方案中，x是环丙基。

在式（i）的一些实施方案中，x是环丁基。

在式（i）的一些实施方案中，x是环戊基。

在式（i）的一些实施方案中，x是环己基。

在式（i）的一些实施方案中，x是金刚烷基。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-c3-c10碳环基，其所述-c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代，并且该x任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-c3-c10碳环基，其所述-c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代，该-c3-c10碳环基选自实例环丙基、环丁基、环戊基、环己基、金刚烷基。

在式（i）的一些实施方案中，x是–(c0-c6烷基)-3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述3至10元杂环基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子，并且该x任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代。普通技术人员将理解，对于包含–(c0-c6烷基)-3至10元杂环基的本发明实施方案而言，杂环可以通过碳原子键合，或者在化合价允许的情况下通过杂原子如氮键合。类似地，普通技术人员将理解，任何任选的取代基可以与碳原子键合，或者在化合价允许的情况下与杂原子例如氮键合，优选在式（i）的二硫键与取代基x中的任何杂原子之间存在至少两个碳原子。

在式（i）的一些实施方案中，x是3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代,例如哌啶基等，并且该x任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是哌啶基，其所述哌啶基任选被一个r¹⁰取代，并且该x任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是哌啶基，其所述哌啶基任选被1个g取代，以形成,例如，4-n-co2c(ch3)3哌啶基的4-n-ch3哌啶基。

在式（i）的一些实施方案中，x是4-哌啶基。

在式（i）的一些实施方案中，x是4-n-ch3哌啶基。

在式（i）的一些实施方案中，x是4-n-co2c(ch3)3哌啶基。

在式（i）的一些实施方案中，x是哌啶基，其所述哌啶基任选被一个r¹⁰取代，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a是，例如，不存在，且r^10b是，例如，–co-r¹¹,例如其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a是,r^11b是aar，其中r是，例如2，和r^11c是-coc1-c4烷基，例如–coch3，以形成，例如。

在式（i）的一些实施方案中，x是。

在式（i）的一些实施方案中，x是哌啶基，其所述哌啶基任选被一个r¹⁰取代,该r¹⁰是–r^10a-r^10b,其中r^10a是，例如，不存在，且r^10b是,例如，–co-r¹¹,例如其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c,其中r^11a是,r^11b是,和r^11c不存在，以形成，例如。

在式（i）的一些实施方案中，x是。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述3至10元杂环基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子，并且该x任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-哌啶基，其所述哌啶基任选被一个r¹⁰取代，并且该x任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-咪唑啉基，其所述咪唑啉基任选被一个r¹⁰取代，并且该x任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-咪唑啉基，其所述x任选被2个g取代，该g是例如=o，以形成，例如，。

在式（i）的一些实施方案中，x是。

在式（i）的一些实施方案中，x是–(c0-c6烷基)-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代，并且该x任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是任选被一个r¹⁰取代的苯基，该r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中r^10a不存在，并且r^10b是例如-co2h，以形成，例如2-co2h苯基、4-co2h苯基,或者r^10b是例如–nhr¹¹，其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a不存在,r^11b不存在,且r^11c是-h，以形成，例如，2-nh2-苯基；且该x任选被1、2、3、4或5个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是苯基，该x任选被1个g（例如-no2）取代，形成，例如，4-no2-苯基,或者-c1-c4卤代烷基,例如cf3，以形成，例如4-cf3-苯基。

在式（i）的一些实施方案中，x是苯基。

在式（i）的一些实施方案中，x是4-no2-苯基。

在式（i）的一些实施方案中，x是4-cf3-苯基。

在式（i）的一些实施方案中，x是2-co2h苯基。

在式（i）的一些实施方案中，x是4-co2h苯基。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代，并且该x任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代,r¹⁰是–r^10a-r^10b,r^10a不存在,且r^10b是例如-co2h，以形成，例如-c(ch3)2-(2-co2h苯基)、-c(ch3)2-(4-co2h苯基)或者–nh2，以形成，例如，-c(ch3)2-(2-nh2-苯基)或-c(ch3)2-(4-nh2-苯基)；和该x任选被1、2、3、4、或5个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-苯基，该x任选被1个g取代，以形成,例如，-c(ch3)2-(4-no2苯基)或-c(ch3)2-(4-cf3-苯基)。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-苯基。

在式（i）的一些实施方案中，x是-c(ch3)2-(4-no2苯基)。

在式（i）的一些实施方案中，x是-c(ch3)2-(4-cf3-苯基)。

在式（i）的一些实施方案中，x是-c(ch3)2-(2-co2h苯基)。

在式（i）的一些实施方案中，x是-c(ch3)2-(4-co2h苯基)。

在式（i）的一些实施方案中，x是-c(ch3)2-(2-nh2-苯基)。

在式（i）的一些实施方案中，x是-c(ch3)2-(4-nh2-苯基)。

在式（i）的一些实施方案中，x是–(c0-c6烷基)-5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子，并且该x任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代。普通技术人员将理解，对于包含–(c0-c6烷基)-5至10元杂芳基的本发明实施方案而言，所述杂芳基可以通过碳原子键合，或者在化合价允许的情况下通过杂原子如氮键合。类似地，普通技术人员将理解，任何任选的取代基可以与碳原子键合，或者在化合价允许的情况下与杂原子，例如氮键合。优选的是在式（i）的二硫键和取代基x中的任何杂原子之间存在至少两个碳原子。

在式（i）的一些实施方案中，x是吡啶基，其所述吡啶基任选被一个r¹⁰取代,r¹⁰是–r^10a-r^10b,r^10a不存在，且r^10b是例如-co2h，以形成，例如3-co2h吡啶基或–nhr¹¹，其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a不存在,r^11b不存在，且r^11c是-h，以形成，例如，2-nh2吡啶基；且该x任选被1、2、3、或4个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是吡啶基，其所述吡啶基任选被一个r¹⁰取代，并且该x任选被1或2个g,例如-c1-c4烷基（例如ch3）取代，以形成，例如，3,5-(ch3)2吡啶基。

在式（i）的一些实施方案中，x是2-吡啶基。

在式（i）的一些实施方案中，x是4-吡啶基。

在式（i）的一些实施方案中，x是3-co2h吡啶基。

在式（i）的一些实施方案中，x是4-(3,5-(ch3)2吡啶基)。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子,例如吡啶基等，并且该x任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-吡啶基,该吡啶基任选被一个r¹⁰取代,r¹⁰是–r^10a-r^10b,r^10a不存在，且r^10b是例如-co2h，以形成，例如–c(ch3)2-3-(2-co2h吡啶基)或–nhr¹¹，其中r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a不存在,r^11b不存在，且r^11c是-h，以形成，例如，–c(ch3)2-3-(2-nh2吡啶基)；且该x任选被1、2、3、或4个g取代。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-3-(2-nh2吡啶基)。

在式（i）的一些实施方案中，x是–c(ch3)2-3-(2-co2h吡啶基)。

在式（i）的一些实施方案中，r^10a不存在。

在式（i）的一些实施方案中，r^10a是–ch2-。

在式（i）的一些实施方案中，r^10a是–(ch2)2-。

在式（i）的一些实施方案中，r^10b选自–oh；–cn；-po3h；-co2h；-co2c1-c4烷基；–co-r¹¹；–nh-r¹¹；–conh-r¹¹；–con(c1-c4烷基)-r¹¹；–conhnh-r¹¹；–n(r¹¹)co(c1-c4烷基)；–ch(co2h)nh-r¹¹；–ch(nh2)co-r¹¹；和-ch(co-r¹¹)nh-r¹¹；conhn=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基。

在式（i）的一些实施方案中，r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c。

在式（i）的一些实施方案中，r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a不存在,r^11b不存在且r^11c是–h。

在式（i）的一些实施方案中，r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a不存在,r^11b不存在且r^11c是ch3。

在式（i）的一些实施方案中，r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a不存在,r^11b不存在且r^11c是–coch3。

在式（i）的一些实施方案中，r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a不存在,r^11b是aar，其中r是1,且r^11c不存在。

在式（i）的一些实施方案中，r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a不存在,r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a不存在,r^11b是aar，其中r是2,且r^11c是–coch3。

在式（i）的一些实施方案中，r^11a选自和。

在式（i）的一些实施方案中，r¹¹是。

在式（i）的一些实施方案中，r¹¹是-r^11a-r^11b-r^11c，其中r^11a是,r^11b是aar，其中r是2,且r^11c是–coch3。

在式（i）的一些实施方案中，r¹¹是-r^11d-r^11e-r^11f。

在式（i）的一些实施方案中，r¹¹是-r^11d-r^11e-r^11f，其中r^11d是–(ch2)t-其中t是2,r^11e不存在且r^11f是苯基。

在式（i）的一些实施方案中，r¹¹是-r^11d-r^11e-r^11f，其中r^11d是–(ch2)t-其中t是2,r^11e是–o-且r^11f是苯基。

在式（i）的一些实施方案中，r¹¹是-r^11d-r^11e-r^11f，其中r^11d是–(ch2)t-其中t是2,r^11e不存在且r^11f是5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子。

在式（i）的一些实施方案中，n是1。

在式（i）的一些实施方案中，n是2。

在式（i）的一些实施方案中，r是1、2、3、4、5、6、7或8。

在式（i）的一些实施方案中，r是1、2、3、4或5。

在式（i）的一些实施方案中，r是1、2或3。

在式（i）的一些实施方案中，r是2。

本发明的一个方面涉及式（ia）化合物

或其药学上可接受的盐，其中：

r³选自-ch3、-ch2ch3和-ch(ch3)2；

r⁴是h；和

x选自：

(i)任选被一个r¹⁰取代的–ch3；

(ii)任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基；

(iii)–(c0-c6烷基)-c3-c10碳环基，其所述c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代；

(iv)–(c0-c6烷基)-3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述3至10元杂环基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

(v)–(c0-c6烷基)-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代；和

(vi)–(c0-c6烷基)-5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基任选被一个r¹⁰取代,并且其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

并且该x任选进一步被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r¹⁰是–r^10a-r^10b其中

r^10a不存在或是–(ch2)n-，该r^10a任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^10b选自：

(i)–oh；

(ii)–cn；

(iii)-po3h；

(iv)-co2h；

(v)-co2c1-c4烷基，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(vi)–co-r¹¹；

(vii)–nh-r¹¹；

(viii)–n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(ix)–conh-r¹¹；

(x)–con(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xi)–conhnh-r¹¹；

(xii)–conhn(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiii)–con(c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiv)–con(c1-c4烷基)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xv)–con(r¹¹)nh2；

(xvi)–con(r¹¹)nh(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xvii)–con(r¹¹)n(c1-c4烷基)2，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xviii)–conhn=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xix)–con(c1-c4烷基)n=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xx)–n(r¹¹)co(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxi)–ch(co2h)nh-r¹¹；

(xxii)–ch(co2c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxiii)–ch(nh2)co-r¹¹；

(xxiv)–ch(nh(c1-c4烷基))co-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxv)–ch(n(c1-c4烷基)2)co-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxvi)-ch(co-r¹¹)nh-r¹¹；和

(xxvii)-ch(co-r¹¹)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

r¹¹选自-r^11a-r^11b-r^11c和-r^11d-r^11e-r^11f,其中

r^11a不存在，或选自、、和；

r^11b不存在，或选自、和aar，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

r^11c不存在或选自-h、-c1-c4烷基和-coc1-c4烷基；

r^11d不存在或是–(ch2)t-，该r^11d当存在时任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^11e不存在或选自–o-和–nh-；

n是1、2、3、4、5或6；

r是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；

t是1、2、3、4、5或6；

e对于每次出现独立地选自-f、-cl、-cn、-oh、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-no2、-co2h、-och3、-ocf3和-cf3。

在一个实施方案中，式（ia）化合物不是(2s)-2-氨基-5-{[(2r)-1-[(羧基甲基)氨基]-3-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-1-氧代丙-2-基]氨基}-5-氧代戊酸

。

本文中关于式（i）所述的每个方面和实施方案，单独地或者在适用的情况下组合地，也适用于式（ia）的化合物，程度为它们没有与结构不相容。

在某些实施方案中，本发明涉及任何前述的式（i）或式（ia）化合物，或其药学上可接受的盐及附带定义，其中所述化合物选自：

,和。

式（ii）化合物及其衍生物

本发明还涉及式（ii）化合物:

或其药学上可接受的盐，其中：

r¹选自br和i；

r²选自h和；

r³选自-ch3、-ch2ch3和-ch(ch3)2；

x选自：

(i)任选被一个r¹⁰取代的–ch3；

(ii)任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基；

(iii)–(c0-c6烷基)-c3-c10碳环基，其所述c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代；

(iv)–(c0-c6烷基)-3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述3至10元杂环基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

(v)–(c0-c6烷基)-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代；和

(vi)–(c0-c6烷基)-5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

并且该x任选进一步被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中

r^10a不存在或是–(ch2)n-，该r^10a任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^10b选自：

(i)–oh；

(ii)–cn；

(iii)-po3h；

(iv)-co2h；

(v)-co2c1-c4烷基，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(vi)–co-r¹¹；

(vii)–nh-r¹¹；

(viii)–n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(ix)–conh-r¹¹；

(x)–con(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xi)–conhnh-r¹¹；

(xii)–conhn(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiii)–con(c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiv)–con(c1-c4烷基)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xv)–con(r¹¹)nh2；

(xvi)–con(r¹¹)nh(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xvii)–con(r¹¹)n(c1-c4烷基)2，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xviii)–conhn=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xix)–con(c1-c4烷基)n=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xx)–n(r¹¹)co(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxi)–ch(co2h)nh-r¹¹；

(xxii)–ch(co2c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxiii)–ch(nh2)co-r¹¹；

(xxiv)–ch(nh(c1-c4烷基))co-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxv)–ch(n(c1-c4烷基)2)co-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxvi)-ch(co-r¹¹)nh-r¹¹；和

(xxvii)-ch(co-r¹¹)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

r¹¹选自-r^11a-r^11b-r^11c和-r^11d-r^11e-r^11f，其中

r^11a不存在，或选自、、和；

r^11b不存在，或选自、和aar，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

r^11c不存在或选自-h、-c1-c4烷基和-coc1-c4烷基；

r^11d不存在或是–(ch2)t-，该r^11d当存在时任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^11e不存在或选自–o-和–nh-；

n是1、2、3、4、5或6；

r是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；

t是1、2、3、4、5或6；

e对于每次出现独立地选自-f、-cl、-cn、-oh、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-no2、-co2h、-och3、-ocf3和-cf3；和

l是[连接基团]。

本发明还涉及式（iia）化合物

或其药学上可接受的盐，其中：

r³选自-ch3、-ch2ch3和-ch(ch3)2；

x选自：

(i)任选被一个r¹⁰取代的–ch3；

(ii)任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基；

(iii)–(c0-c6烷基)-c3-c10碳环基，其所述c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代；

(iv)–(c0-c6烷基)-3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述3至10元杂环基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

(v)–(c0-c6烷基)-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代；和

(vi)–(c0-c6烷基)-5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

并且该x任选进一步被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中

r^10a不存在或是–(ch2)n-，该r^10a任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^10b选自：

(i)–oh；

(ii)–cn；

(iii)-po3h；

(iv)-co2h；

(v)-co2c1-c4烷基，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(vi)–co-r¹¹；

(vii)–nh-r¹¹；

(viii)–n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(ix)–conh-r¹¹；

(x)–con(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xi)–conhnh-r¹¹；

(xii)–conhn(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiii)–con(c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiv)–con(c1-c4烷基)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xv)–con(r¹¹)nh2；

(xvi)–con(r¹¹)nh(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xvii)–con(r¹¹)n(c1-c4烷基)2，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xviii)–conhn=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xix)–con(c1-c4烷基)n=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xx)–n(r¹¹)co(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxi)–ch(co2h)nh-r¹¹；

(xxii)–ch(co2c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxiii)–ch(nh2)co-r¹¹；

(xxiv)–ch(nh(c1-c4烷基))co-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxv)–ch(n(c1-c4烷基)2)co-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxvi)-ch(co-r¹¹)nh-r¹¹；和

(xxvii)-ch(co-r¹¹)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

r¹¹选自-r^11a-r^11b-r^11c和-r^11d-r^11e-r^11f其中

r^11a不存在，或选自、、和；

r^11b不存在，或选自、和aar，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

r^11c不存在或选自-h、-c1-c4烷基和-coc1-c4烷基；

r^11d不存在或是–(ch2)t-，该r^11d当存在时任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^11e不存在或选自–o-和–nh-；

n是1、2、3、4、5或6；

r是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；

t是1、2、3、4、5或6；

e对于每次出现独立地选自-f、-cl、-cn、-oh、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-no2、-co2h、-och3、-ocf3和-cf3；和

l是[连接基团]。

式（ii）和式（iia）的有效负荷连接基团化合物包含与式（i）的卡奇霉素衍生物或其药学上可接受的盐键合的连接基团单元l（有时在本文中称为“[连接基团]”）。有效负荷连接基团化合物是双官能化合物，其可用于连接药物和抗体以形成抗体药物缀合物（adc）。这样的缀合物可用于，例如，形成针对肿瘤相关抗原的免疫缀合物。这样的缀合物允许将细胞毒性药物选择性递送至肿瘤细胞。技术人员将认识到，连接基团单元可以包含适合于将式（i）的卡奇霉素有效负荷化合物与抗体连接的任何单元。

如此设计本发明的有效负载连接基团化合物，以使得连接基团单元[连接基团]l通过氨基糖基与卡奇霉素有效负荷键合。不希望受理论束缚，据信，通过氨基糖的衍生化可以实现从抗体药物缀合物释放更有效形式的卡奇霉素。此外，不希望受理论束缚，还据信，通过氨基糖衍生化可以增加这样的抗体药物缀合物的治疗窗口，因为如果在抗体药物缀合物裂解之前在体内发生二硫键的任何过早活化，所形成的卡奇霉素衍生物保持与抗体键合，并因此被预期毒性较小。

本文中关于式（i）描述的每个方面和实施方案，单独地或在适用的情况下组合地，也适用于式（ii）和式（iia）的化合物，程度为它们没有与结构不相容。

多种的连接基团单元l，或[连接基团]，适用于在本发明中使用。合适的连接基团单元的实例包括但不限于可裂解的连接基团单元，如可蛋白水解裂解的连接基团单元，可水解裂解的连接基团单元和可糖酵解裂解的连接基团单元；和不可裂解的连接基团单元。可裂解的连接基团单元组成部分的实例包括但不限于化学裂解的酰基腙，例如在us5,773,001中描述的那些，酶促裂解的二肽或二肽-对氨基苄基氨基甲酸酯序列，例如在us6,214,345b1中描述的那些，酶促裂解的葡糖苷酸或糖苷部分，例如在us8,039,273b2中和在us8,568,728b2中描述的那些，等等。在本发明的某些实施方案中，可以将额外的分解型（immolative）间隔元件，例如对氨基苯甲基氨基甲酸酯基团，取代的或未取代的n,n-二氨基乙基或n,n-二氨基丙基基团并入到连接基团单元中。

在本发明的某些实施方案中，连接基团单元可以是“不可裂解的”，在这样的情况下，在连接基团内没有化学或酶促敏感的键。在这些情况下，设想药物或活性剂通过抗体本身的酶促分解代谢来释放，从而完整释放具有连接基团和衍生自抗体的一个或多个氨基酸的药物。

在一个方面中，连接基团单元l具有反应性位点，所述反应性位点具有亲核基团，所述亲核基团对抗体单元（例如抗体）上存在的亲电子基团具有反应性。抗体上的亲电子基团为连接连接基团单元提供方便的位点。抗体上有用的亲电子基团包括但不限于醛和酮羰基基团或羧酸基团，例如已被活化的基团。连接基团单元的亲核基团的杂原子可以与抗体上的亲电子基团反应并形成与抗体的共价键。连接基团单元上有用的亲核基团包括但不限于酰肼、肟、氨基、肼、缩氨基硫脲、羧酸肼和芳基酰肼。抗体上的亲电子基团为连接连接基团单元提供方便的位点。

在另一方面中，连接基团单元l具有反应性位点，该反应性位点具有亲电子基团，该亲电子基团与抗体单元（例如抗体）上存在的亲核基团具有反应性。连接基团上的亲电子基团为连接基团连接抗体单元提供方便的位点。抗体上有用的亲核基团包括但不限于巯基、羟基和氨基。抗体的亲核基团的杂原子与连接基团单元上的亲电子基团反应并与连接基团单元形成共价键。连接基团上有用的亲电子基团包括但不限于马来酰亚胺和卤代乙酰胺基团。

氨基官能团也是对于连接基团单元l有用的反应性位点，因为它们可与羧酸或化合物的活化酯反应形成酰胺键合。通常，本发明的基于肽的化合物可以通过在两个或更多个氨基酸和/或肽片段之间形成肽键来制备。这样的肽键可以，例如，根据在肽化学领域公知的液相合成方法（参见，例如，schroder和lubke，“thepeptides”，第1卷，第76-136页，1965，academicpress）来制备。

使用对氨基苄氧羰基（pabc）固定元件（immolationelement）的可蛋白水解裂解的基于肽的键合自其2002年引入（dubowchik，g.m.等人，bioconjugatechem.2002,13,855-869）以来已广泛用于抗体药物缀合物（adc）研究中。这样的键合据称在内化到抗原-靶向细胞中并且将adc暴露于在内涵体和溶酶体细胞器中发现的降解蛋白水解环境时经受解离。这些二肽pabc连接基团的半胱氨酸连接变体已获得专利（us6,214,345b2），并且已经证实这些和其它键合的含胺变体适合于使用由微生物转谷氨酰胺酶促进的酶促缀合的谷氨酰胺残基的位点特异性缀合,以及使用该酶促缀合方法经受有效缀合的非糖基化抗体和工程化抗体变体的用途（wo2012/059882a2）。

在另一个实施方案中，用于本发明的连接基团单元l包括连接基团单元，例如在2012年5月10日作为wo2012/059882公布的国际专利申请号pct/ib2011/054899中公开的那些，其内容通过引用以其全文并入本文中。在该实施方案中，适用于与本发明的有效负载一起使用的连接基团单元包括下述的那些：

其中x、m、n、p、q和氨基酸均如wo2012/059882中所公开的那样定义；并且z是细胞毒性剂，在这样的情况下是如本文中所述的卡奇霉素衍生物。

在另一个实施方案中，用于在本发明中使用的连接基团单元l包括连接基团单元，例如在2016年3月3日作为wo2016/030791公布的国际专利申请号pct/ib2015/056211中公开的那些，其内容通过引用以其全文并入本文中。在该实施方案中，适用于与本发明的有效负载一起使用的连接基团单元包括在wo2016/030791的式i中描述的那些：

其中：

m是稳定性调节剂；

p是包括一个或多个谷氨酰胺残基的肽序列；

q是存在于p中的谷氨酰胺残基；

每个e独立地选自：–c(r¹)2-,-o-c(r¹)2-c(r¹)2-，其中r是至少2,和-c(r¹)2-c(r¹)2-o-其中s是至少1；

每个r¹独立地选自：h、c1-c6直链或支链烷基、c2-c6直链或支链链烯基、和c2-c6直链或支链炔基；

每个x独立地是氨基酸，其中每个氨基酸x是相同或不同的；

每个y独立地是氨基酸，其中每个氨基酸y是相同或不同的；

每个z独立地是间隔元件，其中每个间隔元件是相同或不同的；

m是0-5，n是1-5，p是0-2，q是0-10，r是0-2,和s是0-2，其中q+r+s=2或更大；和

其中m、p、q、e、r¹、x、y、z、m、n、p、q、r和s均如wo2016/030791中所公开的那样定义；并且d是细胞毒性剂，在这样的情况下是如本文中所述的卡奇霉素衍生物。

适用于与本发明的有效负载一起使用的替代连接基团单元l也描述在wo2016/030791的式ii中：

其中：

m是稳定性调节剂；

p是包括一个或多个谷氨酰胺残基的肽序列；

q是存在于p中的谷氨酰胺残基；

每个e独立地选自：–c(r¹)2-、-o-c(r¹)2-c(r¹)2-，其中r是至少2,和-c(r¹)2-c(r¹)2-o-其中s是至少1；

每个r¹独立地选自：h、c1-c6直链或支链烷基、c2-c6直链或支链链烯基、和c2-c6直链或支链炔基；

每个x独立地是氨基酸，其中每个氨基酸x是相同或不同的；

每个y独立地是氨基酸，其中每个氨基酸y是相同或不同的；

每个z独立地是间隔元件，其中每个间隔元件是相同或不同的；

m是0-5，n是1-5，p是0-2，q是0-10，r是0-2，和s是0-2，其中q+r+s=2或更大；和

其中m、p、q、e、r¹、x、y、z、m、n、p、q、r和s均如wo2016/030791中所公开的那样定义；和d是细胞毒性剂，在这样的情况下是如本文中所述的卡奇霉素衍生物。

技术人员将理解，适用于wo2016/03079中描述的连接基团单元的所有定义，包括所有优选的实施方案，在这样的连接基团单元与本发明的有效负载键合作为[连接基团]l以形成本发明的有效负载连接基团化合物时，将同等地适用。

技术人员还将认识到，本领域已知的连接基团单元的改性也用作本发明化合物中使用的连接基团的方面。

在式（ii）的一个实施方案中，[连接基团]l是–(l^c)1-3-l^b-l^a，其中

l^a选自：-卤素；-nhr；-co-h；-co2h；任选被-no2取代的-s-s-芳基；任选被-no2取代的-s-s-杂芳基；烷基-so2-杂芳基；芳基so2-杂芳基-；；；；；和；

l^b选自-l^b1-l^b2-l^b3和-l^b2-l^b3-l^b1其中

l^b1不存在或是一个或多个选自下述的组成部分：-c(o)nr-、-c(o)c1-c6烷基-、-c(o)nrc1-c6烷基-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8-、-c1-c6烷基(och2ch2)1-8-nr-、-c(o)c1-c6烷基nrc(o)-、-c(o)c1-c6烷基(och2ch2)1--8-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8-c(o)-、-c1-c6烷基-s-s-c1-c6烷基nrc(o)ch2-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8nrc(o)ch2-、-c(o)c1-c6烷基-nrc(o)c1-6烷基-、-n=cr-苯基-o-c1-c6烷基-、-n=cr-苯基-o-c1-c6烷基-c(o)-、-c(o)-c1-c6烷基(och2ch2)1--8nrc(o)-、-c(o)c1-c6烷基-苯基(nr-c(o)c1-c6烷基)1-4-、-c(o)c1-c6烷基(och2ch2)1--8-nrc(o)c1-c6烷基-、-c1-c6烷基-、-s-、-c(o)-ch(nr-c(o)c1-c6烷基)-c1-c6烷基-、(-ch2-ch2-o-)1-20、-c1-c6亚烷基-nr-和-nrc1-c6亚烷基-；

l^b2不存在，或选自、、、和；

l^b3是aa0-12,其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

l^c不存在或对于每次出现独立地选自：–co-、-c1-c6亚烷基-、-nrc3-c8-杂环基nr-、-nrc3-c8-碳环基nr-、-nrc1-c6烷基nr-、-nrc1-c6亚烷基-、-s-、-nr-、-nrnr-、-o(cr2)1-4s-s(cr2)1-4n(r)-、-nrc1-c6-亚烷基亚苯基nr-、-nrc1-c6亚烷基亚苯基so2nr-、-oc1-c6烷基s-sc1-c6烷基c(coor)nr-、-nrc(coor)c1-c6烷基s-sc1-c6烷基o-、

其中

x^a选自cr和n；

x^b选自ch、cr(c(r)2)1-3nr、cr(c(r)2)1-3o、cr(c(r)2)1-3c(o)nr、cr-(c(r)2)1-3c(o)nrnr、cr(c(r)2)1-3so2nr、cr(c(r)2)1-3nrnr、cr(c(r)2)1-3nrc(o)和n；

每个x^c是r；

每个x^d不存在或是-(ch2)1-5-；

x^e选自o、s、c(r)2、c(r)(c(r)2)1-3-nr2和nr；

每个x^f选自(c(r)2)1-3-nr和c(r)2-(c(r)2)1-3-o；和

对于其中出现r的每个环体系，每个r独立地选自h、-c1-c20烷基、-c2-c6链烯基、-c2-c6炔基、卤素、羟基、烷氧基、-nh2、-nh(c1-c8烷基)、-n(c1-c8烷基)2、-no2、-c6-c14芳基和-c6-c14杂芳基，其中两个或更多个r任选地结合以形成一个或多个环，并且其中所述-c6-c14芳基和-c6-c14杂芳基任选地被1至5个独立地选自下述的取代基取代：-c1-c10烷基、-c1-c10烷氧基、-卤素、-c1-c10烷硫基、-三氟甲基、-nh2、-nh(c1-c8烷基)、-n(c1-c8烷基)2、-c1-c10烷基-n(c1-c8烷基)2、-c1-c3烷硫基、-no2或-c1-c10杂环基。

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a,其中

l^a选自-卤素；-nhr；-co-h；-co2h；任选被-no2取代的-s-s-芳基；任选被-no2取代的-s-s-杂芳基；烷基-so2-杂芳基；芳基so2-杂芳基-；；；；；和；

l^b是-l^b1-l^b2-l^b3其中

l^b2不存在，或选自、、、和；

l^b3是aa0-12,其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

和

对于其中出现r的每个环体系，每个r独立地选自h、-c1-c20烷基、-c2-c6链烯基、-c2-c6炔基、卤素、羟基、烷氧基、-nh2、-nh(c1-c8烷基)、-n(c1-c8烷基)2、-no2、-c6-c14芳基和-c6-c14杂芳基，其中两个或更多个r任选地连接以形成一个或多个环，和其中所述-c6-c14芳基和-c6-c14杂芳基任选地被1至5个独立地选自下述的取代基取代：-c1-c10烷基、-c1-c10烷氧基、-卤素、-c1-c10烷硫基、-三氟甲基、-nh2、-nh(c1-c8烷基)、-n(c1-c8烷基)2、-c1-c10烷基-n(c1-c8烷基)2、-c1-c3烷硫基、-no2或-c1-c10杂环基。

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a，其中

l^a选自和；

l^b是-l^b1-l^b2-l^b3其中

l^b2不存在，或选自、、、和；

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

和

对于其中出现r的每个环体系，每个r独立地选自h、-c1-c20烷基、-c2-c6链烯基、-c2-c6炔基、卤素、羟基、烷氧基、-nh2、-nh(c1-c8烷基)、-n(c1-c8烷基)2、-no2、-c6-c14芳基和-c6-c14杂芳基，其中两个或更多个r任选地结合以形成一个或多个环，和其中所述-c6-c14芳基和-c6-c14杂芳基任选地被1至5个独立地选自下述的取代基取代：-c1-c10烷基、-c1-c10烷氧基、-卤素、-c1-c10烷硫基、-三氟甲基、-nh2、-nh(c1-c8烷基)、-n(c1-c8烷基)2、-c1-c10烷基-n(c1-c8烷基)2、-c1-c3烷硫基、-no2或-c1-c10杂环基。

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a,其中

l^a选自和；

l^b是-l^b2-l^b3其中

l^b2是；

l^b3aa0-12,其中aa对于每次出现独立地是天然氨基酸或非天然氨基酸。

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a,其中

l^a选自和；

l^b是-l^b2-l^b3其中

l^b2是；

l^b3是aa0-12,其中aa对于每次出现独立地是天然氨基酸或非天然氨基酸。

在式（ii）的一些实施方案中，l是。

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a，其中

l^a是-nhr；

l^b是-l^b1-l^b2-l^b3其中

l^b2不存在，或选自、、、和；

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

和

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a，其中

l^a是-nh2；

l^b是-l^b1-l^b2-l^b3其中

l^b2不存在，或选自、、、和；

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

和

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a，其中

l^a是-nh2；

l^b是-l^b1-

l^b1是一个或多个选自下述的组成部分：-c(o)nr-、-c(o)c1-c6烷基-、-c(o)nrc1-c6烷基-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8-、-c1-c6烷基(och2ch2)1-8-nr-、-c(o)c1-c6烷基nrc(o)-、-c(o)c1-c6烷基(och2ch2)1--8-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8-c(o)-、-c1-c6烷基-s-s-c1-c6烷基nrc(o)ch2-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8nrc(o)ch2-、-c(o)c1-c6烷基-nrc(o)c1-6烷基-、-n=cr-苯基-o-c1-c6烷基-、-n=cr-苯基-o-c1-c6烷基-c(o)-、-c(o)-c1-c6烷基(och2ch2)1--8nrc(o)-、-c(o)c1-c6烷基-苯基(nr-c(o)c1-c6烷基)1-4-、-c(o)c1-c6烷基(och2ch2)1--8-nrc(o)c1-c6烷基-、-c1-c6烷基-、-s-、-c(o)-ch(nr-c(o)c1-c6烷基)-c1-c6烷基-、(-ch2-ch2-o-)1-20、-c1-c6亚烷基-nr-和-nrc1-c6亚烷基-；

和

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a，其中l^a是-nh2；l^b是-l^b1-其中l^b1是-c1-c6烷基(och2ch2)1--8-。

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(ch2)3-(och2ch2)6-nh2。

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a，其中

l^a是；

l^b选自-l^b1-l^b2-l^b3和-l^b2-l^b3-l^b1其中

l^b2不存在，或选自、、、和；

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

和

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a，其中

l^a是；

l^b是-l^b1其中

和

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a，其中

l^a是；

l^b是-l^b1-其中l^b1是-c(o)c1-c6烷基-。

在式（ii）的一些实施方案中，l是。

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中

l^a选自-卤素；-nhr；-co-h；-co2h；任选被-no2取代的-s-s-芳基；任选被-no2取代的-s-s-杂芳基；烷基-so2-杂芳基；芳基so2-杂芳基-；；；；；和；

l^b选自-l^b1-l^b2-l^b3和-l^b2-l^b3-l^b1其中

l^b2不存在，或选自、、、和；

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

l^c选自–co-和-c1-c6亚烷基；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中

l^a是-nhr；

l^b是-l^b1-l^b2-l^b3其中

l^b2不存在，或选自、、、和；

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

l^c选自–co-和-c1-c6亚烷基；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中

l^a是-nh2；

l^b是-l^b1-l^b2-l^b3其中

l^b2不存在，或选自、、和；

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

l^c选自–co-和-c1-c6亚烷基；和

对于其中出现r的每个环体系，每个r独立地选自h、-c1-c20烷基、-c2-c6链烯基、-c2-c6炔基、卤素、羟基、烷氧基、-nh2、-nh(c1-c8烷基)、-n(c1-c8烷基)2、-no2、-c6-c14芳基和-c6-c14杂芳基，其中两个或更多个r任选地形成一个或多个环，和其中所述-c6-c14芳基和-c6-c14杂芳基任选地被1至5个独立地选自下述的取代基取代：-c1-c10烷基、-c1-c10烷氧基、-卤素、-c1-c10烷硫基、-三氟甲基、-nh2、-nh(c1-c8烷基)、-n(c1-c8烷基)2、-c1-c10烷基-n(c1-c8烷基)2、-c1-c3烷硫基、-no2或-c1-c10杂环基。

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中

l^a是-nh2；

l^b是-l^b1-其中

l^c选自–co-和-c1-c6亚烷基；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中

l^a是-nh2；

l^b是-l^b1-其中

l^b1是选自下述的两种组分：-c(o)nr-、-c(o)c1-c6烷基-、-c(o)nrc1-c6烷基-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8-、-c1-c6烷基(och2ch2)1-8-nr-、-c(o)c1-c6烷基nrc(o)-、-c(o)c1-c6烷基(och2ch2)1--8-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8-c(o)-、-c1-c6烷基-s-s-c1-c6烷基nrc(o)ch2-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8nrc(o)ch2-、-c(o)c1-c6烷基-nrc(o)c1-6烷基-、-n=cr-苯基-o-c1-c6烷基-、-n=cr-苯基-o-c1-c6烷基-c(o)-、-c(o)-c1-c6烷基(och2ch2)1--8nrc(o)-、-c(o)c1-c6烷基-苯基(nr-c(o)c1-c6烷基)1-4-、-c(o)c1-c6烷基(och2ch2)1--8-nrc(o)c1-c6烷基-、-c1-c6烷基-、-s-、-c(o)-ch(nr-c(o)c1-c6烷基)-c1-c6烷基-、(-ch2-ch2-o-)1-20、-c1-c6亚烷基-nr-和-nrc1-c6亚烷基-；

l^c选自–co-和-c1-c6亚烷基；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中

l^a是-nh2；

l^b是-l^b1-其中l^b1是-c(o)nr-和-c1-c6烷基(och2ch2)1--8-；

l^c是-c1-c6亚烷基；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(ch2)-conh-(ch2)2-(och2ch2)2-nh2。

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(ch2)-conh-(ch2)2-(och2ch2)7-nh2。

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中l^a是-nh2；l^b是-l^b1-、l^b1-是-c(o)c1-c6烷基；和l^c是–co-。

在式（ii）的一些实施方案中，l是–co-(ch2)2-co-nh2。

对于出现r的每个环体系，在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中l^a是-nh2；l^b是-l^b1-其中l^b1是-c(o)nrc1-c6烷基-和-nrc1-c6亚烷基-；l^c是-c1-c6亚烷基；和每个r独立地选自h、-c1-c20烷基、-c2-c6链烯基、-c2-c6炔基、卤素、羟基、烷氧基、-nh2、-nh(c1-c8烷基)、-n(c1-c8烷基)2、-no2、-c6-c14芳基和-c6-c14杂芳基，其中两个或更多个r任选地形成一个或多个环，和其中所述-c6-c14芳基和-c6-c14杂芳基任选地被1至5个独立地选自下述的取代基取代：-c1-c10烷基、-c1-c10烷氧基、-卤素、-c1-c10烷硫基、-三氟甲基、-nh2、-nh(c1-c8烷基)、-n(c1-c8烷基)2、-c1-c10烷基-n(c1-c8烷基)2、-c1-c3烷硫基、-no2或-c1-c10杂环基。

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(ch2)-conh-(ch2)3-nh-(ch2)4-nh-(ch2)3-nh2。

在式（ii）的一些实施方案中，l是l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中

l^a选自和；

l^b是-l^b1-l^b3其中

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

l^c是-c1-c6亚烷基；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中

l^a选自和；

l^b是-l^b1-l^b3其中

l^b2不存在，或选自、、、和；

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

l^c是-c1-c6亚烷基；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中

l^a选自和；

l^b是–l^b1-l^b3其中

l^b1是-c(o)nr-和-c1-c6烷基(och2ch2)1-8-nr；

l^b3aa2，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；和

l^c是-c1-c6亚烷基。

在式（ii）的一些实施方案中，l是。

在式（ii）的一些实施方案中，l是

。

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中

l^a选自和；

l^b是–l^b1-l^b3其中

l^b1是-c(o)nrc1-c6烷基-和-nrc1-c6亚烷基-；

l^b3aa2，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；和

l^c是-c1-c6亚烷基。

在式（ii）的一些实施方案中，l是

。

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中

l^a选自和；

l^b是–l^b1-l^b2-l^b3其中

l^b2是和；

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

l^c是-c1-c6亚烷基；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中

l^a选自和；

l^b是–l^b1-l^b2-l^b3其中

l^b2是；

l^b3aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

l^c是-c1-c6亚烷基；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中

l^a选自和；

l^b是–l^b1-l^b2-l^b3其中

l^b1是-c(o)nr-和-c1-c6烷基(och2ch2)1-8-nr；

l^b2是；

l^b3aa2，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；和

l^c是-c1-c6亚烷基。

在式（ii）的一些实施方案中，l是。

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a，其中

l^a选自和；

l^b是–l^b1-l^b2-l^b3其中

l^b1是-c(o)nrc1-c6烷基-和-nrc1-c6亚烷基-；

l^b2是；

l^b3aa2，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

l^c是-c1-c6亚烷基.

在式（ii）的一些实施方案中，l是

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)2-l^b-l^a，其中

l^a选自-卤素；-nhr；-co-h；-co2h；任选被-no2取代的-s-s-芳基；任选被-no2取代的-s-s-杂芳基；烷基-so2-杂芳基；芳基so2-杂芳基-；；；；；和；

l^b是-l^b1-l^b2-l^b3其中

l^b2不存在，或选自、、、和；

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

其中

x^a选自cr和n；

x^b选自ch、cr(c(r)2)1-3nr、cr(c(r)2)1-3o、cr(c(r)2)1-3c(o)nr、cr-(c(r)2)1-3c(o)nrnr、cr(c(r)2)1-3so2nr、cr(c(r)2)1-3nrnr、cr(c(r)2)1-3nrc(o)和n；

每个x^c是r；

每个x^d不存在或是-(ch2)1-5-；

x^e选自o、s、c(r)2、c(r)(c(r)2)1-3-nr2和nr；

每个x^f选自(c(r)2)1-3-nr和c(r)2-(c(r)2)1-3-o；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)2-l^b-l^a，其中

l^a选自-卤素；-nhr；-co-h；-co2h；任选被-no2取代的-s-s-芳基；任选被-no2取代的-s-s-杂芳基；烷基-so2-杂芳基；芳基so2-杂芳基-；；；；；和；

l^bis-l^b1-l^b2-l^b3其中

l^b1不存在或是一个或多个选自下述的一个或多个组成部分：-c(o)nr-、-c(o)c1-c6烷基-、-c(o)nrc1-c6烷基-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8-、-c1-c6烷基(och2ch2)1-8-nr-、-c(o)c1-c6烷基nrc(o)-、-c(o)c1-c6烷基(och2ch2)1--8-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8-c(o)-、-c1-c6烷基-s-s-c1-c6烷基nrc(o)ch2-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8nrc(o)ch2-、-c(o)c1-c6烷基-nrc(o)c1-6烷基-、-n=cr-苯基-o-c1-c6烷基-、-n=cr-苯基-o-c1-c6烷基-c(o)-、-c(o)-c1-c6烷基(och2ch2)1--8nrc(o)-、-c(o)c1-c6烷基-苯基(nr-c(o)c1-c6烷基)1-4-、-c(o)c1-c6烷基(och2ch2)1--8-nrc(o)c1-c6烷基-、-c1-c6烷基-、-s-、-c(o)-ch(nr-c(o)c1-c6烷基)-c1-c6烷基-、(-ch2-ch2-o-)1-20、-c1-c6亚烷基-nr-和-nrc1-c6亚烷基-；

l^b2不存在，或选自、、和；

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

l^c是–co-和-nrc1-c6-亚烷基亚苯基nr；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)2-l^b-l^a，其中

l^a选自和；

l^b是-l^b1-l^b3其中

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

l^c是–co-、和-nrc1-c6-亚烷基亚苯基nr；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是l是–(l^c)2-l^b-l^a，其中

l^a选自和；

l^b是–l^b1-l^b2-l^b3其中

l^b2是；

l^b3aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

l^c是–co-、和-nrc1-c6-亚烷基亚苯基nr；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)2-l^b-l^a，其中

l^a选自和；

l^b是-l^b2-l^b3其中

l^b2是；

l^b3aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

l^c是–co-、和-nrc1-c6-亚烷基亚苯基nr；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)2-l^b-l^a，其中

l^a选自和；

l^b是–l^b2-l^b3其中

l^b2是；

l^b3aa2，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；和

l^c是–co-、和-nhc1-c6-亚烷基亚苯基nh。

在式（ii）的一些实施方案中，l是。

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a，其中

l^a选自-卤素；-nhr；-co-h；-co2h；任选被-no2取代的-s-s-芳基；任选被-no2取代的-s-s-杂芳基；烷基-so2-杂芳基；芳基so2-杂芳基-；；；；；和；

l^b是-l^b2-l^b3-l^b1其中

l^b2不存在，或选自、、和；

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a，其中

l^a是；

l^b是-l^b2-l^b3-l^b1其中

l^b2不存在，或选自、、和；

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

和

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a，其中

l^a是；

l^b是-l^b2-l^b3-l^b1其中

l^b2是；

l^b3aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a，其中

l^a是；

l^b是-l^b2-l^b3-l^b1其中

l^b1是选自下述的一种组分：-c(o)nr-、-c(o)c1-c6烷基-、-c(o)nrc1-c6烷基-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8-、-c1-c6烷基(och2ch2)1-8-nr-、-c(o)c1-c6烷基nrc(o)-、-c(o)c1-c6烷基(och2ch2)1--8-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8-c(o)-、-c1-c6烷基-s-s-c1-c6烷基nrc(o)ch2-、-c1-c6烷基(och2ch2)1--8nrc(o)ch2-、-c(o)c1-c6烷基-nrc(o)c1-6烷基-、-n=cr-苯基-o-c1-c6烷基-、-n=cr-苯基-o-c1-c6烷基-c(o)-、-c(o)-c1-c6烷基(och2ch2)1--8nrc(o)-、-c(o)c1-c6烷基-苯基(nr-c(o)c1-c6烷基)1-4-、-c(o)c1-c6烷基(och2ch2)1--8-nrc(o)c1-c6烷基-、-c1-c6烷基-、-s-、-c(o)-ch(nr-c(o)c1-c6烷基)-c1-c6烷基-、(-ch2-ch2-o-)1-20、-c1-c6亚烷基-nr-和-nrc1-c6亚烷基-；

l^b2是；

l^b3aa2，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；和

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a，其中

l^a是；

l^b是-l^b2-l^b3-l^b1其中l^b1是-c(o)c1-c6烷基-；l^b2是；和l^b3aa0-12，其中aa每次出现独立地是天然氨基酸或非天然氨基酸。

在式（ii）的一些实施方案中，l是。

在式（ii）的一些实施方案中，l是-l^b-l^a。

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)1-l^b-l^a。

在式（ii）的一些实施方案中，l是–(l^c)2-l^b-l^a。

在式（ii）的一些实施方案中，l^a选自–nh2；、、和。

在式（ii）的一些实施方案中，l^b是-l^b1-l^b2-l^b3。

在式（ii）的一些实施方案中，l^b是-l^b2-l^b3-l^b1。

在式（ii）的一些实施方案中，l^b1不存在。

在式（ii）的一些实施方案中，l^b1是对于每次出现各自独立地选自下述的一个或两个组成部分：-c(o)nr-；-c(o)c1-c6烷基-；-c1-c6烷基(och2ch2)1--8-；-c1-c6烷基(och2ch2)1--8-；-c1-c6烷基(och2ch2)1-8-nr；-c(o)nrc1-c6烷基-；-c1-c6烷基(och2ch2)1-8-nr；和-nrc1-c6亚烷基-。

在式（ii）的一些实施方案中，l^b2不存在。

在式（ii）的一些实施方案中，l^b2是。

在式（ii）的一些实施方案中，l^b3不存在。

在式（ii）的一些实施方案中，l^b3是aa0-12、l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地是天然氨基酸或非天然氨基酸。

在式（ii）的一些实施方案中，l^b3是aa2、l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地是天然氨基酸或非天然氨基酸。

在式（ii）的一些实施方案中，l^c不存在。

在式（ii）的一些实施方案中，l^c对于每次出现独立地选自-c1-c6亚烷基、–co-、和-nrc1-c6-亚烷基亚苯基nr。

在式（ii）的一些实施方案中，r是h。

在某些实施方案中，本发明涉及任何上述式（ii）或式（iia）化合物或其药学上可接受的盐及其附带定义，其中所述化合物选自：

。

本领域普通技术人员将认识到，一些有效负荷连接基团化合物，例如式（ii）化合物或其药学上可接受的盐，或式（iia）化合物或其药学上可接受的盐本身可用作有效负荷化合物。

式(iii)化合物及其衍生物

本发明还涉及式(iii)化合物,

或其药学上可接受的盐，其中：

r¹选自br和i；

r²选自h和；

r³选自-ch3、-ch2ch3和-ch(ch3)2；

x选自：

(i)任选被一个r¹⁰取代的–ch3；

(ii)任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基；

(iii)–(c0-c6烷基)-c3-c10碳环基，其所述c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代；

(iv)–(c0-c6烷基)-3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述3至10元杂环基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

(v)–(c0-c6烷基)-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代；和

(vi)–(c0-c6烷基)-5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

并且该x任选进一步被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中

r^10a不存在或是–(ch2)n-，该r^10a任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^10b选自：

(i)–oh；

(ii)–cn；

(iii)-po3h；

(iv)-co2h；

(v)-co2c1-c4烷基，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(vi)–co-r¹¹；

(vii)–nh-r¹¹；

(viii)–n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(ix)–conh-r¹¹；

(x)–con(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xi)–conhnh-r¹¹；

(xii)–conhn(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiii)–con(c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiv)–con(c1-c4烷基)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xv)–con(r¹¹)nh2；

(xvi)–con(r¹¹)nh(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xvii)–con(r¹¹)n(c1-c4烷基)2，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xviii)–conhn=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xix)–con(c1-c4烷基)n=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xx)–n(r¹¹)co(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxi)–ch(co2h)nh-r¹¹；

(xxii)–ch(co2c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxiii)–ch(nh2)co-r¹¹；

(xxiv)–ch(nh(c1-c4烷基))co-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxv)–ch(n(c1-c4烷基)2)co-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxvi)-ch(co-r¹¹)nh-r¹¹；和

(xxvii)-ch(co-r¹¹)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

r¹¹选自-r^11a-r^11b-r^11c和-r^11d-r^11e-r^11f，其中

r^11a不存在，或选自、、和；

r^11b不存在，或选自、和aar，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

r^11c不存在或选自-h、-c1-c4烷基和-coc1-c4烷基；

r^11d不存在或是–(ch2)t-，该r^11d当存在时任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^11e不存在或选自–o-和–nh-；

n是1、2、3、4、5或6；

r是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；

t是1、2、3、4、5或6；

e对于每次出现独立地选自-f、-cl、-cn、-oh、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-no2、-co2h、-och3、-ocf3和-cf3；

l^r是[连接基团基团]；和

ab是抗体。

本发明还涉及式（iiia）化合物,

或其药学上可接受的盐，其中：

r³选自-ch3、-ch2ch3和-ch(ch3)2；

x是

x选自：

(i)任选被一个r¹⁰取代的–ch3；

(ii)任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基；

(iii)–(c0-c6烷基)-c3-c10碳环基，其所述c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代；

(iv)–(c0-c6烷基)-3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述3至10元杂环基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

(v)–(c0-c6烷基)-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代；和

(vi)–(c0-c6烷基)-5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

并且该x任选进一步被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中

r^10a不存在或是–(ch2)n-，该r^10a任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^10b选自：

(i)–oh；

(ii)–cn；

(iii)-po3h；

(iv)-co2h；

(v)-co2c1-c4烷基，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(vi)–co-r¹¹；

(vii)–nh-r¹¹；

(viii)–n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(ix)–conh-r¹¹；

(x)–con(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xi)–conhnh-r¹¹；

(xii)–conhn(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiii)–con(c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiv)–con(c1-c4烷基)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xv)–con(r¹¹)nh2；

(xvi)–con(r¹¹)nh(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xvii)–con(r¹¹)n(c1-c4烷基)2，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xviii)–conhn=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xix)–con(c1-c4烷基)n=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xx)–n(r¹¹)co(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxi)–ch(co2h)nh-r¹¹；

(xxii)–ch(co2c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxiii)–ch(nh2)co-r¹¹；

(xxiv)–ch(nh(c1-c4烷基))co-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxv)–ch(n(c1-c4烷基)2)co-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxvi)-ch(co-r¹¹)nh-r¹¹；和

(xxvii)-ch(co-r¹¹)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

r¹¹选自-r^11a-r^11b-r^11c和-r^11d-r^11e-r^11f，其中

r^11a不存在，或选自、、和；

r^11b不存在，或选自、和aar，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

r^11c不存在或选自-h、-c1-c4烷基和-coc1-c4烷基；

r^11d不存在或是–(ch2)t-，该r^11d当存在时任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^11e不存在或选自–o-和–nh-；

n是1、2、3、4、5或6；

r是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；

t是1、2、3、4、5或6；

e对于每次出现独立地选自-f、-cl、-cn、-oh、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-no2、-co2h、-och3、-ocf3和-cf3；

l^r是[连接基团基团]；和

ab是抗体。

本发明还涉及式(iv)化合物,

或其药学上可接受的盐，其中：

r¹选自br和i；

r²选自h和；

r³选自-ch3、-ch2ch3和-ch(ch3)2；

x选自：

(i)任选被一个r¹⁰取代的–ch3；

(ii)任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基；

(iii)–(c0-c6烷基)-c3-c10碳环基，其所述c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代；

(iv)–(c0-c6烷基)-3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述3至10元杂环基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

(v)–(c0-c6烷基)-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代；和

(vi)–(c0-c6烷基)-5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

并且该x任选进一步被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中

r^10a不存在或是–(ch2)n-，该r^10a任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^10b选自：

(i)–oh；

(ii)–cn；

(iii)-po3h；

(iv)-co2h；

(v)-co2c1-c4烷基，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(vi)–co-r¹¹；

(vii)–nh-r¹¹；

(viii)–n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(ix)–conh-r¹¹；

(x)–con(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xi)–conhnh-r¹¹；

(xii)–conhn(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiii)–con(c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiv)–con(c1-c4烷基)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xv)–con(r¹¹)nh2；

(xvi)–con(r¹¹)nh(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xvii)–con(r¹¹)n(c1-c4烷基)2，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xviii)–conhn=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xix)–con(c1-c4烷基)n=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xx)–n(r¹¹)co(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxi)–ch(co2h)nh-r¹¹；

(xxii)–ch(co2c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxiii)–ch(nh2)co-r¹¹；

(xxiv)–ch(nh(c1-c4烷基))co-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxv)–ch(n(c1-c4烷基)2)co-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxvi)-ch(co-r¹¹)nh-r¹¹；和

(xxvii)-ch(co-r¹¹)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

r¹¹选自-r^11a-r^11b-r^11c和-r^11d-r^11e-r^11f，其中

r^11a不存在，或选自、、和；

r^11b不存在，或选自、和aar，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

r^11c不存在或选自-h、-c1-c4烷基和-coc1-c4烷基；

r^11d不存在或是–(ch2)t-，该r^11d当存在时任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^11e不存在或选自–o-和–nh-；

n是1、2、3、4、5或6；

r是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；

t是1、2、3、4、5或6；

e对于每次出现独立地选自-f、-cl、-cn、-oh、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-no2、-co2h、-och3、-ocf3和-cf3；

l^r是[连接基团基团]；

ab是抗体；和

b是1-20。

本发明还涉及式（iva）化合物,

或其药学上可接受的盐，其中：

r³选自-ch3、-ch2ch3和-ch(ch3)2；

x选自：

(i)任选被一个r¹⁰取代的–ch3；

(ii)任选被一个r¹⁰取代的–c2-c8烷基；

(iii)–(c0-c6烷基)-c3-c10碳环基，其所述c3-c10碳环基任选被一个r¹⁰取代；

(iv)–(c0-c6烷基)-3至10元杂环基，其所述3至10元杂环基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述3至10元杂环基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

(v)–(c0-c6烷基)-苯基，其所述苯基任选被一个r¹⁰取代；和

(vi)–(c0-c6烷基)-5至10元杂芳基，其所述5至10元杂芳基任选被一个r¹⁰取代，并且其所述5至10元杂芳基包含一、二或三个独立地选自n、o和s的杂原子；

并且该x任选进一步被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r¹⁰是–r^10a-r^10b，其中

r^10a不存在或是–(ch2)n-，该r^10a任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^10b选自：

(i)–oh；

(ii)–cn；

(iii)-po3h；

(iv)-co2h；

(v)-co2c1-c4烷基，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(vi)–co-r¹¹；

(vii)–nh-r¹¹；

(viii)–n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(ix)–conh-r¹¹；

(x)–con(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xi)–conhnh-r¹¹；

(xii)–conhn(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiii)–con(c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xiv)–con(c1-c4烷基)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xv)–con(r¹¹)nh2；

(xvi)–con(r¹¹)nh(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xvii)–con(r¹¹)n(c1-c4烷基)2，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xviii)–conhn=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xix)–con(c1-c4烷基)n=c(c1-c4烷基)-c6h4-oc1-c4烷基，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xx)–n(r¹¹)co(c1-c4烷基)，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxi)–ch(co2h)nh-r¹¹；

(xxii)–ch(co2c1-c4烷基)nh-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxiii)–ch(nh2)co-r¹¹；

(xxiv)–ch(nh(c1-c4烷基))co-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxv)–ch(n(c1-c4烷基)2)co-r¹¹，其中每个所述c1-c4烷基独立地任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

(xxvi)-ch(co-r¹¹)nh-r¹¹；和

(xxvii)-ch(co-r¹¹)n(c1-c4烷基)-r¹¹，其所述c1-c4烷基任选被1、2、3、4、5或6个e取代；

r¹¹选自-r^11a-r^11b-r^11c和-r^11d-r^11e-r^11f其中

r^11a不存在，或选自、、和；

r^11b不存在，或选自、和aar，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

r^11c不存在或选自-h、-c1-c4烷基和-coc1-c4烷基；

r^11d不存在或是–(ch2)t-，该r^11d当存在时任选被1、2、3、4、5、6、7或8个g取代；

r^11e不存在或选自–o-和–nh-；

n是1、2、3、4、5或6；

r是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20；

t是1、2、3、4、5或6；

e对于每次出现独立地选自-f、-cl、-cn、-oh、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-no2、-co2h、-och3、-ocf3和-cf3；

l^r是[连接基团基团]；

ab是抗体；和

b是1-20。

式（iii）、式（iiia）、式（iv）和式（iva）的抗体药物缀合物（adcs）或其药学上可接受的盐包含抗体（ab），所述抗体（ab）与式（ii）的连接基团有效负荷或其药学上可接受的盐的基团结合，或与式（iia）的连接基团有效负荷或其药学上可接受的盐的基团结合。当连接基团有效负载通过连接基团单元上的合适取代点与抗体结合时，形成式（ii）或式（iia）的连接基团有效负荷、其药学上可接受的盐的基团。连接基团基团（l^r，有时在本文中称为“[连接基团基团]”）仅用于表示连接基团取代基现在充当与有效负荷还有抗体二者结合的双官能取代基。普通技术人员将理解，当连接基团有效负荷的连接基团通过连接基团单元上的合适的取代点与抗体结合时，形成式（ii）或式（iia）的连接基团有效负荷或其药学上可接受的盐的基团。不希望受理论束缚，抗体可通过置换连接基团取代基l^a与连接基团有效负荷结合。当例如连接基团包含的l^a是卤素时，可能发生这样的情况。或者，抗体可通过加入连接基团取代基l^a而与连接基团有效负荷结合。当例如连接基团包含的l^a是并且抗体加在双键上形成时，可能发生这样的情况。或者，抗体可通过由取代基l^a置换合适的离去基团而与连接基团有效负荷结合。当例如连接基团包含的l^a是–nhr,以形成–nh-ab；或者连接基团包含的l^a是-co-h、-co2h、或，以形成；或者连接基团包含的l^a是任选被-no2取代的-s-s-芳基或任选被-no2取代的-s-s-杂芳基，以形成–s-ab；或者连接基团包含的l^a是烷基-so2-杂芳基；芳基so2-杂芳基-以形成杂芳基-ab；或者连接基团包含的l^a是，以形成；或者连接基团包含的l^a是，以形成时，可能发生这样的情况。

在本发明的一些实施方案中，-l^r-ab是–(l^c)1-3-l^b-l^ar-ab其中：

l^ar-ab选自-ab；-nh-ab；-co-ab；-s-ab；-杂芳基-ab；；；和；

l^b选自-l^b1-l^b2-l^b3和-l^b2-l^b3-l^b1其中

l^b2不存在，或选自、、和；

l^b3是aa0-12，其中aa对于每次出现独立地为天然氨基酸或非天然氨基酸；

其中

x^a选自cr和n；

x^b选自ch、cr(c(r)2)1-3nr、cr(c(r)2)1-3o、cr(c(r)2)1-3c(o)nr、cr-(c(r)2)1-3c(o)nrnr、cr(c(r)2)1-3so2nr、cr(c(r)2)1-3nrnr、cr(c(r)2)1-3nrc(o)和n；

每个x^c是r；

每个x^d不存在或是-(ch2)1-5-；

x^e选自o、s、c(r)2、c(r)(c(r)2)1-3-nr2和nr；

每个x^f选自(c(r)2)1-3-nr和c(r)2-(c(r)2)1-3-o；和

在本发明的一些实施方案中，l^ar-ab选自-nh-ab；；；和。

在本发明的一些实施方案中，-l^r-ab是

。

在本发明的一些实施方案中，-l^r-ab是–(ch2)3-(och2ch2)6-nh-ab。

在本发明的一些实施方案中，-l^r-ab是–(ch2)-conh-(ch2)2-(och2ch2)2-nh-ab。

在本发明的一些实施方案中，-l^r-ab是–(ch2)-conh-(ch2)2-(och2ch2)7-nh-ab。

在本发明的一些实施方案中，-l^r-ab是–co-(ch2)2-co-nh-ab。

在本发明的一些实施方案中，-l^r-ab是–(ch2)-conh-(ch2)3-nh-(ch2)4-nh-(ch2)3-nh-ab。

在本发明的一些实施方案中，-l^r-ab是。

在本发明的一些实施方案中，-l^r-ab是

。

在本发明的一些实施方案中，-l^r-ab是

。

在本发明的一些实施方案中，-l^r-ab是

。

在本发明的一些实施方案中，-l^r-ab是

。

本文中关于式（i）所述的每个方面和实施方案，单独地或在适用的情况下组合地，也适用于式（iii）、式（iiia）、式（iv）和式（iva）化合物，程度为它们没有与结构不相容。

本文中关于式（ii）所述的每个方面和实施方案，单独地或与本文中关于式（i）和式（ia）所述的实施方案的各个方面中的每一个组合地，也适用于式（iii）、式（iiia）、式（iv）和式（iva）化合物，程度为它们没有与结构不相容。

在某些实施方案中，本发明涉及任何前述化合物和附带定义,其中ab是抗体。在一些实施方案中，如本文中所述的adc中的抗体是单克隆抗体、多克隆抗体、人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、双特异性抗体、微抗体（minibody）、双链抗体、或抗体片段。

在试图发现对于癌症诊断和治疗有效的细胞靶时，研究人员已经设法识别与一种或多种正常非癌细胞相比在一种或多种特定类型的癌细胞表面上特异性表达的跨膜或其它肿瘤相关的多肽。通常，与非癌细胞的表面相比，这样的肿瘤相关的多肽被更大量地表达在癌细胞表面上。这样的肿瘤相关的细胞表面抗原多肽的识别已经产生了通过基于抗体的疗法特异性靶向癌细胞以用于破坏的能力。

抗体单元(ab)

如上所述，本文中的术语“抗体”（或“ab”）以最广泛的意义来使用，并且具体涵盖完整单克隆抗体、多克隆抗体、单特异性抗体、多特异性抗体（例如双特异性抗体）和表现出所需生物活性的抗体片段。此外，虽然本文中所述的本发明的某些方面涉及抗体药物缀合物，但进一步设想所述缀合物的抗体部分可能被与给定靶细胞群的受体、抗原或其它接受部分特异性结合或反应性缔合或复合的任何物质替换。例如，代替含有抗体，本发明的缀合物可含有靶向分子，其与寻求治疗性或其它生物性修饰的细胞群的受体、抗原或其它接受部分结合、复合或反应。这样的分子的实例包括较小分子量的蛋白质、多肽或肽、凝集素、糖蛋白、非肽、维生素、营养素转运分子（例如，但不限于，转铁蛋白）、或任何其它细胞结合分子或物质。在某些方面，抗体或其它这样的靶向分子用于将药物递送至与抗体或其它靶向分子相互作用的特定靶细胞群。

可存在于抗体单元上的杂原子包括硫（在一个实施方案中，来自抗体的巯基）、氧（在一个实施方案中，来自抗体的羰基、羧基或羟基）和氮（在一个实施方案中，来自抗体的伯或仲氨基）。这些杂原子可以以抗体的天然状态存在于抗体上，例如天然存在的抗体，或者可以通过化学改性引入到抗体中，或者可以通过基因工程如生物化学修饰引入到抗体中。

在一个实施方案中，抗体单元具有巯基，并且抗体单元通过巯基的硫原子结合。

在另一个实施方案中，抗体具有可与活化酯（这样的酯包括但不限于n-羟基琥珀酰亚胺、五氟苯基和对硝基苯基酯）反应的赖氨酸残基，并因此形成由抗体单元的氮原子和羰基构成的酰胺键。

在另一个方面，抗体单元具有一个或多个赖氨酸残基，其可被化学改性以引入一个或多个巯基。可用于改性赖氨酸的试剂包括但不限于n-琥珀酰亚胺基s-乙酰基硫代乙酸酯（sata）和2-亚氨基硫杂环戊烷盐酸盐（traut's试剂）。

在另一个实施方案中，抗体单元可具有一个或多个碳水化合物基团，其可被化学改性以具有一个或多个巯基。

在另一个实施方案中，抗体单元可具有一个或多个可被氧化以提供醛基的碳水化合物基团（参见，例如，laguzza等人，1989，j.med.chem.32(3):548-55）。相应的醛可与反应性位点，诸如，例如肼和羟胺形成键。用于修饰用于药物附着或缔合的蛋白质的其它方案描述于coligan等人，currentprotocolsinproteinscience，卷2，johnwiley＆sons（2002）（通过引用并入本文中）。

当缀合物包含非免疫反应蛋白、多肽或肽单元而不是抗体时，有用的非免疫反应蛋白、多肽或肽单元包括但不限于转铁蛋白、表皮生长因子（“egf”）、铃蟾肽、胃泌素、胃泌素释放肽、血小板衍生生长因子、il-2、il-6、转化生长因子（“top”）（如tgf-α和tgf-β）、牛痘病毒生长因子（“vgf”）、胰岛素和胰岛素样生长因子i和ii、生长抑素、凝集素和来自低密度脂蛋白的脱辅蛋白。

有用的多克隆抗体是衍生自免疫动物血清的抗体分子异质群。有用的单克隆抗体是针对特定抗原决定簇(例如癌细胞抗原、病毒抗原、微生物抗原、蛋白质、肽、碳水化合物、化学物质、核酸或其片段)的抗体的均质群。针对所关注抗原的单克隆抗体(mab)可通过使用通过培养中的连续细胞系而提供用于生产抗体分子的本领域中已知的任何技术来制备。

有用的单克隆抗体包括但不限于人单克隆抗体、人源化单克隆抗体，抗体片段或嵌合单克隆抗体。人单克隆抗体可以通过本领域已知的许多技术中的任何一种来制备（例如，teng等人,1983,proc.natl.acad.sci.usa.80:7308-7312；kozbor等人,1983,immunologytoday4:72-79；和olsson等人,1982,meth.enzymol.92:3-16）。

所述抗体也可以是双特异性抗体。用于制备双特异性抗体的方法是本领域已知的，并在下文中讨论。

抗体可以是抗体的功能活性片段、衍生物或类似物，其免疫特异性结合靶细胞（例如，癌细胞抗原、病毒抗原或微生物抗原）或结合肿瘤细胞或基质的其它抗体。就此而言，“功能活性”意指片段、衍生物或类似物能够引发抗-抗独特型抗体，其识别与衍生出该片段、衍生物或类似物的抗体识别的相同的抗原。具体地，在一个示例性实施方案中，免疫球蛋白分子独特型的抗原性可以通过缺失特异性识别抗原的cdr序列c-端的构架和cdr序列来增强。为了确定哪些cdr序列结合抗原，可将含有cdr序列的合成肽通过本领域已知的任何结合测定（例如，bia核测定）用于与抗原的结合测定中（对于cdr序列的定位，参见例如，kabat等人,1991,sequencesofproteinsofimmunologicalinterest,第五版,nationalinstituteofhealth,bethesda,md.；kabate等人,1980,j.immunology125(3):961-969）。

其它有用的抗体包括抗体片段，例如但不限于f(ab')2片段、fab片段、fv、单链抗体、双链抗体、三链抗体、四链抗体、scfv、scfv-fv或具有与抗体相同的特异性的任何其它分子。

另外，可使用标准重组dna技术制备的包含人与非人部分两者的重组抗体(例如嵌合和人源化单克隆抗体)是有用的抗体。嵌合抗体是这样的分子，在该分子中不同的部分衍生自不同的动物物种，诸如例如具有衍生自鼠类单克隆的可变区和人免疫球蛋白恒定区的那些。(参见，例如，美国专利no.4,816,567；和美国专利no.4,816,397，将其通过引用以其全文并入本文中。)人源化抗体是来自非人物种的抗体分子，其具有一个或多个来自非人物种的互补决定区(cdrs)及来自人免疫球蛋白分子的构架区。(参见，例如，美国专利no.5,585,089，将其通过引用以其全文并入本文中。)这样的嵌合和人源化单克隆抗体可通过本领域中已知的重组dna技术来产生，例如使用在以下文中描述的方法：国际公开no.wo87/02671；欧洲专利公开no.0184187；欧洲专利公开no.0171496；欧洲专利公开no.0173494；国际公开no.wo86/01533；美国专利no.4,816,567；欧洲专利公开no.012023；berter等人,1988,science240:1041-1043；liu等人,1987,proc.natl.acad.sci.usa84:3439-3443；liu等人,1987,j.immunol.139:3521-3526；sun等人,1987,proc.natl.acad.sci.usa84:214-218；nishimura等人,1987,cancer.res.47:999-1005；wood等人,1985,nature314:446-449；和shaw等人,1988,j.natl.cancerinst.80:1553-1559；morrison,1985,science229:1202-1207；oi等人,1986,biotechniques4:214；美国专利no.5,225,539；jones等人,1986,nature321:552-525；verhoeyan等人,1988,science239:1534；和beidler等人,1988,j.immunol.141:4053-4060；将其各自通过引用以其全文并入本文中。

完全人抗体是尤其需要的并且可使用不能表达内源性免疫球蛋白重链和轻链基因但可表达人重链和轻链基因的转基因小鼠来产生。用所选择的抗原，例如本发明的多肽的全部或一部分，以正常方式免疫转基因小鼠。可以使用常规杂交瘤技术获得针对抗原的单克隆抗体。转基因小鼠携带的人免疫球蛋白转基因在b细胞分化期间重排，并随后经历类别转换和体细胞突变。因此，使用这样的技术，可能产生治疗上有用的igg、iga、igm和ige抗体。关于用于产生人抗体的该技术的概述，参见lonberg和huszar，1995,int.rev.immunol.13:65-93。对于用于产生人抗体和人单克隆抗体的该技术的详细讨论和用于产生这样的抗体的方案，参见，例如，美国专利no.5,625,126；5,633,425；5,569,825；5,661,016；5,545,806；将其各自通过引用以其全文并入本文中。其它人抗体可以从例如abgenix,inc.(现在的amgen,freemont,calif.)和medarex(princeton,n.j.)商购获得。

可以使用被称为“引导选择（guidedselection）”的技术产生识别所选表位的完全人抗体。在该方法中，选择的非人单克隆抗体，例如小鼠抗体，用于引导选择识别相同表位的完全人抗体。（参见，例如，jespers等人,1994,biotechnology12:899-903）。人抗体也可以使用本领域已知的各种技术来产生，包括噬菌体展示文库（参见，例如，hoogenboom和winter，1991，j.mol.biol.227:381；marks等人,1991,j.mol.biol.222:581;quan和carter，2002，theriseofmonoclonalantibodiesastherapeutics，inanti-igeandallergicdisease，jardieu和fick，编辑，marceldekker，newyork，ny，第20章，第427-469页）。

在其它实施方案中，抗体是抗体的融合蛋白或其功能活性片段，例如其中抗体通过共价键（例如，肽键）在n端或c端与不是得自抗体的另一种蛋白质（或其一部分，优选蛋白质的至少10、20或50个氨基酸部分）的氨基酸序列融合。优选地，所述抗体或其片段在恒定结构域的n端与另一蛋白质共价连接。

抗体包括经修饰的类似物和衍生物，即通过共价连接任何类型的分子，只要这样的共价连接允许抗体保留其抗原结合免疫特异性。例如，但不限于，抗体的衍生物和类似物包括例如通过糖基化、乙酰化、聚乙二醇化、磷酸化、酰胺化、通过已知的保护/封闭基团衍生化、蛋白水解裂解、与细胞抗体单元或其它蛋白质等键合已经进一步修饰的那些。可以通过已知技术进行许多化学改性中的任何一种，包括但不限于特异性化学裂解、乙酰化、甲酰化、在衣霉素存在下的代谢合成等。此外，所述类似物或衍生物可含有一种或多种非天然氨基酸。

抗体可以在与fc受体相互作用的氨基酸残基中具有修饰（例如，取代、缺失或添加）。特别地，抗体可以在被识别为与抗-fc结构域和fcrn受体之间的相互作用有关的氨基酸残基中具有修饰（参见，例如，国际公开no.wo97/34631，将其通过引用以其全文并入本文中）。

对癌细胞抗原具有免疫特异性的抗体可以是商购可得的或是通过本领域技术人员已知的任何方法例如化学合成或重组表达技术生产的。编码对癌细胞抗原具有免疫特异性的抗体的核苷酸序列可以从例如genbank数据库或类似数据库、文献出版物或通过常规克隆和测序获得。

在一个具体实施方案中，可以使用任何已知的用于治疗癌症的抗体。对癌细胞抗原具有免疫特异性的抗体可以是商购可得的或是通过本领域技术人员已知的任何方法例如重组表达技术生产的。编码对癌细胞抗原具有免疫特异性的抗体的核苷酸序列可以从例如genbank数据库或类似数据库、文献出版物或通过常规克隆和测序获得。

在另一实施方案中，所述抗体选自但不限于用于治疗卵巢癌的鼠抗体，诸如奥戈伏单抗(oregovomab，ovarex^®)；用于治疗结肠直肠癌的鼠igg2a抗体，诸如依决洛单抗(edrecolomab，panorex^®)；用于治疗表皮生长因子阳性癌症，诸如头颈癌的抗-egfrigg嵌合抗体，例如西妥昔单抗(cetuximab，erbitux^®)；用于治疗肉瘤的人源化抗体，诸如玻连蛋白受体(αvβ3)的人源化单克隆抗体，如vitaxin^®；用于治疗慢性淋巴细胞白血病(cll)的人源化igg1抗体，诸如阿仑单抗(alemtuzumab，campathi/h^®)；smartid10，其是用于治疗非霍奇金淋巴瘤的人源化抗-hla-dr抗体；131ilym-1(oncolym^®)，其是用于治疗非霍奇金淋巴瘤的放射性标记的鼠抗-hla-dr10抗体；用于治疗霍奇金病或非霍奇金淋巴瘤的人源化抗-cd2mab，诸如allomune^®；拉贝珠单抗(labetuzumab，ceacide^®)其是用于治疗结肠直肠癌的人源化抗-cea抗体；贝伐单抗(bevacizumab，avastin^®)，其是用于治疗脑癌、结肠癌、肾癌或肺癌的人源化抗-vegf-amab；替伊莫单抗(ibritumomabtiuxetan，zevalin^®)，其是治疗非霍奇金淋巴瘤的抗-cd20单克隆抗体；奥法木单抗(ofatumumab，arzerra^®)，其是用于治疗慢性淋巴细胞白血病的人抗-cd20单克隆抗体；帕尼单抗(panitumumab，vectibix^®)，其是用于治疗结肠癌的人抗-egfr单克隆抗体；利妥昔单抗(rituximab，rituxan^®)，其是用于治疗慢性淋巴细胞白血病和非霍奇金淋巴瘤的抗-cd20嵌合单克隆抗体；托西莫单抗(tositumomab，bexxar^®)，其是用于治疗非霍奇金淋巴瘤的抗-cd20单克隆抗体；曲妥珠单抗(trastuzumab，herceptin^®)，其是用于治疗乳腺癌及胃癌的抗-her2受体单克隆抗体；易普利姆玛(ipilimumab，yervoy^®)，其是用于治疗黑素瘤的抗-ctla4人单克隆抗体；抗-cd33人源化单克隆抗体，诸如以mylotarg^®(wyeth/pfizer，ny)使用的抗体，其是用于治疗急性骨髓性白血病的结合至卡奇霉素的抗-cd33人源化单克隆抗体；和抗-cd22人源化单克隆抗体，诸如以奥英妥珠单抗(inotuzumabozogamicin，wyeth/pfizer，ny)使用的抗体，其是用于治疗急性淋巴细胞白血病和非霍奇金淋巴瘤的结合至卡奇霉素的抗-cd22人源化单克隆抗体。

在另一个具体实施方案中，所述抗体是抗-il13抗体，包括用于治疗癌症的抗-il13抗体，例如包括但不限于抗il-13rα2抗体。

在另一个具体实施方案中，所述抗体是抗-notch抗体，包括用于治疗癌症的抗-notch抗体。

在某些实施方案中，抗体ab通过硫键或通过硫-硫键与连接基团结合。

在某些实施方案中，抗体ab是抗-her2受体单克隆抗体，其中her被认为意指人表皮生长因子受体。

在某些实施方案中，抗体ab是抗-cd33受体单克隆抗体，该cd33受体也称为siglec-3。

在某些实施方案中，本发明涉及任何上述式（iii）或式（iiia）化合物或其药学上可接受的盐及其附带定义，其中所述化合物选自：

。

本发明的另一方面涉及包含任何上述化合物的抗体药物缀合物。

本发明的另一方面涉及包含抗体和任何一种上述化合物的抗体药物缀合物。

在某些实施方案中，本发明涉及任何上述的抗体药物缀合物和附带定义，其中所述化合物与抗体共价结合。

在某些实施方案中，本发明涉及任何上述的抗体药物缀合物和附带定义，其中所述抗体药物缀合物负载有约1至约20种本发明的有效负荷连接基团化合物。在另一个实施方案中，本发明涉及任何上述的抗体药物缀合物和附带定义，其中所述抗体药物缀合物负载有约2、3、4、5、6、7、8、9或10种本发明的有效负荷连接基团化合物。在某些实施方案中，本发明涉及任何上述的抗体药物缀合物和附带定义，其中所述抗体药物缀合物负载有约3或4种本发明的有效负荷连接基团化合物。

本发明的探针化合物

本发明的其它实施方案包括式(i)、式(ia)、式（ii）、式(iia)、式(iii)、式(iiia)、式(iv)和式(iva)的化合物，或其药学上可接受的盐，其中选择取代基x，以使其具有荧光性质。这样的化合物具有作为化学探针化合物的额外用途。在一个实施方案中，取代基x包含具有荧光性质的芳族基团，例如香豆素基团。在一个实施方案中，取代基x是

本文中关于式(i)和式(ia)所述的每个方面和实施方案也适用于本发明的化合物，其中选择取代基x以使其具有荧光性质。

本文中关于式(ii)和式(iia)所述的每个方面和实施方案,单独地或与本文中关于式（i）和式（ia）所述的实施方案的各个方面中的每一个组合地，也适用于本发明的化合物，程度为它们相容，其中选择取代基x以使其具有荧光性质。

本文中关于式(iii)和式(iiia)所述的每个方面和实施方案，单独地或与本文中关于式(i)、式(ia)、式(ii)或式(iia)所述的实施方案的各个方面中的每一个组合地，也适用于本发明的化合物，程度为它们相容，其中选择取代基x以使其具有荧光性质。

本文中关于式(iv)和式(iva)所述的每个方面和实施方案，单独地或与本文中关于式(i)、式(ia)、式(ii)或式(iia)所述的实施方案的各个方面中的每一个组合地，也适用于本发明的化合物，程度为它们相容，其中选择取代基x以使其具有荧光性质。

这样的化合物的实例包括但不限于有效负荷化合物诸如

连接基团有效负荷化合物诸如

和抗体药物缀合物化合物诸如

及其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，本发明涉及

及其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，本发明涉及

及其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，本发明涉及

及其药学上可接受的盐。

本发明的释放物质（species）

本发明的其它实施方案还包括在癌细胞或肿瘤细胞内部或附近从抗体药物缀合物释放的化学物质。

不希望受理论束缚，据信当本发明的化合物包含可裂解的连接基团时，化学物质通过酶促和/或水解裂解通过一种或多种与癌细胞或肿瘤细胞相关联的蛋白酶、糖苷酶或者通过纯化学方式从抗体药物缀合物中释放。所述裂解可以在本发明化合物的一个或多个合适的裂解点上发生，以释放化学物质。不希望受理论束缚，对于本发明，设想裂解可以在抗体本身中的一个或多个合适的点；在连接基团中和/或在取代基x中的一个或多个合适的点处发生。因此，设想在本发明化合物含有通过可裂解部分结合的抗体，并且在别处该化合物含有一个或多个其它可裂解部分，诸如在取代基x中的情况下，则在释放活性化合物之前，裂解可以发生在一个或多个可裂解部分处。因此，单一抗体药物缀合物可能潜在地在体内在多个位置被裂解，因此释放的物质可能不同。

不希望受理论束缚，据信当本发明的化合物包含不可裂解的连接基团时，化学物质通过酶促和/或水解裂解由一种或多种与癌细胞或肿瘤细胞相关联的蛋白酶或糖苷酶从抗体药物缀合物中释放，所述一种或多种与癌细胞或肿瘤细胞相关联的蛋白酶或糖苷酶作用于抗体本身上的一个或多个合适裂解点上以释放该化学物质。此外，设想在本发明化合物含有通过不可裂解部分结合的抗体处，并且在该化合物含有一个或多个其它可裂解部分的别处，诸如在取代基x处的情况下，则在释放活性化合物之前，裂解可以发生在一个或多个可裂解部分处。因此，单一抗体药物缀合物可能潜在地在体内在多个位置被裂解，因此释放的物质可能不同。

不希望受理论束缚，对于本发明的化合物而言，合适的裂解点可以包括但不限于卡奇霉素氨基糖–n(r³)-lr，以释放–n(r³)h；连接基团取代基中的聚乙二醇取代基的端氨基；x中的取代基中的聚乙二醇的端氨基；连接基团取代基中的多氨基链的氨基；和取代基x中的多氨基链的氨基。

本发明的化合物

本发明的化合物包括本文中所述任何化学式的化合物或其药学上可接受的盐。除非另有说明，否则本发明的化合物包括有效负荷化合物，有效负荷连接基团化合物和抗体药物缀合物化合物，包括式(i)、式(ia)、式（ii）、式(iia)、式(iii)、式(iiia)、式(iv)和式(iva)的化合物。本发明的化合物还包括本文中所述的探针化合物。本发明的化合物还包括本文中所述的释放物质。

除非另有说明，否则本文中所有提及的本发明化合物或其盐均包括提及其溶剂化物、水合物和复合物；和提及其盐的溶剂化物、水合物和复合物；包括提及其多晶型物、立体异构体和同位素标记的变体。

本发明的化合物可以以药学上可接受的盐的形式存在，诸如，例如，本文中提供的任一化学式的化合物的酸加成盐和碱加成盐。如本文中所用，术语“药学上可接受的盐”指保留母体化合物的生物学有效性和性质的那些盐。除非另有说明，否则本文中所用的短语“药学上可接受的盐”包括可存在于本文中公开的化学式的化合物中的酸性或碱性基团的盐。

例如，本质上碱性的本发明化合物能够与各种无机和有机酸形成多种盐。尽管这样的盐对于向动物施用而言必须是药学上可接受的，但在实践中经常希望最初将本发明化合物作为药学上不可接受的盐从反应混合物中分离出来，然后通过用碱性试剂处理将后者简单地重新转化为游离碱化合物，并随后将后者游离碱转化为药学上可接受的酸加成盐。本发明的碱化合物的酸加成盐可以通过在水性溶剂介质中或在合适的有机溶剂如甲醇或乙醇中用基本上等量的所选无机或有机酸处理碱化合物来制备。蒸发溶剂后，得到所需的固体盐。所需的酸式盐也可以通过向溶液中加入适当的无机或有机酸而从游离碱在有机溶剂中的溶液中沉淀出来。

可用于制备形成那些碱性化合物的药学上可接受的酸加成盐的酸是形成无毒酸加成盐的那些，所述无毒酸加成盐即含有药理学上可接受的阴离子的盐，诸如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乙酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、柠檬酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、葡糖二酸盐（saccharate）、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐[亦即1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸盐)]盐。

盐的实例包括但不限于乙酸盐、丙烯酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐(诸如氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐和甲氧基苯甲酸盐)、碳酸氢盐、硫酸氢盐、亚硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、丁炔-1,4-二酸盐（butyne-1,4-dioate）、乙二胺四乙酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、己酸盐、辛酸盐、棒酸盐、柠檬酸盐、癸酸盐、二氢氯化物、磷酸二氢盐、乙二胺四乙酸盐、依地斯酸盐(edislyate)、依托酸盐（estolate）、乙磺酸盐（esylate）、乙基琥珀酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、乙内酰胺苯胂酸盐（glycollylarsanilate）、庚酸盐、己炔-1,6-二酸盐、己基间苯二酚酸盐、哈胺（hydrabamine）、氢溴酸盐、盐酸盐、γ-羟基丁酸盐、碘化物、异丁酸盐、羟乙磺酸盐（isothionate）、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、偏磷酸盐、甲烷磺酸盐、甲基硫酸盐、一氢磷酸盐、粘酸盐（mucate）、萘磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐(恩波酸盐(embonate))、棕榈酸盐、泛酸盐、苯乙酸盐、苯丁酸盐、苯基丙酸盐、邻苯二甲酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、丙磺酸盐、丙酸盐、丙炔酸盐、焦磷酸盐、焦硫酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、辛二酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、磺酸盐、亚硫酸盐、丹宁酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐、甲苯磺酸盐、三乙碘化物及戊酸盐。

合适的盐的说明性实例包括衍生自氨基酸的有机盐，诸如甘氨酸和精氨酸，氨，伯、仲和叔胺，和环状胺，诸如哌啶、吗啉和哌嗪，和衍生自下述的无机盐：钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝和锂。

包括碱部分诸如氨基的本发明化合物可与除上述酸之外的各种氨基酸形成药学上可接受的盐。

本质上为酸性的那些本发明化合物能够与各种药理学上可接受的阳离子形成碱盐。这样的盐的实例包括碱金属或碱土金属盐，且尤其地钠和钾盐。这些盐都是通过常规技术来制备的。用作制备本发明药学上可接受的碱盐的试剂的化学碱是与本文中的酸性化合物形成无毒碱盐的那些。这些盐可以通过任何合适的方法来制备，例如，用无机或有机碱如胺（伯、仲或叔）、金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物等处理游离酸。这些盐也可以通过用含有所需的药理学上可接受的阳离子的水溶液处理相应的酸性化合物，然后将所得溶液蒸发（优选在减压下）至干燥来制备。或者，它们也可以通过将酸性化合物的低级链烷醇溶液和所需的碱金属醇盐混合在一起，然后以与以前相同的方式蒸发所得溶液至干燥来制备。在任一种情况下，优选使用试剂的化学计量量，以确保反应的完全和所需最终产物的最大产率。

可用作制备本发明的本质上为酸性的化合物的药学上可接受的碱盐的试剂的化学碱是与这样的化合物形成无毒碱盐的那些。这样的无毒碱盐包括但不限于衍生自这些药理学上可接受的阳离子的那些，所述药理学上可接受的阳离子如碱金属阳离子（例如钾和钠）和碱土金属阳离子（例如钙和镁），铵或水溶性胺加成盐如n-甲基葡糖胺（葡甲胺）和低级链烷醇铵和其它药学上可接受的有机胺的碱盐。

也可以形成酸和碱的半盐，例如半硫酸盐和半钙盐。

关于合适的盐的综述，参见stahl和wermuth的handbookofpharmaceuticalsalts：properties，selection，anduse（wileyvch，2002）。制备本发明化合物的药学上可接受的盐的方法是本领域技术人员已知的。

可以根据本领域技术人员已知的方法制备本发明的盐。本发明化合物的药学上可接受的盐可以通过将化合物和适当的所需酸或碱的溶液混合在一起而容易地制备。盐可以从溶液中沉淀出来并通过过滤来收集，或者可以通过蒸发溶剂来回收。盐中的电离程度可以从完全电离到几乎不电离变化。

本领域技术人员将理解，通过用化学计量过量的适当的酸处理，可以将具有碱性官能团的游离碱形式的本发明化合物转化为酸加成盐。本发明化合物的酸加成盐可以通常在含水溶剂存在下，并在约0℃至100℃之间的温度下，通过用化学计量过量的合适碱，例如碳酸钾或氢氧化钠处理，再转化成相应的游离碱。游离碱形式可以通过常规方法，例如用有机溶剂萃取来分离。此外，本发明化合物的酸加成盐可以通过利用盐的不同溶解度、酸的挥发性或酸性、或通过用适当负载的离子交换树脂处理来互换。例如，该互换可能受到本发明化合物的盐与轻微化学计量过量的pk低于起始盐的酸组分的酸的反应的影响。该转化通常在约0℃至作为该方法的介质使用的溶剂的沸点之间的温度进行。类似的交换用碱加成盐，通常通过游离碱形式的中间体是可行的。

本发明的化合物可以以非溶剂化和溶剂化的形式这两者存在。当紧密结合溶剂或水时，复合物将具有与湿度无关的明确的化学计量。然而，当弱结合溶剂或水（如以溶剂化物和吸湿性化合物的方式）时，水/溶剂含量将取决于湿度和干燥状况。在这样的情况下，非化学计量将是常态。术语“溶剂化物”在本文中用于描述包含本发明化合物和一种或多种药学上可接受的溶剂分子（例如乙醇）的分子复合物。当溶剂是水时，使用术语“水合物”。根据本发明的药学上可接受的溶剂化物包括水合物和溶剂化物，其中结晶的溶剂可以是同位素取代的，例如，d2o、d6-丙酮、d6-dmso。

本发明还涉及本文中提供的所述化学式的化合物的前药。因此，当施用于患者时，本身可能具有很少或没有药理活性的本发明化合物的某些衍生物可以，例如，通过水解裂解转化成本发明的化合物。这样的衍生物被称为“前药”。关于前药使用的进一步信息可以在'pro-drugsasnoveldeliverysystems,卷14,acssymposiumseries(thiguchi和wstella)和'bioreversiblecarriersindrugdesign’,pergamonpress,1987（编辑ebroche，americanpharmaceuticalassociation）中找到，其公开通过引用以其全文并入本文中。

根据本发明的前药可以，例如，通过用本领域技术人员已知为“前部分”的某些部分替换存在于本发明化合物中的适当官能团来制备，所述“前部分”如描述在例如hbundgaard的“designofprodrugs”（elsevier，1985）中的，其公开通过引用以其全文并入本文中。

最后，某些本发明的化合物本身可以用作其它本发明化合物的前药。

在一个实施方案中，本发明涉及式（i）化合物或其药学上可接受的盐的前药。

在一个实施方案中，本发明涉及式（ia）化合物或其药学上可接受的盐的前药。

在一个实施方案中，本发明涉及式（ii）化合物或其药学上可接受的盐的前药。

在一个实施方案中，本发明涉及式（iia）化合物或其药学上可接受的盐的前药。

在一个实施方案中，本发明涉及式（iii）化合物或其药学上可接受的盐的前药。

在一个实施方案中，本发明涉及式（iiia）化合物或其药学上可接受的盐的前药。

在一个实施方案中，本发明涉及式（iv）化合物或其药学上可接受的盐的前药。

在一个实施方案中，本发明涉及式（iva）化合物或其药学上可接受的盐的前药。

本文中所述化学式的化合物的代谢物，即在施用后在体内形成的化合物，也包括在本发明范围内。

本文中所提供的化学式的化合物可具有不对称碳原子。本发明的化合物的碳碳键在本文中可以使用实线(或)、实心楔形()或点状楔形()来描绘。使用实线(或)描绘与不对称碳原子的键意味着表明包括在该碳原子处的所有可能的立体异构体（例如特定的对映异构体，外消旋混合物等）。使用实心或点状楔形来描绘与不对称碳原子的键意味着表示仅包括所示的立体异构体。有可能本发明的化合物可以含有多于一个不对称碳原子。在那些化合物中，使用实线描绘与不对称碳原子的键意味着表示包括所有可能的立体异构体。例如，除非另有说明，否则意图是本发明的化合物可以作为对映异构体和非对映异构体或作为外消旋体及其混合物存在。使用实线描绘与本发明化合物中的一个或多个不对称碳原子的键，并使用实心或点状楔形描绘与同一化合物中的其它不对称碳原子的键，意味着表示存在非对映异构体的混合物。

具有手性中心的本发明化合物可以作为立体异构体存在，如外消旋体、对映异构体或非对映异构体。

本文中所述化学式的化合物的立体异构体可包括本发明化合物的顺式和反式异构体、光学异构体如（r）和（s）对映异构体、非对映异构体、几何异构体、旋转异构体、阻转异构体、构象异构体和互变异构体，包括表现出多于一种同分异构类型的化合物；及其混合物（如外消旋体和非对映体对）。还包括酸加成盐或碱加成盐，其中抗衡离子是光学活性的，例如，d-乳酸盐或l-赖氨酸，或外消旋的，例如dl-酒石酸盐或dl-精氨酸。

当任何外消旋体结晶时，可能有两种不同类型的晶体。第一种类型是上面提到的外消旋化合物（真实外消旋体），其中产生晶体的一种均质形式，其含有等摩尔量的两种对映体。第二种类型是外消旋混合物或外消旋混合物（conglomerate），其中以等摩尔量产生晶体的两种形式，其各包含单一对映异构体。

本发明的化合物可以表现出互变异构现象和结构异构现象。例如，化合物可以以几种互变异构形式存在，包括烯醇和亚胺形式，以及酮和烯胺形式和几何异构体及其混合物。所有这些互变异构形式都包括在本发明化合物的范围内。互变异构体作为溶液中的互变异构体集合的混合物存在。在固体形式中，通常一种互变异构体占优势。尽管可能描述了一种互变异构体，但本发明包括所提供的分子式的化合物的所有互变异构体。

此外，本发明的一些化合物可以形成阻转异构体（例如取代的联芳基）。阻转异构体是构象立体异构体，其是当分子中围绕一个单键的旋转被阻止或大大减慢时，由于与分子其它部分的空间相互作用和该单键两端处的取代基是不对称的而发生的。阻转异构体的相互转化足够慢，以允许在预定条件下分开和分离。对热外消旋化的能量壁垒可以通过形成手性轴的一个或多个键的自由旋转的空间位阻来确定。

在本发明化合物含有链烯基或亚链烯基的情况下，几何顺式/反式（或z/e）异构体是可能的。顺式/反式异构体可通过本领域技术人员熟知的常规技术来分离，例如色谱法和分级结晶法。

用于制备/分离单独的对映体的常规技术包括从合适的光学纯前体手性合成或使用例如手性高压液相色谱（hplc）拆分外消旋体（或盐或衍生物的外消旋体）。

或者，可以使外消旋体（或外消旋前体）与合适的光学活性化合物（例如醇）反应，或者在化合物含有酸性或碱性部分的情况下，与酸或碱如酒石酸或1-苯基乙胺反应。可以通过色谱法和/或分级结晶分离所得的非对映异构体混合物，并且通过本领域技术人员熟知的方法将非对映异构体中的一种或两种都转化为相应的纯对映异构体。

本发明的手性化合物（及其手性前体）可以使用色谱法（通常为hplc）在不对称树脂上用流动相来以对映异构性富集形式获得，该流动相由烃，通常庚烷或己烷组成，其含有0至50%，通常2至20%的异丙醇，和0至5%的烷基胺，通常0.1%二乙胺。浓缩洗脱液得到富集的混合物。

立体异构的外消旋混合物可通过本领域技术人员已知的常规技术来分离；参见，例如，eleliel的“stereochemistryoforganiccompounds”（wiley，newyork，1994），其公开内容通过引用以其全文并入本文中。

如本文中所用的“对映异构体纯的”描述了作为单一的对映异构体存在的化合物，并且将其以术语对映异构体过量（e.e.）来描述。优选地，在化合物作为对映异构体存在的情况下，对映异构体以大于或等于约80％的对映异构体过量，更优选地，以大于或等于约90％的对映异构体过量，还更优选地，以大于或等于约95％的对映异构体过量，还更优选地，以大于或等于约98％的对映异构体过量，最优选地，以大于或等于约99％的对映异构体过量存在。类似地，如本文中所用的“非对映异构体纯的”描述了作为非对映异构体存在的化合物，并且其以术语非对映异构体过量（d.e.）来描述。优选地，在化合物作为非对映异构体存在的情况下，非对映异构体以大于或等于约80％的非对映异构体过量，更优选地，以大于或等于约90％的非对映异构体过量，还更优选地，以大于或等于约95％的非对映异构体过量，还更优选地，以大于或等于约98％的非对映异构体过量，最优选地，以大于或等于约99％的非对映异构体过量存在。

本发明还包括同位素标记的化合物，其与所提供的化学式之一中所述的那些化合物相同，但事实是这样的：一个或多个原子被具有与在自然界中常见的原子质量或质量数不同的原子质量或质量数的原子替代。

同位素标记的本发明化合物通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与本文中所述方法类似的方法，使用适当的同位素标记的试剂代替另外使用的非标记试剂来制备。

可并入本发明化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如但不限于²h、³h、¹³c、¹⁴c、¹⁵n、¹⁸o、¹⁷o、³¹p、³²p、³⁵s、¹⁸f、³⁶cl、¹²⁷i、⁷⁹br和⁸¹br。某些同位素标记的本发明化合物，例如并入放射性同位素如³h和¹⁴c的那些，可用于药物和/或基质组织（substratetissue）分布测定。氚（即³h）和碳-14（即¹⁴c）同位素因其易于制备和可检测性是特别优选的。此外，用较重的同位素例如氘（即²h）取代可以提供由更大的代谢稳定性而产生的某些治疗优势，例如体内半衰期增加或剂量需求减少，且因此，在一些情况下可能是优选的。同位素标记的本发明化合物通常可以通过用同位素标记的试剂取代非同位素标记的试剂，通过进行以下在方案中和/或在实施例和制备中公开的方法来制备。

打算用于药物用途的本发明化合物可以作为结晶或无定形产品或其混合物来施用。它们可以通过诸如沉淀、结晶、冷冻干燥、喷雾干燥或蒸发干燥的方法，例如，作为固体塞、粉末或薄膜来获得。微波或射频干燥可用于此目的。

化合物及其抗体药物缀合物的治疗用途

本发明的另一方面涉及使用本发明的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗病理状况如癌症的方法。

本发明的另一方面涉及杀死肿瘤细胞或癌细胞或抑制肿瘤细胞或癌细胞增殖的方法，包括用一定量的本发明化合物或其药学上可接受的盐治疗患者的肿瘤细胞或癌细胞，所述量有效杀死肿瘤细胞或癌细胞或抑制肿瘤细胞或癌细胞的增殖。

本发明的另一方面涉及使用本发明的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗异常细胞生长的方法。

本发明的另一方面涉及使用本发明的化合物或其药学上可接受的盐用于治疗癌症的方法。

本发明的另一方面涉及本发明的化合物或其药学上可接受的盐，其用作药物。

本发明的另一方面涉及本发明的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗诸如癌症的病理状况。

本发明的另一方面涉及本发明化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗异常细胞生长。

本发明的另一方面涉及本发明化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗癌症。

本发明的另一方面涉及本发明化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗诸如癌症的病理状况的药物中的用途。

本发明的另一方面涉及本发明化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗异常细胞生长的药物中的用途。

本发明的另一方面涉及本发明化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的用途。

本发明的另一方面涉及用于治疗诸如癌症的病理状况的药物组合物，其包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐。

本发明的另一方面涉及用于治疗异常细胞生长的药物组合物，其包含本发明化合物或其药学上可接受的盐。

本发明的另一方面涉及用于治疗癌症的药物组合物，其包含本发明化合物或其药学上可接受的盐。

本发明的化合物可用于抑制肿瘤细胞或癌细胞的增殖，引起肿瘤或癌细胞中的细胞凋亡，或用于治疗患者的癌症。因此，本发明的化合物可用于治疗动物癌症的各种环境中。所述缀合物可用于将本发明化合物递送至肿瘤细胞或癌细胞。不受理论束缚，在一个实施方案中，缀合物的抗体与癌细胞或肿瘤细胞相关的抗原结合或缔合，并且缀合物可以在肿瘤细胞或癌细胞内通过受体介导的内吞作用或其它内化机制被摄取（内化）。抗原可以附着于肿瘤细胞或癌细胞，或者可以是与肿瘤细胞或癌细胞缔合的细胞外基质蛋白。在某些实施方案中，一旦在细胞内，一个或多个特定肽序列被裂解，例如被一种或多种肿瘤细胞或癌细胞缔合的蛋白酶酶促或水解裂解，导致本发明的化合物从缀合物中释放。缀合物可以被细胞内蛋白酶裂解以释放本发明的化合物。然后，释放的本发明化合物在细胞内自由迁移并诱导细胞毒性或抑制细胞生长的活性。不希望受理论束缚，释放的本发明的化合物也可迁移至另一细胞，包括不表达合适抗原的细胞，并诱导细胞毒性或抑制细胞生长的活性。在一个替代实施方案中，本发明的化合物被从肿瘤细胞或癌细胞外的缀合物上裂解，且随后本发明的化合物渗入细胞。

在某些实施方案中，缀合物提供缀合特异性肿瘤或癌症药物靶向，因此降低了本发明化合物的一般毒性。

在另一个实施方案中，抗体单元结合至肿瘤细胞或癌细胞。

在另一个实施方案中，抗体单元结合至肿瘤细胞或癌细胞表面上的肿瘤细胞或癌细胞抗原。

在另一个实施方案中，抗体单元结合肿瘤细胞或癌细胞抗原，其是与肿瘤细胞或癌细胞缔合的细胞外基质蛋白。

抗体单元对特定肿瘤细胞或癌细胞的特异性对于确定最有效治疗的肿瘤或癌症可能是重要的。

如本文中所用的术语“治疗有效量”指所施用的化合物的量，其将在某种程度上缓解所治疗的病症的一种或多种症状。对于癌症的治疗，治疗有效量指具有如下作用的量：（1）减小肿瘤大小，（2）抑制（即，在某种程度上减缓，优选停止）肿瘤转移，（3）在某种程度上抑制（即，在某种程度上减慢，优选停止）肿瘤生长或肿瘤侵袭，和/或（4）在某种程度上缓解（或优选地，消除）与癌症相关的一种或多种体征或症状。

如本文中所用，“主体”指人或动物主体。在某些优选的实施方案中，主体是人。

除非另有说明，否则本文中所用的术语“治疗（treating）”指逆转、减轻、抑制该术语所适用的病症或状况或这样的病症或状况的一种或多种症状的进展，或预防该术语所适用的病症或状况或这样的病症或状况的一种或多种症状。除非另有说明，本文中所用的术语“治疗（treatment）”指如上刚刚所述的作为“治疗（treating）”的治疗行为。术语“治疗（treating）”还包括主体的辅助和新辅助治疗。

术语“异常细胞生长”和“过度增殖性病症”在本申请中可互换使用。

除非另有说明，否则本文中所用的“异常细胞生长”指与正常调节机制无关的细胞生长（例如，接触抑制丧失）。细胞异常生长可能是良性的（非癌性的）或恶性的（癌性的）。

如本文中所用的“癌症”指由异常细胞生长引起的任何恶性和/或侵入性生长或肿瘤。如本文中所用的“癌症”指以形成它们的细胞类型命名的实体肿瘤，血液、骨髓或淋巴系统的癌症。实体肿瘤的实例包括但不限于肉瘤和癌。血液癌症的实例包括但不限于白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。术语“癌症”包括但不限于源自身体特定部位的原发性癌症，已从其开始的部位扩散至身体其它部位的转移性癌症，初始原发性癌症在缓解后的复发，和第二原发性癌症（其是在具有与后一种癌症不同类型的既往癌症病史的人中的新的原发性癌症）。

在本文中提供的方法的某些实施方案中，异常细胞生长是癌症，其中所述癌症选自膀胱癌、乳腺癌、子宫颈癌、结肠癌、前列腺癌、肺癌（包括nsclc和sclc）、食道癌、头颈癌、鳞状细胞癌、结直肠癌、肾癌、肾细胞癌（rcc）、肝癌、胰腺癌、胃癌、甲状腺癌、急性髓性白血病（aml）、骨髓增生异常综合征（mds）、黑色素瘤、神经纤维瘤病和肝细胞癌、子宫内膜癌、肺癌、食道癌、卵巢癌、胰腺癌、皮肤癌、胃癌和睾丸癌；和血源性癌症，包括但不限于白血病和淋巴瘤。

剂型和施用途径

本发明的另一方面涉及药物组合物，其包括有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐，包括本发明的有效载荷、本发明的有效载荷连接基团化合物、和/或其抗体药物缀合物和药学上可接受的载体（carrier）或介质（vehicle）。在某些实施方案中，该组合物适用于兽医学或人施用。

本发明的药物组合物可以是允许将组合物施用给患者的任何形式。例如，该组合物可以是以固体或液体形式的。施用可以是全身性的或局部的。典型的施用途径包括但不限于口服、肠胃外、眼部、肿瘤内十二指肠内途径、局部和直肠施用。肠胃外施用包括皮下注射、静脉内、肌内或胸骨内注射或输注技术。在一个方面，所述组合物是肠胃外施用的。在一个具体实施方案中，所述组合物是静脉内施用的。

可以配制药物组合物，从而使得本发明的化合物在将该组合物施用于患者后是生物可利用的。组合物可以采用一种或多种剂量单位形式，其中例如片剂可以是单一剂量单位，并且液体形式的本发明化合物的容器可以容纳多个剂量单位。或者，已知各种递送系统，例如包封在脂质体、微颗粒、微胶囊、胶囊等中，并且可用于施用本发明的化合物。在某些实施方案中，将多于一种的本发明化合物施用于患者。

用于制备所述药物组合物的材料在所用量下可以是无毒的。对于本领域普通技术人员显而易见的是，该药物组合物中一种或多种活性成分的最佳剂量将取决于多种因素。相关因素包括但不限于动物的类型（例如人）、本发明化合物的特定形式、施用方式和所用的组合物。

药学上可接受的载体（carrier）或介质（vehicle）可以是固体或颗粒，因此该组合物例如是片剂或粉末形式。所述一种或多种载体可以是液体。另外，所述一种或多种载体可以是颗粒状的。载体和/或赋形剂的选择在很大程度上取决于下述因素，诸如特定的施用方式、赋形剂对溶解度和稳定性的影响、以及剂型的性质。

合适的药物载体包括惰性稀释剂或填充剂，水和各种有机溶剂（如水合物和溶剂化物）。如果需要，该药物组合物可含有额外成分，例如调味剂、粘合剂、赋形剂等。赋形剂的实例包括但不限于碳酸钙、磷酸钙、各种糖和淀粉类型、纤维素衍生物、明胶、植物油和聚乙二醇。当需要口服施用含水悬浮液或酏剂时，其中的活性化合物可与各种甜味剂或调味剂、色素或染料组合，如果需要，还可与乳化剂或悬浮剂，以及稀释剂如水、乙醇、丙二醇、甘油或其组合相结合。

药物组合物可以，例如，呈适于口服施用的形式，如片剂、胶囊、丸剂、粉末、缓释制剂、溶液混悬剂；呈适于肠胃外注射的形式，如无菌溶液、混悬剂或乳剂；呈适于局部施用的形式，如软膏或乳膏；或呈适于直肠施用的形式，如栓剂。

示例性肠胃外施用形式包括在无菌水溶液（例如丙二醇水溶液或葡萄糖水溶液）中的活性化合物的溶液或混悬剂。如果需要，这样的剂型可以适当地缓冲。

药物组合物可以是适合单次施用精确剂量的单位剂型。

适用于递送本发明化合物的药物组合物及其制备方法对于本领域技术人员而言是容易地显而易见的。这样的组合物及其制备方法可以在例如'remington'spharmaceuticalsciences'，第19版（mackpublishingcompany，1995）中找到，其公开内容通过引用以其全文并入本文中。

本发明化合物可以口服施用。口服施用可能涉及吞咽，以使得化合物进入胃肠道，或者可以使用颊内或舌下施用，由此化合物从口腔直接进入血流中。

适于口服施用的制剂包括固体制剂，如片剂，含有颗粒、液体或粉末的胶囊，锭剂（包括填充液体的），咀嚼片，多-和纳米-颗粒，凝胶，固体溶液，脂质体，薄膜（包括粘膜粘合剂），胚珠（ovule），喷雾剂和液体制剂。

用于口服施用的固体制剂可以配制成立即和/或修饰释放的。修饰释放制剂包括延迟-、持续-、脉冲-、控制-、靶向和程序释放。合适的修饰释放的制剂描述于美国专利no.6,106,864中。其它合适的释放技术如高能分散体和渗透和涂覆颗粒的细节可以在verma等人，pharmaceuticaltechnologyon-line，25（2），1-14（2001）中找到。在wo00/35298中描述了使用咀嚼胶来实现控制释放。这些参考文献的公开内容通过引用以其全文并入本文中。

液体制剂包括混悬剂、溶液、乳剂、糖浆和酏剂。此类制剂可用作软或硬胶囊中的填充剂，并且通常包括载体，例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纤维素或合适的油，和一种或多种乳化剂和/或助悬剂。液体制剂也可以通过将固体（例如得自药囊的）重构来制备。在通过注射施用的组合物中，还可以包括一种或多种表面活性剂、防腐剂、润湿剂、分散剂、助悬剂、缓冲剂、稳定剂和等渗剂。

在某些实施方案中，药学上可接受的载体可以是液体，如水和油，包括石油、动物、植物或合成来源的那些。载体可以是盐水等。此外，可以使用助剂、稳定剂和其它试剂。在一个实施方案中，当施用给患者时，所述化合物或缀合物和药学上可接受的载体是无菌的。当静脉内施用所述化合物或缀合物时，水是示例性载体。盐水溶液和葡萄糖水溶液和甘油溶液也可用作液体载体，特别是用于可注射溶液。如果需要，本发明的组合物还可含有少量的润湿剂或乳化剂，或ph缓冲剂。合适的药物载体的其它实例描述于e.w.martin的“"remington'spharmaceuticalsciences”中。

液体组合物，无论它们是溶液、混悬剂或其它类似形式，还可包括下列中的一种或多种：无菌稀释剂，如注射用水，盐水溶液，优选生理盐水，林格氏溶液，等渗氯化钠，固定油如可用作溶剂或悬浮介质的合成的甘油单-或二酯，聚乙二醇，甘油，环糊精，丙二醇或其它溶剂；抗菌剂，如苄醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂，如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂，如乙二胺四乙酸；缓冲剂如乙酸盐，柠檬酸盐，磷酸盐或氨基酸和调节张力的试剂，如氯化钠或葡萄糖。肠胃外组合物可以包封在由玻璃、塑料或其它材料制成的安瓿、一次性注射器或多剂量小瓶中。生理盐水是示例性佐剂。可注射组合物优选是无菌的。

用于肠胃外施用的制剂可以配制成立即和/或修饰释放的。修饰释放的制剂包括延迟-、持续-、脉冲-、控制-、靶向和程序释放。因此，本发明的化合物可以配制成固体、半固体或触变液体，用于作为提供活性化合物的修饰释放的植入贮库施用。这样的制剂的实例包括药物涂覆的支架和pgla微球。

在一个实施方案中，本发明的化合物根据常规程序配制成适于静脉内施用给动物（特别是人）的药物组合物。通常，用于静脉内施用的载体（carriers）或介质（vehicles）是无菌等渗缓冲水溶液。必要时，该组合物还可包括增溶剂。用于静脉内施用的组合物可任选地包含局部麻醉剂，如利多卡因，以缓解注射部位的疼痛。通常，成分单独地提供或以单位剂量形式混合在一起，例如，作为在气密密封的容器（例如写明活性剂的量的安瓿或小药囊）中的干燥的冻干粉末或无水浓缩物。在本发明化合物将通过输注施用的情况下，其可以例如用含有无菌药用级水或盐水的输注瓶分配。在本发明化合物通过注射施用的情况下，可以提供一安瓿的无菌注射用水或盐水，以便可以在施用前混合成分。

在某些实施方案中，可能需要将一种或多种本发明化合物局部施用于需要治疗的区域。这可以，例如，而非以限制的方式，通过下述来实现：手术期间的局部输注；局部施用，例如与手术后的伤口敷料结合；通过注射；借助于导管；或者借助于植入物，所述植入物是多孔的、无孔的或凝胶状的材料，包括膜，如硅橡胶膜或纤维。在一个实施方案中，施用可以是通过直接注射在癌症、肿瘤或肿瘤组织或肿瘤前组织的部位（或原位置）处。在另一个实施方案中，施用可以是通过直接注射在自身免疫疾病的表现的部位（或原位置）处。

本发明的化合物还可以用于快速溶解、快速崩解的剂型，如在liang和chen（2001）的expertopinionintherapeuticpatents,11(6),981-986中描述的那些，其公开内容通过引用以其全文并入本文中。

在另一个实施方案中，本发明的化合物可以在控释系统中递送，例如但不限于泵或可以使用的各种聚合物材料。在另一个实施方案中，控释系统可以放置在本发明化合物的靶附近，例如肝脏，因此仅需要全身剂量的一部分（参见，例如，goodson，在medicalapplicationsofcontrolledrelease,supra,卷2,第115-138页(1984)中）。可以使用在langer的综述（science249：1527-1533（1990））中讨论的其它控释系统。

组合物还可包括改变固体或液体剂量单位的物理形式的各种材料。例如，组合物可包括在活性成分周围形成涂层壳的材料。形成涂层壳的材料通常是惰性的，并且可以选自，例如，糖、虫胶和其它肠溶包衣剂。或者，可以将活性成分包裹在明胶胶囊中。

有效治疗特定病症或状况的本发明化合物的量将取决于病症或状况的性质，并且可通过标准临床技术来确定。此外，可任选地使用体外或体内测定来帮助识别最佳剂量范围。组合物中使用的精确剂量还将取决于施用途径和疾病或病症的严重性，并且应根据从业者的判断和每个患者的情况来决定。可以调整剂量方案以提供最佳所需响应。例如，可以施用单次大剂量，可以随时间施用几个分开的剂量，或者可以如治疗情况的紧急程度所指示的按比例减少或增加剂量。对于易于施用和剂量均匀而言，以剂量单位形式配制肠胃外组合物是特别有利的。如本文中所用，剂量单位形式指适合作为待治疗的哺乳动物主体用的单一剂量的物理上离散的单元；每个单元含有预定量的经计算与所需药物载体相结合产生所需治疗效果的活性化合物。本发明的剂量单位形式的规格由下述规定并直接取决于它们：（a）化学治疗剂的独特特征和要实现的特定治疗或预防效果，和（b）在配混这样的用于个体敏感性治疗的活性化合物的领域中固有的局限性。

因此，基于本文中提供的公开，技术人员将理解，剂量和给药方案根据治疗领域中熟知的方法进行调整。也就是说，可以容易地确定最大可耐受剂量，并且还可以确定向患者提供可检测的治疗益处的有效量，以及施用每种药剂以向患者提供可检测的治疗益处的时间要求。因此，虽然本文中举例说明了某些剂量和施用方案，但这些实施例绝不限制可在实施本发明时提供给患者的剂量和施用方案。

应注意，剂量值可随待缓解的状况的类型和严重程度而变化，并且可包括单剂量或多剂量。应进一步理解，对于任何特定主体，应根据个体需要和施用或监督组合物施用的人的专业判断随时间调整特定剂量方案，并且本文中所述的剂量范围仅仅是示例性的，而并非意在限制所要求保护的组合物的范围或实践。例如，可以基于药代动力学或药效动力学参数来调整剂量，其可以包括临床效果，如毒性效果和/或实验室值。因此，本发明包括由技术人员确定的患者内剂量递增。确定用于施用化学治疗剂的合适剂量和方案在相关领域中是熟知的，并且一旦提供本文中公开的教导，则将被本领域技术人员理解是被涵盖的。

施用的本发明化合物的量取决于所治疗的主体、病症或状况的严重程度、施用率、化合物的配置和处方医师的判断。通常，施用于患者的本发明化合物的剂量通常为约0.001mg/kg至约20mg/kg患者体重。在一个方面中，施用于患者的剂量为约0.001mg/kg至约10mg/kg患者体重之间。在另一方面中，施用于患者的剂量为约0.01mg/kg至约10mg/kg患者体重之间。在另一方面中，施用于患者的剂量为约0.01mg/kg至约5mg/kg患者体重之间。在另一方面中，施用于患者的剂量为约0.01mg/kg至约3mg/kg患者体重之间。在另一方面中，施用于患者的剂量为约0.1mg/kg至约3mg/kg患者体重之间。

对于静脉内给药，该组合物可包含每kg患者体重约0.001至约100mg的本发明化合物。在一个方面中，该组合物可包括每kg患者体重约0.01至约100mg的本发明化合物。在另一方面中，施用量将在约0.01至约25mg/kg体重的本发明化合物的范围内。

组合物包含有效量的本发明化合物，从而获得合适的剂量。通常，该量为组合物重量的至少约0.001％的本发明化合物。在一个示例性实施方案中，制备药物组合物，以使得肠胃外剂量单位含有约0.001％至约2％重量的本发明化合物的量。

无论是固体还是液体形式，本发明的组合物可包括第二活性药物成分，包括例如用于治疗癌症的药理学试剂。

在一个方面中，本发明还涉及药物组合物，其包含有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐，药学上可接受的稀释剂、载体或赋形剂，并且进一步包含治疗有效量的另一药物活性成分。在一个实施方案中，所述额外的药物活性成分是抗癌剂。在一个实施方案中，所述额外的药物活性成分是化学治疗剂。在一个实施方案中，所述额外的药物活性成分是免疫肿瘤学药剂。

各部分的试剂盒

由于可能需要施用活性化合物的组合，例如，为了治疗特定疾病或状况，两种或更多种药物组合物(其中至少一种包含根据本发明的化合物)可以方便地以适于共同施用组合物的试剂盒的形式来组合，这在本发明的范围内。因此，本发明的试剂盒包括两种或更多种分开的药物组合物，其中至少一种含有本发明的化合物，和用于分别保存所述组合物的方式，例如容器、分开的瓶子或分开的箔包。这样的试剂盒的一个实例是用于包装片剂、胶囊等的常见的泡罩包装。

本发明的试剂盒特别适用于施用不同的剂型，例如口服和肠胃外，用于以不同的剂量间隔施用分开的组合物，或用于将分开的组合物相互通过滴定法测量。为了有助于顺应性，该试剂盒通常包括用药指南并且可提供记忆辅助。

组合疗法

癌症，包括但不限于肿瘤、转移或其它以不受控制的细胞生长为特征的疾病或病症，可以通过施用本发明化合物来治疗或抑制。

在一个实施方案中，本发明涉及本发明的化合物或其药学上可接受的盐与另一种药物活性成分的组合。在一个实施方案中，所述额外的药物活性成分是抗癌剂。

如本文中所用的，术语“组合疗法”指将本发明的化合物和至少一种额外的药物或药剂（例如抗癌剂）一起施用，相继地或同时地。

如上所述，本发明的化合物可与一种或多种额外的抗癌剂组合使用。当使用组合疗法时，所述一种或多种额外的抗癌剂可以与本发明的化合物相继或同时施用。在一个实施方案中，在施用本发明的化合物之前，将所述额外的抗癌剂施用于哺乳动物（例如人）。在另一个实施方案中，在施用本发明的化合物之后，将所述额外的抗癌剂施用于哺乳动物。在另一个实施方案中，在施用本发明的化合物的同时将所述额外的抗癌剂施用于哺乳动物（例如人）。

在其它实施方案中，提供了用于治疗癌症的方法，包括向有此需要的患者施用有效量的本发明化合物和抗癌剂。在一个实施方案中，所述抗癌剂是化学治疗剂。在一个实施方案中，所述化学治疗剂是用其治疗癌症尚未发现难以治愈的化学治疗剂。在另一个实施方案中，所述化学治疗剂是用其治疗癌症已经发现难以治愈的化学治疗剂。本发明的化合物可以施用给也经历过手术作为癌症治疗的患者。

在本发明的一个实施方案中，与本发明的化合物和本文中所述药物组合物联合使用的抗癌剂是抗血管生成剂（例如，阻止肿瘤发展新血管的药剂）。抗血管生成剂的实例包括例如vegf抑制剂、vegfr抑制剂、tie-2抑制剂、pdgfr抑制剂、血管生成素抑制剂、pkcβ抑制剂、cox-2(环加氧酶ii)抑制剂、整合素(α-v/β-3)、mmp-2(基质-金属蛋白酶2)抑制剂、和mmp-9(基质-金属蛋白酶9)抑制剂。

优选的抗血管生成剂包括舒尼替尼(sunitinib)(sutent™)、贝伐单抗(bevacizumab)(avastin™)、阿西替尼(axitinib)(ag13736)、su14813(pfizer)和ag13958(pfizer)。

额外的抗血管生成剂包括凡塔蓝尼(vatalanib)(cgp79787)、索拉非尼(sorafenib)(nexavar™)、派加替尼八钠(pegaptaniboctasodium)(macugen™)、凡德他尼(vandetanib)(zactima™)、pf-0337210(pfizer)、su14843(pfizer)、azd2171(astrazeneca)、兰比珠单抗(ranibizumab)(lucentis™)、neovastat™(ae941)、四硫莫里德塔(tetrathiomolybdata)(coprexa™)、amg706(amgen)、vegftrap(ave0005)、cep7055(sanofi-aventis)、xl880(exelixis)、特拉替尼(telatinib)(bay57-9352)和cp-868,596(pfizer)。

其它抗血管生成剂包括恩扎妥林(enzastaurin)(ly317615)、米哚妥林(midostaurin)(cgp41251)、哌立福新(perifosine)(krx0401)、替普瑞酮(teprenone)(selbex™)和ucn01(kyowahakko)。

可与本发明的化合物和本文中所述的药物组合物结合使用的抗血管生成剂的其它实例包括塞来昔布(celecoxib)(celebrex™)、帕瑞昔布(parecoxib)(dynastat™)、德拉昔布(deracoxib)(sc59046)、氯美昔布(lumiracoxib)(preige™)、戊地昔布(valdecoxib)(bextra™)、罗非昔布(rofecoxib)(vioxx™)、艾拉莫德(iguratimod)(careram™)、ip751(invedus)、sc-58125(pharmacia)和依他昔布(etoricoxib)(arcoxia™)。

其它抗血管生成剂包括依昔舒林(exisulind)(aptosyn™)、双水杨酸酯(salsalate)(amigesic™)、二氟尼柳(diflunisal)(dolobid™)、布洛芬(ibuprofen)(motrin™)、酮洛芬(ketoprofen)(orudis™)、萘丁美酮(nabumetone)(relafen™)、吡罗昔康(piroxicam)(feldene™)、萘普生(naproxen)(aleve™、naprosyn™)、双氯芬酸(diclofenac)(voltaren™)、吲哚美辛(indomethacin)(indocin™)、舒林酸(sulindac)(clinoril™)、托美丁(tolmetin)(tolectin™)、依托度酸(etodolac)(lodine™)、酮咯酸(ketorolac)(toradol™)和奥沙普嗪(oxaprozin)(daypro™)。

其它抗血管生成剂包括abt510(abbott)、阿雷司他(apratastat)(tmi005)、azd8955(astrazeneca)、英赛林德(incyclinide)(metastat™)和pck3145(procyon)。

其它抗血管生成剂包括阿曲汀(acitretin)(neotigason™)、普利肽新(plitidepsin)(aplidine™)、希伦泰德(cilengtide)(emd121974)、考布他汀a4(combretastatina4)(ca4p)、非瑞替尼(fenretinide)(4hpr)、卤夫酮(halofuginone)(tempostatin™)、panzem™(2-甲氧基雌二醇)、pf-03446962(pfizer)、瑞马司他(rebimastat)(bms275291)、卡托莫西单抗(catumaxomab)(removab™)、来那度胺(lenalidomide)(revlimid™)、角鲨胺(squalamine)(evizon™)、沙利度胺(thalidomide)(thalomid™)、ukrain™(nsc631570)、vitaxin™(medi522)和唑来膦酸（zoledronicacid）(zometa™)。

在另一个实施方案中，所述抗癌剂是所谓的信号转导抑制剂（例如，抑制控制细胞生长、分化和存活的基本过程的调节分子在细胞内传递信息的方式）。信号转导抑制剂包括小分子、抗体和反义分子。信号转导抑制剂包括例如激酶抑制剂（例如，酪氨酸激酶抑制剂或丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂）和细胞周期抑制剂。更具体地，信号转导抑制剂包括，例如，法呢基蛋白转移酶抑制剂、egf抑制剂、erbb-1(egfr)、erbb-2、panerb、igf1r抑制剂、mek、c-kit抑制剂、flt-3抑制剂、k-ras抑制剂、pi3激酶抑制剂、jak抑制剂、stat抑制剂、raf激酶抑制剂、akt抑制剂、mtor抑制剂、p70s6激酶抑制剂、wnt途径的抑制剂和所谓的多靶点激酶抑制剂。

优选的信号转导抑制剂包括吉非替尼(gefitinib)(iressa™)、西妥昔单抗(cetuximab)(erbitux™)、厄洛替尼(erlotinib)(tarceva™)、曲妥珠单抗(trastuzumab)(herceptin™)、舒尼替尼(sunitinib)(sutent™)、伊马替尼(imatinib)(gleevec™)和pd325901(pfizer)。

可与本发明化合物和本文中所述的药物组合物结合使用的信号转导抑制剂的另外的实例包括bms214662(bristol-myerssquibb)、洛那法尼(lonafarnib)(sarasar™)、培利曲索(pelitrexol)(ag2037)、马妥珠单抗(matuzumab)(emd7200)、尼妥珠单抗(nimotuzumab)(theracimh-r3™)、帕尼单抗(panitumumab)(vectibix™)、凡德他尼(vandetanib)(zactima™)、帕佐泮尼(pazopanib)(sb786034)、alt110(alteristherapeutics)、bibw2992(boehringeringelheim)和cervene™(tp38)。

信号转导抑制剂的其它实例包括pf-2341066(pfizer)、pf-299804(pfizer)、卡奈替尼(canertinib)(ci1033)、帕妥珠单抗(pertuzumab)(omnitarg™)、拉帕替尼(lapatinib)(tycerb™)、培利替尼(pelitinib)(ekb569)、米替福新(miltefosine)(miltefosin™)、bms599626(bristol-myerssquibb)、lapuleucel-t(neuvenge™)、neuvax™(e75癌症疫苗)、osidem™(idm1)、木利替尼(mubritinib)(tak-165)、cp-724,714(pfizer)、帕尼单抗(panitumumab)(vectibix™)、拉帕替尼(lapatinib)(tycerb™)、培利替尼(pelitinib)(ekb569)和帕妥珠单抗(pertuzumab)(omnitarg™)。

信号转导抑制剂的其它实例包括arry142886(arraybiopharm)、依维莫司(everolimus)(certican™)、佐他莫司(zotarolimus)(endeavor™)、替西罗莫司(temsirolimus)(torisel™)、ap23573(ariad)和vx680(vertex)。

另外，其它信号转导抑制剂包括xl647(exelixis)、索拉非尼(sorafenib)(nexavar™)、le-aon(georgetownuniversity)和gi-4000(globelmmune)。

其它信号转导抑制剂包括abt751(abbott)、阿昔迪布(alvocidib)(夫拉平度(flavopiridol))、bms387032(bristolmyers)、em1421(erimos)、依地苏兰(indisulam)(e7070)、塞利希布(seliciclib)(cyc200)、bio112(onebio)、bms387032(bristol-myerssquibb)、巴勃希布(palbocyclib)(pd0332991，pfizer)、克卓替尼(crizotinib)(pfizer)和ag024322(pfizer)。

本发明考虑将本发明化合物与传统的抗肿瘤剂一起使用。传统的抗肿瘤剂包括但不限于激素调节剂，如激素、抗激素、雄激素激动剂、雄激素拮抗剂和抗雌激素治疗剂，组蛋白脱乙酰酶（hdac）抑制剂，基因沉默剂或基因活化剂，核糖核酸酶，蛋白质组（proteosomics），拓扑异构酶i抑制剂，喜树碱衍生物，拓扑异构酶ii抑制剂，烷基化剂，抗代谢物，聚（adp-核糖）聚合酶-1（parp-1）抑制剂，微管蛋白抑制剂，抗生素，植物来源的纺锤体抑制剂，铂配位化合物，基因治疗剂，反义寡核苷酸，血管靶向剂（vta）和他汀类药物。

与本发明化合物、任选与一或多种其它药剂组合使用的传统抗肿瘤剂的实例包括但不限于糖皮质激素，如地塞米松(dexamethasone)、泼尼松(prednisone)、泼尼松龙(prednisolone)、甲泼尼龙(methylprednisolone)、氢皮质酮(hydrocortisone)，和孕酮，如甲羟孕酮(medroxyprogesterone)、乙酸甲地孕酮(megestrolacetate)(megace)、米非司酮(mifepristone)(ru-486)，选择性雌激素受体调节剂(serm；诸如他莫昔芬(tamoxifen)、雷洛昔芬(raloxifene)、拉索昔芬(lasofoxifene)、阿非昔芬(afimoxifene)、阿佐昔芬(arzoxifene)、巴多昔芬(bazedoxifene)、非培米芬(fispemifene)、奥美昔芬(ormeloxifene)、奥培米芬(ospemifene)、替米利芬(tesmilifene)、托瑞米芬(toremifene)、曲洛司坦(trilostane)和chf4227(cheisi))，选择性雌激素-受体下调剂(serd；如氟维司群(fulvestrant))、依西美坦(exemestane)(阿诺新(aromasin))、阿那曲唑(anastrozole)(阿丽米克斯(arimidex))、阿他美坦(atamestane)、法屈唑(fadrozole)、来曲唑(letrozole)(弗隆(femara))、促性腺激素释放激素(gnrh；通常也称为促黄体激素-释放激素[lhrh])促效剂，如布舍瑞林(buserelin)(苏普法克特(suprefact))、戈舍瑞林(goserelin)(诺雷德(zoladex))、亮丙瑞林(leuprorelin)(抑那通(lupron))和曲普瑞林(triptorelin)(亮丙星(trelstar))、阿巴瑞克(abarelix)(普来纳西(plenaxis))、比卡鲁胺(bicalutamide)(康士得(casodex))、环丙孕酮(cyproterone)、氟他胺(flutamide)(欧立新(eulexin))、甲地孕酮(megestrol)、尼鲁胺(nilutamide)(尼兰曲隆(nilandron))，和奥沙特隆(osaterone)、度他雄胺(dutasteride)、爱普列特(epristeride)、非那雄安(finasteride)、赛润瑞潘(serenoarepens)、phl00801、阿巴瑞克(abarelix)、戈舍瑞林(goserelin)、亮丙瑞林(leuprorelin)、曲普瑞林(triptorelin)、比卡鲁胺(bicalutamide)、他莫昔芬(tamoxifen)、依西美坦(exemestane)、阿那曲唑(anastrozole)、法屈唑(fadrozole)、福美司坦(formestane)、来曲唑(letrozole)及其组合。

与本发明化合物组合使用的传统抗肿瘤剂的其它实例包括但不限于辛二酰苯胺异羟肟酸(suberolanilidehydroxamicacid,saha,merckinc./atonpharmaceuticals)、缩肽(fr901228或fk228)、g2m-777、ms-275、丁酸特戊酰氧基甲酯和pxd-101；豹蛙酶(onconase)(兰派拉斯(ranpirnase))、ps-341(mln-341)、万珂(velcade)(硼替佐米(bortezomib))、9-氨基喜树碱、贝洛替康(belotecan)、bn-80915(roche)、喜树碱、二氟替康(diflomotecan)、艾特咔林(edotecarin)、依喜替康(exatecan)(daiichi)、吉马替康(gimatecan)、10-羟基喜树碱、伊立替康盐酸盐(irinotecanhcl)(开普拓(camptosar))、勒托替康(lurtotecan)、奥拉热星(orathecin)(卢比替康(rubitecan)、苏普金(supergen))、sn-38、拓朴替康(topotecan)、10-羟基喜树碱、伊立替康(irinotecan)、sn-38、艾特咔林(edotecarin)、拓朴替康(topotecan)、阿柔比星(aclarubicin)、阿德力霉素(adriamycin)、胺萘非特(amonafide)、胺柔比星(amrubicin)、安纳霉素(annamycin)、道诺霉素(daunorubicin)、阿霉素(doxorubicin)、依沙芦星(elsamitrucin)、表柔比星(epirubicin)、依托泊苷(etoposide)、伊达比星(idarubicin)、加柔比星(galarubicin)、羟基脲(hydroxycarbamide)、奈莫柔比星(nemorubicin)、诺安托(novantrone)(米托蒽醌(mitoxantrone))、吡柔比星(pirarubicin)、匹蒽醌(pixantrone)、丙卡巴肼(procarbazine)、蝴蝶霉素(rebeccamycin)、索布佐生(sobuzoxane)、塔呋泊苷(tafluposide)、伐柔比星(valrubicin)、新内卡(zinecard)(右雷佐生(dexrazoxane))、氮芥n-氧化物、环磷酰胺、amd-473、六甲蜜胺、ap-5280、阿帕兹酮(apaziquone)、布洛利辛(brostallicin)、苯达莫司汀(bendamustine)、白消安(busulfan)、卡波醌(carboquone)、卡莫司汀(carmustine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、达卡巴嗪(dacarbazine)、雌莫司汀(estramustine)、福莫司汀(fotemustine)、葡磷酰胺(glufosfamide)、异环磷酰胺(ifosfamide)、kw-2170、洛莫司汀(lomustine)、马磷酰胺(mafosfamide)、氮芥（mechlorethamine）、美法仑(melphalan)、二溴甘露醇(mitobronitol)、二溴卫矛醇(mitolactol)、丝裂霉素c(mitomycinc)、米托蒽醌(mitoxatrone)、尼莫司汀(nimustine)、雷莫司汀(ranimustine)、替莫唑胺(temozolomide)、噻替派(thiotepa)，和铂配位烷基化化合物，如顺铂、铂尔定(paraplatin)(卡铂(carboplatin))、依铂(eptaplatin)、洛铂(lobaplatin)、奈达铂(nedaplatin)、艾洛汀(eloxatin)(奥沙利铂(oxaliplatin)，sanofi)、链脲菌素(streptozocin)、萨特铂(satrplatin)及其组合。

本发明也考虑将本发明化合物与下述一起使用：二氢叶酸还原酶抑制剂(诸如甲胺喋呤和neutrexin(葡萄糖醛酸曲美特撒(trimetresateglucuronate)))、嘌呤拮抗剂(诸如6-巯基嘌呤核糖苷、巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、克拉屈滨(cladribine)、氯法拉滨(clofarabine，clolar)、氟达拉滨(fludarabine)、奈拉滨(nelarabine)和雷替曲塞(raltitrexed))、嘧啶拮抗剂(诸如5-氟尿嘧啶(5-fu)、爱宁达(alimta)(培美曲塞二钠、ly231514、mta))、卡培他滨(capecitabine，xeloda™)、胞嘧啶阿拉伯糖苷、gemzar™(吉西他滨(gemcitabine)，elililly)、替加氟(tegafur)(uftorzel或uforal和包括替加氟(tegafur)、吉美斯塔(gimestat)和欧特斯塔(otostat)的ts-1组合)、脱氧氟尿苷（doxifluridine）、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(包括十八烷基磷酸盐（ocfosfate）、磷酸盐硬脂酸盐，持续释放和脂质形式)、依诺他滨(enocitabine)、5-氮杂胞嘧啶核苷（5-azacitidine，vidaza)、地西他滨(decitabine)和乙炔基胞嘧啶核苷)及其它抗代谢物，诸如依氟鸟胺酸(eflornithine)、羟基脲、四氢叶酸(leucovorin)、诺拉曲特(nolatrexed)(thymitaq)、三安平(triapine)、曲美沙特(trimetrexate)、n-(5-[n-(3,4-二氢-2-甲基-4-氧代喹唑啉-6-基甲基)-n-甲基氨基]-2-噻吩甲酰基)-l-谷氨酸、ag-014699(pfizerinc.)、abt-472(abbottlaboratories)、ino-1001(inotekpharmaceuticals)、ku-0687(kudospharmaceuticals)和gpi18180(guilfordpharminc)及其组合。

与本发明化合物、任选与一或多种其它药剂组合使用的传统抗肿瘤细胞毒性剂的实例包括但不限于白蛋白结合型紫杉醇(abraxane)(abraxisbioscience,inc.)、巴他布林(batabulin)(amgen)、epo906(novartis)、长春氟宁(vinflunine)(bristol-myerssquibbcompany)、放线菌素d(actinomycind)、博莱霉素(bleomycin)、丝裂霉素c(mitomycinc)、新制癌菌素(neocarzinostatin)(净司他丁(zinostatin))、长春碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)、长春地辛(vindesine)、长春瑞宾(vinorelbine)(诺维本(navelbine))、多烯紫杉醇(docetaxel)(泰索帝(taxotere))、奥他赛(ortataxel)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)(包括taxoprexin，dha/太平洋紫杉醇缀合物)、顺铂、卡铂、奈达铂、奥沙利铂（oxaliplation）(艾洛汀(eloxatin))、赛特铂(satraplatin)、开普拓(camptosar)、卡培他滨(希罗达（xeloda）)、奥沙利铂(艾洛汀)、taxoterealitretinoin、堪佛司非米德(canfosfamide)(telcyta™)、dmxaa(antisoma)、伊班膦酸、l-天冬酰胺酶、培门冬酶(oncaspar™)、乙丙昔罗（efaproxiral）(efaproxyn™-放射疗法))、贝瑟罗汀(bexarotene)(targretin™)、替米利芬(tesmilifene)(dppe-提高细胞毒剂功效))、theratope™(biomira)、维甲酸(tretinoin)(vesanoid™)、替拉扎明(tirapazamine)(trizaone™)、莫特沙芬钆(motexafingadolinium)(xcytrin™)cotara™(mab)和nbi-3001(protoxtherapeutics)、多聚谷氨酸盐-紫杉醇(polyglutamate-paclitaxel)(xyotax™)及其组合。

与本发明化合物、任选与一或多种其它药剂组合使用的传统抗肿瘤剂的进一步的实例包括但不限于advexin(ing201)、tnferade(genevec，一种响应放射治疗表达tnfα的化合物)、rb94(baylorcollegeofmedicine)、genasense(奥利默森(oblimersen),genta)、考布他汀a4p(combretastatina4p)(ca4p)、oxi-4503、ave-8062、zd-6126、tzt-1027、阿托伐他汀(atorvastatin)(lipitor,pfizerinc.)、普伐他汀(provastatin)(pravachol,bristol-myerssquibb)、洛伐他汀(lovastatin)(mevacor,merckinc.)、辛伐他汀(simvastatin)(zocor,merckinc.)、氟伐他汀(fluvastatin)(lescol,novartis)、西立伐他汀(cerivastatin)(baycol,bayer)、罗素他汀(rosuvastatin)(crestor,astrazeneca)、洛伐他汀(lovostatin)、烟酸(advicor,kospharmaceuticals)、多达一(caduet)、立普妥(lipitor)、托彻普(torcetrapib)及其组合。

本发明也考虑将本发明化合物与免疫调节剂（例如免疫抑制剂或免疫增强剂）一起使用。这样的药剂的实例包括但不限于pd-l1拮抗剂或抑制剂，诸如抗-pd-1抗体。这样的抗pd-l1抗体的实例可包括，例如，阿维鲁单抗（avelumab）(先前的msb0010718c，merck/pfizer)或以引用的方式并入的记载在wo2013/079174a1和us2014/0241917中的抗体(merck)，或medi4736(astrazeneca)[记载在wo2011/066389和us2013/034559中]，或拉立珠单抗(lambrolizumab)。这样的药剂的实例也可包括ctla-4抗体、针对肿瘤坏死因子(tnf)受体4-1bb和ox40的抗体(例如抗-ox-40抗体或抗-4-1bb抗体)、抗癌抗原疫苗、p-钙黏素lp-双重亲和力再靶向蛋白（p-cadherinlp-dual-affinityre-targetingprotein）或另一抗体药物缀合物。在一个实施方案中，所述免疫调节剂是抗-ctla4抗体，例如曲美单抗(tremelimumab)(先前的cp-675,206，完全人igg2mab)；伊派利单抗(ipilimumab)(mdx-0120；medarex；bristol-myerssquibb。在另一方面中，第二活性剂是p53癌症疫苗、p53表位疫苗和其它癌症疫苗(例如活化树突状细胞)。

在一些实施方案中，患者也接受额外的治疗，诸如放射疗法。在一特定实施方案中，本发明化合物与化学治疗剂或与放射疗法同时施用。在另一特定实施方案中，在施用本发明化合物之前或之后施用化学治疗剂或放射疗法。

化学治疗剂可经一系列阶段来施用。可施用任何一种化学治疗剂或其组合，诸如一或多种护理化学治疗剂的标准物。

此外，提供用本发明化合物治疗癌症的方法作为化学疗法或放射疗法的替代方法，其中所述化学疗法或放射疗法已证实或可证实对于所治疗的主体而言毒性过大，例如产生不可接受或不可忍受的副作用。所治疗的患者可以任选用其它癌症疗法来治疗，诸如手术、放射疗法或化学疗法，取决于何种疗法被发现是可接受的或可忍受的。

本发明的化合物也可以以体外或离体方式来使用，诸如用于治疗某些癌症，包括但不限于白血病和淋巴瘤，这样的治疗涉及自体干细胞移植。这可涉及多步骤过程，其中收集动物的自体造血干细胞并清除所有癌细胞，然后将动物的剩余骨髓细胞群体经由伴随或不伴随高剂量放射疗法下施用高剂量的本发明化合物来根除，并且将干细胞移植物输注回动物中。然后提供支持性护理，同时使骨髓功能复原且患者恢复。

本发明的化合物及其抗体药物缀合物的合成

本发明的化合物和缀合物可使用以下实施例中所概述的合成方法来制备。

如下文更详细地描述的，本发明的化合物和缀合物可使用具有用于与该化合物结合的反应性位点的连接基团单元的部分来制备。

用于adcs的常规缀合方法包括通过赖氨酸侧链胺的化学改性，或通过还原链间二硫键活化的半胱氨酸巯基的化学改性。mylotarg，贝伦妥单抗维多汀（brentuximabvedotin）和kadcyla®（阿多曲妥珠单抗恩他新（ado-trastuzumabemtansine）是使用这些常规方法的adcs的实例。

也已研究了使用转谷氨酰胺酶和/或分选酶用于制备adcs的酶促方法。转谷氨酰胺酶属于催化酰基加成到伯胺的酶家族。使用转谷氨酰胺酶的缀合提供了高选择性、简化的反应方法和温和的反应条件的优点。参见，例如，strop等人，chemistry＆biology，20:161-167(2013)；和farias等人,bioconj.chem.25(2):240-250(2014)。us2013-0230543和us2013-0122020描述了转谷氨酰胺酶-介导的抗体和小分子的位点特异性缀合。

与转谷氨酰胺酶的缀合

在某些实施方案中，可以在转谷氨酰胺酶存在下将本发明的化合物与含有fc或含有fab的多肽共价交联，所述多肽用含有酰基供体谷氨酰胺的标签（例如，含有gln的肽标签或q标签）或通过多肽工程改造（例如，通过氨基酸缺失、插入、取代、突变或它们在该多肽上的任何组合）而具有反应性（即，在胺和转谷氨酰胺酶存在下形成作为酰基供体的共价键的能力）的内源性谷氨酰胺来工程改造，条件是，本发明的化合物包含胺供体剂（例如，包含反应性胺或与反应性胺连接的小分子），从而形成稳定且均质的工程改造的含有fc的多肽缀合物群，其中胺供体剂通过含有酰基供体谷氨酰胺的标签或暴露/可接近/反应性的内源性谷氨酰胺与含有fc或含有fab的多肽位点特异性缀合。例如，本发明的化合物可以如系列号pct/ib2011/054899的国际专利申请中所述般共轭，将其全部内容通过引用并入本文中。在某些实施方案中，为促进本发明化合物在转谷氨酰胺酶存在下与用含有酰基供体谷氨酰胺的标签或通过多肽工程改造或通过本领域技术人员已知的其它方法例如去糖基化而具有反应性的内源性谷氨酰胺工程改造的含有fc或含有fab的多肽缀合，z是nh2。

与人轻链κ结构域恒定区缀合

在某些实施方案中，本发明的化合物可以共价连接至人轻链κ结构域恒定区（clκ）的k¹⁸⁸的侧链（根据kabat的全轻链编号）。例如，本发明的化合物可以如美国专利申请系列号13/180,204或wo2012/007896中所述般被缀合，其全部内容通过引用并入本文中。在某些实施方案中，为了促进与k188clκ（clκ-k80）的缀合，z是；r⁷对于每次出现独立地选自f、cl、i、br、no2、cn和cf3；并且h是1、2、3、4或5。在某些实施方案中，为了促进与k¹⁸⁸clκ（clκ-k80）的缀合，z是

与包含琥珀酰亚胺的连接基团（包括开环变体（version））的缀合

在一个可选实施方案中，本发明的化合物可以通过基于琥珀酰亚胺的连接基团或基于开环的琥珀酰亚胺的连接基团缀合。

在以下实施例中进一步描述本发明，这些实施例并非旨在限制本发明的范围。

范例

实验通常在惰性气氛（氮气或氩气）下进行，特别是在使用氧气-或湿度-敏感试剂或中间体的情况下。通常使用商业溶剂和试剂而无需进一步纯化，包括合适的无水溶剂（通常得自aldrichchemicalcompany，milwaukee，wisconsin的sure-seal^tm产品）。产物通常在真空下干燥，然后进行进一步反应或进行生物试验。质谱数据来自液相色谱-质谱（lcms或lc-ms）、大气压化学电离（apci）或气相色谱-质谱（gcms）仪器。核磁共振（nmr）数据的化学位移以百万分率（ppm，δ）表示，参照所用氘代溶剂的残余峰。

对于参考其它实施例或方法中的程序的合成，反应方案（反应时长和温度）可以变化。通常，反应之后进行薄层色谱法（tlc）或质谱和/或lcms，并在适当时进行后处理。纯化可以在实验之间变化：通常，对用于洗脱液/梯度的溶剂和溶剂比进行选择以提供合适的rf或保留时间。

使用acdlabs软件生成化合物名称。

用于分析的分析型lc-ms、hplc和gc条件：

分析型lc-ms条件:

方法1:phenomenexlunac18(2),150x3.0mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.1%甲酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.1%甲酸(v/v)；梯度：经5分钟20%至100%b，然后100%b保持0.5分钟，然后梯度：经0.5分钟100%至20%b；流速：1.5ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；ms(+)范围200-2000道尔顿；注射体积：10μl；仪器：agilent1100hplc。

方法2:phenomenexlunac18(2),150x3.0mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.1%甲酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.1%甲酸(v/v)；梯度：经5分钟20%至100%b，然后梯度：经0.5分钟100%至20%b；流速：1.5ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；ms(+)范围200-2000道尔顿；注射体积：10μl；仪器：agilent1100hplc。

方法3:phenomenexlunac18(2),150x3.0mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.1%甲酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.1%甲酸(v/v)；梯度：经8分钟20%至95%b，然后经2分钟100%b；流速：1ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；ms(+)范围200-2000道尔顿；注射体积：10μl；仪器：agilent1100hplc。

方法4:watersacquityuplchsst3,c18,2.1x50mm,1.7µm；流动相a:在水中的0.1%甲酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.1%甲酸(v/v)；梯度：经0.1分钟5%b,经2.5分钟5%至95%b,经0.35分钟95%b；流速：1.25ml/分钟。温度：60℃；检测：200-450nm；ms(+)范围100-2000道尔顿；注射体积：5μl；仪器：watersacquity。

方法5:watersacquityuplcbeh,2.1mmx50mm,c18,1.7µm；流动相a:在水中的0.1%甲酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.1%甲酸(v/v)；梯度：经0.1分钟5%b,经0.7分钟5%至95%b,经0.1分钟95%b；流速：1.25ml/分钟。温度：60℃；检测：200-450nm；ms(+)范围100-1200道尔顿；注射体积：5μl；仪器：watersacquity。

方法6:phenomenexlunac18(2),150x3.0mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.1%甲酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.1%甲酸(v/v)；梯度：经3分钟20%至100%b，然后100%b保持0.25分钟；流速：2.0ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；ms(+)范围200-3000道尔顿；注射体积：5μl；仪器：agilent1260hplc。

方法7:phenomenexlunac18(2),150x3.0mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.1%甲酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.1%甲酸(v/v)；梯度：经8分钟20%至100%b，然后100%b保持2分钟；流速：2.0ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；ms(+)范围200-3000道尔顿；注射体积：5μl；仪器：agilent1260hplc。

方法8:watersuplcbehc18,2.1x150mm,1.7μm柱；流动相a:在水中的0.1%甲酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.1%甲酸(v/v)；梯度：经11.5分钟5%至95%b；流速：0.25ml/分钟。温度：40℃（c）；检测：与acquityuplc偶联的waterssynaptg2质谱仪；注射体积：2ul。

方法9:chromolithrp-18e,25x2mm柱；流动相a:在水中的0.038%三氟乙酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.016%三氟乙酸(v/v)；梯度：经0.7分钟5%至95%b，之后用95%b等度洗脱0.4分钟；流速：1.5ml/分钟。温度：50℃（c）；检测：dad220nm；ms(+)范围0-1000；注射体积：3μl；仪器：shimadzulc-2010。

方法10:phenomenexlunac18(2),150x4.6mm,5μm柱；流动相a:10mm磷酸盐缓冲液,ph7；流动相b:在乙腈中的0.02%乙酸(v/v)；梯度：经10分钟20%至95%b；流速：1.0ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；ms(+)范围200-3000道尔顿；注射体积：5μl；仪器：agilent1260hplc。

方法11:phenomenexlunac18(2),150x3.0mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.1%甲酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.1%甲酸(v/v)；梯度：经5分钟20%至100%b，然后梯度：经0.5分钟100%至20%b；流速：1.5ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；ms(+)范围200-3000道尔顿；注射体积：5μl；仪器：agilent1260hplc。

方法12:watersacquityuplchsst3,c18,2.1x50mm,1.7µm；流动相a:在水中的0.1%甲酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.1%甲酸(v/v)；梯度：经0.1分钟5%b,经1.0分钟5%至95%b,经0.35分钟95%b；流速：1.25ml/分钟。温度：60℃；检测：200-450nm；ms(+)范围100-2000道尔顿；注射体积：5μl；仪器：watersacquity。

方法13:柱:chromolithflashrp-18e25-2mm；流动相a:在水中的0.04三氟乙酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.02%三氟乙酸(v/v)；梯度：经0.7分钟5%至95%b,经0.4分钟95%b；流速：1.5ml/min；温度：50℃；检测：esi,uv220nm；ms(+)范围:0-1000道尔顿:注射体积：0.5-2μl；仪器：shimadzu2010。

方法14:柱:xbridgeshieldrp185μm,2.1×50mm；流动相a:在水中的0.1%甲酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.1%甲酸；梯度：经3分钟0%至95%溶剂b,经1分钟95%b；流速：1ml/min；离子源:esi；离子模式:正；雾化气体:氮气；干燥气体:氮气；流速:5l/min；雾化器压力:30psig；气体温度：325℃；毛细管电压:3.5kv；碎裂电压:50v；仪器：agilentg1969a。

方法18:phenomenexlunac18(2),150x3.0mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.1%甲酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.1%甲酸(v/v)；经0.5分钟10%b，然后梯度：经4分钟10%至100%b，然后经0.25分钟100%b；流速：1.5ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；ms(+)范围200-3000道尔顿；注射体积：5μl；仪器：agilent1260hplc。

分析型高效液相色谱法(hplc)条件:

方法15:柱:ymc-packods-a150×4.6mm,5μm；流动相a:在水中的0.1%三氟乙酸；流动相b:在乙腈中的0.1%三氟乙酸；梯度：经10分钟0%至95%溶剂b,经5分钟95%；流速：1.0ml/分钟；温度：30℃；仪器：agilent1100hplc-bg。

方法16:柱:atlantishilicsilica150×4.6mm,5μm；流动相a:在水中的0.1%三氟乙酸；流动相b:在乙腈中的0.1%三氟乙酸；梯度：经10分钟100%至70%溶剂b,经5分钟70%；流速：1.0ml/分钟；温度：30℃；仪器：agilent1100hplc-bg。

分析性气相色谱法(gc)条件:

方法17:柱:hp-530m×0.32mm×0.25umfilm；载气:氮气；总流量:153.3/min；分流:1:100；注射器:250℃；检测器(fid):300℃；柱温：40℃(2min)至250℃(2min),速率=15℃/min；注射体积：2-3μl；仪器：shimadzugc-2010gc-c。

用于纯化的制备型hplc条件:

方法a:phenomenexlunac18,100x30mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.02%乙酸和2.5%乙腈(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.02%乙酸(v/v)；梯度：经20分钟20%至90%b；流速：20ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；注射体积：至多5ml。仪器：gilson215。

方法b:phenomenexlunac18,100x30mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.02%乙酸和2.5%乙腈(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.02%乙酸(v/v)；梯度：经20分钟20%至95%b；流速：20ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；注射体积：至多5ml。仪器：gilson215。

方法c:phenomenexlunac18,100x30mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.02%乙酸和2.5%乙腈(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.02%乙酸(v/v)；梯度：经20分钟10%至90%b；流速：20ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；注射体积：至多5ml。仪器：gilson215。

方法d:phenomenexlunac18,100x30mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.02%乙酸和2.5%乙腈(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.02%乙酸(v/v)；梯度：经20分钟20%至100%b；流速：20ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；注射体积：至多5ml。仪器：gilson215。

方法e:phenomenexlunac18,100x30mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.02%乙酸和2.5%乙腈(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.02%乙酸(v/v)；梯度：经20分钟10%至80%b；流速：20ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；注射体积：至多5ml。仪器：gilson215。

方法f:phenomenexlunac18,100x30mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.02%乙酸和2.5%乙腈(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.02%乙酸(v/v)；梯度：经20分钟20%至80%b；流速：20ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；注射体积：至多5ml。仪器：gilson215。

方法g:phenomenexlunac18,100x30mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.02%乙酸和2.5%乙腈(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.02%乙酸(v/v)；梯度：经20分钟10%至95%b；流速：20ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；注射体积：至多5ml。仪器：gilson215。

方法h:phenomenexlunac18,100x30mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.02%乙酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.02%乙酸(v/v)；梯度：经20分钟15%至95%b；流速：20ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；注射体积：至多5ml。仪器：gilson215。

方法i:phenomenexlunac18,150x30mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.02%乙酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.02%乙酸(v/v)；梯度：经20分钟5%至100%b；流速：20ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；注射体积：至多5ml。仪器：gilson215。

方法j:phenomenexlunac18,100x30mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.02%三氟乙酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.02%乙酸(v/v)；梯度：经12分钟5%至60%b；流速：20ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；注射体积：至多5ml。仪器：gilson215。

方法k:phenomenexlunac18,100x30mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.02%三氟乙酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.02%乙酸(v/v)；梯度：经12分钟25%至100%b；流速：20ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；注射体积：至多5ml。仪器：gilson215。

方法l:phenomenexlunac18,100x30mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.02%三氟乙酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.02%乙酸(v/v)；梯度：经12分钟20%至100%b；流速：20ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；注射体积：至多5ml。仪器：gilson215。

方法m:phenomenexlunac18,100x30mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.02%乙酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.02%乙酸(v/v)；梯度：经20分钟30%至100%b；流速：20ml/分钟。温度：未控制；检测：dad210,254nm；注射体积：至多5ml。仪器：gilson215。

方法n:watersxbridgeprepobdc18,100x19mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.1%三氟乙酸(v/v)；流动相b:在乙腈中的0.1%三氟乙酸(v/v)；梯度：经10分钟23%至43%b；流速：25ml/分钟。温度：未控制。

方法o:durashellc18,150x25mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.05%氢氧化铵水溶液(v/v)；流动相b:乙腈；梯度：经10分钟5%至35%b,经2分钟35%b；流速：25ml/分钟。温度：未控制。

方法p:durashellc18,150x25mm,5μm柱；流动相a:在水中的0.05%氢氧化铵水溶液(v/v)；流动相b:乙腈；梯度：经10分钟51%至71%b,经2分钟71%b；流速：30ml/分钟。温度：未控制。

连接基团、硫醇和关键中间体的制备：

n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酸(l1)的制备

步骤1:n-(叔丁氧基羰基)-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酸的合成

将n-(叔丁氧基羰基)-l-缬氨酸2,5-二氧代吡咯烷-1-基酯(1.0g,3.18mmol)在二甲氧基乙烷(8ml)中的溶液添加到n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酸在四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后加入碳酸氢钠(282mg,3.34mmol)在水(8ml)中的水溶液，并将所得悬浮液在室温下搅拌4天。然后加入柠檬酸水溶液(15%溶液,100ml)并用乙酸乙酯和2-丙醇的混合物(10:1,2x100ml)萃取该混合物。合并的萃取物用水(2x100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并浓缩得到黏稠的无色油状物。然后用乙醚研磨此油状物，得到1.1g(92%)的所需产物，为白色固体，将其不经进一步纯化直接用于下一步骤中。lc-msm/z373.5[m-h⁺]；保留时间=1.89分钟(方法1)

步骤2:l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酸的合成

在5℃，向n-(叔丁氧基羰基)-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酸(1g,2.67mmol)在干燥的二氯甲烷(10ml)中的搅拌的悬浮液中添加三氟乙酸(6ml)。将混合物温热至室温，然后搅拌3h。然后将混合物浓缩，并将所得残余物用叔丁基甲基醚洗涤并过滤，得到1.15g所需粗产物，为白色固体，其不经进一步纯化直接使用。

步骤3:n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酸(l1)的合成

向l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酸(200mg,0.515mmol)和n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酸2,5-二氧代吡咯烷-1-基酯(261mg,0.515mmol)在二甲氧基乙烷-水-四氢呋喃的混合物(1:1:2,40ml)中的搅拌的溶液中添加碳酸氢钠(108mg,1.29mmol)，并将该混合物在室温下搅拌～20h。然后通过添加盐酸水溶液将混合物酸化至ph2(ph试纸)并用乙酸乙酯-2-丙醇的混合物(10:1，3×50ml)萃取。合并的萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩且所得残余物通过反相色谱法(方法n)纯化。将含有产物的级分冻干，以提供44mg(13%)的所需产物(l1)，为白色固体。lc-msm/z667.1[m-h⁺]；保留时间=0.752分钟(方法9)。

n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(五氟苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺(l2)的制备

步骤1:n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-(羟基甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺的合成

在室温，向n²-乙酰基-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-(羟基甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺(参见国际专利申请pct/ib2013/059553，2014年5月8日作为wo2014/068443公开，其内容通过引用以其全文并入本文中)(370.0mg，0.557mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(8ml)中的溶液中添加9-芴基甲基氯甲酸酯(173mg，0.669mmol)和n,n-二异丙基乙胺(216mg，1.67mmol，0.291ml)。在室温下将反应混合物搅拌2h。将乙醚(10ml)引入到反应混合物中且通过过滤收集白色固体，得到410mg(95%)的所需产物，为白色固体。lc-msm/z772.5[m-h⁺]；保留时间=1.42分钟(方法4)。

步骤2:n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(五氟苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺的合成

在室温，向n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-(羟基甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺(349mg,0.491mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中的溶液中添加双(五氟苯基)碳酸酯(387mg，0.982mmol)，并随后添加n,n-二异丙基乙胺(0.342ml，0.96mmol)。在室温下搅拌反应混合物2h。粗反应混合物通过反相hplc(方法h)纯化。将含有产物的级分立即冻干，得到132mg(27%)的所需产物(l2)，为白色固体。lc-msm/z982.6[m-h⁺]；保留时间=2.10分钟(方法4)。

(21-氧代-3,6,9,12,15,18-六氧杂二十一碳-1-基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯(l3)的制备

步骤1:(21-羟基-3,6,9,12,15,18-六氧杂二十一碳-1-基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯的合成

在0℃，将硼烷二甲基硫醚复合物在四氢呋喃(188ul,0.375mmol)中的2.0m溶液添加到1-(9h-芴-9-基)-3-氧代-2,7,10,13,16,19,22-七氧杂-4-氮杂二十五烷-25-酸(108mg,0.188mmol)在四氢呋喃中的溶液中。在三小时之后，将甲醇(2ml)添加至反应混合物中，随后添加饱和氯化铵水溶液(1ml)，以淬灭过量试剂。在一小时之后，用乙酸乙酯(75ml)稀释反应混合物，并用水(25ml)和盐水(25ml)洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层，过滤且浓缩，得到110mg所需产物。lc-msm/z562.3[m+h⁺]；保留时间=1.02分钟(方法5)。

步骤2:(21-氧代-3,6,9,12,15,18-六氧杂二十一碳-1-基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯的合成

将氯铬酸吡啶鎓(87mg，0.39mmol)和硅胶(82mg)的混合物添加到(21-羟基-3,6,9,12,15,18-六氧杂二十一碳-1-基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯(110mg，0.16mmol)在二氯甲烷中的溶液中。在6小时之后，过滤反应混合物并用1n盐酸水溶液洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层，过滤并浓缩。残余物通过硅胶色谱法(在二氯甲烷中的0至10%甲醇)纯化。浓缩含有产物的级分，得到61mg所需产物(l3)。lc-msm/z560.3[m+h⁺]；保留时间=1.12分钟(方法5)。

[2-(2-{2[(碘乙酰基)氨基]乙氧基}乙氧基)乙基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯(l4)的制备

在冰水浴中，将氯化碘乙酸(744mg,3.64mmol)添加到{2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙基}氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯(674mg,1.82mmol)和三甲胺(1840mg,18.2mmol,2.48ml)在四氢呋喃(20ml)和二氯甲烷(8ml)中的溶液中。搅拌内容物2小时，然后减压蒸发，再溶解在乙酸乙酯(40ml)中并用盐酸(0.5m,2x20ml)、碳酸氢钠饱和水溶液(2x20ml)萃取和经无水硫酸镁干燥。粗反应混合物通过正相硅胶色谱法纯化，用在庚烷中的10%-100%乙酸乙酯经20柱体积进行洗脱。将含有产物的级分减压蒸发，获得370mg(38%)所需产物(l4)。lc-msm/z539.0[m+h⁺]；保留时间=0.88分钟(方法5)。

(3-氨基丙基)(4-{[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基](3-{[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙基)氨基}丁基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯(l5)的制备

步骤1:[3-({4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基}氨基)丙基]氨基甲酸叔丁基酯的合成

将净的（neat）碳酸叔丁基酯苯酯(284mg,271ul,1.46mmol)添加到n,n'-双(3-氨基丙基)丁-1,4-二胺(296.0mg,1.46mmol)在乙醇(2.0ml)中的溶液中，并在搅拌下将内容物加热至回流18小时。在真空下使反应混合物浓缩成淡黄色-无色油状物且通过反相hplc(方法j)纯化。将含有产物的级分冻干，获得221mg(23%)所需产物。lc-msm/z303.3[m+h⁺]；保留时间=0.26分钟(方法5)。也获得73mg(8%)的(2,2-二甲基-4-氧代-3-氧杂-5,9,14-三氮杂十七烷-17-基)氨基甲酸叔丁基酯；lc-msm/z403.4[m+h⁺]；保留时间=0.47分钟(方法5)。

步骤2:{9,14-双[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-2,2-二甲基-4-氧代-3-氧杂-5,9,14-三氮杂十七烷-17-基}氨基甲酸-9h-芴-9-基甲酯的合成

将9-芴基甲氧基甲酰氯(66.0mg，0.255mmol)添加到[3-({4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基}氨基)丙基]氨基甲酸叔丁基酯(47mg，0.073mmol)和n,n-二异丙基乙胺(56.5mg，0.438mmol，76.1μl)在n,n-二甲基乙酰胺(500.0μl)中的搅拌溶液中。在3小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法k)纯化。将含有产物的级分冻干，获得66mg(93%)所需产物。lc-msm/z991.6[m+na⁺]；保留时间=1.33分钟(方法5)。

步骤3:(3-氨基丙基)(4-{[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基](3-{[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙基)氨基}丁基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯的合成

将{9,14-双[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-2,2-二甲基-4-氧代-3-氧杂-5,9,14-三氮杂十七烷-17-基}氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯(65mg，0.067mmol)溶解在含有三氟乙酸(0.5ml)的二氯甲烷(2.5ml)的搅拌溶液中。在1小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法k)纯化。将含有产物的级分冻干，获得64mg(97%)所需产物(l5)。lc-msm/z869.5[m+h⁺]；保留时间=0.99分钟(方法5)。

n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n-(3-{(4-{(3-氨基丙基)[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丁基)[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙基)-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酰胺(l6)的制备

步骤1:丁烷-1,4-二基双({3-[(叔丁氧基羰基)氨基]丙基}氨基甲酸)双(9h-芴-9-基甲酯)的合成

将9-芴基甲氧基甲酰氯(62.0mg,0.24mmol)添加到(2,2-二甲基-4-氧代-3-氧杂-5,9,14-三氮杂十七烷-17-基)氨基甲酸叔丁基酯(72mg,0.11mmol)和n,n-二异丙基乙胺(148mg,1.14mmol,199ul)在n,n-二甲基乙酰胺(1000ul)中的搅拌溶液中。在3小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法k)纯化。将含有产物的级分减压蒸发，获得所需产物(96mg，99%)。lc-msm/z869.5[m+na⁺]；保留时间=1.23分钟(方法5)。

步骤2:丁烷-1,4-二基双[(3-氨基丙基)氨基甲酸]双(9h-芴-9-基甲酯)

将丁烷-1,4-二基双({3-[(叔丁氧基羰基)氨基]丙基}氨基甲酸)双(9h-芴-9-基甲酯)(90mg，0.11mmol)溶解在二氯甲烷(4ml)和三氟乙酸(1ml)的搅拌溶液中。在1小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法k)纯化。将含有产物的级分减压蒸发，获得所需产物(79mg，86%)。lc-msm/z647.5[m+h⁺]；保留时间=0.69分钟(方法5)。

步骤3:n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n-(3-{(4-{(3-氨基丙基)[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丁基)[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙基)-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酰胺的合成

向丁烷-1,4-二基双[(3-氨基丙基)氨基甲酸]双(9h-芴-9-基甲酯)(37.8mg，0.0432mmol)的溶液添加n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酸(7.2mg,0.011mmol)、n,n,n',n'-四甲基-o-(1h-苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(4.10mg,0.0108mmol)和n,n-二异丙基乙胺(5.58mg,0.0432mmol,7.51ul)在n,n-二甲基乙酰胺(1.0ml)中的预活化溶液。在1小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法l)纯化。将含有产物的级分冻干，获得9.1mg(60%)的所需产物(l6)。lc-msm/z1295.8[m+h⁺]；保留时间=0.94分钟(方法5)。

n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n-[({4-[(3-{(4-{(3-氨基丙基)[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丁基)[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙基)氨基]苄基}氧基)羰基]-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酰胺(l7)的制备

步骤1:丁烷-1,4-二基双({3-[(叔丁氧基羰基)氨基]丙基}氨基甲酸)双(9h-芴-9-基甲酯)的合成

步骤2:丁烷-1,4-二基双[(3-氨基丙基)氨基甲酸]双(9h-芴-9-基甲酯)的合成

将丁烷-1,4-二基双({3-[(叔丁氧基羰基)氨基]丙基}氨基甲酸)双(9h-芴-9-基甲酯)(90mg,0.11mmol)溶解在二氯甲烷(4ml)和三氟乙酸(1ml)的搅拌溶液中。在1小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法k)纯化。将含有产物的级分减压蒸发，获得所需产物(79mg,86%)。lc-msm/z647.5[m+h⁺]；保留时间=0.69分钟(方法5)。

步骤3:n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n-[({4-[(3-{(4-{(3-氨基丙基)[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丁基)[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙基)氨基]苄基}氧基)羰基]-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酰胺的合成

将n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(五氟苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺(l2,7.5mg,0.0076mmol)添加到丁烷-1,4-二基双[(3-氨基丙基)氨基甲酸]双(9h-芴-9-基甲酯)(26.7mg,0.0306mmol)和n,n-二异丙基乙胺(3.95mg,0.0306mmol,5.31ul)在n,n-二甲基乙酰胺(1.0ml)中的溶液中。在1小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法l)纯化。将含有产物的级分冻干，获得9.0mg(76%)所需产物(l7)。lc-msm/z1444.9[m+h⁺]；保留时间=0.95分钟(方法5)。

2-[4-(三氟甲基)苯基]丙烷-2-硫醇(t1)的制备

将甲基氯化镁(4.0ml,12.0mmol,3.0m)在四氢呋喃中的溶液添加到甲基-4-(三氟甲基)苯甲酸酯(612mg,3.00mmol)在四氢呋喃(3.0ml)中的溶液中，并加热至50℃。在3小时之后，用1mhcl淬灭反应物并调节至ph5，接着用乙醚(3x20ml)萃取，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。接着用硫脲(685mg,9.00mmol)在三氟乙酸(5ml)中的溶液处理粗油。在3小时之后，汽提挥发物并用氢氧化钾水溶液(10ml,3.0m)处理粗残余物。在1小时之后，将溶液调节至ph5，用乙醚(2x15ml)萃取，经无水硫酸钠干燥。所得产物(t1)未经进一步纯化即可使用。lc-msm/z221.1[m+h⁺]；保留时间=1.16分钟(方法12)。

以下通过上文描述用于制备t1的程序通过适当酯的反应来制备：

t2:2-(2-氨基吡啶-3-基)丙烷-2-硫醇。lc-msm/z169.2[m+h⁺]；保留时间=0.44分钟(方法12)。

t3:4-(2-硫烷基丙-2-基)苯甲酸。lc-msm/z197.2[m+h⁺]；保留时间=0.80分钟(方法12)。

t4:2-(4-氨基苯基)丙烷-2-硫醇。

2-(2-氨基苯基)丙烷-2-硫醇(t5)的制备

将甲基氯化镁(4.0ml,12.0mmol,3.0m)在四氢呋喃中的溶液添加到甲基-2-氨基苯甲酸酯(453mg,3.0mmol)在四氢呋喃(3.0ml)中的溶液中，并加热至50℃。在3小时之后，用1mhcl淬灭反应物且调节至ph5，接着用乙醚(3x20ml)萃取，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。接着在搅拌下用硫(770mg,24.0mmol)在三氟乙酸(2.0ml)中的溶液处理粗油。在3小时之后，汽提挥发物并用在四氢呋喃中的氢化铝锂(569mg,15.0mmol,15.0ml,1.0m)处理粗残余物。在搅拌12小时之后，用ph5的柠檬酸处理溶液并用乙醚(3x50ml)萃取，经无水硫酸钠干燥。所得产物(t5)未经进一步纯化即可直接使用。lc-msm/z168.2[m+h⁺]；保留时间=0.72分钟(方法12)。

n-乙酰基-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺的制备

步骤1:n-乙酰基-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-(羟基甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺的合成

向n-乙酰基-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酸(300.0mg,0.948mmol)、4-氨基苄醇(0.140g,1.14mmol)在二氯甲烷(10.0ml)和甲醇(5ml)中的溶液中添加2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉(0.296g,1.14mmol)。在搅拌24小时之后，再添加一部分2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉(0.148g,0.57mmol)。在18小时之后，将硅胶添加到混合物中且在真空中移除溶剂；粗混合物通过正相色谱法二氯甲烷/甲醇纯化，得到75mg(19%)产物。lc-msm/z422.5[m+h⁺]；保留时间=0.51分钟(方法12)。

步骤2:n-乙酰基-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺的合成

将碳酸双(4-硝基苯酯)(108mg，0.356mmol)、三甲胺(54.0mg，0.53mmol，74μl)在n,n-二甲基乙酰胺(3.0ml)中的溶液添加到n-乙酰基-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-(羟基甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺(75.0mg,0.18mmol)中。在24小时之后，添加硅胶且真空浓缩混合物。粗混合物通过正相色谱法二氯甲烷/甲醇纯化，得到63mg(63%)产物。lc-msm/z587.4[m+h⁺]；保留时间=0.78分钟(方法12)。

n-乙酰基-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(3-甲基-3-硫烷基丁基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺(t6)的制备

将固体4-氨基-2-甲基丁烷-2-硫醇盐酸盐(5.97mg,0.0384mmol)添加到n-乙酰基-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺(15mg,0.026mmol)、n,n-二异丙基乙胺(9.91mg,0.0767mmol,13.3ul)在乙腈(2.0ml)中的悬浮液中。在24小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法l)直接纯化。将含有产物的级分冻干，提供9.7mg(67%)的所需产物(t6)。lc-msm/z567.5[m+h⁺]；保留时间=0.73分钟(方法12)。

以下通过上文描述用于制备t6的程序通过合适的氨基-硫醇与n-乙酰基-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺的反应来制备：

t7:n-乙酰基-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(4-硫烷基哌啶-1-基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺。lc-msm/z565.7[m+h⁺]；保留时间=0.65分钟(方法12)。

t8:n-乙酰基-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-{4-[({[(1r)-1-羧基-2-甲基-2-硫烷基丙基]氨基甲酰基}氧基)甲基]苯基}-l-鸟氨酰胺。lc-msm/z597.7[m+h⁺]；保留时间=0.66分钟(方法12)。

n-乙酰基-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-(3-甲基-3-硫烷基丁基)-l-鸟氨酰胺(t9)的制备

将4-氨基-2-甲基丁烷-2-硫醇盐酸盐(11.9mg,0.0765mmol)的溶液添加到n-乙酰基-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酸(22mg,0.070mmol)、n,n,n′,n′-四甲基-o-(1h-苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(26.4mg,0.0695mmol)、n,n-二异丙基乙胺(36.0mg,0.278mmol,48.4ul)在n,n-二甲基乙酰胺(400ul)中的预活化溶液中。在30分钟之后，反应混合物通过反相hplc(方法l)直接纯化。将含有产物的级分冻干，提供10.6mg(37%)的所需产物(p9)。lc-msm/z418.5[m+h⁺]；保留时间=0.60分钟(方法12)。

以下通过上文描述用于制备t9的程序通过合适的氨基-硫醇与n-乙酰基-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酸的反应来制备：

t10:n-乙酰基-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-`l-鸟氨酰基-3-硫烷基-l-缬氨酸。lc-msm/z448.5[m+h⁺]；保留时间=0.56分钟(方法12)。

4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基2,3,4-三-o-乙酰基-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯的制备

步骤1:4-甲酰基苯基2,3,4-三-o-乙酰基-β-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯的合成

向在被箔包覆的烧瓶中的溴化-2,3,4-三-o-乙酰基-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯(1.06g,2.5mmol)在乙腈(40ml)中的溶液中添加4-羟基苯甲醛(940mg,7.69mmol)，随后添加氧化银(2.82g,12.2mmol)。在黑暗中搅拌四小时之后，溶液经由硅藻土过滤，真空浓缩。将残余物溶解在乙酸乙酯(140ml)和二氯甲烷(70ml)中，并用饱和碳酸氢钠(5x100ml)、然后盐水(100ml)分配，且经硫酸镁干燥。汽提挥发物，得到1.01g(92%)的产物。lc-msm/z456.3[m+h2o⁺]；保留时间=0.76分钟(方法12)。

步骤2:4-(羟基甲基)苯基2,3,4-三-o-乙酰基-β-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯的合成

在0℃，向4-甲酰基苯基2,3,4-三-o-乙酰基-β-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯(1.0g,2.3mmol)在氯仿(20ml)和异丙醇(5ml)中的溶液中添加硅胶(500mg)和硼氢化钠(94.9mg，2.51mmol)。在30分钟之后，将溶液倾入冰水中，收集有机层，接着经由硅藻土过滤，且随后用盐水(20ml)洗涤，经硫酸镁干燥且真空浓缩。残余物用乙醚研磨，得到885mg(97%)的产物。lc-msm/z458.3[m+h2o⁺]；保留时间=0.74分钟(方法12)。

步骤3:4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基2,3,4-三-o-乙酰基-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯的合成

向4-(羟基甲基)苯基2,3,4-三-o-乙酰基-β-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯(885.0mg,2.01mmol)在四氢呋喃(15ml)和n,n-二异丙基乙胺(398mg,3.01mmol,530ul)中的溶液中添加碳酸双(4-硝基苯基酯)(1260mg，4.02mmol)。在48小时之后，真空浓缩反应物，再溶解在乙酸乙酯(50ml)中，用10%硫酸氢钠的溶液(4×30ml)、盐水(30ml)洗涤，且接着经硫酸镁干燥，并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法乙酸乙酯/庚烷洗脱剂纯化，得到1186mg(98%)的所需产物。lc-msm/z623.4[m+h2o⁺]；保留时间=0.94分钟(方法12)。

4-({[(3-甲基-3-硫烷基丁基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯基β-d-吡喃葡萄糖醛酸(t11)的制备

向4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基2,3,4-三-o-乙酰基-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯(188mg,0.310mmol)和n,n-二异丙基乙胺(81.9mg,0.621mmol,109ul)在四氢呋喃(2.0ml)和n,n-二甲基乙酰胺(1.0ml)中的溶液中添加4-氨基-2-甲基丁烷-2-硫醇盐酸盐(58.0mg,0.373mmol)。在加热至60℃持续18小时之后，用5%柠檬酸(2×25ml)和乙醚萃取内容物，并真空浓缩。将残余物溶解在冷却至0℃的四氢呋喃(5ml)中，并添加氢氧化锂(59.5mg，2.48mmol，2.48ml，1.0m)。在0℃1小时之后反应完成，并添加乙酸(150μl，8当量)，浓缩内容物且通过反相hplc纯化，得到40.4mg(29%)的所需产物(t11)。lc-msm/z444.4[m-h^-]；保留时间=0.65分钟(方法12)。

以下通过上文描述用于制备t11的程序通过合适的氨基-硫醇与4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基2,3,4-三-o-乙酰基-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯的反应来制备：

t12:4-({[(4-硫烷基哌啶-1-基)羰基]氧基}甲基)苯基β-d-吡喃葡萄糖醛酸。lc-msm/z442.4[m-h^-]；保留时间=0.64分钟(方法12)。

(1-硫烷基丙基)膦酸(t13)的制备

步骤1:(1-羟基丙基)膦酸二丙-2-基酯的合成

在-72℃，在氮气氛围下，经5分钟将在己烷中的正丁基锂溶液(2.5m,2.89ml,7.22mmol)逐滴添加到膦酸二丙-2-基酯(6.0g,36.11mmol)在干燥的四氢呋喃(60ml)中的搅拌溶液中。在30分钟之后，经10分钟将丙醛(2.88ml,39.7mmol)在四氢呋喃(10ml)中的溶液添加到反应混合物中。在一小时之后，将浓硫酸(779mg,7.94mmol)逐滴添加到反应混合物中，经10分钟使混合物温热至环境温度。浓缩反应混合物，并将残余物倾入水(100ml)中。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取混合物。将合并的萃取物用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到7g产物，其未经进一步纯化即用在下一步骤中。

步骤2:(1-羟基丙基)膦酸二丙-2-基酯的合成

将n,n-二甲基吡啶-4-胺(46.3mg,0.379mmol)添加到(1-羟基丙基)膦酸二丙-2-基酯(850mg,3.79mmol)在干燥的二氯甲烷(17ml)和三乙胺(1.32ml,9.48mmol)中的搅拌溶液中。使所得混合物冷却至0℃并添加4-硝基苯基磺酰氯(1.01g,4.55mmol)。使反应混合物温热至环境温度。在18小时之后，用二氯甲烷(50ml)稀释混合物并用盐水洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层并浓缩。残余物(1.7g)通过柱色谱法在硅胶上纯化(乙酸乙酯/石油醚，1:4至1:2)，得到830mg所需产物。lc-msm/z432.0[m+na+]；保留时间=0.854分钟(方法13)。

步骤3:(1-硫氰基丙基)膦酸二丙-2-基酯的合成

将(1-羟基丙基)膦酸二丙-2-基酯(7.7g,18.81mmol)、硫氰化钾(7.31g,75.2mmol)和18-冠-6(1.99g，7.52mmol)在乙腈(200ml)中的混合物加热至回流持续26小时。使反应混合物冷却至环境温度，并过滤。残余物用乙腈洗涤，且接着溶解在乙酸乙酯(200ml)中。用水(3×100ml)和盐水洗涤溶液。经无水硫酸钠干燥有机层并真空浓缩，得到4.57g粗产物，其未经进一步纯化即用在下一步骤中。

步骤4:(1-硫烷基丙基)膦酸二丙-2-基酯的合成

在5℃，将硼氢化钠(2.71g，71.6mmol)添加到(1-硫氰酸根合丙基)膦酸二丙-2-基酯(3.6g，14.33mmol)在乙醇(95%，80ml)中的搅拌溶液中。使反应混合物温热至环境温度。在72小时之后，用水(100ml)稀释混合物，冷却至5℃，并用盐酸水溶液(4m，40ml)淬灭过量碱。用乙酸乙酯(3×100ml)萃取反应混合物。合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶上(乙酸乙酯/石油醚，1:4至1:2)纯化，得到3.0g所需产物。

步骤5:(1-硫烷基丙基)膦酸的合成

在0℃，将溴(三甲基)硅烷(11.5ml，87.4mmol)添加到(1-硫烷基丙基)膦酸二丙-2-基酯(300mg，12.5mmol)在无水二氯甲烷(45ml)中的搅拌溶液中。使反应混合物温热至环境温度。在20小时之后，真空浓缩反应混合物。将残余物溶解在二氯甲烷/甲醇(45ml/15ml)中且搅拌2小时。真空浓缩反应混合物，得到1.94g所需产物(t13)。lc-msm/z157.0[m+h⁺](方法14)；hplc保留时间=4.30分钟(方法15)。

以下使用上文描述用于制备t13的程序通过合适的醛与膦酸二丙-2-基酯的反应来制备：

(1-硫烷基乙基)膦酸(t14)

lc-msm/z143.0[m+h⁺](方法14)；hplc保留时间=4.64分钟(方法16)。

n,n,3-三甲基-3-硫烷基丁酰胺(t15)的制备

步骤1:3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-3-甲基丁酸的合成

将3-甲基丁-2-烯酸(179g,1.78mol)添加到哌啶(276g,3.24mol)中，随后加入(4-甲氧基苯基)甲硫醇(250g,1.62mol)，同时维持在35℃的温度。将反应混合物加热至80℃。在20小时之后，将叔丁基甲基醚(1.0l)添加到混合物中，并过滤反应混合物。使残余物在乙酸乙酯(1.5l)和盐酸水溶液(1.0l,3m)的两相混合物之间分配。有机相用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩，得到338g产物，其未经纯化即直接用在下一步骤中。lc-msm/z275.9[m+na⁺]；保留时间=0.783分钟(方法13)。

步骤2:3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-n,n,3-三甲基丁酰胺的合成

将几滴n,n-二甲基甲酰胺添加到3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-3-甲基丁酸(3.5g,13.76mmol)在二氯甲烷(40ml)中的溶液中。使该溶液冷却至5℃并将草酰氯(2620mg，20.6mmol)添加到反应混合物中。在3小时之后，使反应混合物浓缩至干燥，得到粗酰氯(4.3g)。在5℃，将n,n-二甲基胺在四氢呋喃中的溶液(2m，20ml，40mmol)添加到该酰氯(2.3g，8.431mmol)在四氢呋喃(10ml)中的溶液中。在3小时之后，将乙酸乙酯(60ml)添加到反应混合物中，分离有机层并浓缩。所得残余物通过硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇，20/1)来纯化，得到1.55g所需产物，为白色固体。lc-msm/z303.9[m+na⁺]；保留时间=0.777分钟(方法13)。

步骤3:n,n,3-三甲基-3-硫烷基丁酰胺的合成

将三氟乙酸(7.5ml)添加到3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-n,n,3-三甲基丁酰胺(1.5g,5.33mmol)在甲氧基苯(3ml)中的溶液中。该反应在50℃在氢气氛围下搅拌。在20小时之后，浓缩反应物，残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯，1:0至1:1)纯化，得到310mg所需产物(t15)。lc-msm/z162.1[m+h](方法14)；gc保留时间=10.2分钟(方法17)。

以下使用上文描述用于制备t15的程序通过氢氧化铵与3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-3-甲基丁酸的反应来制备：

3-甲基-3-硫烷基丁酰胺(t16)lc-msm/z134.1[m+h⁺](方法14)；gc保留时间=9.66分钟(方法17)。

4-氨基-2-甲基丁烷-2-硫醇(t17)的制备

步骤1:3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-3-甲基丁-1-醇的合成

在10℃，将1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(71.8g,0.458mol)添加到3-甲基-3-硫烷基丁-1-醇(54g,0.449mol)和碳酸铯(146g,0.449mol)在乙腈(500ml)中的搅拌的混合物中。在2小时之后，过滤混合物并用二氯甲烷(200ml)洗涤滤饼。将残余物溶解在乙酸乙酯(600ml)中，并用氢氧化钾水溶液(2m,2x250ml)、盐水(250ml)洗涤溶液，经无水硫酸钠干燥且真空浓缩，得到103g所需粗产物，其未经纯化即直接用在下一步骤中。

步骤2:甲磺酸3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-3-甲基丁酯的合成

在10℃，在氮气氛围下，将甲磺酰氯(54g,0.47mol)逐滴添加到3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-3-甲基丁-1-醇(103g,0.478mol)和三乙胺(65g,0.64mol)在干燥的二氯甲烷(700ml)中的溶液中。在一小时之后，用水(250ml)、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤反应混合物。有机相经无水硫酸钠干燥且真空浓缩，得到135g所需产物，其未经进一步纯化即直接用在下一步骤中。

步骤3:3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-3-甲基丁-1-胺的合成

将叠氮化钠(28.1g,0.432mol)分批添加到甲磺酸3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-3-甲基丁酯(135g,423mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(600ml)中的搅拌的溶液中。将反应混合物加热至50℃。在18小时之后，将混合物倾入水(300ml)中，并用乙酸乙酯/己烷(1:1，3×500ml)萃取。合并的萃取物用水(3×500ml)、盐水(200ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并真空浓缩，得到粗叠氮化物，为黄色油状物。将三苯基膦(221g，0.844mol)添加到此粗叠氮化物在水/四氢呋喃(200ml/1400ml)中的溶液中。将反应混合物加热至30℃。在20小时之后，浓缩混合物，且残余物通过柱色谱法在硅胶上(乙酸乙酯/石油醚2:1，接着甲醇/二氯甲烷1:8)纯化，得到84g所需产物，为黄色油状物。lc-msm/z239.9[m+na⁺]；保留时间=0.669分钟(方法13)。

步骤4:4-氨基-2-甲基丁烷-2-硫醇的合成

将三氟乙酸(400ml)添加到3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-3-甲基丁-1-胺(84g,304mmol)在甲氧基苯(160ml)中的溶液中。将反应混合物加热至50℃。在20小时之后，真空浓缩混合物。将残余物溶解在水(600ml)中并用石油醚(300ml)萃取。用甲醇(400ml)稀释水层。在10℃，添加碳酸钾(84.1g，609mmol)，随后添加二碳酸二叔丁基酯(73.1g，335mmol)。在1小时之后，过滤反应混合物，并用乙酸乙酯(3×300ml)萃取滤液。合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥且真空浓缩。残余物通过柱色谱法在硅胶上(乙酸乙酯/石油醚，1:20至1:10)纯化，得到59g粗制的boc-保护的胺。在10℃，将盐酸在乙酸乙酯中的溶液(4m，500ml)添加到此boc-保护的胺(59g，268mmol)在无水叔丁基甲基醚(300ml)中的溶液中。使反应混合物温热至环境温度。在3小时之后，过滤混合物并用乙酸乙酯/叔丁基甲基醚(1:1，200ml)洗涤滤饼，得到32.4g所需产物(t17)，为白色固体(作为盐酸盐)。lc-msm/z120.1[m+h⁺](方法14)；hplc保留时间=5.22分钟(方法15)。

n-(3-甲基-3-硫烷基丁基)乙酰胺(t18)的制备

步骤1:n-{3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-3-甲基丁基}乙酰胺的合成

在0℃，将乙酰氯(0.317ml，4.46mmol)添加到3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-3-甲基丁-1-胺(970mg,4.05mmol)和三乙胺(0.843ml，6.08mmol)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中。使反应混合物温热至环境温度。在1小时之后，用饱和柠檬酸水溶液(20ml)和盐水(20ml)洗涤溶液。经无水硫酸钠干燥有机层并浓缩，得到1.1g粗产物，其未经进一步纯化即用在下一步骤中。

步骤2:n-(3-甲基-3-硫烷基丁基)乙酰胺的合成

将n-{3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-3-甲基丁基}乙酰胺(1g,4mmol)溶解在甲氧基苯(3ml)中，并将三氟乙酸(7.5ml)添加到溶液中。将反应混合物加热至50℃。在20小时之后，浓缩反应混合物，且残余物通过硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇，1:0至15:1)纯化，得到550mg所需产物(t18)。lc-msm/z162.1[m+h⁺](方法14)；gc保留时间=11.3分钟(方法17)。

n-甲基-n-(3-甲基-3-硫烷基丁基)乙酰胺(t19)的制备

步骤1:n-甲基-n-(3-甲基-3-硫烷基丁基)乙酰胺的合成

在0℃，在氮气氛围下，将n-{3-[(4-甲氧基苄基)硫烷基]-3-甲基丁基}乙酰胺(500mg,1.78mmol)在无水四氢呋喃(8.88ml)中的溶液逐滴添加到氢化钠的搅拌悬浮液(85.3mg在矿物油中的60%分散液)中。在40分钟之后，将碘甲烷(265mg，1.87mmol)添加到反应混合物中。在16小时之后，添加另一份氢化钠(85.3mg，在矿物油中的60%分散液)。在24小时之后，用水(20ml)淬灭过量氢化物试剂并用乙酸乙酯(3×20ml)萃取混合物。合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过快速柱色谱法在硅胶上(二氯甲烷/甲醇，9:1)纯化，得到粗甲基化产物。将此物质溶解在甲氧基苯(3ml)中，并将三氟乙酸(7.5ml)添加到反应混合物中，将反应混合物加热至50℃。在20小时之后，浓缩反应混合物，且残余物通过硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇1:0至15:1)纯化，得到410mg所需产物(t19)。lc-msm/z176.2[m+h⁺](方法14)；gc保留时间=11.6分钟(方法17)。

3-甲基-3-(甲基二硫烷基)丁酸的制备

步骤1:3-甲基-3-(甲基二硫烷基)丁酸的合成

将碳酸钠(1480mg,13.9mmol)添加到3-甲基-3-硫烷基丁酸(1700mg,12.67mmol)在水(15ml)中的溶液中。使反应混合物冷却至5℃，并在氮气氛围下添加甲基硫代磺酸s-甲酯(1760mg,13.9mmol)在乙醇(8ml)中的溶液。使反应混合物温热至环境温度。在18小时之后，将饱和碳酸氢钠水溶液(8ml)和水(15ml)添加到反应混合物中。将混合物真空浓缩以移除乙醇。残余物水溶液用盐酸水溶液(1m)酸化至ph2并用乙酸乙酯(2×30ml)萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶色谱法(二氯甲烷/甲醇1:0至10:1)纯化，得到1700mg所需产物。¹hnmr(400mhz,氯仿-d)δ=2.73(s,2h),2.47(s,3h),1.50(s,6h)。

4-{[(乙基{[甲基(3-甲基硫烷基丁酰基)氨基]甲基}氨基甲酰基)氧基]甲基}苯基2,3,4-三-o-乙酰基-β-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯(t20)的制备

步骤1:4-{[(乙基氨基甲酰基)氧基]甲基}苯基2,3,4-三-o-乙酰基-β-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯的合成

在0-10℃，将乙胺盐酸盐(1640mg,20.1mmol)添加到净的4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基2,3,4-三-o-乙酰基-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯(6090mg,10.06mmol)中。在三小时之后，将反应混合物倾入水(450ml)中，且水层用乙酸乙酯(2×200ml)萃取。合并的有机层用盐酸水溶液(1m)和盐水洗涤，并经无水硫酸钠干燥。将溶液浓缩，且残余物通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯1:0至0:1)纯化，得到3.5g所需产物。lc-msm/z534.1[m+na⁺]；保留时间=0.781分钟(方法13)。

步骤2:4-(9-乙基-4,4,7-三甲基-6,10-二氧代-11-氧杂-2,3-二硫杂-7,9-二氮杂十二烷-12-基)苯基2,3,4-三-o-乙酰基-β-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯的合成

在0℃，将多聚甲醛(1932mg)添加到4-{[(乙基氨基甲酰基)氧基]甲基}苯基2,3,4-三-o-乙酰基-β-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯(1288mg,2.18mmol)在二氯甲烷(25ml)中的溶液中，随后加入氯三甲基硅烷(821mg，7.55mmol)在二氯甲烷(7.5ml)中的溶液。使反应混合物温热至环境温度。在一小时之后，过滤反应混合物。在-30℃，将滤液逐滴添加到甲胺(3.90ml，2m在四氢呋喃中)在四氢呋喃(25ml)中的溶液中。在一小时之后，使反应混合物温热至0℃并添加三乙胺(1.41ml，10.1mmol)。在0℃，在单独的反应容器中，将草酰氯(843.7mg，6.51mmol)在二氯甲烷(6.5ml)中的溶液添加到3-甲基-3-(甲基二硫烷基)丁酸(960mg,5.32mmol)和痕量的二甲基甲酰胺(6滴)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中。使溶液温热至环境温度，且在一小时之后浓缩。将粗酰氯溶解在二氯甲烷(10ml)中并添加到反应混合物中。在16小时之后，使反应混合物温热至环境温度，并通过反相hplc(方法o)纯化。将含有产物的级分冻干，获得347mg所需产物。lc-msm/z739.2[m+na⁺]；保留时间=0.896分钟(方法13)。

步骤3:4-{[(乙基{[甲基(3-甲基-硫烷基丁酰基)氨基]甲基}氨基甲酰基)氧基]甲基}苯基2,3,4-三-o-乙酰基-β-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯(t20)的合成

将(2s,3s)-1,4-二硫烷基丁-2,3-二醇(68.8mg,0.447mmol)和三乙胺(0.62ml，4.47mmol)添加到4-(9-乙基-4,4,7-三甲基-6,10-二氧代-11-氧杂-2,3-二硫杂-7,9-二氮杂十二烷-12-基)苯基2,3,4-三-o-乙酰基-β-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯(160mg,0.223mmol)在甲醇(16ml)中的溶液中。在四小时之后，浓缩反应混合物，并将残余物通过反相hplc(方法p)纯化。将含有产物的级分冻干，获得40mg所需产物(t20)。lc-msm/z692.8[m+na⁺]；保留时间=0.751分钟(方法13)。

卡奇霉素有效负荷的制备:

4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p1)的制备

在-20℃，将丙烷-2-硫醇(14.6,0.186mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,5z,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-[2-(甲基三硫烷基)亚乙基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯[卡奇霉素-γ¹i](102mg,0.0745mmol)、n-(3-二甲基氨基丙基)-n′-乙基碳二亚胺盐酸盐(15mg,0.0745mmol)和三乙胺(52ul,0.373mmol)在乙腈(3ml)中的溶液中。在24小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法c)纯化。将含有产物的级分冻干，获得60mg的所需产物(p1)。lc-msm/z1364.5[m+h⁺]；保留时间=3.99分钟(方法1)。

以下通过上文描述用于制备p1的程序通过合适的硫醇与4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,5z,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-[2-(甲基三硫烷基)亚乙基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯[卡奇霉素-γ¹i]的反应来制备：

p2:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,5z,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1378.2[m+h⁺]；保留时间=3.07分钟(方法3)。

p3:2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}苯甲酸。lc-msm/z1442.3[m+h⁺]；保留时间=3.78分钟(方法1)。

p4:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]-十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1441.6[m+h⁺]；保留时间=3.75分钟(方法1)。

4-{[(2e)-2-{(1r,4z,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-4-甲基戊酸(p5)的制备

将4-甲基-4-硫烷基戊酸(6.4mg,0.043mmol)添加到2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}苯甲酸(6.5mg,0.0043mmol)和三乙胺(3.0μl,2.2mg,0.022mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(300ul)中的溶液中。在24小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法a)纯化。将含有产物的级分冻干以提供6.0mg的所需产物(p5)。lc-msm/z1436.6[m+h⁺]；保留时间=3.92分钟(方法1)。

2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}丁二酸(p6)的制备

将2-硫烷基丁二酸(1.0mg,0.0063mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(6.1mg,0.0042mmol)和三乙胺(1.2μl,0.85mg,0.0084mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(209ul)中的溶液中。在4小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法a)纯化。将含有产物的级分冻干以提供4.3mg的所需产物(p6)。lc-msm/z1438.5[m+h⁺]；保留时间=3.71分钟(方法1)。

以下通过上文描述用于制备p5或p6相同的程序通过合适的硫醇与2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}苯甲酸(p3)和/或4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]-十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p4)的反应来制备:

p7:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-6-{[(2s,5z,9r,13e)-13-{2-[(4-肼基-2-甲基-4-氧代丁-2-基)二硫烷基]亚乙基}-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1436.5[m+h⁺]；保留时间=2.26分钟(方法6)。

p8:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-{2-[(4-氨基-2-甲基丁-2-基)二硫烷基]亚乙基}-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1407.4[m+h⁺]；保留时间=1.94分钟(方法6)。

p9:2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}丙酸。lc-msm/z1394.5[m+h⁺]；保留时间=3.55分钟(方法2)。

p10:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(苯基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1398.5[m+h⁺]；保留时间=4.94分钟(方法2)。

p11:2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}丙酸乙酯。lc-msm/z1422.6[m+h⁺]；保留时间=3.92分钟(方法3)。

p12:2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-2-甲基丙酸。lc-msm/z1408.6[m+h⁺]；保留时间=4.79分钟(方法3)。

p13:4-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}苯甲酸。lc-msm/z1442.5[m+h⁺]；保留时间=3.74分钟(方法2)。

p14:(2s)-2-氨基-5-{[(2r)-1-[(羧基甲基)氨基]-3-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-1-氧代丙-2-基]氨基}-5-氧代戊酸。lc-msm/z1595.6[m+h⁺]；保留时间=2.87分钟(方法2)。

p15:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,5z,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-{2-[(1-甲基哌啶-4-基)二硫烷基]亚乙基}-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1419.3[m+h⁺]；保留时间=2.70分钟(方法3)。

p16:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(哌啶-4-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1405.4[m+h⁺]；保留时间=1.91分钟(方法6)。

p17:4-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}哌啶-1-甲酸叔丁基酯。lc-msm/z1505.5[m+h⁺]；保留时间=2.48分钟(方法6)。

p18:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(环丙基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1362.3[m+h⁺]；保留时间=5.81分钟(方法7)。

p19:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(环丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1376.3[m+h⁺]；保留时间=6.04分钟(方法7)。

p20:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(环戊基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1390.4[m+h⁺]；保留时间=6.08分钟(方法7)。

p21:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(环己基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1404.4[m+h⁺]；保留时间=6.34分钟(方法7)。

p22:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(三环[3.3.1.1~3,7~]癸-1-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1456.5[m+h⁺]；保留时间=6.71分钟(方法7)。

p23:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-{2-[(2-氰基丙-2-基)二硫烷基]亚乙基}-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1389.4[m+h⁺]；保留时间=5.79分钟(方法7)。

p24:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-{2-[(2-苯基丙-2-基)二硫烷基]亚乙基}双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1440.4[m+h⁺]；保留时间=1.92分钟(方法6)。

p25:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-(2-{[2-(2-氨基苯基)丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1455.5[m+h⁺]；保留时间=2.43分钟(方法6)。

p26:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-(2-{[2-(2-氨基吡啶-3-基)丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1456.4[m+h⁺]；保留时间=1.96分钟(方法6)。

p27:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-(2-{[2-(4-氨基苯基)丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1455.5[m+h⁺]；保留时间=2.17分钟(方法6)。

p28:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-({2-[4-(三氟甲基)苯基]丙-2-基}二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1508.4[m+h⁺]；保留时间=2.60分钟(方法6)。

p29:4-(2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}丙-2-基)苯甲酸。lc-msm/z1484.4[m+h⁺]；保留时间=2.33分钟(方法6)。

p30:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-{2-[(4-氨基-2-甲基-4-氧代丁-2-基)二硫烷基]亚乙基}-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1421.4[m+h⁺]；保留时间=2.11分钟(方法6)。

p31:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-(2-{[4-(二甲基氨基)-2-甲基-4-氧代丁-2-基]二硫烷基}亚乙基)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1449.4[m+h⁺]；保留时间=2.18分钟(方法6)。

p32:3-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-3-甲基丁酸。lc-msm/z1422.4[m+h⁺]；保留时间=2.17分钟(方法6)。

p33:(2r)-2-氨基-3-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-3-甲基丁酸。lc-msm/z1437.4[m+h⁺]；保留时间=2.03分钟(方法6)。

p34:(10s,13s,16s,19r)-10-(乙酰氨基)-16-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-19-(2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}丙-2-基)-2,2-二甲基-4,11,14,17-四氧代-13-(丙-2-基)-3-氧杂-5,12,15,18-四氮杂二十烷-20-酸。lc-msm/z1964.0[m+h⁺]；保留时间=3.10分钟(方法11)。

p35:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[(10s,13s)-10-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-5,5-二甲基-9,12,15-三氧代-13-(丙-2-基)-3,4-二硫杂-8,11,14-三氮杂十六碳-1-亚基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1705.6[m+h⁺]；保留时间=2.15分钟(方法6)。

p36:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-[2-({2-甲基-1-[(2-苯氧基乙基)氨基]丙-2-基}二硫烷基)亚乙基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1513.5[m+h⁺]；保留时间=2.20分钟(方法11)。

p37:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-{2-[(1-氨基-2-甲基丙-2-基)二硫烷基]亚乙基}-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1393.4[m+h⁺]；保留时间=2.07分钟(方法11)。

p38:3-[(2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-2-甲基丙基)氨基]丙酸。lc-msm/z1465.4[m+h⁺]；保留时间=2.15分钟(方法11)。

p39:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-(2-{[2-(2,5-二氧代咪唑烷-4-基)丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1462.3[m+h⁺]；保留时间=2.35分钟(方法11)。

p40:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-{2-[(3,5-二甲基吡啶-4-基)二硫烷基]亚乙基}-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1427.3[m+h⁺]；保留时间=2.11分钟(方法6)。

p41:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-{2-[(3r)-吡咯烷-3-基二硫烷基]亚乙基}双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1391.4[m+h⁺]；保留时间=2.07分钟(方法6)。

p42:(2r)-2-氨基-5-[(3-{[(2e)-2-{(1r,4z,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-3-甲基丁基)氨基]-5-氧代戊酸。lc-msm/z1536[m+h⁺]；保留时间=4.18分钟(方法3)。

p43:(2s)-2-氨基-6-[(4-{[(2e)-2-{(1r,4z,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-4-甲基戊酰基)氨基]己酸。lc-msm/z1565[m+h⁺]；保留时间=4.05分钟(方法3)。

p44:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-4-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1399.1[m+h⁺]；保留时间=4.44分钟(方法3)。

p45:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-{2-[(4-硝基苯基)二硫烷基]亚乙基}-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1443.5[m+h⁺]；保留时间=3.08分钟(方法3)。

p46:2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}吡啶-3-甲酸。lc-msm/z1443.4[m+h⁺]；保留时间=4.52分钟(方法3)。

p47:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-13-(2-{[(2r)-1-羟基丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1380.5[m+h⁺]；保留时间=3.01分钟(方法1)。

p48:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-{2-[(4-{(2e)-2-[1-(4-甲氧基苯基)亚乙基]肼基}-2-甲基-4-氧代丁-2-基)二硫烷基]亚乙基}-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1568.4[m+h⁺]；保留时间=2.39分钟(方法6)。

4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基{[4-({[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}甲基)苯基]氨基甲酰基}氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p49)的制备

步骤1:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基{[4-({[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}甲基)苯基]氨基甲酰基}氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

在-30℃，将n,n-二异丙基乙胺(22µl,16mg,0.12mmol)添加到(4-氨基苄基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(26.2mg,0.0761mmol)和双(五氟苯基)碳酸酯(29.5mg,0.0734mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(250ul)中的溶液中。在一小时之后，将4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,5z,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p2)(8.8mg,0.0061mmol)添加到反应混合物中，并将反应混合物温热至环境温度。在4小时之后，将该反应混合物通过反相hplc(方法m)纯化。将含有产物的级分冻干以提供6.1mg所需产物。lc-msm/z1748.6[m+h⁺]；保留时间=1.07min分钟(方法5)

步骤2:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基{[4-({[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}甲基)苯基]氨基甲酰基}氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p50)的合成

在0℃，将哌啶(3.4μl,3.0mg,0.035mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基{[4-({[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}甲基)苯基]氨基甲酰基}氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(6.1mg,0.0035mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(400ul)中的溶液中。在3.5小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法c)纯化。将含有产物的级分冻干以提供3.1mg的所需产物(p49)。lc-msm/z1526.6[m+h⁺]；保留时间=4.61分钟(方法3)。

{[(3s,4s,6s)-6-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-2-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-6-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氧基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-3-基](乙基)氨基}乙酸(p50)的制备

步骤1:{[(3s,4s,6s)-6-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-2-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-6-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氧基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-3-基](乙基)氨基}乙酸苯酯的合成

将溴乙酸苯基酯(149mg,0.695mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,5z,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p1)(99.0mg,0.070mmol)、n,n-二异丙基乙胺(89.8mg,0.695mmol,124ul)在n,n-二甲基乙酰胺(3000ul)中的溶液中并在35℃搅拌。3天之后，反应混合物通过反相hplc(方法a)纯化。将含有产物的级分冻干，获得所需产物(76.9mg,71%)。lc-msm/z1498.4[m+h⁺]；保留时间=4.71分钟(方法1)

步骤2:{[(3s,4s,6s)-6-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-2-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-6-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氧基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-3-基](乙基)氨基}乙酸的合成

将氢氧化锂水溶液(1.51mg,62.9umol,62.9ul,1.0m)添加到{[(3s,4s,6s)-6-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-2-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-6-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氧基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-3-基](乙基)氨基}乙酸苯基酯(24.5mg,15.7umol)在二甲基亚砜(1000ul)和水(300ul)中的溶液中。在30分钟之后，用乙酸(4.72mg,78.6umol,4.50ul)淬灭反应混合物，然后通过反相hplc（方法a）纯化。将含有产物的级分冻干，获得4.9mg(22%)的所需产物(p50)。lc-msm/z1422.30[m+h⁺]；保留时间=2.69分钟(方法6)。

将溴乙酸甲酯(41mg,0.267mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,5z,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p1)(19mg,0.013mmol)和n,n-二异丙基乙胺(69mg,0.534mmol,95ul)在n,n-二甲基乙酰胺(600ul)中的溶液中，并在35℃搅拌该混合物。在24小时之后，反应混合物通过反相hplc直接纯化（方法a）。将含有产物的级分冻干，获得76.9mg(71%)的所需产物(p51)。lc-msm/z1436.5[m+h⁺]；保留时间=0.88分钟(方法12)。

4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-(2-{[(2r)-1-{[(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基甲酰基]氧基}丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p52)的制备

步骤1:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,11s,13e)-9,11-二羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-[2-(甲基三硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

将硼氢化钠(2.76mg,0.0693mmol)和氯化铈(iii)七水合物(51.6mg,0.139mmol)在甲醇(400.0ul)中的溶液添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,5z,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-[2-(甲基三硫烷基)亚乙基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯[卡奇霉素-γ¹i](50.5mg,0.0370mmol)中。在2小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法f)纯化。将含有产物的级分冻干以提供18.8mg所需产物。lc-msm/z1370.3[m+h⁺]；保留时间=5.5分钟(方法7)

步骤2:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,11s,13e)-9,11-二羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-(2-硫烷基亚乙基)双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

将在水中的三(2-羧基乙基)膦溶液(30mg,100umol,200ul,0.5m)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,11s,13e)-9,11-二羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-[2-(甲基三硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(18.8mg,13.1µmol)在n,n-二甲基乙酰胺(400µl)和7.4ph磷酸盐缓冲液溶液(200μl)中的溶液中。在15分钟之后，反应混合物通过反相hplc(方法f)纯化。将含有产物的级分冻干以提供11.1mg所需产物。lc-msm/z1292.3[m+h⁺]；保留时间=2.2分钟(方法8)

步骤3:(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基甲酸(2r)-2-(吡啶-2-基二硫烷基)丙酯的合成

在环境温度，将n,n'-二异丙基乙胺(114mg,150ul,0.863mmol)添加到双(三氯甲基)碳酸酯(128mg,0.432mmol)和7-氨基-4-甲基香豆素(75.6mg,0.432mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(2.0ml)中的溶液中。在1小时之后，将该混合物添加到含(r)-2-(吡啶-2-基二硫烷基)丙-1-醇(43.6mg,0.217mmol)的烧瓶中，并将反应混合物搅拌2h，然后通过反相hplc（方法m）直接纯化。将含有产物的级分冻干以提供16.9mg的(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基甲酸(2r)-2-(吡啶-2-基二硫烷基)丙酯

步骤4:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,11s,13e)-9,11-二羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-(2-{[(2r)-1-{[(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基甲酰基]氧基}丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

将(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基甲酸(2r)-2-(吡啶-2-基二硫烷基)丙酯(1.98mg,0.00492mmol)溶解在n,n-二甲基乙酰胺(100ul)和n,n'-二异丙基乙胺(0.927mg,1.24ul,0.00703mmol)和4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,11s,13e)-9,11-二羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-(2-硫烷基亚乙基)双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(1.9mg,0.0014mmol)中。在72小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法a)纯化。将含有产物的级分冻干以提供1mg所需产物。lc-msm/z1583.4[m+h⁺]；保留时间=2.4分钟(方法8)

步骤5:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-(2-{[(2r)-1-{[(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基甲酰基]氧基}丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

将1-羟基-1,2-苯并碘氧杂戊环-3(h)-酮1-氧化物(1.36mg,2.43umol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,11s,13e)-9,11-二羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-(2-{[(2r)-1-{[(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基甲酰基]氧基}丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(非优选名称)(1.0mg,0.6µmol)在二甲基亚砜(200.0µl)中的溶液中。在6天之后，反应混合物通过反相hplc(方法a)纯化。将含有产物的级分冻干以提供0.1mg的所需产物(p52)。lc-msm/z1581.4[m+h⁺]；保留时间=5.8分钟(方法7)。

卡奇霉素连接基团-有效负荷的制备:

实施例1:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)-氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环-[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp1)的制备

步骤1:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

将n,n-二异丙基乙胺(17.6ul,13.2mg,0.100mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p1)

(35.7mg,0.0251mmol)、n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(五氟苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺(32.0mg,0.0326mmol)和3h-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(1.22mg,0.00877mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(251µl)中的溶液中。在3小时之后，将另一份3h-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(1.22mg,0.00877mmol)添加到反应混合物中。在24小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法b)纯化。将含有产物的级分冻干，获得所需产物(37.8mg)。lc-msm/z2161.7[m+h⁺]；保留时间=5.57分钟(方法1)

步骤2:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

在0℃，将哌啶(16.8ul.14.5mg,0.170mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(37.8,0.0170mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(500ul)中的溶液中。在2小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法c)纯化。将含有产物的级分冻干以提供30.1mg的所需产物(lp1)。lc-msm/z1939.8[m+h⁺]；保留时间=3.99分钟(方法1)。

实施例2:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-5-(氨基甲酰氨基)-2-{[(2s)-2-{[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,5z,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp2)的制备

将2,6-二甲基吡啶(9ul,8.41mg,0.076mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p1)

(35.7mg,0.0251mmol)、n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰基]-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺(14.2mg,0.0192mmol)和3h-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(2.67mg,0.0192mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(300ul)中的溶液中。在24小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法i)纯化。将含有产物的级分冻干，获得7.6mg的所需产物(lp2)。lc-msm/z1964[m+h⁺]；保留时间=1.8分钟(方法5)。

实施例3:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[(21-氨基-4,7,10,13,16,19-六氧杂二十一碳-1-基)(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp3)的制备

步骤1:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-{乙基[1-(9h-芴-9-基)-3-氧代-2,7,10,13,16,19,22-七氧杂-4-氮杂二十五烷-25-基]氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

将乙酸(0.9ul,1mg,0.02mmol)添加到(21-氧代-3,6,9,12,15,18-六氧杂二十一碳-1-基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯(8.7mg,0.016mmol)和4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,5z,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p2)(5.5mg,0.0040mmol)在甲醇:乙腈(1:2)混合物中的溶液中。在2小时之后，将氰基硼氢化钠(2.6mg,0.040mmol)添加到反应混合物中。在20小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法b)纯化。将含有产物的级分冻干以提供2.6mg所需产物。lc-msm/z1921.6[m+h⁺]；保留时间=5.79min分钟(方法3)

步骤2:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[(21-氨基-4,7,10,13,16,19-六氧杂二十一碳-1-基)(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

在0℃，将哌啶(2.0ul,1.7mg,0.020mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-{乙基[1-(9h-芴-9-基)-3-氧代-2,7,10,13,16,19,22-七氧杂-4-氮杂二十五烷-25-基]氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(2.6mg,0.0014mmol)在n,n-二甲基甲酰胺中的溶液中。在3小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法f)纯化。将含有产物的级分冻干以提供2.6mg的所需产物(lp3)。lc-msm/z1699.6[m+h⁺]；保留时间=1.37分钟(方法4)。

实施例4:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp4)的制备

步骤1:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

将n,n-二异丙基乙胺(13.1ul,9.83mg,0.0746mmol)添加到4-[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(27.2mg,0.0186mmol)、n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(五氟苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺(23.8mg,0.0242mmol)和3h-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(0.78mg,0.0056mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(186ul)中的溶液中。在2小时之后，将另一份3h-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(0.8mg,0.006mmol)添加到反应混合物中。在24小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法b)纯化。将含有产物的级分冻干，获得所需产物(42.1mg)。lc-msm/z2196.8[m+h⁺]；保留时间=5.30分钟(方法1)

步骤2:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

将哌啶(1.8ul,1.55mg,0.018mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯

(8.2mg,0.0036mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(200ul)中的溶液中。在1小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法c)直接纯化。将含有产物的级分冻干以提供2.4mg的所需产物(lp4)。lc-msm/z1974[m+h⁺]；保留时间=4.7分钟(方法3)。

实施例5:2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}苯甲酸(lp5)的制备

步骤1:2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}苯甲酸的合成

将n,n-二异丙基乙胺(10.1ul,7.55mg,0.0572mmol)添加到n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(五氟苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺(18.3mg,0.0186mmol)、2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}苯甲酸(p3)(21.5mg,0.0143mmol)和3h-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(0.7mg,0.005mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(143ul)中的溶液中。在3小时之后，将另一份3h-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(0.7mg,0.005mmol)添加到反应混合物中。在24小时之后，反应混合物通过反相hplc（方法b）直接纯化。将含有产物的级分冻干，获得所需产物(25.8mg)。lc-msm/z2239.8[m+h⁺]；保留时间=5.26分钟(方法1)

步骤2:2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}苯甲酸的合成

在0℃，将哌啶(3.86μl,3.33mg,0.0391mmol)添加到2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9r,12r,15r)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}苯甲酸(9mg,0.004mg)在n,n-二甲基乙酰胺中的溶液中。在2小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法c)纯化。将含有产物的级分冻干以提供7.9mg的所需产物(lp5)。lc-msm/z2017.8[m+h⁺]；保留时间=3.55分钟(方法1)。

实施例6:2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-3-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-2-甲基丙酸(lp6)的制备

将2-甲基-2-硫烷基丙酸(7.89mg,0.0591mmol)添加到2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}苯甲酸(lp5)(12.3,0.00592mmol)和三乙胺(4.12μl,2.99mg,0.0296mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(592ul)中的溶液中。在3小时之后，反应混合物通过反相hplc（方法a）直接纯化。将含有产物的级分冻干以提供10.3mg所需产物(lp6)。lc-msm/z1983.8[m+h⁺]；保留时间=5.15min分钟(方法3)。

实施例7:(2s)-5-({(2r)-3-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-1-[(羧基甲基)氨基]-1-氧代丙-2-基}氨基)-2-氨基-5-氧代戊酸(lp7)的制备

在40℃，将谷胱甘肽(6.0mg,0.019mmol)在磷酸盐缓冲的盐水水溶液(ph7.4,50ul)中的溶液添加到2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}苯甲酸(lp5)(4.0mg,0.002mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(400ul)和水(200ul)中的溶液中。在1小时之后，反应混合物通过反相hplc（方法e）直接纯化。将含有产物的级分冻干以提供3.1mg的所需产物(lp7)。lc-msm/z2171.0[m+h⁺]；保留时间=3.37min分钟(方法1)。

实施例8:4-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}苯甲酸的制备

将4-硫烷基苯甲酸(0.7mg,0.004mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(i22)

(8.1mg,0.0036mmol)和三乙胺(2.5μl,1.8mg,0.018mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(179ul)中的溶液中。在20分钟之后，将反应混合物冷却至0℃，并将哌啶(3.5ul,3.1mg,0.036mmol)添加到反应混合物中。在1.5小时之后，将该反应混合物通过反相hplc（方法a）直接纯化。将含有产物的级分冻干以提供4.1mg的所需产物(lp8)。lc-msm/z2017.8[m+h⁺]；保留时间=3.86分钟(方法1)。

实施例9:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(苯基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp9)的制备

步骤1:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(苯基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

将苯硫醇(0.17mg,0.0015mmol)在n,n-二甲基乙酰胺中的溶液添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(i22)

(5mg,0.002mmol)和三乙胺(0.62μl,0.45mg,0.004mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(100ul)中的溶液中。在1小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法d)纯化。将含有产物的级分冻干以提供1.8mg所需产物。lc-msm/z2196.0[m+h⁺]；保留时间=5.69min分钟(方法2)

步骤2:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(苯基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

在0℃，将哌啶(0.8μl,0.7mg,0.008mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(苯基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(1.8mg,0.0008mmol)在n,n-二甲基乙酰胺中的溶液中。在2小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法c)直接纯化。将含有产物的级分冻干以提供1.2mg的所需产物(lp9)。lc-msm/z1973.9[m+h⁺]；保留时间=4.01分钟(方法2)。

实施例10:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[({4-[({[(4-{[(2r)-2-{[(2r)-2-{[(2r)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}氨基)甲基]苯基}氨基甲酰基)(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp10)的制备

将n,n-二异丙基乙胺(1.0ul,0.77mg,0.0059mmol)和2,6-二甲基吡啶(1.4ul,1.3mg,0.012mmol)添加到n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺(7.3mg,0.0078mmol)、4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基{[4-({[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}甲基)苯基]氨基甲酰基}氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p49)(3.1mg,0.0020mmol)和3h-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(0.5mg,0.004mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(400ul)中的溶液中。在两小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法d)直接纯化。将含有产物的级分冻干，得到受保护的产物。固体残余物溶解在n,n-二甲基甲酰胺(500ul)中。将反应混合物冷却至0℃并加入哌啶(3.4μl,3.0mg,0.035mmol)。在2小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法c)直接纯化。将含有产物的级分冻干以提供3.0mg的所需产物(lp10)。lc-msm/z2101.7[m+h⁺]；保留时间=4.65分钟(方法3)。

以下根据实施例6的程序通过适当的硫醇与2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}苯甲酸(lp5),和/或替代地通过实施例8的程序通过适当的硫醇与4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(i22)的反应，继之以fmoc去保护来制备：

。

实施例11:lp11:2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}丙酸。lc-msm/z1969.7[m+h⁺]；保留时间=4.81min分钟(方法3)

。

实施例12:lp12:2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}丁二酸。lc-msm/z2013.9[m+h⁺]；保留时间=3.45min分钟(方法1)。

实施例13:lp13:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-6-{[(2s,9r,13e)-13-{2-[(4-肼基-2-甲基-4-氧代丁-2-基)二硫烷基]亚乙基}-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z2011.9[m+h⁺]；保留时间=3.57min分钟(方法2)。

实施例14:lp14:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,5z,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-{2-[(1-甲基哌啶-4-基)二硫烷基]亚乙基}-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1995[m+h⁺]；保留时间=3.30分钟(方法3)。

实施例15:lp15:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-6-{[(2s,9r,13e)-13-{2-[(4-氨基-2-甲基丁-2-基)二硫烷基]亚乙基}-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1984[m+h⁺]；保留时间=4.1分钟(方法3)。

实施例16:lp16:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-5-(氨基甲酰氨基)-2-{[(2s)-2-{[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,5z,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z2112[m+h⁺]；保留时间=5.3分钟(方法8)。

实施例17:lp17:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-6-{[(2s,5z,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1953.5[m+h⁺]；保留时间=3.14分钟(方法3)。

实施例18:lp18:2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}丙酸乙酯。lc-msm/z1997.8[m+h⁺]；保留时间=3.79分钟(方法1)。

实施例19:lp19:4-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-4-甲基戊酸。lc-msm/z2011.9[m+h⁺]；保留时间=3.02分钟(方法2)。

实施例20:lp20:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[2-(环己基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1979.7[m+h⁺]；保留时间=2.43分钟(方法6)。

实施例21:lp21:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(哌啶-4-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1980.7[m+h⁺]；保留时间=1.99分钟(方法6)。

实施例22:lp22:4-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}哌啶-1-甲酸叔丁基酯。lc-msm/z2080.7[m+h⁺]；保留时间=2.42分钟(方法6)。

实施例23:lp23:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(三环[3.3.1.1~3,7~]癸-1-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z2031.8[m+h⁺]；保留时间=2.55分钟(方法6)。

实施例24:lp24:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-{2-[(2-苯基丙-2-基)二硫烷基]亚乙基}双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z2015.7[m+h⁺]；保留时间=2.44分钟(方法6)。

实施例25:lp25:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-6-{[(2s,9r,13e)-13-(2-{[2-(2-氨基吡啶-3-基)丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z2031.7[m+h⁺]；保留时间=2.04分钟(方法6)。

实施例26:lp26:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-6-{[(2s,9r,13e)-13-[(10s,13s)-10-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-5,5-二甲基-9,12,15-三氧代-13-(丙-2-基)-3,4-二硫杂-8,11,14-三氮杂十六碳-1-亚基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z2280.9[m+h⁺]；保留时间=2.43分钟(方法11)。

实施例27:lp27:(2r)-3-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}-3-甲基丁酸。lc-msm/z2310.9[m+h⁺]；保留时间=2.42分钟(方法11)。

实施例28:lp28:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-6-{[(2s,9r,13e)-13-(2-{[4-({[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}氨基)-2-甲基丁-2-基]二硫烷基}亚乙基)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z2431[m+h⁺]；保留时间=2.53分钟(方法11)。

实施例29:lp29:(2r)-3-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-2-({[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}氨基)-3-甲基丁酸。lc-msm/z2461[m+h⁺]；保留时间=2.45分钟(方法11)。

实施例30:lp30:4-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}哌啶-1-甲酸4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基酯。lc-msm/z2428[m+h⁺]；保留时间=2.52分钟(方法11)。

实施例31:lp31:(2s,3s,4s,5r,6s)-6-[4-({[(4-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}哌啶-1-基)羰基]氧基}甲基)苯氧基]-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-甲酸。lc-msm/z2306.8[m+h⁺]；保留时间=2.52分钟(方法11)。

实施例32:lp32:(2s,3s,4s,5r)-6-[4-({[(3-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}-3-甲基丁基)氨基甲酰基]氧基}甲基)苯氧基]-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-甲酸。lc-msm/z2308.8[m+h⁺]；保留时间=2.54分钟(方法11)。

实施例33:lp33:(1-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}丙基)膦酸。lc-msm/z2019.6[m+h⁺]；保留时间=2.20分钟(方法6)。

实施例34:lp34:(1-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}乙基)膦酸。lc-msm/z2005.7[m+h⁺]；保留时间=2.2分钟(方法6)。

实施例35:lp35:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-6-{[(2s,9r,13e)-13-{2-[(4-氨基-2-甲基-4-氧代丁-2-基)二硫烷基]亚乙基}-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1996.7[m+h⁺]；保留时间=2.43分钟(方法11)。

实施例36:lp36:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-6-{[(2s,9r,13e)-13-(2-{[4-(二甲基氨基)-2-甲基-4-氧代丁-2-基]二硫烷基}亚乙基)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z2024.8[m+h⁺]；保留时间=2.49分钟(方法11)。

实施例37:lp37:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-6-{[(2s,9r,13e)-13-(2-{[4-(乙酰氨基)-2-甲基丁-2-基]二硫烷基}亚乙基)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z2024.7[m+h⁺]；保留时间=2.47分钟(方法11)。

以下通过根据实施例3的程序通过(21-氧代-3,6,9,12,15,18-六氧杂二十一碳-1-基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯与4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,5z,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-{2-[(1-甲基哌啶-4-基)二硫烷基]亚乙基}-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p15)的反应，继之以fmoc去保护来制备：

。

实施例38:lp38:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[(21-氨基-4,7,10,13,16,19-六氧杂二十一碳-1-基)(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-{2-[(1-甲基哌啶-4-基)二硫烷基]亚乙基}-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1740.6[m+h⁺]；保留时间=0.61min分钟(方法5)。

实施例39:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-{[2-({2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙基}氨基)-2-氧代乙基](乙基)氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-6-{[(2s,9r,13e)-13-{2-[(4-肼基-2-甲基-4-氧代丁-2-基)二硫烷基]亚乙基}-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp39)的制备：

步骤1:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-{乙基[1-(9h-芴-9-基)-3,14-二氧代-2,7,10-三氧杂-4,13-二氮杂十五烷-15-基]氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成；

将[2-(2-{2-[(碘乙酰基)氨基]乙氧基}乙氧基)乙基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯(82.0mg,0.15mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p4)(20mg,0.014mmol)、n,n-二异丙基乙胺(8.86mg,0.0685mmol,12.0ul)在n,n-二甲基乙酰胺(500ul)中的溶液中，并将内容物加热至45℃。3天之后，反应混合物通过反相hplc（方法b）直接纯化。将含有产物的级分冻干，获得所需产物(7.0mg)。lc-msm/z1809.668[m+h⁺]；保留时间=1.32分钟(方法5)

步骤2:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-{[2-({2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙基}氨基)-2-氧代乙基](乙基)氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-6-{[(2s,9r,13e)-13-{2-[(4-肼基-2-甲基-4-氧代丁-2-基)二硫烷基]亚乙基}-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp39)的合成；

将3-甲基-3-硫烷基丁酰肼(1.34mg,0.00727mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-{乙基[1-(9h-芴-9-基)-3,14-二氧代-2,7,10-三氧杂-4,13-二氮杂十五烷-15-基]氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(6.8mg,0.0036mmol)和三乙胺(1.10mg,0.0109mmol,1.49ul)在n,n-二甲基乙酰胺(0.9ml)中的溶液中。在3小时之后，添加净的哌啶(6.19mg,0.0727mmol,7.18ul)并搅拌额外的1小时。反应混合物通过反相hplc（方法b）直接纯化。将含有产物的级分冻干，获得2.8mg的所需产物(lp39)。lc-msm/z1624.7[m+h⁺]；保留时间=3.38分钟(方法1)。

实施例40:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-{[2-({2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙基}氨基)-2-氧代乙基](乙基)氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp40)的制备

步骤1:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-{乙基[1-(9h-芴-9-基)-3,14-二氧代-2,7,10-三氧杂-4,13-二氮杂十五烷-15-基]氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成；

将[2-(2-{2-[(碘乙酰基)氨基]乙氧基}乙氧基)乙基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯(83.2mg,0.154mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,5z,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p1)(22.0mg,0.015mmol)、n,n-二异丙基乙胺(20.0mg,0.154mmol,26.9ul)在n,n-二甲基乙酰胺(0.5ml)中的溶液中并加热至45℃。在5天之后，反应混合物通过反相hplc（方法b）直接纯化。将含有产物的级分冻干，获得所需产物(11.4mg)。lc-msm/z1624.7[m+h⁺]；保留时间=3.38分钟(方法1)

步骤2:将4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-{乙基[1-(9h-芴-9-基)-3,14-二氧代-2,7,10-三氧杂-4,13-二氮杂十五烷-15-基]氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(11.4mg,0.00621mmol)用n,n-二甲基乙酰胺(0.5ml)和哌啶(10.6mg,0.124mmol,12.3ul)的溶液处理。在搅拌4小时之后，反应混合物通过反相hplc（方法b）直接纯化。将含有产物的级分冻干，获得6.8mg(40%)的所需产物(lp40)。lc-msm/z1552.7[m+h⁺]；保留时间=3.69分钟(方法1)。

实施例41:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[(26-氨基-2-氧代-6,9,12,15,18,21,24-七氧杂-3-氮杂二十六碳-1-基)(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp41)的制备

将(23-氨基-3,6,9,12,15,18,21-七氧杂二十三碳-1-基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯(1.92mg,2.72umol)添加到{[(3s,4s,6s)-6-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-2-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-6-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氧基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-3-基](乙基)氨基}乙酸(p50)(3.1mg,2.1umol)、n,n,n′,n′-四甲基-o-(1h-苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.872mg,2.30umol)和n,n-二异丙基乙胺(1.35mg,10.5umol,1.82ul)在n,n-二甲基乙酰胺(500ul)中的溶液中。在15分钟之后，添加净的哌啶(7.12mg,83.6umol,8.26ul)，并搅拌额外的30分钟。反应混合物通过反相hplc（方法a）直接纯化。将含有产物的级分冻干，获得2.4mg(61%)的所需产物(lp41)。lc-msm/z1772.87[m+h⁺]；保留时间=0.75分钟(方法5)。

实施例42:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-{[(14s,17s,20s)-20-(4-氨基丁基)-14-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-2,13,16,19,22-五氧代-17-(丙-2-基)-6,9-二氧杂-3,12,15,18,21-五氮杂二十三碳-1-基](乙基)氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp42)的制备

将4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-{[2-({2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙基}氨基)-2-氧代乙基](乙基)氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp40)(1.8mg,1.1umol)添加到n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酸(l1)(0.933mg,1.40umol)、n,n,n′,n′-四甲基-o-(1h-苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.531mg,1.40umol)和n,n-二异丙基乙胺(0.695mg,5.38umol,0.936ul)在n,n-二甲基乙酰胺(200ul)的预活化溶液中。在1小时之后，添加净的哌啶(2.75mg,32.3umol,3.19ul)至反应中并使其静置额外的45分钟。然后，将反应混合物通过反相hplc（方法a）直接纯化。将含有产物的级分冻干，获得1.1mg(49%)的所需产物(lp42)。lc-msm/z1979.92[m+h⁺]；保留时间=0.72分钟(方法5)。

实施例43:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-{[1-(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苯基)-3,14-二氧代-2,7,10-三氧杂-4,13-二氮杂十五烷-15-基](乙基)氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp43)的制备

将n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(五氟苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺(l2)(1.37mg,1.40umol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-{[2-({2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙基}氨基)-2-氧代乙基](乙基)氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp40)(1.8mg,1.1umol)、n,n-二异丙基乙胺(0.695mg,5.38umol,0.936ul)在n,n-二甲基乙酰胺(200ul)中的溶液中。在1小时之后，将净的哌啶(2.75mg,32.3umol,3.19ul)添加到反应中，并使其静置45分钟。反应混合物通过反相hplc（方法a）直接纯化。将含有产物的级分冻干，获得1.0mg(41%)的所需产物(lp43)。lc-msm/z1064.569[m+2h²⁺]；保留时间=0.74分钟(方法5)。

以下通过实施例41的程序通过(3-氨基丙基)(4-{[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基](3-{[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙基)氨基}丁基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯(l5)与{[(3s,4s,6s)-6-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-2-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-6-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氧基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-3-基](乙基)氨基}乙酸(p50)的反应，继之以fmoc去保护来制备：

。

实施例44:lp44:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[(2-{[3-({4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基}氨基)丙基]氨基}-2-氧代乙基)(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1606.67[m+h⁺]；保留时间=0.70分钟(方法5)。

以下通过实施例41的程序通过n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n-(3-{(4-{(3-氨基丙基)[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丁基)[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙基)-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酰胺(l6)与{[(3s,4s,6s)-6-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-2-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-6-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氧基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-3-基](乙基)氨基}乙酸(p50)的反应，继之以fmoc去保护来制备。

实施例45:lp45:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-{[(4s,7s,10s)-4-(4-氨基丁基)-10-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-2,5,8,11,26-五氧代-7-(丙-2-基)-3,6,9,12,16,21,25-七氮杂二十七碳-27-基](乙基)氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1017.11[m+2h²⁺]；保留时间=0.68分钟(方法5)。

以下根据实施例41的程序通过n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n-[({4-[(3-{(4-{(3-氨基丙基)[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丁基)[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}丙基)氨基]苄基}氧基)羰基]-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酰胺(l7)与{[(3s,4s,6s)-6-{[(2r,3r,4s,5s,6r)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-2-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-6-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氧基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-3-基](乙基)氨基}乙酸(p50)的反应，继之以fmoc去保护来制备。

实施例46:lp46:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-{[1-(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苯基)-3,18-二氧代-2-氧杂-4,8,13,17-四氮杂十九烷-19-基](乙基)氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1091.79[m+2h²⁺]；保留时间=0.72分钟(方法5)。

以下根据实施例41的程序通过n²-乙酰基-n⁶-[(9h-芴-9-基甲氧基)羰基]-l-赖氨酰-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-l-鸟氨酸(l1)与4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[(26-氨基-2-氧代-6,9,12,15,18,21,24-七氧杂-3-氮杂二十六碳-1-基)(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp41)的反应，继之以fmoc去保护来制备：

。

实施例47:lp47:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-{[(2s,4s,5s)-5-{[(29s,32s,35s)-35-(4-氨基丁基)-29-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-2,28,31,34,37-五氧代-32-(丙-2-基)-6,9,12,15,18,21,24-七氧杂-3,27,30,33,36-五氮杂三十八碳-1-基](乙基)氨基}-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(丙-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯。lc-msm/z1100.438[m+2h²⁺]；保留时间=0.80分钟(方法5)。

实施例48:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,5z,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-5-(氨基甲酰氨基)-2-{[(2s)-2-{[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp48)的制备：

将2,6-二甲基吡啶(4.8ul,4.4mg,0.040mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-6-{[(2s,5z,9r,13e)-13-[2-(叔丁基二硫烷基)亚乙基]-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-5-{[(2s,4s,5s)-5-(乙基氨基)-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(p2)(14mg,0.010mmol)、

n-[6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰基]-l-缬氨酰-n⁵-氨基甲酰基-n-[4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-l-鸟氨酰胺(7.4mg,0.010mmol)和3h-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-醇(1.407mg,0.0102mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(250ul)中的溶液中。在18小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法i)纯化。将含有产物的级分冻干，获得4.5mg的所需产物(lp48)。lc-msm/z1998[m+na⁺]；保留时间=6.19分钟(方法10)。

实施例49:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-(2-{[(2r)-1-{[(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基甲酰基]氧基}丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(lp49)的制备

步骤1:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-13-(2-{[(2r)-1-羟基丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

将(2r)-2-(2-吡啶基二硫代)-1-丙醇(4.5mg,0.022mmol)添加到1,4-二硫苏糖醇(2.5mg,0.106mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(380ul)中的溶液中。在3小时之后，将4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代-13-[2-(吡啶-2-基二硫烷基)亚乙基]双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(17.2mg,0.0072mmol)添加到反应混合物中。在2小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法b)纯化。将含有产物的级分冻干以提供10mg所需产物。lc-msm/z2176.7[m+h⁺]；保留时间=7.74分钟(方法7)

步骤2:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-(2-{[(2r)-1-{[(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基甲酰基]氧基}丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

在环境温度下，将n,n'-二异丙基乙胺(114mg,150ul,0.863mmol)添加到双(三氯甲基)碳酸酯(128mg,0.432mmol)和7-氨基-4-甲基香豆素(75.6mg,0.432mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(2.0ml)中的溶液中。在1小时之后，将1ml等分的反应混合物移出并加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-13-(2-{[(2r)-1-羟基丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)-12-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(6.1mg,0.0027mmol)中。将n,n'-二异丙基乙胺(10.8mg,14.4ul,0.0818mmol)添加到反应混合物中。在1小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法b)纯化。将含有产物的级分冻干以提供2.3mg所需产物。lc-msm/z2378.7[m+h⁺]；保留时间=3.31分钟(方法6)

步骤3:4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-(2-{[(2r)-1-{[(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基甲酰基]氧基}丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯的合成

将哌啶(5ul,4mg,0.05mmol)添加到4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯硫代甲酸s-[(2r,3s,4s,6s)-6-({[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(9s,12s,15s)-9-(乙酰氨基)-15-[3-(氨基甲酰氨基)丙基]-1-(9h-芴-9-基)-3,10,13,16-四氧代-12-(丙-2-基)-2-氧杂-4,11,14-三氮杂十六烷-16-基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-4-羟基-6-{[(2s,9r,13e)-9-羟基-12-[(甲氧基羰基)氨基]-13-(2-{[(2r)-1-{[(4-甲基-2-氧代-2h-色烯-7-基)氨基甲酰基]氧基}丙-2-基]二硫烷基}亚乙基)-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-1(12),5-二烯-3,7-二炔-2-基]氧基}-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]氨基}氧基)-4-羟基-2-甲基四氢-2h-吡喃-3-基]酯(2.4mg,0.010mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(300ul)中的溶液中。在1小时之后，反应混合物通过反相hplc(方法a)纯化。将含有产物的级分冻干以提供2.4mg的所需产物(lp49)。lc-msm/z2156.8[m+h⁺]；保留时间=5.8分钟(方法7)。

实施例50:(2s,3s,4s,5r,6s)-6-{4-[(13e)-13-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}-4-乙基-6,9,9-三甲基-3,7-二氧代-2-氧杂-10,11-二硫杂-4,6-二氮杂十三烷-1-基]苯氧基}-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-甲酸(lp50)的制备

步骤1:(2s,3s,4s,5r,6s)-6-{4-[(13e)-13-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}-4-乙基-6,9,9-三甲基-3,7-二氧代-2-氧杂-10,11-二硫杂-4,6-二氮杂十三烷-1-基]苯氧基}-3,4,5-三(乙酰氧基)四氢-2h-吡喃-2-甲酸甲酯的合成

将4-{[(乙基{[甲基(3-甲基硫烷基丁酰基)氨基]甲基}氨基甲酰基)氧基]甲基}苯基2,3,4-三-o-乙酰基-β-d-吡喃葡萄糖醛酸甲酯(t20)(11.3mg,0.0168mmol)和三乙胺(3.35μl,2.43mg,0.0240mmol)在n,n-二甲基乙酰胺(120μl)中的溶液添加到2-{[(2e)-2-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}乙基]二硫烷基}苯甲酸(lp5)(5mg,0.002mmol)中。在5小时之后，反应混合物通过反相hplc（方法a）直接纯化。将含有产物的级分冻干以提供3mg所需产物。lc-msm/z2534.0[m+h⁺]；保留时间=2.77min分钟(方法18)

步骤2:2s,3s,4s,5r,6s)-6-{4-[(13e)-13-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}-4-乙基-6,9,9-三甲基-3,7-二氧代-2-氧杂-10,11-二硫杂-4,6-二氮杂十三烷-1-基]苯氧基}-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-甲酸(lp50)的合成

将氢氧化锂(0.249mg,0.0104mmol)在水(10μl)中的溶液添加到(2s,3s,4s,5r,6s)-6-{4-[(13e)-13-{(1r,8s)-8-({(2r,3r,4s,5s,6r)-3-({(2s,4s,5s)-5-[{[(4-{[(2s)-2-{[(2s)-2-{[(2s)-2-(乙酰氨基)-6-氨基己酰基]氨基}-3-甲基丁酰基]氨基}-5-(氨基甲酰氨基)戊酰基]氨基}苄基)氧基]羰基}(乙基)氨基]-4-甲氧基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-5-[({(2s,4s,5s,6r)-5-[(4-{[(2s,3r,4r,5s,6s)-3,5-二羟基-4-甲氧基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基]氧基}-3-碘-5,6-二甲氧基-2-甲基苯甲酰基)硫烷基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)氨基]-4-羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基}氧基)-1-羟基-10-[(甲氧基羰基)氨基]-11-氧代双环[7.3.1]十三碳-4,9-二烯-2,6-二炔-13-亚基}-4-乙基-6,9,9-三甲基-3,7-二氧代-2-氧杂-10,11-二硫杂-4,6-二氮杂十三烷-1-基]苯氧基}-3,4,5-三(乙酰氧基)四氢-2h-吡喃-2-甲酸甲酯(3mg,0.001mmol)在甲醇(400μl)和水(400μl)中的溶液中。在40分钟之后，反应混合物通过反相hplc（方法a）直接纯化。将含有产物的级分冻干以提供2.2mg所需产物(lp50)。lc-msm/z2393.9[m+h⁺]；保留时间=2.55min分钟(方法18)。

用于缀合卡奇霉素lp的通用程序

通用程序a：缀合反应在含有150mm氯化钠(nacl)和12%二甲基亚砜(dmso)的25-50mm三(羟基甲基)氨基乙烷(tris)缓冲液(ph8)中在约5mg/ml蛋白质浓度下进行。在使用之前，将抗体缓冲交换到水或稀释的磷酸盐缓冲的盐水(pbs)中，并且为实现以上浓度依次用适当体积的1mtris(ph8)、5mnacl和dmso处理。添加适当的连接基团有效负荷（15-20当量mol/mol）作为dmso中的30mm储备溶液，然后加入转谷氨酰胺酶粉末（ajinomotoactiva，相对于抗体重量2倍重量当量（wt.eq.））。将反应在室温下旋转过夜。通过lcms或疏水性相互作用色谱法（hic）检查负载。如果反应不完全，则加入另外一等分的转谷氨酰胺酶和/或连接基团-有效负荷并继续旋转另外的3-6小时。

反应后处理通常涉及缓冲交换到pbs中，然后通过尺寸排阻色谱法（gesuperdex20010/300gl）进行纯化。得到的抗体药物缀合物（adc）通过分析型hic、尺寸排阻色谱法（sec）和lcms，按照下文描述的方法来表征。

通用程序b:缀合反应在含有150mmnacl和5-7％dmso的25-50mmtris缓冲液（ph7.5）中在约5mg/ml蛋白质浓度下进行。在使用前，将抗体缓冲交换到水或稀释的pbs中，并且依次用适当体积的1mtris（ph7.5）、5mnacl和dmso处理，以达到上述浓度。加入适当的连接基团有效负荷（15-20当量mol/mol）作为dmso中的30mm储备溶液，然后加入转谷氨酰胺酶粉末（ajinomotoactiva，相对于抗体重量2倍重量当量）。将反应在室温下旋转过夜。通过lcms或hic检查负载。如果反应不完全，则加入另外一等分转谷氨酰胺酶和/或连接基团-有效负荷并继续旋转另外的3-6小时。

反应后处理通常涉及缓冲交换到pbs中，然后通过尺寸排阻色谱法（gesuperdex20010/300gl）进行纯化。得到的adc通过分析型hic、sec和lcms，按照下文描述的方法来表征。

通用程序c:通过wo2013093809中概述的方法进行工程改造半胱氨酸突变体的还原/再氧化。为提供~5mg/ml抗体在20%dma(vol/vol)中的储备溶液，用pbs和dma处理所得抗体（在pbs中，ph7.4）。用6当量（mol/mol）合适的马来酰亚胺连接基团-有效负荷处理所得溶液，并在彻底混合后使其在室温静置2h。在反应不完全的情况下，将温度升高至37℃持续～1h。将粗反应物缓冲交换到pbs中并通过sec（gesuperdex200，pbs洗脱液）纯化，合并单体级分用于分析。

用于缀合实施例的一般分析方法：

lcms:柱=watersbeh300-c4,2.1x100mm(p/n=186004496)；仪器=acquityuplc，具有sqd2质谱检测器；流速=0.7ml/min；温度=80℃；缓冲液a=水+0.1%甲酸；缓冲液b=乙腈+0.1%甲酸。梯度：经2分钟从3%b至95%b，在95%b保持0.75min，然后在3%b重新平衡。在马上注射之前用dtt还原样品。通过lcms（400-2000道尔顿）监测洗脱液，并使用maxent1对蛋白质峰解卷积。如先前所述，dar作为重量平均负载来报告。

或者，使用连接至xevog2-xstof质谱仪的aquityh-classuplc进行非还原lcms分析。使用beh-c18柱(2.1μmx50mm,p/n186002350)在80℃进行分离。进行a梯度：在水(+0.1%甲酸)中的从10%乙腈至95%乙腈。从1500-3000m/z(正模式)收集ms数据。使用maxent软件选择整个蛋白质峰用于解卷积。典型的注射大小为0.1μg。

sec:柱:superdex200(5/150gl)；流动相：磷酸盐缓冲盐水，包含2%乙腈,ph7.4；流速=0.25ml/min；温度=环境温度；仪器：agilent1100hplc。

hic:柱:tskgelbutylnpr,4.6mmx3.5cm(p/n=s0557-835)；缓冲液a=含有10mm磷酸盐的1.5m硫酸铵，ph7；缓冲液b=10mm磷酸盐，ph7+20%异丙醇；流速=0.8ml/min；温度=环境温度；梯度：=经12分钟0%b至100%b，在100%b保持2分钟，然后在100%a重新平衡；仪器：agilent1100hplc。

用于缀合的抗体：

。

体外细胞分析程序

在处理之前，将her2-靶向表达（bt474（乳腺癌）、n87（胃癌）、mda-mb-361-dyt2（乳腺癌））或her2-非表达(mda-mb-468,ht29)细胞或cd33靶向表达hl60、hel92.1.7、nb4、tf-1或cd33-非表达（raji）细胞接种在96孔细胞培养板中24小时。将细胞一式两份地用10倍浓度的3倍连续稀释的抗体-药物缀合物或游离化合物（即，没有与药物缀合的抗体）处理。在处理后96小时，通过celltiter96^®aqueous单溶液细胞增殖mts分析（onesolutioncellproliferationmtsassay）（promega，madisonwi）测定细胞活力。相对细胞活力确定为未处理对照的百分比。使用具有xlfitv4.2的四参数逻辑模型＃203（idbs，guildford，surry，uk）计算ic50值。结果显示在下表3（对于有效负荷）、表4（对于herceptin缀合物）和表5（对于cd33缀合物）中。

评估人aml体内模型中的adc活性

将食蟹猴人嵌合抗cd33抗体，11a1，与各种连接基团-有效负荷缀合（如实施例50-110中的cd33缀合物），并在急性髓性白血病（aml）异种移植模型中进行测试。对于下面描述的每种模型，在第0天给予第一剂量。肿瘤每周测量至少一次，并用下式计算它们的体积：肿瘤体积(mm³)=0.5×（肿瘤宽度²）（肿瘤长度）。计算每个治疗组的平均肿瘤体积（±s.e.m.），其中包括最多10只动物和最少4只动物。所有动物实验均在由机构动物护理和使用委员会指南以及适当的动物研究批准下的实验动物护理评估协会（associationforassessmentoflaboratoryanimalcare）认可的设施中进行。

a.hl60aml异种移植物

在免疫缺陷小鼠中检查抗-cd33adc对人肿瘤的体内生长的影响。对于皮下（sc）aml模型，将10x10⁶个hl60细胞皮下植入雌性nod-scid小鼠的侧腹中。当肿瘤达到200mm³的平均体积时，对动物进行分级以确保各治疗组中肿瘤大小的均匀性。hl60amlsc异种移植模型以表6-10中提供的剂量给予pbs载体、人源化抗-cd33adc和在一些情况下用对照neg-8.8adc和/或mylotarg，每4天静脉内给药一次，持续4个周期（q4dx4）。

图1显示了得自表6的与以1mg/kg给药mylotarg和pbs载体相比，以0.01、0.05和0.1mg/kg剂量给药的卡奇霉素adc（实施例50、69和84）的数据的图。

图2显示了得自表7的以0.01、0.05和0.1mg/kg给药的抗-cd33adccd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp19(实施例85)，以0.1mg/kg给药的带有相同连接基团有效负荷的对照neg-8.8adc（实施例86），以1mg/kg给药的mylotarg，和pbs载体的数据的图。

图3显示了得自表8的以0.01、0.03和0.1mg/kg给药的抗-cd33adccd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp1(实施例51)，以0.1mg/kg给药的带有相同连接基团有效负荷的对照neg-8.8adc(实施例52)，以1mg/kg给药的mylotarg，和pbs载体的数据的图。

图4显示了得自表9的以0.03、0.1和0.3mg/kg给药的抗-cd33adccd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp13(实施例70)，以0.3mg/kg给药的带有相同连接基团有效负荷的对照neg-8.8adc(实施例71)，以1mg/kg给药的mylotarg，和pbs载体的数据的图。

图5显示了得自表10的以0.01、0.05和0.1mg/kg给药的抗-cd33卡奇霉素adc(实施例60、61、和67)，以1mg/kg给药的mylotarg，和pbs载体的数据的图。

这些数据表明抗-cd33卡奇霉素adc以剂量依赖性方式抑制hl60aml异种移植肿瘤的生长，其中几个实例在mylotarg®的有效剂量的一小部分下提供肿瘤生长的完全和持续的消退。特别有效的实例包括cd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp1，其在0.1mg/kg的剂量下在研究的第14天提供10/10完全且持久的应答，和cd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp6，其在0.1mg/kg的剂量下在研究的第18天提供9/9完全且持久的应答。此外，这些数据显示抗-cd33卡奇霉素adc在相同剂量下比它们各自的对照neg8.8-adc（不识别cd33抗原的那些）有效得多。

b.tf-1aml异种移植物

在免疫缺陷小鼠中检查抗-cd33adc对人肿瘤的体内生长的影响。对于皮下（sc）aml模型，将10×10⁶个tf-1细胞皮下植入雌性无胸腺nu/nu小鼠的侧腹中。当肿瘤达到300mm³的平均体积时，对动物进行分级以确保各种治疗组中肿瘤大小的均匀性。tf-1amlsc异种移植模型以表11-13中提供的剂量给予pbs载体或人源化抗-cd33adc，每4天静脉内给药一次，持续4个周期（q4dx4）。

图6显示了得自表11的均以0.3mg/kg的剂量给药的抗-cd33adcscd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp1(实施例51)、cd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp13(实施例70)、cd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp19(实施例85)、它们各自的阴性对照adc(分别为实施例52、71、和86)，以1mg/kg的剂量给药的mylotarg®，和pbs载体的数据的图。

图7显示了得自表12的以0.005、0.01、0.05和0.3mg/kg的剂量给药的抗-cd33adccd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp1(实施例51)和pbs载体的数据的图。

图8显示了得自表13的以0.03、0.1、和0.3mg/kg的剂量给药的抗-cd33adccd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp19(实施例85)和pbs载体的数据的图。

图9显示了得自表14的以0.005、0.01、0.05和0.3mg/kg的剂量给药的抗-cd33adccd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp13(实施例70)和pbs载体的数据的图。

这些数据表明抗-cd33卡奇霉素adcs以剂量依赖性方式抑制tf-1aml异种移植肿瘤的生长。当以0.3mg/kg测试时，测试的所有三种抗-cd33卡奇霉素adcs，cd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp1、cd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp13和cd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp19提供强烈应答。当在这些研究中以0.3mg/kg进行测试时，两个实例，cd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp1和cd33-11a1-v1417-kn92s-h16-d55a-k222r-hg1-lp13，在10/10动物中提供了延长和完全的应答，而mylotarg®在该测定中无效。此外，这些数据显示抗-cd33卡奇霉素adcs在相同剂量下比它们各自的对照neg8.8-adc（不识别cd33抗原的那些）有效得多。

序列表

<110>pfizerinc.

ahmad,omark

brown,stephenp

chakrapani,subramanyam

dirico,kennethj

dushin,russellg

puthenveetil,sujiet

tumey,lawrencen

<120>卡奇霉素衍生物及其抗体药物缀合物

<130>pc72283

<160>20

<170>patentinversion3.5

<210>1

<211>449

<212>prt

<213>人工的

<220>

<223>合成的

<400>1

gluvalglnleuvalgluserglyglyglyleuvalglnproglygly

151015

serleuargleusercysalaalaserglytyrilephethrasptyr

202530

valthrhistrpvalargglnalaproglylysglyleuglutrpile

354045

alatyrileasnprotyrasnaspglythrlystyrasngluargphe

505560

lysglyargphethrileserseraspasnalalysasnserleutyr

65707580

leuglnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcys

859095

alaargasptyrargtyrgluiletyrglymetasptyrtrpglygln

100105110

glythrleuvalthrvalserseralaserthrlysglyproserval

115120125

pheproleualaproserserlysserthrserglyglythralaala

130135140

leuglycysleuvallysasptyrpheprogluprovalthrvalser

145150155160

trpasnserglyalaleuthrserglyvalhisthrpheproalaval

165170175

leuglnserserglyleutyrserleuserservalvalthrvalpro

180185190

serserserleuglythrglnthrtyrilecysasnvalasnhislys

195200205

proserasnthrlysvalasplyslysvalgluprolyssercysasp

210215220

argthrhisthrcysproprocysproalaprogluleuleuglygly

225230235240

proservalpheleupheproprolysprolysaspthrleumetile

245250255

serargthrprogluvalthrcysvalvalvalaspvalserhisglu

260265270

aspprogluvallyspheasntrptyrvalaspglyvalgluvalhis

275280285

asnalalysthrlysproarggluleuleuglnglyserthrtyrarg

290295300

valvalservalleuthrvalleuhisglnasptrpleuasnglylys

305310315320

glutyrlyscyslysvalserasnlysalaleuproalaproileglu

325330335

lysthrileserlysalalysglyglnproarggluproglnvaltyr

340345350

thrleuproproserarggluglumetthrlysasnglnvalserleu

355360365

thrcysleuvallysglyphetyrproseraspilealavalglutrp

370375380

gluserasnglyglnprogluasnasntyrlysthrthrproproval

385390395400

leuaspseraspglyserphepheleutyrserlysleuthrvalasp

405410415

lysserargtrpglnglnglyasnvalphesercysservalmethis

420425430

glualaleuhisasnhistyrthrglnlysserleuserleuserpro

435440445

gly

<210>2

<211>213

<212>prt

<213>人工的

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该技术已申请专利。仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
技术研发人员：O.K.艾哈迈德;S.P.布朗;K.J.迪里科;R.杜欣;G.F.菲尔岑;S.普滕维蒂尔;P.斯特罗普;C.苏布拉曼亚姆;L.N.塔米
技术所有人：辉瑞公司
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