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本申请要求提交于2017年11月1日的美国临时申请系列号62/580,064的权益，其整体引用本文中。
描述
本发明一般地涉及适用作法尼醇x受体(farnesoidxreceptor；fxr)调节剂的化合物、包含此类化合物的药物组合物，以及其在疗法中的用途，尤其用于治疗或预防fxr调节剂适用的疾病、病症及病状。
fxr或nr1h4(细胞核受体子族1组h成员4)为一种可以以配体依赖性方式活化特定目标基因的表达的细胞核受体。fxr表达于人体内的肝脏中，整个胃肠道、结肠、卵巢、肾上腺、肾脏中，以及胆囊及胆为中。fxr与类视黄醇x受体(rxr)形成杂二聚体，且与目标基因中的特定反应组件结合以调节基因转录(b.m.forman等人，cell1995；81：687；w.seol等人，mol.endocrinol.1995；9：72)。fxr/rxr杂二聚体通常与由单核苷酸间隔开的保守性六核苷酸序列(aggtca)(亦即ir-1序列)的反向重复序列结合。fxr的相关生理学配体为胆酸，包括鹅脱氧胆酸及其牛磺酸结合物(d.j.parks等人，science1999；284：1365；m.makishima等人，science1999；284：1362)。fxr活化调节多种基因的表达，该多种基因编码胆酸合成、流入及流出肝脏及肠道所涉及的酶及转运蛋白，从而引起负反馈回路中的总内源性胆酸的净减。fxr通过上调细胞介素纤维母细胞生长因子15(啮齿动物)或19(灵长类动物)的表达来参与旁分泌及内分泌信号传导，其亦可促进胆酸浓度的调节(holt等人，genesdev.2003；17：1581；inagaki等人，cellmetab2005；2：217)。因此，将fxr视为胆酸内环境稳定的主要调节因子。
fxr激动剂的一个用途为用于治疗胆酸失调的疾病，包括胆汁郁积性疾病(例如，原发性胆汁性肝硬化及原发性硬化性胆管炎)，其可导致纤维化、肝硬化、胆管癌、肝细胞癌、肝功能衰竭及死亡。虽然肝脏中的胆酸浓度升高具有不利影响，但胆酸亦影响小肠的微生物群及完整性。人类或啮齿动物体内的胆汁流动阻塞会造成肠道细菌增殖及粘膜损伤，其可导致细菌穿过粘膜屏障易位及全身性感染(berg，trendsmicrobiol.1995；3：149-154)。缺乏fxr的小鼠的回肠细菌量及上皮屏障受损增加，同时肠道fxr的活化在预防细菌过度生长及维持肠道上皮的完整性中起重要作用(inagaki等人，procnatlacadsci2006；103：3920-3925)。随时间推移，fxr剔除式小鼠自发演变成肝细胞癌，且此情形可通过选择性地再活化肠道中的fxr而消除(degirolamo等人，hepatology61：161-170)。用小分子激动剂药理学活化fxr或在肠道中转殖基因表达fxr可使胆酸浓度正常，降低肝胆管中的细胞增殖，以及减少啮齿动物胆汁郁积模型中的炎症细胞浸润、坏死区域及肝纤维化(liu等人，j.clin.invest.2003；112:1678-1687；modica等人，gastroenterology.2012；142：355-365)。在临床前胆汁郁积模型中观测到的一些这些有益效应已转移至人类患者，且fxr激动剂奥贝胆酸(obeticholicacid)(oca或ocalivatm)已经批准用于治疗原发性胆汁性肝硬化(https://www.fda.gov/newsevents/newsroom/pressannouncements/ucm503964.htm)。
除了控制胆酸内环境稳定以外，fxr激动剂亦调节数百种基因的肝脏表达，所述基因编码胆固醇及脂质代谢及转运、葡萄糖内环境稳定、炎症、趋化性及细胞凋亡以及其它路径所涉及的蛋白质(zhan等人，plosone2014；9：e105930；ijssennagger等人，jhepatol2016；64：1158-1166)。根据对基因表达的这些广泛影响，亦已在纤维化、癌症、炎性疾病及代谢障碍的临床前模型中研究fxr激动剂，所述代谢障碍包括血脂异常、肥胖症、2型糖尿病、非酒精性脂肪肝病(nafld)及代谢综合征(crawley，expertopin.ther.patents2010；20:1047-1057)。
亦在人类临床试验中研究fxr激动剂用于治疗nafld、脂肪肝病的更晚期形式非酒精性脂肪变性肝炎(nash)及相关并发症。nafld为现今全世界慢性肝病的一个最常见病因(vernon等人，alimentpharmacolther2011；34:274-285)。发展nafld的风险因素包括肥胖症、2型糖尿病(t2dm)、胰岛素抗性、高血压及血脂异常。在患有nafld的t2dm患者中的6周临床试验中，fxr激动剂oca在统计学上显著改良胰岛素敏感性且减轻体重，由此展现对一些这些风险因素的有益效应(mudaliar等人，gastroenterology2013；145：574-582)。nash为nafld的最严重及进行性形式，且包括肝脏脂肪变性、炎症及伴随细胞外纤维化量改变的气胀变性(ballooningdegeneration)的组织学结果(sanyal等人，hepatology2015；61:1392-1405)。在nash患者中的72周临床试验中，oca在统计学上显著改良肝脏脂肪变性、小叶炎症、肝细胞气胀及纤维化，如通过肝脏活检体的组织学分析所评估(neuschwander-tetri等人，lancet2015；385：956-965)。鉴于nash为美国肝细胞癌(hcc)及肝脏移植的第二主要病因，这些数据亦表明fxr激动剂在临床结果方面展现益处的潜力(wong等人，hepatology2014；59：2188-2195)。
本发明提供用于治疗有需要的患者中的与法尼醇x受体(fxr)活性相关的疾病、病症或病状的新颖化合物。
技术实现要素：
在一个方面中，本发明提供式(i)、(ii)和(iii)的化合物以及其亚属及物质，包括其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐及溶剂合物，其适用作fxr调节剂。
在另一方面中，本发明亦提供用于制备本发明的化合物的方法及中间体。
在另一方面中，本发明亦提供一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体以及本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂合物中的至少一者。
在另一方面中，本发明的化合物可单独或与一种或多种其它治疗剂组合用于疗法。
本发明的化合物可用于治疗需要此类治疗的患者中的与法尼醇x受体(fxr)活性相关的疾病、病症或病状，其为通过向该患者给予治疗有效量的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂合物。该疾病、病症或病状可与病理性纤维化有关。本发明的化合物可单独，或与一种或多种本发明的化合物组合或与一种或多种(例如，一至两种)其它治疗剂组合使用。
本发明的化合物可作为单一药剂或与其它药剂组合用于治疗选自以下的疾病、病症或病状：非酒精性脂肪变性肝炎(nash)、非酒精性脂肪肝病(nafld)、慢性肾病、糖尿病性肾病、原发性硬化性胆管炎(psc)及原发性胆汁性肝硬化症(pbc)。本发明的化合物可作为单一药剂或与其它药剂组合用于治疗特发性肺纤维化(ipf)。
本发明的化合物可用于制造用以治疗需要此类治疗的患者中的疾病、病症或病状的药剂。
本发明的其它特征及优势可见于以下详细的说明及权利要求。
具体实施方式
本申请提供式(i)化合物，包括其所有立体异构体、溶剂合物、前药及药学上可接受的盐及溶剂合物形式。本申请亦提供含有至少一种式(i)化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂合物及任选的至少一种其它治疗剂的药物组合物。此外，本申请提供用于治疗患有fxr调节性疾病或病症的患者的方法，该疾病或病症例如胆纤维化、肝纤维化、肾纤维化、非酒精性脂肪肝病(nafld)、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、原发性硬化性胆管炎(psc)、原发性胆汁性肝硬化症(pbc)及胰纤维化，所述方法为通过向需要此类治疗的患者给予治疗有效量的本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂合物，且任选与至少一种其它治疗剂组合。
i.本发明的化合物
在一个实施方案中，本发明提供式(i)的化合物：
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂合物；其中
x1和x4各自独立地为c或n；
x2和x3各自独立地为cr5、n、nr6、o或s；
e为cr3、cr3ar3b、n、nr4、o或s；
虚直线为任选的共价键；
y为cr7或n；
h和m各自独立地为1或2的整数；
g和n各自独立地为0、1或2的整数；
d和f各自独立地为0、1、2或3的整数；
z为6-至10-元芳基、含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的5-至10-元杂芳基，3-至10-元碳环基，或含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的4-至10-元杂环基，其中所述芳基、杂芳基、碳环基以及杂环基独立地被0至5个r8取代；
l1为共价键、o、s、nr17、-s(o)2-、c1-3亚烷基、c1-3杂亚烷基、c2-4亚烯基、c2-4亚炔基、芳基，或含1-3个独立选自n、o和s的杂原子或含1-4个独立选自n、o和s的杂原子的5-至6-元杂芳基；其中所述亚烷基、杂亚烷基、芳基和杂芳基各自独立地被0-3个r11取代；
l2为共价键、o、s、nr18、c1-3亚烷基，或c1-3杂亚烷基，其中所述亚烷基和杂亚烷基独立地被0-3个r16取代；
rx为-l3-rz；
l3为共价键、c1-3亚烷基、-o(c1-3亚烷基)-或-c(o)nr12-ch2-，其中所述c1-3亚烷基被0-3个r15取代；
rz为-cn、-no2、-c(o)r16、-c(o)or13、-c(o)nr14ar14b、-nr12c(o)r12、甲基四唑基、
re为c1-6烷基、c3-6环烷基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、烷氧基烷基，或卤代烷氧基烷基；
ry1和ry2各自独立地为氢、卤素、氰基、羟基、氨基、c1-6烷基、烷基氨基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、烷氧基烷基、卤代烷氧基烷基、烷氧基，或卤代烷氧基；或者两个ry1与其所连接的碳原子共同形成桥接部分；且条件是当y为n且ry1连接至与y相邻的碳原子时，则ry1不为卤素、氰基、羟基、氨基、烷氧基，或卤代烷氧基；
r1为c1-6烷基、c3-5环烷基，或c4-6杂环基，其中所述烷基和环烷基独立地被0-3个r9取代；
r2为6-至10-元芳基、含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的5-至10-元杂芳基，3-至10-元碳环基，或含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的4-至10-元杂环基，其中所述芳基、杂芳基、碳环基以及杂环基独立地被0-5个r10取代；
r3和r4各自独立地为氢、c1-6烷基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、烷氧基烷基，或卤代烷氧基烷基；
r3a和r3b各自独立地为氢、卤素、氰基、羟基、氨基、c1-6烷基、烷基氨基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、烷氧基烷基、卤代烷氧基烷基、烷氧基，或卤代烷氧基；
r5和r7各自独立地为氢、卤素、氰基、羟基、氨基、c1-6烷基、烷基氨基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、烷氧基烷基、卤代烷氧基烷基、烷氧基，或卤代烷氧基；
r6、r17和r18各自独立地为氢、c1-6烷基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、烷氧基烷基，或卤代烷氧基烷基；
r8和r10各自独立地为卤素、氰基、羟基、氨基、氧代、-ora、-sra、＝s、-nrcrc、＝nh、＝n-oh、＝nra、＝n-ora、-no2、-s(o)2ra、-s(o)2nhrb、-s(o)2nrcrc、-s(o)2orb、-os(o)2rb、-os(o)2orb、-p(o)(orb)(orb)、-c(o)rb、-c(nrb)rb、-c(o)orb、-c(o)nrcrc、-c(nrb)nrcrc、-oc(o)rb、-nrbc(o)rb、-oc(o)orb、-nrbc(o)orb、-oc(o)nrcrc、-nrbc(o)nrcrc、-nrbc(nrb)rb、-nrbc(nrb)nrcrc、c1-6烷基、c1-6卤代烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、碳环基，或杂环基，其中所述烷基、芳基、杂芳基、碳环基以及杂环基本身或作为另一基团的一部分各自独立地被0-5个rd取代；
ra各自独立地为c1-6烷基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、烷氧基烷基、卤代烷氧基烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、碳环基、碳环基烷基、杂环基，或杂环基烷基；
rb各自独立地为氢或ra；
rc各自独立地为rb或者所述两个rc与其所连接的氮原子共同形成含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的4-、5-、6-或7-元杂环基；
rd各自独立地为ra、烷氧基、卤代烷氧基、烷基氨基、环烷基氨基、杂环基氨基、环烷氧基、杂环基氧基、卤代烷氧基、烷氧基烷氧基、卤代烷基氨基、烷氧基烷基氨基、卤代烷氧基烷基氨基、芳基氨基、芳烷基氨基、芳基氧基、芳烷基氧基、杂芳基氧基、杂芳基烷基氧基、烷基硫基、卤素、氰基、羟基、氨基、氧代、-ora、-sra、＝s、-nrcrc、＝nh、＝n-oh、＝nra、＝n-ora、-no2、-s(o)2ra、-s(o)2nhrb、-s(o)2nrcrc、-s(o)2orb、-os(o)2rb、-os(o)2orb、-p(o)(orb)(orb)、-c(o)rb、-c(nrb)rb、-c(o)orb、-c(o)nrcrc、-c(nrb)nrcrc、-oc(o)rb、-nrbc(o)rb、-oc(o)orb、-nrbc(o)orb、-nrbc(o)nrcrc、-nrbc(nrb)rb，或-nrbc(nrb)nrcrc；
r9为卤素、氰基、羟基、氨基或c1-6烷基；
r11和r16各自独立地为卤素、氧代、氰基、羟基、氨基、c1-6烷基、c3-6环烷基、c4-6杂环基、烷基氨基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、烷氧基烷基、卤代烷氧基烷基、烷氧基，或卤代烷氧基；
r12各自独立地为氢或c1-4烷基；
r13为氢、c1-10烷基或糖基；
r14a和r14b各自独立地为氢、c1-6烷基、c3-6环烷基、c4-6杂环基、烷基氨基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、烷氧基烷基、卤代烷氧基烷基、烷氧基，或卤代烷氧基；
r15为卤素、氧代、氰基、羟基、氨基、烷基、烷氧基，或烷基氨基；或者，两个r15与其所连接的原子共同形成碳环基或杂环基部分；和
r16为c1-4烷基、含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的5-至6-元杂芳基，3-至6-元碳环基，或含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的4-至6-元杂环基，其中所述杂芳基、碳环基以及杂环基独立地被0至5个r8取代。
本领域技术人员应理解，在式(i)中，虚线圆圈表示由x1、x2、x3、x4及碳原子形成的芳族环；且虚线直线表示存在或不存在的共价键。
在式(i)的前述实施方案中的任一项中，x2为n或nr6。
在式(i)的前述实施方案中的任一项中，e为cr3、cr3ar3b或nr4。
在式(i)的前述实施方案中的任一项中，两个ry1一起形成c1-3亚烷基桥接部分。(ry1)f表示在任何适合的环成员原子上的一个或多个任选的取代基基团，并且每个ry1是独立的且可为相同或不同。
在式(i)的前述实施方案中的任一项中，
所述
在式(i)的前述实施方案中的任一项中，l1为共价键、o、s、nh，c1-3亚烷基，-(c1-3亚烷基)a-o-(c1-3亚烷基)b-，-(c1-3亚烷基)a-s-(c1-3亚烷基)b-或-(c1-3亚烷基)a-nh-(c1-3亚烷基)b-，其中所述c1-3亚烷基被0-3个r11取代；a为0或1的整数；b为0或1的整数；其前提为a和b不均为1；且l2为共价键。
在式(i)的前述实施方案中的任一项中，
所述
e与以上定义相同。
在式(i)的前述实施方案中的任一项中，e为ch、ch2或nh。
在式(i)的前述实施方案中的任一项中，z为苯基或含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的5-至10-元杂芳基，其中所述苯基和杂芳基独立地被0至5个r8取代，其中r8与以上定义相同。
在式(i)的前述实施方案中的任一项中，l1为共价键。
在式(i)的前述实施方案中的任一项中，-z-rx选自
其中所述z部分进一步被0-3个r8取代，且r8与以上定义相同。
在式(i)的前述实施方案中的任一项中，y为n。
在式(i)的前述实施方案中的任一项中，y为ch；且l1为共价键、o、s、nh、-o-(c1-3亚烷基)-、-s-(c1-3亚烷基)-或-nh-(c1-3亚烷基)-。
在式(i)的前述实施方案中的任一项中，r2为苯基或含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的6-元杂芳基，其中所述苯基或杂芳基被0-3个r10取代。
在式(i)的前述实施方案中的任一项中，l2为共价键。
在式(i)的一个实施方案中，所述化合物表示为式(ii)：
x1为c或n；
x2和x3各自独立地为ch、n、o或s；
z为苯基或含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的5-至10-元杂芳基，其中所述苯基和杂芳基独立地被0-3个r8取代；
rx为-c(o)or13；
r1为c1-6烷基或c3-5环烷基，其中所述烷基和环烷基各自被0-3个r9取代；
r2为苯基或含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的6-元杂芳基，其中所述苯基和杂芳基各自被0-3个r10取代；
n为0或1的整数；和
r8、r9、r10和r13与以上定义相同。
在式(ii)的前述实施方案中的任一项中，
所述
在式(ii)的前述实施方案中的任一项中，r2为苯基或吡啶基，其各自独立地被0-3个r10取代。
在式(ii)的前述实施方案中的任一项中，
所述
在式(ii)的前述实施方案中的任一项中，z为8-至10-元双环杂芳基，其中所述杂芳基被0-3个r8取代。
在式(ii)的前述实施方案中的任一项中，rx为-c(o)oh。
在一个实施方案中，本发明化合物表示为式(iii)：
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂合物；其中：
虚直线为任选的共价键；
z为萘基或含1或2个杂原子的9-至10-元双环杂芳基，所述杂原子独立地选自n和s，其中所述萘基和杂芳基各自独立地被0-3个r8取代；
rx为-c(o)oh或
r1为环丙基或cf3；
r2为苯基或吡啶基，其中所述苯基和吡啶基各自独立地被0-3个r10取代；
n为0或1的整数；
r8各自独立地为卤素、c1-4烷基、c1-4卤代烷基、c1-4卤代烷氧基、-o(被0至1个c1-4烷氧基取代的c1-4烷基)、-o(ch2)0-1(c3-6环烷基)，或四唑基；和
r10独立地为卤素、c1-4烷基、c1-4卤代烷基、c1-4烷氧基，或c1-4卤代烷氧基。
在式(iii)的一些实施方案中，所述
在式(iii)的一些实施方案中，z为选自苯并噻唑基、咪唑并吡啶基、吡咯并吡啶基、喹啉基和吲哚基的杂芳基，其中所述杂芳基被0-3个r8取代。
在式(iii)的一些实施方案中，r1为环丙基。在式(iii)的其它实施方案中，r1为-cf3。
在式(iii)的一些实施方案中，r8各自独立地为f、-ch3、-och3、-och2ch3、-och(ch3)2、-och2ch2och3、-cf3、-ochf2、-och2(环丙基)、-o(环丁基)，或-o(环戊基)。
在式(iii)的一些实施方案中，r10各自独立地为cl、-ch3、-cf3，或-ocf3。
在式(i)或式(ii)的一个实施方案中，x1为c。
在式(i)或式(ii)的一个实施方案中，x2为n。
在式(i)或式(ii)的一个实施方案中，x3为o。
在式(i)的一个实施方案中，x4为c。
在式(i)的一个实施方案中，x1为c且x4为c。
在式(i)或式(ii)的一个实施方案中，x2和x3之一为n且x2和x3的另一项为o。
在式(i)或式(ii)的一个实施方案中，x2为n和x3为o。
在式(i)或式(ii)的一个实施方案中，x2为o和x3为n。
在式(i)或式(ii)的一个实施方案中，x1为c；x2为n；且x3为o。
在式(i)的一个实施方案中，x1为c；x2和x3之一为n且x2和x3的另一项为o；且x4为c。
在式(i)的一个实施方案中，x1为c；x2为n；x3为o；且x4为c。
在式(i)的一个实施方案中，x1为c；x2为o；x3为n；且x4为c。
在式(i)或式(ii)的一个实施方案中，x1为n；x2为n；且x3为n。
在式(i)的一个实施方案中，所述
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，e为cr3或cr3ar3b。该实施方案涵盖其中e为ch或ch2的化合物。
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，e为cr3。该实施方案涵盖其中e为ch的化合物。
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，e为cr3ar3b。该实施方案涵盖其中e为ch2的化合物。
在式(i)的一个实施方案中，h为1且m为1。
在式(i)的一个实施方案中，h和m之一为1且h和m的另一项为2。
在式(i)的一个实施方案中，h为2且m为2。
在式(i)的一个实施方案中，g为0且n为0。该实施方案涵盖其中y为ch或n的化合物。
在式(i)的一个实施方案中，g和n之一为0且g和n的另一项为1。该实施方案涵盖其中y为ch或n的化合物。
在式(i)的一个实施方案中，g为1且n为1。该实施方案涵盖其中y为ch或n的化合物。
在式(i)的一个实施方案中，h为1或2；m为1或2；g为0或1；n为0或1；且y为n。
在式(i)的一个实施方案中，h为1或2；m为1或2；g为0或1；n为0或1；y为n；且e为ch、ch2或nh。
在式(i)的一个实施方案中，e为ch、ch2或nh。
在式(i)的一个实施方案中，所述
在式(i)的一个实施方案中，所述
在式(i)的一个实施方案中，所述
在式(i)的一个实施方案中，所述
在式(i)的一个实施方案中，l1为共价键、o、nr17、-s(o)2-、c1-2亚烷基、c1-2杂亚烷基、c2-3亚烯基、c2-3亚炔基、苯基，或含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的5-至6-元杂芳基；其中所述亚烷基、杂亚烷基、苯基和杂芳基各自独立地被0-3个r11取代。
在式(i)的一个实施方案中，l1为共价键、o、nh、-s(o)2-、c1-2亚烷基、-ch2o-、-och2-、-ch＝ch-、-c≡c-、苯基，或含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的5-至6-元杂芳基；其中所述苯基和杂芳基各自独立地被0-3个r11取代。
在式(i)的一个实施方案中，l1为共价键、-ch2-、-ch2ch2-、-s(o)2-或苯基。
在式(i)的一个实施方案中，l1为共价键。
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，z为6-至10-元芳基、含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的5-至10-元杂芳基，3-至6-元碳环基，或含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的4-至10-元杂环基，其中所述芳基、杂芳基、碳环基以及杂环基独立地被0至5个r8取代。该实施方案涵盖其中r8各自独立地为f、cl、c1-4烷基、c1-2氟烷基、c1-3羟基烷基、c2-4烷氧基烷基、c1-3烷氧基、c1-2氟烷氧基、-o(ch2)1-3oh、-o(ch2)1-3o(c1-2烷基)、-c(o)o(c1-4烷基)、-o(c3-6环烷基)、-o(氧杂环丁烷基)、-o(四氢呋喃基)或-och2(c3-6环烷基)的化合物；
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，z为苯基、含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的5-至10-元杂芳基，或3-至6-元碳环基，其中所述苯基、杂芳基和碳环基独立地被0至5个r8取代。该实施方案涵盖其中r8各自独立地为f、c1-4烷基、c1-2氟烷基、-ch2oh、-ch2ch2och3、-och3、-och2ch3、-och(ch3)2、-ochf2、-ocf3、-och2ch2oh、-och2chf2、-och2ch2och3、-c(o)oc(ch3)3、-o(环丁基)、-o(环戊基)、-o(氧杂环丁烷基)、-o(四氢呋喃基)，或-och2(环丙基)的化合物。
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，z为环丙基、环丁基、噻唑基、苯基、吡啶基、哒嗪基、吲哚基、苯并[d]噻唑基、萘基、吡咯并[2,3-b]吡啶基、吡咯并[2,3-d]嘧啶基、咪唑并[3,4-a]吡啶基、噻唑并[5,4-b]吡啶基、萘基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、喹啉基、异喹啉基，或噌啉基，其各自被0-2个r8取代。该实施方案涵盖其中r8各自独立地为f、c1-4烷基、c1-2氟烷基、-chf2、-cf3、-ch2oh、-ch2ch2och3、-och3、-och2ch3、-och(ch3)2、-ochf2、-ocf3、-och2ch2oh、-och2chf2、-och2ch2och3、-c(o)oc(ch3)3、-o(环丁基)、-o(环戊基)、-o(氧杂环丁烷基)、-o(四氢呋喃基)或-och2(环丙基)的化合物。
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，rz选自-cn、-c(o)r16、-c(o)or13、-c(o)nr14ar14b、-nr12c(o)r12、甲基四唑基、
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，l3为共价键、c1-2亚烷基、-o(c1-2亚烷基)-或-c(o)nr12-ch2-，其中所述c1-2亚烷基被0-3个r15取代；且rz选自-cn、-c(o)r16、-c(o)or13、-c(o)nr14ar14b、-nr12c(o)r12、甲基四唑基、
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，l3为共价键、c1-2亚烷基，或-o(c1-2亚烷基)-；且rz选自-cn、-c(o)r16、-c(o)or13、-c(o)nr14ar14b、-nr12c(o)r12、甲基四唑基、
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，l3为共价键、c1-2亚烷基，或-o(c1-2亚烷基)-；且rz选自-cn、-c(o)r16、-c(o)or13、-c(o)nr14ar14b、-nr12c(o)r12、甲基四唑基、
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，rx为-cn、-c(o)oh、-ch2c(o)oh、-c(o)o(c1-3烷基)、-c(o)(c1-4烷基)、-c(o)nr14ar14b、-c(o)nhs(o)2(c3-6环烷基)、-nhc(o)(c1-4烷基)、-och2c(o)oh、-c(o)(氮杂环丁烷基)、-c(o)(二氟氮杂环丁烷基)、-c(o)(吗啉基)、-c(o)(甲基噁二唑基)、-c(o)(哌啶基)、-c(o)(羟基哌啶基)、-c(o)(吡咯烷基)、羧基(三羟基)吡喃基、四唑基或甲基四唑基。
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，rx为-cn、-c(o)oh、-ch2c(o)oh、-c(o)och2ch3、-c(o)ch3、-c(o)nh2、-c(o)n(ch3)2、-c(o)n(ch3)(ch2ch3)、c(o)n(ch2ch3)2、-c(o)n(ch3)(ch2ch2och3)、-c(o)nh(环丙基)、-c(o)nhs(o)2(环丙基)、-nhc(o)ch3、-och2c(o)oh、-c(o)(氮杂环丁烷基)、-c(o)(二氟氮杂环丁烷基)、-c(o)(吗啉基)、-c(o)(甲基噁二唑基)、-c(o)(哌啶基)、-c(o)(羟基哌啶基)、-c(o)(吡咯烷基)、羧基(三羟基)吡喃基、四唑基或甲基四唑基；
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，z为环丙基、环丁基、噻唑基、苯基、吡啶基、哒嗪基、吲哚基、苯并[d]噻唑基、萘基、吡咯并[2,3-b]吡啶基、吡咯并[2,3-d]嘧啶基、咪唑并[3,4-a]吡啶基、噻唑并[5,4-b]吡啶基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、喹啉基、异喹啉基，或噌啉基，其各自被0-2个r8取代；r8各自独立地为f、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch(ch3)2、-chf2、-cf3、-ch2oh、-ch2ch2och3、-och3、-och2ch3、-och(ch3)2、-ochf2、-ocf3、-och2ch2oh、-och2chf2、-och2ch2och3、-c(o)oc(ch3)3、-o(环丁基)、-o(环戊基)、-o(氧杂环丁烷基)、-o(四氢呋喃基)，或-och2(环丙基)；且rx为-cn、-c(o)oh、-ch2c(o)oh、-c(o)och2ch3、-c(o)ch3、-c(o)nh2、-c(o)n(ch3)2、-c(o)n(ch3)(ch2ch3)、c(o)n(ch2ch3)2、-c(o)n(ch3)(ch2ch2och3)、-c(o)nh(环丙基)、-c(o)nhs(o)2(环丙基)、-nhc(o)ch3、-och2c(o)oh、-c(o)(氮杂环丁烷基)、-c(o)(二氟氮杂环丁烷基)、-c(o)(吗啉基)、-c(o)(甲基噁二唑基)、-c(o)(哌啶基)、-c(o)(羟基哌啶基)、-c(o)(吡咯烷基)、羧基(三羟基)吡喃基、四唑基或甲基四唑基。
在式(i)的一个实施方案中，l2为共价键、c1-3亚烷基或c1-3杂亚烷基，其中所述亚烷基和杂亚烷基独立地被0-3个r16取代；且r2为苯基、含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的5-至6-元杂芳基，3-至6-元碳环基，或含1-3个独立选自n、o和s的杂原子的4-至6-元杂环基，其中所述苯基、杂芳基、碳环基以及杂环基独立地被0-5个r10取代。
在式(i)的一个实施方案中，l2为共价键或-ch(环丙基)-；且r2为环丙基、苯基或吡啶基，其中所述苯基和吡啶基独立地被1-2个r10取代。
在式(i)的一个实施方案中，l2为-ch(环丙基)-；且r2为环丙基。
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，r2为苯基或吡啶基，其中所述苯基和吡啶基独立地被1-2个r10取代。该实施方案涵盖其中r10各自独立地为cl、-ch3、-ch2ch3、-cf3、-ocf3或-ch＝ch2的化合物。
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，r1为c1-4烷基、c3-5环烷基，或c4-6杂环基，其中所述烷基和环烷基独立地被0-3个r9取代。
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，r1为c1-4烷基或c3-5环烷基。
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，r1为c3-5环烷基。
在式(i)、式(ii)或式(iii)的一个实施方案中，r1为环丙基。
在式(i)的一个实施方案中，所述
在式(i)的一个实施方案中，
l1为共价键、-ch2-、-ch2ch2-、-s(o)2-或苯基；
z为环丙基、环丁基、噻唑基、苯基、吡啶基、哒嗪基、苯并[d]噻唑基、吲哚基、吡咯并[2,3-b]吡啶基、吡咯并[2,3-d]嘧啶基、咪唑并[3,4-a]吡啶基、噻唑并[5,4-b]吡啶基、萘基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、喹啉基、异喹啉基，或噌啉基，其各自被0-2个r8取代；
rx为-cn、-c(o)oh、-ch2c(o)oh、-c(o)och2ch3、-c(o)ch3、-c(o)nh2、-c(o)n(ch3)2、-c(o)n(ch3)(ch2ch3)、c(o)n(ch2ch3)2、-c(o)n(ch3)(ch2ch2och3)、-c(o)nh(环丙基)、-c(o)nhs(o)2(环丙基)、-nhc(o)ch3、-och2c(o)oh、-c(o)(氮杂环丁烷基)、-c(o)(二氟氮杂环丁烷基)、-c(o)(吗啉基)、-c(o)(甲基噁二唑基)、-c(o)(哌啶基)、-c(o)(羟基哌啶基)、-c(o)(吡咯烷基)、羧基(三羟基)吡喃基、四唑基，或甲基四唑基；和
r8各自独立地为f、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch(ch3)2、-chf2、-cf3、-ch2oh、-ch2ch2och3、-och3、-och2ch3、-och(ch3)2、-ochf2、-ocf3、-och2ch2oh、-och2chf2、-och2ch2och3、-c(o)oc(ch3)3、-o(环丁基)、-o(环戊基)、-o(氧杂环丁烷基)、-o(四氢呋喃基)，或-och2(环丙基)。
一个实施方案提供式(i)的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂合物，其中：
x1和x4各自独立地为c或n；
x2为ch或n；
x3为ch、n或o；
l1为共价键、-ch2-、-ch2ch2-、-s(o)2-或苯基；
z为环丙基、环丁基、噻唑基、苯基、吡啶基、哒嗪基、苯并[d]噻唑基、吲哚基、吡咯并[2,3-b]吡啶基、吡咯并[2,3-d]嘧啶基、咪唑并[3,4-a]吡啶基、噻唑并[5,4-b]吡啶基、萘基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、喹啉基、异喹啉基，或噌啉基，其各自被0-2个r8取代；
rx为-cn、-c(o)oh、-ch2c(o)oh、-c(o)och2ch3、-c(o)ch3、-c(o)nh2、-c(o)n(ch3)2、-c(o)n(ch3)(ch2ch3)、c(o)n(ch2ch3)2、-c(o)n(ch3)(ch2ch2och3)、-c(o)nh(环丙基)、-c(o)nhs(o)2(环丙基)、-nhc(o)ch3、-och2c(o)oh、-c(o)(氮杂环丁烷基)、-c(o)(二氟氮杂环丁烷基)、-c(o)(吗啉基)、-c(o)(甲基噁二唑基)、-c(o)(哌啶基)、-c(o)(羟基哌啶基)、-c(o)(吡咯烷基)、羧基(三羟基)吡喃基、四唑基，或甲基四唑基；
r1为环丙基；
l2为共价键或-ch(环丙基)-；
r2为环丙基、苯基，或吡啶基，其中所述苯基和吡啶基独立地被1-2个r10取代；
r8各自独立地为f、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch(ch3)2、-chf2、-cf3、-ch2oh、-ch2ch2och3、-och3、-och2ch3、-och(ch3)2、-ochf2、-ocf3、-och2ch2oh、-och2chf2、-och2ch2och3、-c(o)oc(ch3)3、-o(环丁基)、-o(环戊基)、-o(氧杂环丁烷基)、-o(四氢呋喃基)，或-och2(环丙基)；和
r10各自独立地为cl、-ch3、-ch2ch3、-cf3、-ocf3或-ch＝ch2。
在一个实施方案中，本发明提供选自以下的化合物：
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂合物。
在一个实施方案中，本发明提供选自以下的化合物：
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂合物。
在一个实施方案中，本发明尤其提供选自如说明书中所描述的任一实施例的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂合物。
在一个实施方案中，本发明的化合物的fxrec50值≤5000nm，使用瞬时人类fxr/gal4-萤光素酶报道基因分析法；在另一实施方案中，本发明的化合物的fxrec50值≤1000nm；在另一实施方案中，本发明的化合物的fxrec50值≤500nm；在另一实施方案中，本发明的化合物的fxrec50值≤200nm；在另一实施方案中，本发明的化合物的fxrec50值≤100nm；在另一实施方案中，本发明的化合物的fxrec50值≤50nm。
ii.药物组合物、治疗用途及组合
在另一实施方案中，本发明提供一种组合物，其包含本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂合物中的至少一者。
在另一实施方案中，本发明提供一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体及本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体、或药学上可接受的盐或溶剂合物中的至少一者。
在另一实施方案中，本发明提供一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体及治疗有效量的本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂合物中的至少一者。
在另一实施方案中，本发明提供一种用于制备本发明的化合物的方法。
在另一实施方案中，本发明提供一种用于制备本发明的化合物的中间体。
在另一实施方案中，本发明提供一种如上文所定义的药物组合物，其进一步包含一种或多种其它治疗剂。
在另一实施方案中，本发明提供一种用于治疗需要此类治疗的患者中的与胆酸失调相关的疾病、病症或病状的方法，且该方法包含向该患者给予治疗有效量的本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂合物。
在另一实施方案中，本发明提供一种用于治疗需要此类治疗的患者中的与法尼醇x受体(fxr)活性相关的疾病、病症或病状的方法，其包含向该患者给予治疗有效量的本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂合物。
在另一实施方案中，本发明提供一种用于治疗疾病、病症或病状的方法，其包含单独或任选与另一种本发明的化合物及/或至少一种其它类型的治疗剂组合地，向需要此类治疗的患者给予治疗有效量的本发明的化合物中的至少一者。
在另一实施方案中，本发明提供一种用于在患者中引发法尼醇x受体(fxr)激动效应的方法，其包含向该患者给予治疗有效量的本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂合物。
在一些实施方案中，疾病、病症或病状与fxr功能障碍相关，包括病理性纤维化、癌症、炎性病症、代谢性或胆汁郁积性病症。
在一些实施方案中，疾病、病症或病状与纤维化相关，包括肝纤维化、胆纤维化、肾纤维化、心脏纤维化、皮肤纤维化、眼纤维化及胰纤维化。
在其它实施方案中，疾病、病症或病状与细胞增生性病症相关，例如癌症。在一些实施方案中，癌症包括实体肿瘤生长或赘瘤形成。在其它实施方案中，癌症包括肿瘤转移。在一些实施方案中，癌症为肝脏、胆囊、小肠、大肠、肾脏、前列腺、膀胱、血液、骨头、大脑、乳房、中枢神经系统、子宫颈、结肠、子宫内膜、食道、生殖器、泌尿生殖道、头部、喉、肺部、肌肉组织、颈部、口腔粘膜或鼻粘膜、卵巢、胰脏、皮肤、脾、胃、睾丸或甲状腺的癌症。在其它实施方案中，癌症为癌瘤、肉瘤、淋巴瘤、白血病、黑素瘤、间皮瘤、多发性骨髓瘤或精原细胞瘤。
可根据本发明预防、调节或治疗的与fxr活性相关的疾病、病症或病状的实例包括(但不限于)移植注射、纤维化病症(例如肝纤维化、肾脏纤维化)、炎性病症(例如急性肝炎、慢性肝炎、非酒精性脂肪变性肝炎(nash)、大肠急躁症(ibs)、炎性肠病(ibd))，以及细胞增生性病症(例如癌症、骨髓瘤、纤维瘤、肝细胞癌、结肠直肠癌、前列腺癌、白血病、卡波西肉瘤(kaposi'ssarcoma)、实体肿瘤)。
适于通过本发明的化合物预防或治疗的纤维化病症、炎性病症以及细胞增生性病症包括(但不限于)非酒精性脂肪肝病(nafld)、酒精性或非酒精性脂肪变性肝炎(nash)、急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、药物诱导的肝炎、胆硬化、门静脉高血压、再生障碍、肝功能低下、肝血流病症、肾病、肠易激综合征(ibs)、炎性肠病(ibd)、胰腺分泌异常、良性前列腺增生、神经病性膀胱疾病、糖尿病肾病变、病灶性节段性肾小球硬化症、iga肾病、由药物或移植诱导的肾病、自体免疫性肾病、狼疮性肾炎、肝纤维化、肾脏纤维化、慢性肾病(ckd)、糖尿病性肾病(dkd)、皮肤纤维化、瘢痕瘤、全身性硬化症、硬皮病、病毒诱导的纤维化、特发性肺纤维化(ipf)、间质性肺病、非特异性间质肺炎(nsip)、常见间质肺炎(uip)、放射线诱发的纤维化、家族性肺纤维化、呼吸道纤维化、慢性阻塞性肺病(copd)、脊髓肿瘤、椎间盘突出、椎管狭窄、心脏衰竭、心脏纤维化、血管纤维化、血管周围纤维化、口蹄疫、癌症、骨髓瘤、纤维瘤、肝细胞癌、结肠直肠癌、前列腺癌、白血病、慢性淋巴细胞性白血病、卡波西肉瘤、实体肿瘤、脑梗塞、脑出血、神经痛、周边神经病变、年龄相关性黄斑变性(amd)、青光眼、眼纤维化、角膜疤痕、糖尿病性视网膜病变、增生性玻璃体视网膜病变(pvr)、瘢痕性类天疱疮青光眼滤光手术疤痕、克罗恩氏病(crohn'sdisease)或全身性红斑性狼疮症；由伤口愈合异常引起的瘢痕瘤形成；在器官移植之后发生的纤维化、骨髓纤维化及肌瘤。在一个实施方案中，本发明提供一种用于治疗纤维化病症、炎性病症或细胞增生性病症的方法，其包含单独或任选与另一种本发明的化合物及/或至少一种其它类型的治疗剂组合地，向需要此类治疗的患者给予治疗有效量的本发明的化合物中的至少一者。
在另一实施方案中，本发明提供一种用于疗法的本发明的化合物。
在另一实施方案中，本发明提供一种用于疗法的本发明的化合物，该疗法为用于治疗其纤维化病症、炎性病症或细胞增生性病症。
在另一实施方案中，本发明亦提供本发明的化合物的用途，其为用于制造用以治疗其纤维化病症、炎性病症或细胞增生性病症的药剂。
在另一实施方案中，本发明提供一种用于治疗纤维化病症、炎性病症或细胞增生性病症的方法，其包含向有需要的患者给予治疗有效量的第一及第二治疗剂，其中该第一治疗剂为本发明的化合物。
在另一实施方案中，本发明提供同时、分别或依序用于疗法中的本发明的化合物与其它治疗剂的组合制剂。
在另一实施方案中，本发明提供同时、分别或依序用于治疗纤维化病症、炎性病症或细胞增生性病症的本发明的化合物与其它治疗剂的组合制剂。
本发明的化合物可与其它治疗剂组合使用，所述其它治疗剂例如一种或多种抗纤维化及/或抗炎治疗剂。
在一个实施方案中，组合药物组合物或组合方法或组合用途中使用的其它治疗剂为选自以下治疗剂中的一或多者，优选一至三者：tgfβ受体抑制剂(例如，高伦替布(galunisertib))、tgfβ合成抑制剂(例如，吡非尼酮(pirfenidone))、血管内皮生长因子(vegf)抑制剂、血小板源生长因子(pdgf)及纤维母细胞生长因子(fgf)受体激酶(例如，尼达尼布(nintedanib))、人类化抗αvβ6整合素单克隆抗体(例如，3g9)、人类重组型正五聚素蛋白-2、重组型人类血清淀粉状蛋白p、针对tgfβ-1、-2及-3的重组型人类抗体、内皮素受体拮抗剂(例如，马西替坦(macitentan))、干扰素γ、c-jun氨基端激酶(jnk)抑制剂(例如，4-[[9-[(3s)-四氢-3-呋喃基]-8-[(2,4,6-三氟苯基)氨基]-9h-嘌呤-2-基]氨基]-反-环己醇、3-戊基苯乙酸(pbi-4050)、含有锰(iii)的经四重取代的卟啉衍生物、靶向伊红趋素-2(eotaxin-2)的单克隆抗体、介白素-13(il-13)抗体(例如，雷布瑞奇单抗(lebrikizumab)、塔罗金单抗(tralokinumab))、靶向介白素4(il-4)及介白素13(il-13)的双特异性抗体、nk1速激肽受体激动剂(例如，sar9、met(o2)11-p物质)、辛曲德开贝舒托(cintredekinbesudotox)、针对结缔组织生长因子的人类重组型dna衍生的igg1κ单克隆抗体及完全人类igg1κ抗体(对cc-趋化细胞素配体2具有选择性，例如卡鲁单抗(carlumab)、ccx140)、抗氧化剂(例如，n-乙酰半胱氨酸)、磷酸二酯酶5(pde5)抑制剂(例如，西地那非(sildenafil))、用于治疗障碍性气管疾病的药剂(例如蕈毒碱拮抗剂，例如噻托铵(tiotropium)、溴化丙托铵(ipatropiumbromide))、肾上腺素β2激动剂(例如，羟甲叔丁肾上腺素、沙美特罗(salmeterol))、皮质类固醇(例如，曲安西龙(triamcinolone)、地塞米松(dexamethasone)、氟替卡松(fluticasone))、免疫抑制剂(例如，他克莫司(tacrolimus)、雷帕霉素(rapamycin)、吡美莫司(pimecrolimus))以及适用于治疗纤维化病状(例如肝、胆及肾脏纤维化)、非酒精性脂肪肝病(nalfd)、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、心脏纤维化、特发性肺纤维化(ipf)及全身性硬化症的治疗剂。适用于治疗此类纤维化病状的治疗剂包括(但不限于)fxr激动剂(例如，oca、gs-9674及ljn452)；loxl2抑制剂(例如，辛图珠单抗(simtuzumab))；lpa1拮抗剂(例如，bms-986020及sar100842)；ppar调节剂(例如，埃菲卟喏(elafibrinor)、吡格列酮(pioglitazone)及沙格列让(saroglitazar)、iva337)；ssao/vap-1抑制剂(例如，pxs-4728a及sze5302)；ask-1抑制剂(例如，gs-4997或胜龙塞替(selonsertib))；acc抑制剂(例如，cp-640186及ndi-010976或gs-0976)；fgf21模拟物(例如，ly2405319及bms-986036)；卡斯蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生(emricasan))；nox4抑制剂(例如，gkt137831)；mgat2抑制剂(例如，bms-963272)；αv整合素抑制剂(例如，阿吐珠单抗(abituzumab))；及胆酸/脂肪酸结合物(例如，阿雷美罗(aramchol))。本发明的各种实施方案的fxr激动剂亦可与一种或多种治疗剂组合使用，例如ccr2/5抑制剂(例如，森尼韦若(cenicriviroc))；半乳糖凝集素-3抑制剂(例如，td-139、gr-md-02)；白三烯受体拮抗剂(例如，泰鲁斯特(tipelukast)、孟鲁司特(montelukast))；sglt2抑制剂(例如，达格列净(dapagliflozin)、瑞格列净(remogliflozin))；glp-1受体激动剂(例如，利拉鲁肽(liraglutide)及司美鲁肽(semaglutide))；fak抑制剂(例如，gsk-2256098)；cb1反向激动剂(例如，jd-5037)；cb2激动剂(例如，apd-371及jbt-101)；自分泌运动因子抑制剂(例如，glpg1690)；脯胺酰基第三rna合成酶抑制剂(例如，卤夫酮(halofugenone))；fpr2激动剂(例如，zk-994)；及thr激动剂(例如，mgl:3196)。在另一实施方案中，用于组合药物组合物或组合方法或组合用途中的其它治疗剂为选自免疫肿瘤剂中的一或多者，优选一至三者，所述免疫肿瘤剂例如阿仑单抗(alemtuzumab)、阿特珠单抗(atezolizumab)、伊派利单抗(ipilimumab)、纳武单抗(nivolumab)、奥伐木单抗(ofatumumab)、帕博利珠单抗(pembrolizumab)及利妥昔单抗(rituximab)。
本发明的化合物可通过任何适合手段给予以用于本文中所描述的用途中的任一者，例如，经口给予，例如片剂、胶囊(其各自包括持续释放或定时释放调配物)、丸剂、散剂、颗粒、酏剂、酊剂、悬浮液、糖浆及乳液；舌下给予；经颊给予；非经肠给予，例如经皮下、静脉内、肌肉内或胸骨内注射，或输注技术(例如，呈无菌可注射水溶液或非水溶液或悬浮液的形式)；经鼻给予，包括给予至鼻粘膜，例如通过吸入喷雾；局部给予，例如以乳膏或软膏形式；或经直肠给予，例如以栓剂形式。其可单独给予，但通常将与基于所选给药途径及标准医药实践选择的药物载体一起给予。
术语“药物组合物”是指包含本发明的化合物与至少一种其它药学上可接受的载体的组合的组合物。“药学上可接受的载体”是指本领域中通常接受用于向动物(尤其哺乳动物)递送生物活性剂的介质，视给药模式的性质及剂型而定，包括(亦即)佐剂、赋形剂或媒剂，例如稀释剂、防腐剂、填充剂、流动调节剂、崩解剂、湿润剂、乳化剂、悬浮剂、甜味剂、调味剂、芳香剂、抗细菌剂、抗真菌剂、润滑剂及分散剂。药学上可接受的载体为根据一般本领域技术人员范围内的多个因素调配。这些因素包括(但不限于)：所调配的活性剂的类型及性质；被给予含有该试剂的组合物的受试者；组合物的所欲给药途径；以及所靶向的治疗适应症。药学上可接受的载体包括水性及非水性液体介质，以及各种固体及半固体剂型。除活性剂以外，此类载体可包括多种不同成分及添加剂，此类其它成分出于一般本领域技术人员公知的多种原因(例如使活性剂、粘合剂稳定等)而包括于调配物中。适合的药学上可接受的载体及涉及其选择的因素的描述见于多种易于获得的来源中，例如remington'spharmaceuticalsciences，第18版(1990)。
如本文中所使用，术语“治疗(treating/treatment)”是指通过使用本发明的化合物或组合物获得有利或所需结果(包括临床结果)的方法。出于本发明的目的，有利或所需临床结果包括(但不限于)以下中的一或多者：降低由疾病、病症或病状引起的一种或多种症状的严重程度及/或频率；降低疾病、病症或病状的程度或引起疾病、病症或病状消退；使疾病、病症或病状稳定(例如预防或延缓疾病、病症或病状的恶化)；延迟或减慢疾病、病症或病状的进程；改善疾病、病症或病状状态；降低用于治疗疾病、病症或病状所需的一种或多种其它药剂的剂量；及/或提高生活质量。
本发明的化合物的给药方案当然将视已知因素而变化，例如特定药剂的药效学特征及其给药模式及途径；接受者的物种、年龄、性别、健康状况、医学条件及体重；症状的性质及程度；并行发生的治疗的种类；治疗频率；给药途径、患者的肾功能及肝功能以及所需作用。
借助于一般指导，各活性成分在用于所指示作用时的每日经口剂量将在每日约0.01至约5000mg之间，优选每日约0.01至约1000mg之间，且最优选每日约0.01至约250mg之间的范围内。静脉内给予时，在恒定速率输注期间的最优选剂量将在每分钟约0.01至约10mg/kg的范围内。本发明的化合物可以单次日剂量给予，或每日总剂量可分成每日两次、三次或四次分次剂量给予。
化合物通常以与针对所欲给药形式(例如口服片剂、胶囊、酏剂及糖浆)适当选择且与常规医药实践相符的适合的医药稀释剂、赋形剂或载体(在本文中统称为药物载体)的混合物形式给予。
适合于给药的剂型(药物组合物)可含有每剂量单位约0.1毫克至约2000毫克的活性成分。在这些药物组合物中，活性成分通常将以按该组合物的总重量计约0.1-95重量％的量存在。
用于口服给药的典型胶囊含有本发明的化合物中的至少一者(250mg)、乳糖(75mg)及硬脂酸镁(15mg)。混合物通过60目筛且装入1号明胶胶囊中。
通过将本发明的化合物中的至少一者(250mg)以无菌方式放入小瓶中、以无菌方式冷冻干燥及密封来制造典型可注射制剂。对于使用，将小瓶的内含物与2ml生理食盐水混合产生可注射制剂。
本发明在其范围内包括药物组合物，所述药物组合物包含单独或与药物载体组合的治疗有效量的至少一种本发明的化合物作为活性成分。任选，本发明的化合物可单独、与本发明的其它化合物组合或与一种或多种(优选一至三种)其它治疗剂组合使用，所述其它治疗剂例如ask-1抑制剂、ccr2/5拮抗剂、自分泌运动因子抑制剂、lpa1受体拮抗剂或其它医药活性物质。
当与本发明的化合物组合使用时，上述其它治疗剂可以例如physicians'deskreference(如上文所述的专利中)中所指示的量或另外由一般本领域技术人员测定的量使用。
尤其当以单个剂量单元形式提供时，经组合的活性成分之间可能存在化学相互作用。因此，当本发明的化合物及第二治疗剂在单个剂量单元中组合时，其经调配使得尽管活性成分在单个剂量单元中组合，但活性成分之间的物理接触最小化(亦即降低)。举例而言，一种活性成分可包覆肠溶包衣。通过对活性成分中的一种包覆肠溶包衣，不仅可使经组合的活性成分之间的接触最小化，而且可控制这些组分中的一者在胃肠道中的释放，使得这些组分中的一者不在胃中释放，而在肠道中释放。活性成分中的一者亦可包覆有影响在整个胃肠道中持续释放的物质，且亦用以使经组合的活性成分之间的物理接触最小化。此外，持续释放的组分可额外包覆肠溶包衣使得此组分的释放仅在肠道中发生。另一种方法将涉及组合产物的调配，其中一种组分包覆有持续及/或肠释放聚合物，且另一组分亦包覆有例如低粘度级别的羟丙基甲基纤维素(hpmc)的聚合物或本领域中已知的其它适合的材料，以进一步分隔活性组分。聚合物包衣用以形成与另一组分的相互作用的额外屏障。
本领域技术人员将容易地获得这些以及其它用于使本发明的组合产物的组分之间的接触最小化的方式(无论以单个剂型给予或以各别形式但通过相同方式同时给予)，只要与本发明相符即可。
本发明的化合物可单独或与一种或多种(优选一至三种)其它治疗剂组合给予。“组合给予”或“组合疗法”是指同时向所治疗的哺乳动物给予本发明的化合物及一种或多种(优选一至三种)其它治疗剂。当组合给予时，各组分可同时给予或以任何顺序在不同时间点依序给予。因此，各组分可单独但时间上充分接近地给予，以便提供所需治疗作用。
本发明的化合物亦适用作涉及fxr激动剂的测试或分析法中的标准或参考化合物，例如作为质量标准或对照。此类化合物可提供于例如用于涉及fxr激动剂活性的医药研究的市售试剂盒中。举例而言，本发明的化合物可在分析法中用作参考物以将其已知活性与具有未知活性的化合物相比较。此将确保实验者正确进行分析法且提供比较基础，尤其当测试化合物为参考化合物的衍生物时。当研发新分析法或方案时，本发明的化合物可用于测试其有效性。
本发明亦涵盖一种制品。如本文中所使用，制品意在包括(但不限于)试剂盒及封装。本发明的制品包含：(a)第一容器；(b)位于该第一容器内的药物组合物，其中该组合物包含：第一治疗剂，其包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐形式；以及(c)药品说明书，其陈述该药物组合物可用于治疗血脂异常及其后遗症。在另一实施方案中，药品说明书陈述该药物组合物可与第二治疗剂组合(如上文所定义)用于治疗纤维化及其后遗症。制品可进一步包含：(d)第二容器，其中组分(a)及(b)位于第二容器内，且组分(c)位于第二容器内或外部。位于第一及第二容器内是指各别容器将条目保持于其边界内。
第一容器为用于容纳药物组合物的收容器。此容器可用于制造、储存、运送及/或个别/整体出售。第一容器意在涵盖瓶子、罐、小瓶、烧瓶、注射器、试管(例如用于乳膏制剂)或用以制备、保持、储存或分配医药产品的任何其它容器。
第二容器为用于容纳第一容器及任选存在的药品说明书的容器。第二容器的实例包括(但不限于)盒(例如卡纸板或塑料)、板条箱、纸盒、袋(例如纸或塑料袋)、小袋及大袋。药品说明书可经由胶带、胶、短纤维或另一附着方法以物理方式附着于第一容器的外部，或其可留在第二容器内部而不借助于任何物理方式附着于第一容器。或者，药品说明书位于第二容器外部上。当位于第二容器的外部上时，药品说明书优选经由胶带、胶、短纤维或另一附着方法以物理方式附着。或者，其可与第二容器外部相邻或接触但不以物理方式附着。
药品说明书为叙述与位于第一容器内的药物组合物有关的信息的标记、卷标、标记物等。所述信息通常将由控管出售制品的地区的监管机构(例如美国食品与药品督管理局(unitedstatesfoodanddrugadministration))决定。优选地，药品说明书具体叙述药物组合物已审批通过的适应症。药品说明书可由任何材料制成，个人可自其读取其中或其上所含的信息。优选地，药品说明书为上面已形成(例如印刷或涂覆)所需信息的可印刷材料(例如纸、塑料、卡纸板、箔、粘着剂背衬纸或塑料等)。
iii.定义
在整个说明书及随附权利要求中，既定化学式或名称应涵盖其所有立体异构体及光学异构体及外消旋体(若此类异构体存在)。除非另外指示，否则所有对掌性(对映异构性及非对映异构性)及外消旋形式在本发明的范围内。化合物中亦可存在c＝c双键、c＝n双键、环系统及其类似物的多种几何异构体，且所有此类稳定异构体均涵盖于本发明中。描述本发明的化合物的顺式及反式(或e-及z-)几何异构体且可以异构体混合物形式或以经分离的异构形式分离。本发明的化合物可以光学活性或外消旋形式分离。光学活性形式可通过拆分外消旋形式或通过自光学活性起始物质合成来制备。用于制备本发明的化合物的所有方法及其中制备的中间体视为本发明的一部分。当制备对映异构或非对映异构产物时，其可通过常规方法分离，例如通过色谱或分步结晶来分离。视方法条件而定，本发明的最终产物以游离(中性)形式或盐形式获得。这些最终产物的游离形式及盐均在本发明的范围内。若有此需要，则可将化合物的一种形式转化成另一种形式。游离碱或酸可转化成盐；盐可转化成游离化合物或另一种盐；本发明的异构化合物的混合物可分离成个别异构体。呈游离形式的本发明的化合物及其盐可以多种互变异构体形式存在，其中氢原子转置至分子的其它部分且分子中的原子之间的化学键因此重排。应理解，所有互变异构体形式只要可能存在则均包括于本发明内。如本文中所使用，“本发明的化合物”是指式(i)、(ii)及(iii)中的任一者所涵盖的一种或多种化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐或溶剂合物。
如本文中所使用，术语“烷基”或“亚烷基”意在包括具有指定数量的碳原子的支链及直链饱和脂族烃基。“烷基”表示单价饱和脂族基(例如乙基)，而“亚烷基”表示二价饱和脂族基(例如亚乙基)。举例而言，“c1至c10烷基”或“c1-10烷基”意在包括c1、c2、c3、c4、c5、c6、c7、c8、c9及c10烷基。“c1至c10亚烷基”或“c1-10亚烷基”意在包括c1、c2、c3、c4、c5、c6、c7、c8、c9及c10亚烷基。此外，举例而言，“c1至c6烷基”或“c1-6烷基”表示具有1至6个碳原子的烷基；且“c1至c6亚烷基”或“c1-6亚烷基”表示具有1至6个碳原子的亚烷基。烷基可未经取代或经取代，其中至少一个氢由另一化学基团置换。实施例烷基包括(但不限于)甲基(me)、乙基(et)、丙基(例如正丙基及异丙基)、丁基(例如正丁基、异丁基、叔丁基)及戊基(例如正戊基、异戊基、新戊基)。当使用“c0烷基”或“c0亚烷基”时，其意在表示直接的键。
除非另有指示，否则如本文中单独或作为另一基团的一部分所使用的术语“低级烷基”包括含有1至8个碳的直链及支链烃，且如本文中单独或作为另一基团的一部分所使用的术语“烷基”及“烷”包括在正链中含有1至20个碳，优选1至10个碳，更佳1至8个碳的直链及支链烃，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、异己基、庚基、4,4-二甲基戊基、辛基、2,2,4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、其各种支链异构体等。
“杂烷基”是指其中一个或多个碳原子已由杂原子(例如o、n或s)置换的烷基。举例而言，若连接至母分子的烷基的碳原子由杂原子(例如o、n或s)置换，则所得杂烷基分别为烷氧基(例如-och3等)、烷基氨基(例如-nhch3、-n(ch3)2等)或硫代烷基(例如-sch3)。若未连接至母分子的烷基的非封端碳原子由杂原子(例如o、n或s)置换且所得杂烷基分别为烷基醚(例如-ch2ch2-o-ch3等)、烷氨基烷基(例如-ch2nhch3、-ch2n(ch3)2等)或硫烷基醚(例如-ch2-s-ch3)。若烷基的碳原子由杂原子(例如o、n或s)置换，则所得杂烷基分别为羟基烷基(例如-ch2ch2-oh)、氨基烷基(例如-ch2nh2)或烷基硫醇基(例如-ch2ch2-sh)。杂烷基可具有例如1至20个碳原子、1至10个碳原子或1至6个碳原子。c1-c6杂烷基是指具有1至6个碳原子的杂烷基。
“烯基”或“亚烯基”意在包括具有指定数目的碳原子及一个或多个、优选一至两个碳-碳双键的直链或支链构型的烃链，其中碳-碳双键可存在于沿着链的任何稳定点处。尽管“烯基”表示单价基团，但“亚烯基”表示二价基团。举例而言，“c2至c6烯基”或“c2-6烯基”(或亚烯基)意在包括c2、c3、c4、c5及c6烯基。烯基的实例包括(但不限于)乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-戊烯基、3,戊烯基、4-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、2-甲基-2-丙烯基及4-甲基-3-戊烯基。
“炔基”或“亚炔基”意在包括具有一个或多个、优选一至三个碳-碳叁键的直链或支链构型的烃链，其中碳-碳叁键可存在于沿着链的任何稳定点处。尽管“炔基”表示单价基团，但“亚炔基”表示二价基团。举例而言，“c2至c6炔基”或“c2-6炔基”(或亚炔基)意在包括c2、c3、c4、c5及c6炔基；例如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基及己炔基。
如本文中所使用，“芳基烷基”(亦称为芳烷基)、“杂芳基烷基”、“碳环基烷基”或“杂环基烷基”是指非环状烷基，其中一个结合于碳原子(通常末端或sp3碳原子)的氢原子分别由芳基、杂芳基、碳环基或杂环基置换。典型芳基烷基包括(但不限于)苯甲基、2-苯基乙-1-基、萘基甲基、2-萘基乙-1-基、萘并苯甲基、2-萘并苯基乙-1-基及其类似基团。芳基烷基、杂芳基烷基、碳环基烷基或杂环基烷基可包含4至20个碳原子及0至5个杂原子，例如烷基部分可含有1至6个碳原子。
如本文中所使用，术语“苯甲基”是指上面一个氢原子由苯基置换的甲基，其中该苯基可任选经1至5个基团，优选1至3个基团、-oh、-och3、cl、f、br、i、-cn、-no2、-nh2、-nh(ch3)、-n(ch3)2、-cf3、-ocf3、-c(＝o)ch3、-sch3、-s(＝o)ch3、-s(＝o)2ch3、-ch3、-ch2ch3、-co2h及-co2ch3取代。“苯甲基”亦可由式“bn”表示。
术语“低级烷氧基”、“烷氧基”或“烷基氧基”、“芳基氧基”或“芳烷氧基”是指连接至氧原子的以上烷基、芳烷基或芳基中的任一者。“c1至c6烷氧基”或“c1-6烷氧基”(或烷基氧基)意在包括c1、c2、c3、c4、c5及c6烷氧基。烷氧基的实例包括(但不限于)甲氧基、乙氧基、丙氧基(例如正丙氧基及异丙氧基)及叔丁氧基。类似地，“低级烷硫基”、“烷硫基”、“硫烷氧基”、“芳基硫基”或“芳烷基硫基”表示具有指定数目的经由硫桥连接的碳原子的如上文所定义的烷基、芳基或芳烷基；例如甲基-s-及乙基-s-。
如本文中单独或作为另一基团的一部分所使用的术语“烷酰基”或“烷基羰基”是指连接至羰基的烷基。举例而言，烷基羰基可由烷基-c(o)-表示。“c1至c6烷基羰基”(或烷基羰基)意在包括c1、c2、c3、c4、c5及c6烷基-c(o)-基团。
如本文中单独或作为另一基团的一部分所使用的术语“烷基磺酰基”或“磺酰胺”是指连接至磺酰基的烷基或氨基。举例而言，烷基磺酰基可由-s(o)2r'表示，而磺酰胺可由-s(o)2nrcrd表示。r'为c1至c6烷基；且rc及rd与下文关于“氨基”所定义相同。
如本文中所使用，单独或作为另一基团的一部分的术语“氨基甲酸酯”是指连接至酰氨基的氧基。举例而言，氨基甲酸酯可由n(rcrd)-c(o)-o-表示，且rc及rd与下文关于“氨基”所定义相同。
如本文中单独或作为另一基团的一部分所使用的术语“酰氨基”是指连接至羰基的氨基。举例而言，酰氨基可由n(rcrd)-c(o)-表示，且rc及rd与下文关于“氨基”所定义相同。
术语“氨基”定义为-nrc1rc2，其中rc1及rc2独立地为h或c1-6烷基；或rc1及rc2与其所连接的原子共同形成3至8元杂环，其任选经一个或多个选自以下的基团取代：卤基、氰基、羟基、氨基、氧代基、c1-6烷基、烷氧基及氨基烷基。当rc1或rc2(或其两者)为c1-6烷基时，氨基亦可称为烷基氨基。烷基氨基的实例包括(但不限于)-nh2、甲氨基、乙基氨基、丙基氨基、异丙氨基及其类似基团。
术语“氨基烷基”是指上面一个氢原子由氨基置换的烷基。举例而言，氨基烷基可由n(rc1rc2)-亚烷基-表示。“c1至c6”或“c1-6”氨基烷基(或氨基烷基)意在包括c1、c2、c3、c4、c5及c6氨基烷基。
如本文中单独或作为另一基团的一部分所使用的术语“卤素”或“卤基”是指氯、溴、氟及碘，其中优选为氯或氟。
“卤烷基”意在包括经一个或多个卤素取代的具有指定数目的碳原子的支链及直链饱和脂族烃基。“c1至c6卤烷基”或“c1-6卤烷基”(或卤烷基)意在包括c1、c2、c3、c4、c5及c6卤烷基。卤烷基的实例包括(但不限于)氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基、五氯乙基、2,2,2-三氟乙基、七氟丙基及七氯丙基。卤烷基的实例亦包括“氟烷基”，其意在包括经1个或更多个氟原子取代的具有指定数目的碳原子的支链及直链饱和脂族烃基。如本文中所使用，术语“多卤烷基”是指包括2至9个，优选2至5个卤基取代基(例如f或cl，优选f)的如上文所定义的“烷基”，例如多氟烷基，例如-ch2cf3、-cf3或-ch2cf2cf3。
卤烷氧基”或“卤烷基氧基”表示具有经由氧桥连接的指定数目的碳原子的如上文所定义的卤烷基。举例而言，“c1至c6卤烷氧基”或“c1-6卤烷氧基”意在包括c1、c2、c3、c4、c5及c6卤烷氧基。卤烷氧基的实例包括(但不限于)三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基及五氟乙氧基。类似地，“卤烷基硫基”或“硫代卤烷氧基”表示具有经由硫桥连接的指定数目的碳原子的如上文所定义的卤烷基；例如三氟甲基-s-及五氟乙基-s-。如本文中所使用，术语“多卤烷氧基”是指包括2至9个，优选2至5个卤基取代基(例如f或cl，优选f)的如上文所定义的“烷氧基”或“烷基氧基”，例如多氟烷氧基，例如-och2cf3、-ocf3或-och2cf2cf3。
“羟基烷基”意在包括经1或多个羟基(oh)取代的具有指定数目的碳原子的支链及直链饱和脂族烃基。“c1至c6羟基烷基”(或羟基烷基)意在包括c1、c2、c3、c4、c5及c6羟基烷基。
术语“环烷基”是指环化烷基，包括单环状、双环状或多环状环系统。“c3至c7环烷基”或“c3-7环烷基”意在包括c3、c4、c5、c6及c7环烷基。环烷基的实例包括(但不限于)环丙基、环丁基、环戊基、环己基及降冰片基。“环烷基”的定义中包括支链环烷基，例如1-甲基环丙基及2-甲基环丙基。
术语“环杂烷基”是指环化杂烷基，包括单环状、双环状或多环状环系统。“c3至c7环杂烷基”或“c3-7环杂烷基”意在包括c3、c4、c5、c6及c7环杂烷基。环杂烷基的实例包括(但不限于)氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、氮杂环丁基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基及哌嗪基。“环杂烷基”的定义中包括支链环杂烷基，例如哌啶基甲基、哌嗪基甲基、吗啉基甲基、吡啶基甲基、吡嗪基甲基、嘧啶基甲基及吡嗪基甲基。
如本文中所使用，术语“氮杂环基”是指在环中含有一个或多个氮原子的环杂烷基。氮杂环基的实例包括(但不限于)吡咯烷基、哌啶基、吗啉基及哌嗪基。
如本文中所使用，“碳环”、“碳环基”或“碳环状”意在是指任何稳定的3、4、5、6、7或8元单环或5、6、7、8、9、10、11、12或13元多环(包括双环或三环)烃环，其中任一者可为饱和或部分不饱和的。亦即，术语“碳环”、“碳环基”或“碳环状”包括(但不限于)环烷基及环烯基。此类碳环的实例包括(但不限于)环丙基、环丁基、环丁烯基、环戊基、环戊烯基、环己基、环庚烯基、环庚基、环庚烯基、金刚烷基、环辛基、环辛烯基、环辛二烯基、[3.3.0]二环辛烷、[4.3.0]二环壬烷、[4.4.0]二环癸烷(十氢萘)、[2.2.2]二环辛烷、芴基、苯基、萘基、二氢茚基、金刚烷基、蒽基及四氢萘基(萘满)。如上文所示，桥接环亦包括于碳环定义中(例如[2.2.2]二环辛烷)。除非另外规定，否则优选碳环为环丙基、环丁基、环戊基、环己基、二氢茚基及四氢萘基。当一个或多个，优选一至三个碳原子连接两个不相邻碳原子时，产生桥接环。优选桥为一或两个碳原子。应注意，桥始终将单环转化成三环。当环桥接时，则关于环所述的取代基亦可存在于桥上。
此外，如本文中单独或作为另一基团的一部分所使用的术语“碳环基”(包括“环烷基”及“环烯基”)包括含有1至3个环的饱和或部分不饱和(含有1或2个双键)环烃基，包括单环烷基、双环烷基及三环烷基，其含有形成环的总共3至20个碳，优选形成环的3至10个碳或3至6个碳，且其可与1或2个如关于芳基所描述的芳环稠合，所述芳环包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环癸基及环十二基、环己烯基、
所述基团中的任一者可任选经1至4个取代基取代，所述取代基例如卤素、烷基、烷氧基、羟基、芳基、芳基氧基、芳基烷基、环烷基、烷基酰氨基、烷酰基氨基、氧代基、酰基、芳基羰基氨基、硝基、氰基、硫醇及/或烷硫基及/或烷基取代基中的任一者。
如本文中所使用，术语“双环碳环”或“双环碳环基”意在是指含有两个稠合环且由碳原子组成的稳定的9或10元碳环环系统。在两个稠合环中，一个环为稠合至第二环的苯环；且第二环为饱和或部分不饱和的5或6元碳环。双环碳环基可在任何可产生稳定结构的碳原子处连接至其侧基。若所得化合物稳定，则本文中所描述的双环碳环基可在任何碳上经取代。双环碳环基的实施例为(但不限于)1,2-二氢萘基、1,2,3,4-四氢萘基及二氢茚基。
如本文中所使用，如本文中单独或作为另一基团的一部分所使用的术语“芳基”是指单环或多环(包括双环及三环)芳族烃，包括例如苯基、萘基、蒽基及菲基。芳基部分为公知的且描述于例如lewis，r.j.编，hawley'scondensedchemicaldictionary，第13版，johnwiley&sons，inc.，newyork(1997)中。在一个实施方案中，术语“芳基”表示在环部分中含有6至10个碳的单环及双环芳族基团(例如苯基或萘基，包括1-萘基及2-萘基)。举例而言，“c6或c10芳基”或“c6-10芳基”是指苯基及萘基。除非另外说明，否则“芳基”、“c6或c10芳基”、“c6-10芳基”或“芳族残基”可未经取代或经1至5个基团，优选1至3个基团取代，所述基团为选自-oh、-och3、f、cl、br、i、-cn、-no2、-nh2、-n(ch3)h、-n(ch3)2、-cf3、-ocf3、-c(o)ch3、-sch3、-s(o)ch3、-s(o)2ch3、-ch3、-ch2ch3、-co2h及-co2ch3。
如本文中所使用，术语“杂环”、“杂环基”或“杂环状基团”意在是指稳定的3、4、5、6或7元单环或5、6、7、8、9、10、11、12、13或14元多环(包括双环及三环)杂环，其为饱和或部分不饱和的且含有碳原子及1、2、3或4个独立地选自由n、o及s组成的群的杂原子；及且包括任何其中以上定义的杂环中的任一者与碳环或芳基(例如苯)环稠合的多环基团。亦即，术语“杂环”、“杂环基”或“杂环状基团”包括非芳环系统，例如杂环烷基及杂环烯基。氮及硫杂原子可任选经氧化(亦即，n→o及s(o)p，其中p为0、1或2)。氮原子可经取代或未经取代(亦即，则为n或nr，其中r为h或另一取代基(若定义))。杂环可在任何可产生稳定结构的杂原子或碳原子处连接至其侧基。若所得化合物为稳定的，则本文中所描述的杂环可在碳或氮原子上经取代。杂环中的氮可任选经四级铵化。优选的是，当杂环中的s及o原子的总数超过1时，这些杂原子彼此不相邻。杂环中的s及o原子的总数优选不超过1。杂环基的实例包括(但不限于)氮杂环丁基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、向日葵基、吡喃基、吗啉基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、吗啉基和二氢呋喃并[2,3-b]四氢呋喃。
如本文中所使用，术语“双环杂环”或“双环杂环基”意在是指稳定的9或10元杂环系统，其含有两个稠环且由碳原子及1、2、3或4个独立地选自由n、o及s组成的群的杂原子组成。在两个稠环中，一个环为5或6元单环芳环，其包含5元杂芳基环、6元杂芳基环或苯环，各自与第二环稠合。第二环为5或6元单环，其为饱和、部分不饱和或不饱和的且包含5元杂环、6元杂环或碳环(条件是当第二环为碳环时，第一环不为苯并)。
双环杂环基可在任何可产生稳定结构的杂原子或碳原子处连接至其侧基。若所得化合物稳定，则本文所描述的双环杂环基可在碳原子或氮原子上经取代。优选的是，当杂环中的s及o原子的总数超过1时，这些杂原子彼此不相邻。杂环中的s及o原子的总数优选不超过1。双环杂环基的实施例为(但不限于)1,2,3,4-四氢喹啉基、1,2,3,4-四氢异喹啉基、5,6,7,8-四氢-喹啉基、2,3-二氢-苯并呋喃基、色满基、1,2,3,4-四氢-喹噁啉基及1,2,3,4-四氢-喹唑啉基。
杂环的定义中亦包括桥接环。当一个或多个，优选一至三个原子(亦即，c、o、n或s)连接两个不相邻碳或氮原子时，产生桥接环。桥接环的实例包括(但不限于)一个碳原子、两个碳原子、一个氮原子、两个氮原子及碳-氮基团。应注意，桥始终将单环转化成三环。当环桥接时，则关于环所述的取代基亦可存在于桥上。
如本文中所使用，术语“杂芳基”意在是指稳定的单环及多环(包括双环及三环)芳族烃，其包括至少一个杂原子环成员，例如硫、氧或氮。杂芳基包括(但不限于)吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、呋喃基、喹啉基、异喹啉基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、吲哚基、吡咯基、噁唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、异噁唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、吲唑基、1,2,4-噻二唑基、异噻唑基、嘌呤基、咔唑基、苯并咪唑基、吲哚啉基、苯并二氧杂环戊基及苯并二噁烷。杂芳基为经取代或未经取代的。氮原子为经取代或未经取代的(亦即，n或nr，其中r为h或另一取代基(若定义))。氮及硫杂原子可任选经氧化(亦即，n→o及s(o)p，其中p为0、1或2)。
杂芳基的实例包括(但不限于)吖啶基、吖辛因基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噁唑啉基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑啉基、咔唑基、4ah-咔唑基、咔啉基、色满基、色烯基、噌啉基、十氢喹啉基、2h,6h-1,5,2-二噻嗪基、呋喃基、咪唑烷基、二氢咪唑基、咪唑基、1h-吲唑基、咪唑并吡啶基、吲哚烯基、吲哚啉基、吲哚嗪基、吲哚基、3h-吲哚基、靛红酰基、异苯并呋喃基、异色满基、异吲唑基、异吲哚啉基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噻唑并吡啶基、异噁唑基、异噁唑并吡啶基、亚甲基二氧基苯基、
5至10元杂芳基的实例包括(但不限于)吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、咪唑烷基、吲哚基、四唑基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噁唑啶基、噻二嗪基、噻二唑基、噻唑基、三嗪基、三唑基、苯并咪唑基、1h-吲唑基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并四唑基、苯并三唑基、苯并异噁唑基、苯并噁唑基、羟吲哚基、苯并噁唑啉基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、靛红酰基、异喹啉基、八氢异喹啉基、异噁唑并吡啶基、喹唑啉基、喹啉基、异噻唑并吡啶基、噻唑并吡啶基、噁唑并吡啶基、咪唑并吡啶基及吡唑并吡啶基。5至6元杂环的实例包括(但不限于)吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、吡嗪基、咪唑基、咪唑啶基、吲哚基、四唑基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、噁唑啶基、噻二嗪基、噻二唑基、噻唑基、三嗪基及三唑基。
除非另有指示，否则“碳环基”或“杂环基”包括一至三个与碳环或杂环稠合的其它环(例如芳基、环烷基、杂芳基或环杂烷基环)，例如
且可任选经由可用碳原子经1、2或3个选自以下的基团取代：氢、卤基、卤烷基、烷基、卤烷基、烷氧基、卤烷氧基、烯基、三氟甲基、三氟甲氧基、炔基、环烷基-烷基、环杂烷基、环杂烷基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基、芳基氧基、芳基氧基烷基、芳基烷氧基、烷氧羰基、芳基羰基、芳基烯基、氨基羰基芳基、芳基硫基、芳基亚磺酰基、芳基偶氮、杂芳基烷基、杂芳基烯基、杂芳基杂芳基、杂芳氧基、羟基、硝基、氰基、硫醇、烷硫基、芳基硫基、杂芳基硫基、芳硫基烷基、烷氧基芳硫基、烷基羰基、芳基羰基、烷氨基羰基、芳基氨基羰基、烷氧羰基、氨基羰基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、芳基亚磺酰基、芳基亚磺酰基烷基、芳基磺酰基氨基及芳基砜氨基羰基及/或本文中阐述的烷基取代基中的任一者。
当术语烷基、烯基、炔基、环烷基、碳环基、杂环基、芳基及杂芳基中的任一者作为另一基团的一部分使用时，碳原子数及环成员与术语本身中所定义相同。举例而言，烷氧基、卤烷氧基、烷基氨基、卤烷基、羟基烷基、氨基烷基、卤烷氧基、烷氧基烷氧基、卤烷氨基、烷氧基烷氨基、卤烷氧基烷氨基、烷硫基及其类似物各自独立地含有与关于术语“烷基”所定义相同的碳原子数，例如1至4个碳原子、1至6个碳原子、1至10个碳原子等。类似地，环烷氧基、杂环基氧基、环烷基氨基、杂环基氨基、芳烷基氨基、芳基氨基、芳基氧基、芳烷氧基、杂芳氧基、杂芳基烷氧基及其类似物各自独立地含有与关于术语“环烷基”、“杂环基”、“芳基”及“杂芳基”所定义相同的环成员，例如3至6元、4至7元、6至10元、5至10元、5或6元等。
根据本领域中使用的惯例，如结构式中所使用的指向粗线的键，例如
根据本领域中使用的惯例，结构式中的波浪形或弯曲键，例如
应理解，在本文中，若碳环或杂环部分可经由不同环原子键结或以其它方式连接至指定底物而未标示特定连接点，则所有可能点均为预期点，无论经由碳原子或例如三价氮原子。举例而言，术语“吡啶基”是指2-、3-或4-吡啶基，术语“噻吩基”是指2-或3-噻吩基等。
当展示连至取代基的键与连接环中的两个原子的键交叉时，则此类取代基可键结至该环上的任何原子。当所列举的取代基未指示此类取代基键结至具有指定化学式的化合物的其余部分的原子时，则此类取代基可经由此类取代基中的任何原子键结。取代基及/或变量的组合仅在此类组合产生稳定化合物时为容许的。
本领域技术人员将认识到，应选择本发明的化合物的取代基及其它部分以提供足够稳定的化合物，从而提供药学上适用的化合物，其可调配成可接受地稳定的药物组合物。预期具有此类稳定性的本发明的化合物属于本发明的范围内。
术语“抗衡离子”用于表示带负电的物质，例如氯离子、溴离子、氢氧根、乙酸根及硫酸根。术语“金属离子”是指碱金属离子，例如钠、钾或锂；及碱土金属离子，例如镁及钙；以及锌及铝。
如本文中所提及，术语“经取代”是指至少一个(连接至碳原子或杂原子的)氢原子由非氢基团置换，条件是维持正常价且取代产生稳定化合物。当取代基为氧代基(亦即＝o)时，则置换原子上的2个氢。氧代基取代基不存在于芳族部分上。当环系统(例如碳环或杂环)称为经羰基或双键取代时，则意在该羰基或双键为该环的一部分(亦即，在该环内)。如本文中所使用，环双键为在两个相邻环原子之间所形成的双键(例如，c＝c、c＝n或n＝n)。关于烷基、环烷基、杂烷基、环杂烷基、亚烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、碳环基及杂环基的术语“经取代”分别是指其中连接至碳原子或杂原子的一个或多个氢原子各自独立地由一个或多个非氢取代基置换的烷基、环烷基、杂烷基、环杂烷基、亚烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、碳环基及杂环基。
在本发明的化合物上存在氮原子(例如，胺)的情况下，这些氮原子可通过用氧化剂(例如mcpba及/或过氧化氢)处理而转化成n-氧化物，得到本发明的其它化合物。因此，所展示及所主张的氮原子视为涵盖所展示的氮及其n-氧化物(n→o)衍生物。
当任何变量在化合物的任何组分或式中出现超过一次时，其在每次出现时的定义独立于其在其它每次出现时的定义。因此，举例而言，若展示基团经0、1、2或3个r基团取代，则该基团在其经0个r基团取代时未经取代或经至多三个r基团取代，且在每次出现时独立地根据r的定义选择r。
并且，取代基及/或变量的组合为容许的，只要此类组合产生稳定化合物即可。
如本文所使用，术语“互变异构体”是指化合物的两种或更多种异构体中的每一者，所述异构体一起平衡存在，且由于分子内的原子或基团的电子迁移而容易互换。举例而言，本领域技术人员将容易地理解，1,2,3-三唑以如上文所定义的两种互变异构形式存在：
因此，本发明意在涵盖所有可能的互变异构体，即使在结构仅描绘其中的一者时。
词组“药学上可接受”在本文中用于指在合理医学判断范围内，适用于与人类及动物的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症，与合理益处/风险比相称的化合物、材料、组合物及/或剂型。
本发明的化合物可以盐形式存在，其亦在本发明的范围内。药学上可接受的盐优选。如本文中所使用，“药学上可接受的盐”是指本发明的化合物的衍生物，其中母化合物通过制备其酸盐或碱盐而经改质。本发明的药学上可接受的盐可通过常规化学方法自含有碱性或酸性部分的母化合物合成。通常，此类盐可通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量的量的适当碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应来制备；通常，优选非水性介质(如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈)。适合的盐的清单见于remington'spharmaceuticalsciences，第18版，mackpublishingcompany，easton，pa(1990)中，其揭示内容以引用的方式并入本文中。
若本发明的化合物具有例如至少一个碱性中心，则其可形式酸加成盐。这些酸加成盐为例如通过以下酸形成：强无机酸，例如矿物酸，例如硫酸、磷酸或氢卤酸；有机羧酸，例如具有1至4个碳原子的烷羧酸(例如乙酸)，其未经取代或经例如卤素取代(如氯乙酸)，例如饱和或不饱和的二羧酸，例如草酸、丙二酸、丁二酸、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、邻苯二甲酸或对苯二甲酸，例如羟基羧酸，例如抗坏血酸、乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸或柠檬酸，例如氨基酸(例如天冬氨酸或谷氨酸或赖氨酸或精氨酸)或苯甲酸；或有机磺酸，例如(c1-c4)烷基或芳基磺酸，其未经取代或经例如卤素取代，例如甲基磺酸或对甲苯磺酸。视需要，亦可形成具有额外存在的碱性中心的相应酸加成盐。具有至少一个酸基(例如cooh)的本发明的化合物亦可与碱形成盐。与碱形成的适合的盐为例如金属盐，例如碱金属盐或碱土金属盐，例如钠、钾或镁盐；或与氨或有机胺形成的盐，例如吗啉、硫代吗啉、哌啶、吡咯烷、单-、二-或三-低级烷基胺，例如乙基、叔丁基、二乙基、二异丙基、三乙基、三丁基或二甲基-丙胺，或单、二或三羟基低级烷基胺，例如单、二或三乙醇胺。此外，可形成相应内盐。亦包括不适合用于医药学用途，但可用于例如分离或纯化式(i)的游离化合物或其药学上可接受的盐的盐。
含有碱基的式(i)化合物的优选盐包括单盐酸盐、硫酸氢盐、甲磺酸盐、磷酸盐、硝酸盐或乙酸盐。
含有酸基的式(i)化合物的优选盐包括钠、钾及镁盐以及药学上可接受的有机胺的盐。
此外，本发明的化合物可具有前药形式。任何将在活体内转化以提供生物活性剂的化合物为本发明的范围及精神内之前药。如本文中所使用的术语“前药”涵盖基于羧酸残基之前药，亦即“前药酯”，及基于精氨酸模拟物部分的前药，亦即“精氨酸模拟物的前药”。此类前药优选经口给予，因为许多情况下水解主要在消化酶的影响下发生。在酯本身具有活性的情况下或在水解发生于血液中的情况下，可使用非经肠给药。
本发明的化合物含有羧基，其可形成在生理条件下可水解的酯，所述酯通过在体内水解得到本发明的化合物本身而充当前药，亦即“前药酯”。本发明的化合物的生理学上可水解的酯的实例包括c1至c6烷基、c1至c6烷基苯甲基、4-甲氧基苯甲基、二氢茚基、苯二甲酰基、甲氧基甲基、c1-6烷酰氧基-c1-6烷基(例如乙酰氧基甲基、特戊酰氧基甲基或丙酰氧基甲基)、c1至c6烷氧基羰氧基-c1至c6烷基(例如甲氧基羰氧基甲基或乙氧基羰氧基甲基、甘胺酰基氧基甲基、苯基甘胺酰基氧基甲基、(5-甲基-2-氧代基-1,3-二氧杂环戊烯-4-基)-甲基)，及用于例如青霉素(penicillin)及头孢菌素(cephalosporin)技术中的其它公知的生理学上可水解的酯。此类酯可通过本领域中已知的常规技术来制备。“前药酯”可通过使用本领域技术人员已知的程序使本发明的化合物的羧酸部分与烷基或芳基醇、卤化物或磺酸盐反应而形成。此外，前药的各种形式为本领域中公知的。关于此类前药衍生物的实施例，参见：
bundgaard，h.编，designofprodrugs，elsevier(1985)，及widder，k.等人编，methodsinenzymology，112:309-396，academicpress(1985)；
bundgaard，h.，第5章，＂designandapplicationofprodrugs＂，krosgaard-larsen，p.等人编，atextbookofdrugdesignanddevelopment，第113-191页，harwoodacademicpublishers(1991)；
bundgaard，h.，adv.drugdeliv.rev.，8:1-38(1992)；
bundgaard，h.等人，j.pharm.sci.，77:285(1988)；及
kakeya，n.等人，chem.pharm.bull.，32:692(1984)。
前药制备在本领域中已公知且描述于例如king，f.d.编，medicinalchemistry：principlesandpractice，theroyalsocietyofchemistry，cambridge，uk(1994)；testa，b.等人，hydrolysisindrugandprodrugmetabolism.chemistry，biochemistryandenzymology，vchaandwiley-vch，zurich，switzerland(2003)；wermuth，c.g.编，thepracticeofmedicinalchemistry，academicpress，sandiego，ca(1999)；rautio，j.等人，naturereviewdrugdiscovery，17，559-587，(2018)。
本发明意在包括存在于本发明的化合物中的原子的所有同位素。同位素包括原子数相同但质量数不同的原子。借助于一般实例但非限制性地，氢的同位素包括氘(符号d或2h)及氚(符号t或3h)。碳的同位素包括13c及14c。本发明的经同位素标记的化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过类似于本文所述的方法，使用适合的经同位素标记的试剂代替以其它方式使用的未经标记的试剂来制备。此类化合物具有多种潜在用途，例如作为测定潜在医药化合物结合于目标蛋白或受体的能力的标准及试剂，或用于使活体内或活体外结合于生物受体的本发明的化合物成像。
“稳定化合物”及“稳定结构”意在指示足够稳固以经受自反应混合物分离至适用纯度且调配成有效治疗剂的化合物。优选的是，本发明的化合物不含n-卤基、s(o)2h或s(o)h基团。
术语“溶剂合物”是指本发明的化合物与一个或多个溶剂分子(不论有机或无机)的物理性缔合。此物理性缔合包括氢键结。溶剂合物中的溶剂分子可以有序排列及/或无序排列形式存在。溶剂合物可包含化学计量或非化学计量的量的溶剂分子。“溶剂合物”涵盖溶液相及可分离的溶剂合物两者。例示性溶剂合物包括(但不限于)水合物、乙醇合物、甲醇合物及异丙醇合物。溶剂化方法在本领域中通常已知。
术语“糖基”是指通过自环状形式的单糖且引申开来自低碳寡糖移除半缩醛羟基而获得的单价自由基或取代基部分。在一个实施方案中，糖基具有以下结构：
如本文中所使用的缩写定义如下：“1x”表示一次，“2x”表示两次，“3x”表示三次，“℃”表示摄氏度，“eq”表示当量，“g”表示克，“mg”表示毫克，“l”表示公升，“ml”表示毫升，“μl”表示微升，“n”表示正常，“m”表示摩尔，“mmol”表示毫摩尔，“min”表示分钟，“h”表示小时，“rt”表示室温，“rbf”表示圆底烧瓶，“atm”表示大气压，“psi”表示磅/平方英寸，“conc.”表示浓缩，“rcm”表示闭环复分解，“sat”或“sat'd”表示饱和，“sfc”表示超临界流体色谱，“mw”表示分子量，“mp”表示熔点，“ee”表示对映异构过量，“ms”或“massspec”表示质谱，“esi”表示电喷雾电离质谱，“hr”表示高分辨率，“hrms”表示高分辨率质谱，“lcms”表示液相色谱质谱，“hplc”表示高压液相色谱，“rphplc”表示逆相hplc，“tlc”或“tlc”表示薄层色谱，“nmr”表示核磁共振光谱，“noe”表示细胞核奥氏效应作用光谱学(nuclearoverhausereffectspectroscopy)，“1h”表示质子，“δ”表示δ，“s”表示单峰，“d”表示二重峰，“t”表示三重峰，“q”表示四重峰，“m”表示多重峰，“br”表示宽峰，“hz”表示赫兹且“α”、“β”、“r”、“s”、“e”及“z”为本领域技术人员熟知的立体化学标示。
缩写
本文中的流程、实施例及其它地方使用以下缩写：
me甲基
et乙基
pr丙基
i-pr异丙基
bu丁基
i-bu异丁基
t-bu叔丁基
ph苯基
bn苯甲基
boc或boc叔丁氧基羰基
boc2o二碳酸二-叔丁酯
acn乙腈
acoh或hoac乙酸
alcl3氯化铝
aibn偶氮二异丁腈
bbr3三溴化硼
bcl3三氯化硼
bemp2-叔丁氨基-2-二乙基氨基-1,3-二甲基全氢
-1,3,2-二氮杂磷杂苯
bop试剂六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基叁(二甲氨基)
鏻
伯格斯试剂(burgess1-甲氧基-n-三乙基铵基磺酰基-甲酰亚胺酯reagent)
cbz苯甲氧羰基
dcm或ch2cl2二氯甲烷
ch3cn或acn乙腈
cdcl3氘代氯仿
chcl3氯仿
mcpba或m-cpba间氯过苯甲酸
cs2co3碳酸铯
cu(oac)2乙酸铜(ii)
cy2nmen-环己基-n-甲基环己胺
dbu1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯
dce1,2-二氯乙烷
dea二乙胺
dmp或戴斯-马丁高碘烷1,1,1-叁(乙酰氧基)-1,1-二氢-1,2-苯碘酰
(dess-martinperiodinane)-3-(1h)-酮
dic或dipcdi二异丙基碳化二亚胺
diea、dipea或休尼格氏二异丙基乙胺
碱(hunig'sbase)
dmap4-二甲氨基吡啶
dme1,2-二甲氧基乙烷
dmf二甲基甲酰胺
dmso二甲亚砜
cdna互补dna
dppp(r)-(+)-1,2-双(二苯膦基)丙烷
duphos(+)-1,2-双((2s,5s)-2,5-二乙基磷杂环戊烷
基)苯
edcn-(3-二甲氨基丙基)-n'-乙基碳化二亚胺
edcin-(3-二甲氨基丙基)-n'-乙基碳化二亚胺盐
酸盐
edta乙二胺四乙酸
(s,s)-etduphosrh(i)三氟甲磺酸(+)-1,2-双((2s,5s)-2,5-二乙基磷
杂环戊烷基)苯(1,5-环辛二烯)铑(i)
et3n或tea三乙胺
etoac乙酸乙酯
et2o乙醚
etoh乙醇
gmf玻璃微纤维过滤器
grubbsii(1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑啶亚基)二
氯(苯基亚甲基)(三环己基膦)钌
hcl盐酸
hatu六氟磷酸o-(7-氮杂苯并三唑-1-
基)-n,n,n',n'-四甲基脲鎓
hepes4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-乙磺酸
hex己烷
hobt或hobt1-羟基苯并三唑
h2o2过氧化氢
ibx2-碘氧基苯甲酸
h2so4硫酸
琼斯试剂(jonesreagent)含cro3的h2so4水溶液，2m
k2co3碳酸钾
k2hpo4磷酸氢二钾
koac乙酸钾
k3po4磷酸钾
lah氢化锂铝
lg离去基团
lioh氢氧化锂
meoh甲醇
mgso4硫酸镁
mscl甲磺酰氯
msoh或msa甲基磺酸
nacl氯化钠
nah氢化钠
nahco3碳酸氢钠
na2co3碳酸钠
naoh氢氧化钠
na2so3亚硫酸钠
na2so4硫酸钠
nbsn-溴琥珀酰亚胺
ncsn-氯琥珀酰亚胺
nh3氨
nh4cl氯化铵
nh4oh氢氧化铵
nh4cooh甲酸铵
nmmn-甲基吗啉
otf三氟甲磺酸盐或三氟甲磺酸酯
pd2(dba)3叁(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)
pd(oac)2乙酸钯(ii)
pd/c钯/碳
pd(dppf)cl2[1,1'-双(二苯膦基)-二茂铁]二氯钯(ii)
ph3pcl2二氯化三苯基膦
pg保护基
pocl3磷酰氯
ppts对甲苯磺酸吡啶鎓
i-proh或ipa异丙醇
ps聚苯乙烯
pto2氧化铂
rt室温
ruphos-pd-g2氯(2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联
苯)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(ii)
sem-cl2-(三甲基硅烷基)乙氧基甲基氯
sio2氧化硅
sncl2氯化锡(ii)
tbai碘化四-正丁基铵
tfa三氟乙酸
thf四氢呋喃
tmschn2三甲基硅烷基重氮甲烷
t3p丙烷膦酸酐
tris叁(羟基甲基)氨基甲烷
ptsoh对甲苯磺酸
tscl对甲苯磺酰氯
iv.制备方法
本发明的化合物可以有机合成领域的技术人员公知的多种方式，使用下文所描述的方法以及合成有机化学技术中已知的合成方法或本领域技术人员理解的变化形式制备。优选方法包括(但不限于)下文所描述的方法。本文中所引用的所有参考文献均以全文引用的方式并入本文中。反应在适于所使用的试剂及材料且适于实现转化的溶剂或溶剂混合物中进行。有机合成领域的技术人员应理解，分子上存在的官能基应与所提出的转变形式相符。有时需要作出判断以修改合成步骤的顺序或选择一种特定方法流程而非另一种，从而获得本发明的所需化合物。对与反应条件兼容的取代基的限制对于本领域技术人员将为显而易见的，且于是须使用替代方法。亦将认识到，在本领域中，任何合成途径的规划中的另一主要考虑因素为审慎选择用于保护本发明所述化合物中存在的反应性官能基的保护基。可适用于制备本发明的化合物的合成方法的尤其适用概要可见于larock，r.c.，comprehensiveorganictransformations，vch，newyork(1989)中。
本发明的化合物可使用此章节中所描述的反应及技术来制备。反应在适于所用试剂及物质且适用于实现转变的溶剂中进行。另外，在下述合成方法的说明中，应理解所提出的所有反应条件(包括溶剂、反应氛围、反应温度、实验持续时间及处理程序)均选择为本领域技术人员容易识别的该反应的标准条件。有机合成领域的技术人员应理解，所公布分子各个部分上所存在的官能基必须与所提出的试剂及反应物兼容。并非落入既定类别内的所有式(i)化合物均可与一些所描述方法中需要的一些反应条件兼容。本领域技术人员将了解对与反应条件兼容的取代基的这些限制以及必须使用的替代方法。可适用于制备本发明的化合物的合成方法的尤其适用概要可见于larock，r.c.，comprehensiveorganictransformations，vch，newyork(1989)中。
通用流程
由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的本发明的化合物或其任何亚属或种类可根据以下流程1至7中所示的一般途径制备。
流程1
流程1描述制备式i的子集，即式i-a、i-b及i-c的化合物的方法。中间体1可经由在本领域技术人员公知的条件下，与x5-l1-z-rx(其中x5表示卤素、三氟甲磺酸酯基或其它适合的离去基团，l1表示共价键，且可商购或易于通过本领域技术人员已知的方法制备)偶合来转化成产物i-a。一些偶合实例包括但不限于pd催化的布赫瓦尔德-哈特维希反应(buchwald-hartwigreaction)、cu介导的乌尔曼偶合(ullmanncoupling)、ni介导的胺化或亲核芳族取代(snar)。或者，若x5表示可商购的或通过相应的芳基卤化物的硼化获得硼酸或酯，可使用cu催化的陈-伊凡-兰姆偶合(chan-evans-lamcoupling)。在各种情况下，可能需要针对偶合反应的变量(例如催化剂、配体、溶剂、碱、添加剂及温度)的优化。在其它实施例中，l1表示连接基，例如(但不限于)c、co或so2。在此类实施例中，可在适合的碱(例如三乙胺、休尼格氏碱(hunig'sbase)或吡啶)存在下，在存在或不存在添加剂(例如hobt或dmap)的情况下，在适合的溶剂(例如二氯甲烷、乙酸乙酯、dmf或thf)中，利用偶合剂(例如(但不限于)t3p、edc、dcc或cdi)经由中间体1与适合的羧酸的偶合来获得产物i-a。在一些实施例中，可通过在碱(例如三乙胺或休尼格氏碱)存在下，在适合的溶剂(例如二氯甲烷)中搅拌使羧酸氯化物或磺酰基氯与中间体1反应以获得i-a。或者，对于具有适合的烷基卤化物或等同物的碳连接基的1的烷基化，在适合的条件下，包括但不限于在诸如dmf的溶剂中，在所需的烷基化剂x5-l1-z-rx(其中x5表示卤化物、三氟甲磺酸酯或其它适合的离去基团)存在下，用适合的碱例如k2co3处理1。在各种情况下，本领域技术人员将显而易见，所利用的特定条件(包括温度)可能需要优化。若i-a含有酯或腈，则其可在例如(但不限于)在适于实现水解的温度下，在由meoh、thf及水组成的溶剂中用naoh或lioh处理的条件下水解成相应的羧酸i-b。在一些情况下，可能需要特定酯(例如叔丁酯)的酸介导的水解以获得i-b。可在适合的溶剂(例如二氯甲烷、乙酸乙酯、dmf或thf)中，在存在或不存在添加剂(例如hobt或dmap)的条件下，在适合的碱(例如，三乙胺、休尼格氏碱或吡啶)存在下，利用偶合剂(例如(但不限于)t3p、edc、dcc或cdi)通过i-b与r4-n-r5(可商购或易于由本领域技术人员制备)的偶合来获得实施例i-c。在各种情况下，用于获得i-c的特定条件(包括温度及浓度)可能需要优化。
流程2
流程2描述了制备中间体1的子集，即中间体1a和1b的方法。酯中间体2的还原可通过多种试剂完成，包括但不限于lialh4、dibal-h或libh4，在适当的溶剂中，例如et2o或thf，得到的伯醇中间体3。所得中间体3的羟基可在溶剂(例如，但不限于dcm)中通过appel反应(pph3，cx4)或在溶剂(包括但不限于dce)中通过用水性hbr或hcl加热3而转化为卤代中间体4。中间体4可通过卤化物4与试剂(例如，但不限于pph3)在回流溶剂(例如甲苯)中的反应转化为相应的鏻5。在包括但不限于用碱(例如但不限于lihmds、lda、nah、kotbu或nbuli)处理鏻5的条件下，然后在适合的溶剂(例如thf)中添加6，鏻5和酮6(可商购或容易通过本领域技术人员已知的方法制备)之间的wittig烯化反应可用于获得烯烃中间体7。或者，在亚磷酸三烷氧基酯(例如，但不限于亚磷酸三乙氧基酯)中加热纯的4可以产生相应的膦酸酯5。horner-wadsworth-emmons(hwe)烯化反应可在类似于witting烯化反应的条件下(例如用适合的碱处理5，然后加入6)将5和6偶合。在金属介导的转移氢化条件下，中间体7的烯烃可还原得到中间体7a。金属催化剂包括但不限于钯碳或caco3上的铱。还原反应可以在多种溶剂中进行，包括etoac、meoh和thf。所采用的特定还原条件应与易于还原的任何其它官能团兼容，并且可能需要进行改性以使产率和选择性最大化。中间体7和7a的保护基p*的去除可通过多种条件来实现，这些条件将取决于p*的性质以及与7和7a中存在的其它官能团的相容性而变化。在其中p*＝boc的实施例中，可使用适当的酸性条件(即tfa、hcl)来促进保护基团的去除，得到中间体1a和1b。然而，若需要替代性保护基以实现官能基兼容性，则其可通过本领域技术人员已知的方法移除。其它用于保护基移除的方法可见于greene，t.及wuts，p.g.m.，protectinggroupsinorganicsynthesis，johnwiley&sons，inc.，newyork，ny，2006及其中的参考文献中。
流程3
流程3描述了制备中间体1的子集，即中间体1c的方法。可在例如但不限于在由meoh、thf和水组成的溶剂中，在适合于水解的温度，例如但不限于用naoh或lioh处理2，将酯2水解为相应的羧酸8。在某些情况下，可能需要特定酯(例如叔丁基酯)的酸介导的水解才能获得中间体8。中间体8到胺10的转化可通过包括在酸8和例如二苯基磷酰基叠氮化物(dppa)的试剂之间原位形成酰基叠氮化物的方法完成。若将酰基叠氮化物在甲苯等溶剂中加热，则可发生curtius重排，生成可被tbuoh捕获的异氰酸酯，从而得到boc-保护的氨基杂环9。可以通过用适合的酸(例如，但不限于tfa或hcl)处理9，除去boc保护基，生成中间体10。中间体10和酮6(可商购或容易由本领域技术人员制备)之间的还原性胺化可得到中间体11。还原性胺化条件包括但不限于在溶剂(如dcm)中混合6和10，并添加酸(如acoh)以促进亚胺形成，然后加入还原剂，例如三乙酰氧基硼氢化钠。与中间体7(流程2)相同，中间体11的保护基团p*的去除可通过多种条件来完成，其取决于p*的性质以及与11中存在的其它官能团的相容性。在其中p*＝boc的实施例中，可使用适当的酸性条件(例如，tfa和hcl)以促进保护基团的去除而得到中间体1c。然而，若需要替代性保护基以实现官能基兼容性，则其可通过本领域技术人员已知的方法移除。其它用于保护基移除的方法可见于greene，t.及wuts，p.g.m.，protectinggroupsinorganicsynthesis，johnwiley&sons，inc.，newyork，ny，2006及其中的参考文献中。
流程4
流程4描述一种用于制备中间体2的子集，即中间体2a的方法。醛12(可商购的或易于通过本领域技术人员已知的方法制备)可与羟胺盐酸盐一起在多种条件下缩合，所述条件包括(但不限于)在室温下，在吡啶中搅拌两种反应物，或在适合的溶剂(例如乙醇)中，在碱(例如氢氧化钠或乙酸钠)存在下温和地加热反应物。在适合的溶剂(主要如dmf)中，所得肟可通过试剂(例如(但不限于)ncs或nbs)经由卤化转化成相应的肟酰基卤化物13。肟酰基卤化物13可与β-酮酯15(可商购的或易于通过本领域技术人员已知的方法制备)在三乙胺或其它适当的碱的存在下、在溶剂中(例如，但不限于dcm)得到3,4,5-取代的异噁唑酯中间体2a。
流程5
流程5描述一种用于制备中间体3的子集，即中间体3a的方法。合成可由以下步骤开始：在例如(但不限于)在酸性介质(h2o/tfa)中用亚硝酸钠处理，接着在适合的溶剂(例如水)中，在适合的温度添加叠氮化钠以得到叠氮化合物15的条件下进行胺14a(可商购的或易于由本领域技术人员已知的方法制备)的叠氮化。或者，可通过卤化物14b(可商购的或易于由本领域技术人员已知的方法制备)与叠氮化合物盐(例如叠氮化钠)在适合的温度下，在dmso/水的混合物中加热获得叠氮化合物15。所得叠氮化物15可与炔烃16通过在溶剂(例如甲苯)中加热进行环化，得到3a。炔烃16可商购，或可通过多种方法获得，包括但不限于相应的末端炔烃的去质子化和用甲醛或甲醛等同物捕获所得阴离子。
流程6
流程6描述一种用于制备中间体2的子集，即中间体2c的方法。α-酮酯17(可商购的或易于由本领域技术人员已知的方法制备)可与n,n-二甲基甲酰胺二甲基缩醛18通过在适当的溶剂(例如etoh或meoh)中加热，得到中间体19。肼20可与中间体19通过在适当的溶剂(例如etoh或meoh)中加热两种反应物进行成环，得到中间体2c。肼20可商购或可通过用试剂(例如，但不限于亚硝酸钠)在酸性介质中处理相应的胺来制备，或将相应的芳基卤化物与肼偶合来制备。
流程7
流程7描述一种用于制备中间体3的子集，即中间体3a的方法。可经由pd催化的铃木(suzuki)反应使经适当取代的硼酸或酯21及具有适合的反应性卤素的吡唑22或等效物偶合，得到中间体23。用于铃木偶合的典型条件包括(但不限于)在经脱氧的溶剂或溶剂混合物中，在适合的温度下加热反应物21及22与钯催化剂、配体及碱。特定条件包括(但不限于)在120℃下的含pdcl2(dppf)2、na2co3的thf/水。在各种情况下，用于获得23的特定条件(包括化学计量、钯来源、配体、碱、溶剂、温度及浓度)可能需要单独优化。偶合搭配物21及22为可商购的或可易于由本领域技术人员已知的方法制备。中间体23可在适合的溶剂(例如thf或et2o)中，通过足够强的碱(例如(但不限于)n-buli或lda)在吡唑的5-位置去质子化。可用甲酰基等价物(例如dmf)原位捕获来自23的去质子化的所得阴离子，得到醛中间体24。可在适合的溶剂(例如，但不限于thf或et2o)中，通过多种试剂(包括(但不限于)lialh4、dibal-h或libh4)实现醛24的还原，得到中间体3a。
实施例
下文提供的实施例为说明性的，作为部分范围及本发明的特定实施方案且不欲限制本发明的范围。除非另外指示，否则缩写及化学符号具有其常见及惯用含义。除非另有指示，否则本文中所描述的化合物已使用本文中所揭示的流程及其它方法制备、分离及表征或可使用其制备。
视需要，反应在干燥氮气(或氩气)的氛围下进行。对于无水反应，使用来自em的
实施例的表征或纯化中使用的hplc/ms及制备型/分析型hplc方法
nmr(核磁共振)谱图通常在指定溶剂中，用bruker或jeol400mhz及500mhz仪器获得。用溶剂共振作为内标，四甲基硅烷的所有化学位移均以ppm为单位报导。1hnmr谱图数据通常报导如下：化学位移、多重性(s＝单峰，brs＝宽单峰，d＝二重峰，dd＝双二重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，sep＝七重峰，m＝多重峰，app＝明显)、偶合常数(hz)及积分。
术语hplc是指用岛津高效液相色谱仪器(shimadzuhighperformanceliquidchromatographyinstrument)进行的一种以下方法：
通用方法a
实施例1
2-(2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸
步骤1：2,6-二氯苯甲醛肟
将羟基胺盐酸盐(6.6g，95.0mmol)添加至2,6-二氯苯甲醛(11.1g，63.4mmol)的吡啶(31.7ml)室温溶液中，其温和地放热。10分钟后，真空除去过量的吡啶，并将残余物在et2o和水之间分配。将有机层依次用饱和水性nh4cl和盐水洗涤，并将合并的水层用数小份的et2o反萃取。合并的有机萃取物经na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到2,6-二氯苯甲醛肟(12.4g，65.3mmol，100％产率)，其为白色固体。产物用于下一步骤中无需进一步提纯。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.39(s，1h)，7.92(s，1h)，7.40-7.36(m，2h)，7.27-7.22(m，1h)。
步骤2：2,6-二氯-n-羟基苄亚胺酰基氯(“苄亚胺酰基”的英文为“benzimidoyl”)
将2,6-二氯苯甲醛肟(12.0g，63.1mmol)溶于dmf(45.9ml)并加热至40℃。随后在约3分钟内，将溶于dmf(38.3ml)的ncs(10.1g，76.0mmol)添加至暖的溶液中。在搅拌过夜后，将反应混合物冷却至室温，倒入冰中，并用et2o萃取。收集有机层并用盐水洗涤。将合并的水层用et2o反萃取。合并的有机层经na2so4干燥，过滤并真空浓缩至干。将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-50％etoac/己烷，isco120g柱)，得到2,6-二氯-n-羟基苄亚胺酰基氯(13.3g，59.3mmol，94％产率)，其为蜡状白色固体。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ8.02(s，1h)，7.43-7.37(m，2h)，7.37-7.30(m，1h)。
步骤3：5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-羧酸甲基酯
向含有3-环丙基-3-氧代丙酸甲基酯(1.3g，8.9mmol)的50ml圆底烧瓶添加三乙胺(2.5ml，17.8mmol)。将所得澄清溶液在室温搅拌15分钟并在冰水浴中冷却。在10分钟内，向搅拌中的溶液添加2,6-二氯-n-羟基苄亚胺酰基氯(2.0g，8.9mmol)的etoh(4ml)溶液，得到白色悬浮液。在添加后，将所得悬浮液在室温搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩，并将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-10％etoac/己烷，isco80g柱)，得到5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-羧酸甲基酯(2.4g，7.7mmol，87％产率)，其为白色固体。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.45-7.39(m，2h)，7.39-7.33(m，1h)，3.71(s，3h)，2.93(tt，j＝8.5，5.2hz，1h)，1.47-1.40(m，2h)，1.34-1.27(m，2h)。
步骤4：(5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲醇
在0℃，向5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-羧酸甲基酯(3.0g，9.6mmol)的thf(11.1ml)溶液中添加二异丁基氢化铝(20.2ml，20.2mmol，1.0m，在甲苯中)。将反应混合物温热至室温并搅拌2小时。将反应冷却至0℃，并通过添加meoh(2ml)和1m水性hcl(约75ml)淬灭。将混合物用etoac萃取，并将有机层用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并真空浓缩至干，得到(5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲醇(2.5g，8.9mmol，92％产率)，其为白色固体，其无需进一步提纯来使用。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.46(d，j＝1.1hz，1h)，7.45(s，1h)，7.41-7.36(m，1h)，4.44(s，2h)，2.22(tt，j＝8.5，5.2hz，1h)，1.42(brs，1h)，1.35-1.25(m，2h)，1.23-1.11(m，2h)。
步骤5：4-(溴甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑
将溶于dcm(5.1ml)的四溴甲烷(3.8g，11.4mmol)添加至0℃的(5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲醇(2.2g，7.6mmol)和三苯基膦(3.0g，11.4mmol)的dcm(25.2ml)溶液中。将反应混合物温热至室温并搅拌2小时。将反应混合物用dcm稀释并用h2o洗涤。将dcm层真空浓缩至干，并将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-20％etoac/己烷，isco120g柱)，得到4-(溴甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(2.3g，6.7mmol，89％产率)，其为白色固体。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.49-7.42(m，2h)，7.42-7.36(m，1h)，4.23(s，2h)，2.14(tt，j＝8.4，5.1hz，1h)，1.33-1.29(m，2h)，1.23-1.17(m，2h)。
步骤6：((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲基)膦酸二乙基酯
将亚磷酸三乙基酯(1.1ml，6.2mmol)添加至4-(溴甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(1.2g，3.5mmol)的二噁烷(1.7ml)溶液中。将反应混合物在120℃搅拌过夜。将反应混合物直接装载至sio2筒上并通过快速色谱提纯(0-100％etoac/己烷，isco40g柱)，得到((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲基)膦酸二乙基酯(1.4g，3.4mmol，98％产率)，其为白色固体。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.46-7.40(m，2h)，7.38-7.31(m，1h)，4.08-3.86(m，4h)，2.97-2.79(m，2h)，2.28-2.17(m，1h)，1.25(dd，j＝5.0，2.2hz，2h)，1.22(t，j＝7.0hz，6h)，1.16-1.09(m，2h)。
替代步骤6：((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲基)三苯基鏻溴化物
向4-(溴甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(2.6g，7.4mmol)的甲苯(36.7ml)溶液中添加三苯基膦(4.2g，16.2mmol)并将所得混合物在120℃加热23小时。随后过滤混合物，并将固体用热甲苯洗涤，得到((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲基)三苯基鏻溴化物(4.4g，7.2mmol，97％)为灰白色固体。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.77(tt，j＝1.4，6.3hz，3h)，7.73-7.66(m，6h)，7.57(td，j＝3.6，7.9hz，6h)，7.37-7.30(m，1h)，7.28-7.23(m，2h)，5.12(d，j＝12.2hz，2h)，2.54(tt，j＝5.1，8.2hz，1h)，0.96-0.67(m，4h)。
步骤7：2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯
在-78℃，向((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲基)膦酸二乙基酯(1.2g，3.0mmol)在thf(11.1ml)中的悬浮液中添加双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂(6.2ml，6.2mmol，1.0m溶液)并将所得混合物在-78℃搅拌35分钟(该白色悬浮液转化为澄清橙色溶液。在-78℃向上述混合物滴加thf(3.7ml)中的2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(0.78g，3.3mmol)。将所得混合物在-78℃搅拌15分钟并移除冷却浴。将混合物在室温搅拌4小时，冷却至0℃，然后用nh4cl饱和水溶液淬灭。将混合物用三份的etoac萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩至干。将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-100％etoac/己烷，isco40g柱)，得到2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(1.2g，2.4mmol，80％产率)，其为粘稠白色固体。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.46-7.39(m，2h)，7.38-7.32(m，1h)，5.75(t，j＝2.2hz，1h)，3.39-3.20(m，4h)，2.46(s，2h)，2.20(s，2h)，2.01(tt，j＝8.4，5.1hz，1h)，1.47(s，13h)，1.31-1.20(m，2h)，1.16-1.07(m，2h)。
替代步骤7：2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯
在n2下，在-78℃，向((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲基)三苯基鏻溴化物(0.50g，0.81mmol)在thf(6.5ml)中的悬浮液中逐滴添加双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂(1.6ml，1.6mmol，1.0m溶液)。将所得混合物在-78℃搅拌25分钟，温热并在室温搅拌1小时。向上述混合物滴加thf(1.6ml)中的2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(311mg，1.3mmol)。将混合物在室温搅拌过夜，在50℃加热3.5小时，然后在60℃加热过夜。将混合物冷却至0℃，并用饱和水性nh4cl淬灭。将分离的水层用etoac萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-50％etoac/己烷，isco40g柱)，得到2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(0.11g，0.22mmol，28％产率)，其为浅黄色胶。ms(esi)m/z：489.6[m+h]+；1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.46-7.39(m，2h)，7.38-7.32(m，1h)，5.75(t，j＝2.2hz，1h)，3.39-3.20(m，4h)，2.46(s，2h)，2.20(s，2h)，2.01(tt，j＝8.4，5.1hz，1h)，1.47(s，13h)，1.31-1.20(m，2h)，1.16-1.07(m，2h)。
步骤8：4-((7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑
将三氟乙酸(1ml)添加至在冰水浴中冷却的2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(0.21g，0.42mmol)的dcm(4ml)溶液中。1小时后，将反应混合物真空浓缩至干，用dcm稀释，用1nnaoh洗涤，经na2so4干燥，并真空浓缩至干，得到4-((7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(0.17g，0.44mmol，100％产率)。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.46-7.39(m，2h)，7.37-7.32(m，1h)，5.73(t，j＝2.2hz，1h)，2.81-2.69(m，3h)，2.45(s，2h)，2.20(s，2h)，2.06-1.96(m，1h)，1.55-1.48(m，5h)，1.27-1.21(m，2h)，1.16-1.07(m，2h)。
用于snar的通用方法：方法a1
步骤1：2-氨基-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸乙基酯
在0℃，在5分钟内，向4-氨基-3-氟苯甲酸乙基酯(9.16g，50mmol)和硫氰酸钠(16.2g，200mmol)在hoac(25ml)中的混合物中添加5mlhoac中的br2(1.03ml)。将混合物在30℃加热过夜，然后在50℃加热24小时。通过抽滤除去固体冰用dcm(2×10ml)洗涤。将滤液真空浓缩至干。将残余物用水(50ml)稀释并添加氨水(5ml)至约ph9。将悬浮液搅拌2小时并通过抽滤收集固体并用水(3×10ml)洗涤。将固体在高真空下干燥过夜得到2-氨基-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸乙基酯为黄色固体。1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.47-8.02(m，3h)，7.57(dd，j＝11.4，1.5hz，1h)，4.30(d，j＝7.0hz，2h)，1.32(t，j＝7.2hz，3h)。
步骤2：2-溴-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸乙基酯
在0℃，将亚硝酸叔丁基酯(3.09g，30mmol)添加至溴化铜(ii)(6.14g，25mmol)在ch3cn(50ml)中的浆体中。向该悬浮液添加2-氨基-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸乙基酯(6.01g，25mmol)。将混合物在室温搅拌5小时。真空除去溶剂，并将残余物在dcm(25ml)和盐水(20ml)之间分配。有机层经na2so4干燥，过滤并真空浓缩至干。将粗产物用快速色谱在sio2上提纯(0-100％dcm/己烷，isco80g柱)，得到2-溴-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸乙基酯(5.6g，18.0mmol，72％产率)，其为白色固体。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ8.56-8.19(m，1h)，7.88(dd，j＝10.5，1.4hz，1h)，4.45(q，j＝7.2hz，2h)，1.45(t，j＝7.2hz，3h)。
实施例1.2-(2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸
将4-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(9.5mg，0.024mmol)、2-溴-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸乙基酯(11.1mg，0.037mmol，可商购)和碳酸铯(23.8mg，0.073mmol)在dma(0.1ml)中的混合物在65℃加热3小时。向该粗制反应混合物添加thf(160μl)、meoh(80μl)和1m水性氢氧化锂(84μl，0.084mmol)，并将所得混合物在室温搅拌。在室温过夜后添加另外的1m水性氢氧化锂，1.0m(0.05ml，0.05mmol)并将反应混合物在室温搅拌过夜。蒸发挥发性溶剂，将残余物冷却至0℃，并用1nhcl酸化。真空除去过量的溶剂，将残余物溶于1:1dmf/dmso(2ml)，过滤并将粗物质用制备型lc/ms使用以下条件提纯：柱：xbridgec18，19x200mm，5-μm颗粒；流动相a：5:95乙腈：含10-mm乙酸铵的水；流动相b：95:5乙腈：含10-mm乙酸铵的水；梯度：经15分钟35-100％b，然后在100％b停留5分钟；流速：20ml/min。合并含所需产物的级分，并通过离心蒸发干燥，得到2-(2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸(7.9mg，0.013mmol，55％产率)。ms(esi)m/z：584.4[m+h]+；1hnmr(500mhz，dmso-d6)δ8.12(s，1h)，7.66-7.47(m，4h)，5.70(s，1h)，3.48(brs，4h)，2.46(s，2h)，2.15(s，2h)，2.12-2.05(m，1h)，1.62-1.46(m，4h)，1.19-1.11(m，2h)，1.05-0.98(m，2h)；hlegal-fxrec50＝41nm。
用于pd-催化的c-n偶合的通用方法：方法a2
实施例2
6-(2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)喹啉-2-羧酸
将4-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(24mg，0.062mmol)、6-溴喹啉-2-羧酸甲基酯(19.7mg，0.074mmol)和cs2co3(40.2mg，0.12mmol)在二噁烷(0.45ml)中的浆体用氮气通过混合物来脱气5分钟。随后添加氯(2-二环己基膦基-2′,6′-二异丙氧基-1,1′-联苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]钯(ii)(ruphos-pd-g2)(商购自sigmaaldrich，cas编号1375325-68-0；2.4mg，3.1μmol,)，将反应容器密封并加热至90℃过夜。
将混合物冷却至室温，用meoh稀释，过滤并真空浓缩。向残余物中添加thf(0.28ml)、meoh(0.14ml)和氢氧化锂一水合物(14.9mg，0.62mmol)。将反应混合物在65℃加热3小时，并添加另外的氢氧化锂一水合物(14.9mg，0.62mmol)。在65℃加热另外的2.5小时后，除去挥发性溶剂，将残余物冷却至0℃并用tfa酸化。将反应混合物用meoh稀释至约2ml，过滤并将滤液用制备型hplc使用以下条件提纯：柱：phenomenexc18，30x100mm，5-μm颗粒；流动相a：5:95乙腈：含0.1％tfa的水；流动相b：95:5乙腈：含0.1％tfa的水；梯度：经10分钟0-100％b，然后在100％b停留4分钟；流速：40ml/min。合并含所需产物的级分，并通过离心蒸发干燥并冻干，得到6-(2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)喹啉-2-羧酸(7.5mg，0.013mmol，20％产率)。ms(esi)m/z：560.2[m+h]+；1hnmr(400mhz，甲醇-d4)δ8.49(d，j＝8.6hz，1h)，8.15(dd，j＝9.1，12.3hz，2h)，7.84(dd，j＝2.8，9.6hz，1h)，7.61-7.44(m，3h)，7.31(d，j＝2.7hz，1h)，5.78(t，j＝2.3hz，1h)，3.46-3.36(m，4h)，2.55(s，2h)，2.30(d，j＝2.3hz，2h)，2.17-2.07(m，1h)，1.72(h，j＝7.5，7.9hz，4h)，1.22-1.11(m，4h)；hlegal-fxrec50＝47nm。
通用方法b
实施例3
2-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸
步骤1：2-(三氟甲基)苯甲醛肟
将羟基胺盐酸盐(4.0g，57.4mmol)添加至2-(三氟甲基)苯甲醛(5.0g，28.7mmol)的吡啶(14.4ml)室温溶液中，其温和地放热。10分钟后，真空除去过量的吡啶。将残余物在etoac和水之间分配。有机层用盐水洗涤并将合并的水层用两小份的etoac反萃取。合并的有机物经na2so4干燥，过滤并浓缩得到无色油状物，其在静置后变为白色蜡状固体。将产物用于下一步骤无需进一步提纯。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.52(q，j＝2.1hz，1h)，8.05-7.98(m，1h)，7.73-7.67(m，1h)，7.61-7.54(m，1h)，7.54-7.46(m，1h)。
步骤2：n-羟基-2-(三氟甲基)苄亚胺酰基氯
将ncs(4.0g，29.6mmol)分批添加至0℃的2-(三氟甲基)苯甲醛肟(5.0g，26.4mmol)的dmf(30ml)溶液中，同时保持内部温度低于25℃。将反应混合物在室温搅拌1小时。将反应混合物用水(100ml)稀释，并用etoac(2×75ml)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到n-羟基-2-(三氟甲基)苄亚胺酰基氯(5.9g，23.8mmol，90％产率)，其为黄色液体。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.20(s，1h)，7.76(d，j＝7.8hz，1h)，7.68-7.55(m，3h)。
步骤3：5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-羧酸乙基酯
在室温，向干燥的圆底烧瓶中添加n-羟基-2-(三氟甲基)苄亚胺酰基氯(59g，0.26mol)、三乙胺(294ml，2.1mol)和3-环丙基-3-氧代丙酸乙基酯(43.7g，0.28mol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物减压浓缩并将残余物用快速色谱在sio2上提纯(20％etoac/己烷isco220g柱)合并所需级分并蒸发，得到5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-羧酸乙基酯(66g，0.19mol，73％产率)，其为灰白色固体。ms(esi)m/z：326.0[m+h]+。
步骤4：(5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲醇
将氢化锂铝(2.0m的thf溶液，265ml，0.53mol)逐滴添加至-10℃的5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-羧酸乙基酯(60g，0.18mol)的thf(500ml)溶液中。将所得反应混合物温热至0℃并搅拌1小时。用etoac(15ml)、然后用水(50ml)和10％naoh水溶液(50ml)并伴随剧烈搅拌以淬灭反应。将所得白色沉淀物过滤，并用etoac(250ml)洗涤。将滤液用盐水(200ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到(5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲醇(52g，0.16mol，86％产率)，其为棕色油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.82(dd，j＝7.5，1.5hz，1h)，7.69-7.57(m，2h)，7.51-7.43(m，1h)，4.42(d，j＝5.7hz，2h)，2.17(tt，j＝8.5，5.1hz，1h)，1.35(t，j＝5.6hz，1h)，1.31-1.23(m，2h)，1.18-1.11(m，2h)。
步骤5：4-(溴甲基)-5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑
向(5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲醇(25g，88mmol)的1,2-二氯乙烷(100ml)溶液中添加48％水性hbr(29.8g，177mmol)。将反应混合物加热搅拌至40℃过夜，并用水(100ml)稀释。分离有机层，且水层用dcm(2×200ml)萃取并将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到4-(溴甲基)-5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑(30.3g，88mmol，99％产率)，其为黄色油状物。粗产物无需进一步提纯来使用。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.82(d，j＝7.7hz，1h)，7.73-7.59(m，2h)，7.55(d，j＝7.3hz，1h)，4.21(s，2h)，2.11(tt，j＝8.4，5.1hz，1h)，1.33-1.24(m，2h)，1.24-1.14(m，2h)。
步骤6：((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)膦酸二乙基酯
将4-(溴甲基)-5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑(52.8g，153mmol)和亚磷酸三乙基酯(52.3ml，305mmol)在二噁烷(169ml)中的混合物在95℃搅拌17小时，冷却至室温并在约65℃真空浓缩，得到浅棕色油状物。将油状物用快速色谱在sio2上提纯(30-100％etoac/己烷，1.5kg柱)。将产物在高机械真空下、在约70-80℃进一步蒸馏，以除去未反应的亚磷酸三乙基酯，并得到((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)膦酸二乙基酯(52.4g，130mmol，85％产率)，其为棕色油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.83-7.76(m，1h)，7.71-7.54(m，3h)，4.06-3.88(m，4h)，2.88-2.74(m，2h)，2.21(tt，j＝8.5，5.1hz，1h)，1.29-1.20(m，8h)，1.15-1.06(m，2h)。
步骤7：2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯
双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂(1m，在thf中，33.8ml，33.8mmol)添加至-78℃的((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)膦酸二乙基酯(6.5g，16.1mmol)的thf(60ml)溶液中。30分钟后，将thf(30ml)中的2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(4.2g，17.7mmol)添加至反应混合物中。15分钟后，将反应烧瓶从冷却浴中移除，并在室温搅拌过夜。将反应混合物用饱和水性nh4cl淬灭，并用etoac萃取。有机层经mgso4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-50％etoac/己烷，isco，120g柱)，得到2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(5.7g，11.7mmol，72％产率)。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.79(d，j＝7.4hz，1h)，7.65-7.53(m，2h)，7.38(d，j＝7.4hz，1h)，5.70(t，j＝2.2hz，1h)，3.26(brt，j＝5.5hz，4h)，2.42(s，2h)，2.11(s，2h)，1.96(tt，j＝8.5，5.2hz，1h)，1.45(s，13h)，1.24-1.17(m，2h)，1.15-1.06(m，2h)。
步骤8：2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯
将2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(4.9g，10.1mmol)溶于乙酸乙酯(120ml)中，将然后将10％钯碳(1.0g，0.84mmol)添加至溶液中。将反应混合物用h2抽真空并平衡3次。在h2气球气氛下将混合物搅拌1小时，并通过硅藻土垫过滤。将滤液真空蒸发浓缩，并将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-30％etoac/己烷，isco220g柱)，得到2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(3.2g，6.5mmol，65％产率)，其为无色胶。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.80(d，j＝7.4hz，1h)，7.67-7.56(m，2h)，7.36(d，j＝7.2hz，1h)，3.31-3.23(m，2h)，3.22-3.15(m，2h)，2.41(d，j＝7.7hz，2h)，2.15(spt，j＝8.1hz，1h)，1.98(tt，j＝8.5，5.0hz，1h)，1.84-1.74(m，2h)，1.65(brs，1h)，1.43(s，11h)，1.36-1.31(m，2h)，1.29-1.24(m，2h)，1.21-1.15(m，2h)，1.11-1.04(m，2h)。
步骤9：4-((7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)甲基)-5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑
向2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(1.3g，2.7mmol)的溶液中添加dcm(10ml)然后添加tfa(1.5ml，19.9mmol)，并将反应混合物在室温搅拌4小时。将反应混合物用1m水性k2hpo4洗涤，经mgso4干燥，过滤并真空浓缩，得到4-((7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)甲基)-5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑(1.1g，2.7mmol，83％产率)。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.80(dd，j＝7.6，1.5hz，1h)，7.67-7.55(m，2h)，7.37(dd，j＝7.0，1.0hz，1h)，2.74-2.66(m，2h)，2.66-2.58(m，2h)，2.40(d，j＝7.8hz，2h)，2.13(dt，j＝16.2，8.1hz，1h)，2.03-1.94(m，2h)，1.85-1.72(m，2h)，1.50-1.40(m，2h)，1.39-1.32(m，2h)，1.26-1.22(m，2h)，1.22-1.15(m，2h)，1.11-1.03(m，2h)。
用于snar的通用方法：方法b1
实施例3.2-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸
将4-((7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)甲基)-5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑(参见通用方法b的步骤9，25.0mg，0.064mmol)、2-溴-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸乙基酯(29.2mg，0.096mmol)和cs2co3(62.6mg，0.19mmol)在dma(0.5ml)中的混合物在65℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温，并添加thf(160μl)、meoh(80μl)、h2o(80μl)和氢氧化锂一水合物(9.2mg，0.38mmol)，并将所得混合物在室温搅拌过夜。真空除去过量的溶剂，将悬浮液冷却至0℃并用tfa酸化。将混合物溶于dmso(约2ml)，过滤并通过制备型lc/ms用以下条件提纯：柱：xbridgec18，19x200mm，5-μm颗粒；流动相a：5:95乙腈：含10-mm乙酸铵的水；流动相b：95:5乙腈：含10-mm乙酸铵的水；梯度：26-66％b经20分钟，然后在100％b停留4分钟；流速：20ml/min。合并含所需产物的级分，并通过离心蒸发干燥，得到2-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸。(18.2mg，0.031mmol，48％产率)。ms(esi)m/z：586.2[m+h]+；1hnmr(500mhz，dmso-d6)δ8.17(d，j＝1.5hz，1h)，7.93(d，j＝7.8hz，1h)，7.79(dt，j＝7.5，28.6hz，2h)，7.56(dd，j＝9.5，18.2hz，2h)，3.50(br.s，2h)，3.44(br.s，2h)，2.45(d，j＝7.7hz，2h)，2.25(tt，j＝5.0，8.3hz，1h)，2.15–2.01(m，1h)，1.78(brt，j＝9.8hz，2h)，1.51(dt，j＝5.7，26.6hz，4h)，1.33(dd，j＝8.4，11.6hz，2h)，1.11(dt，j＝3.3，6.7hz，2h)，1.01(dd，j＝4.1，6.8hz，2h)；hlegal-fxrec50＝85nm。
用于pd-催化的c-n偶合的通用方法：方法b2
实施例4
6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-羧酸
将4-((7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)甲基)-5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑(参见通用方法b的步骤9，1.3g，3.2mmol)、6-氯-4-(三氟甲基)喹啉-2-羧酸乙基酯(1.5g，4.9mmol)和cs2co3(2.1g，6.5mmol)的二噁烷(16.2ml)浆体用氮气鼓泡通过混合物来脱气5分钟。随后添加氯(2-二环己基膦基-2′,6′-二异丙氧基-1,1′-联苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]钯(ii)(ruphos-pd-g2)(0.126g，0.163mmol)并将反应容器密封，并加热至90℃3小时。将粗制反应混合物浓缩至硅藻土上，并用快速色谱在sio2上提纯(0-50％etoac/己烷，isco120g柱)，得到6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-羧酸乙基酯(1.8g，2.8mmol，85％产率)，其为黄色固体。向固体中添加thf(9.1ml)、meoh(4.6ml)和1.0m水性氢氧化锂(5.5ml，5.5mmol)。将所得混合物在室温搅拌过夜，冷却至0℃，用10％水性柠檬酸酸化至ph3，并用三份的etoac萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用c-18反相快速色谱提纯(10-100％a中的b，a＝10:90:0.05mecn/h2o/tfa，b＝90:10:0.05mecn/h2o/tfa，线性梯度，iscoc-18gold柱)。合并所需级分并浓缩。将所得固体溶于最少量的1:1h2o/ch3cn并冻干，得到6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-羧酸(1.6g，2.6mmol，94％产率)，其为深红色固体。ms(esi)m/z：630.3[m+h]+；1hnmr(500mhz，甲醇-d4)δ8.29(s，1h)，8.09(brd，j＝9.6hz，1h)，7.89(d，j＝7.7hz，1h)，7.79-7.69(m，3h)，7.48(d，j＝7.4hz，1h)，7.15(brs，1h)，3.42-3.37(m，2h)，3.34-3.28(m，2h)，2.50(d，j＝7.7hz，2h)，2.27-2.15(m，2h)，1.93-1.83(m，2h)，1.70-1.62(m，2h)，1.62-1.54(m，2h)，1.43-1.28(m，2h)，1.20-1.08(m，4h)；hlegal-fxrec50＝26nm。
通用方法c
实施例5
2-(2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸
步骤1：5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-羧酸
向5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-羧酸甲基酯(2.1g，6.6mmol，于通用方法a中描述的合成)的thf(22.1ml)和meoh(11.0ml)溶液中添加1.0m水性lioh(16.6ml，16.6mmol)并将所得混合物在室温搅拌。搅拌过夜后，添加另外的1.0m水性氢氧化锂(8.0ml，8.0mmol)。将混合物继续搅拌5小时并真空浓缩。将残余物在etoac和水之间分配。将分离的水层冷却至0℃并用1.0nhcl调节至约ph6。混合物经etoac萃取三次，并将合并的萃取物用盐水洗涤，经mgso4干燥并真空浓缩至干，得到5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-羧酸(1.8g，6.0mmol，91％产率)，其为灰白色固体。产物无需进一步提纯用于下一步骤中。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.42-7.37(m，2h)，7.36-7.31(m，1h)，2.93(tt，j＝8.4，5.1hz，1h)，1.46-1.39(m，2h)，1.33-1.24(m，2h)。
步骤2：(5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)氨基甲酸叔丁基酯
依次将二苯基磷酰基叠氮化物(0.93ml，4.2mmol)和et3n(0.58ml，4.2mmol)添加至5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-羧酸(0.5g，1.7mmol)在甲苯(20ml)中的悬浮液中，并将反应混合物加热至90℃。在40分钟后，缓慢添加叔丁醇(1.6ml，16.8mmol)至该热溶液中并继续加热。在加热约12小时后，将反应混合物冷却至室温，并用etoac冲洗，转移至圆底烧瓶中。添加硅胶并将混合物真空浓缩，得到自由流动的固体。将该固体用快速色谱在sio2上提纯(0-100％etoac/己烷，isco40g柱)，得到(5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(0.48g，1.3mmol，78％产率)，其为白色固体。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.45-7.40(m，2h)，7.37-7.31(m，1h)，2.17-2.07(m，j＝4.4hz，1h)，1.39(s，9h)，1.28-1.22(m，2h)，1.17-1.08(m，2h)。
步骤3：5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-胺
将三氟乙酸(1.0ml，13.0mmol)添加至含有(5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(0.48g，1.3mmol)的烧瓶中。30分钟后，将反应混合物用etoac稀释并用1.0m水性k2hpo4碱化至约ph9。将有机层用盐水洗涤，并将合并的水层用etoac反萃取。合并的有机萃取物经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。将粗产物用快速色谱在sio2上提纯(0-100％etoac/己烷，isco40g柱)，得到5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-胺(0.22g，0.80mmol，62％产率)，其为白色固体。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.47-7.42(m，2h)，7.39-7.32(m，1h)，2.62(br.s.，2h)，1.98(tt，j＝8.3，5.3hz，1h)，1.17-1.11(m，2h)，1.12-1.03(m，2h)。
步骤4：2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯
向5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-胺(50mg，0.19mmol)和2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(44.5mg，0.19mmol)的dcm(0.93ml)溶液中添加乙酸(10.6μl，0.19mmol)。将混合物在室温搅拌15分钟，然后分批添加三乙酰氧基硼氢化钠(43.3mg，0.20mmol)。将反应在室温搅拌1小时并直接用快速色谱在sio2上提纯(0-20％etoac/己烷)，得到2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(82.0mg，0.17mmol，90％产率)，其为油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.41-7.48(m，2h)，7.31-7.40(m，1h)，3.52(t，j＝7.59hz，1h)，3.25-3.32(m，2h)，3.14-3.24(m，2h)，1.89-2.15(m，3h)，1.32-1.48(m，14h)，1.13-1.26(m，2h)，0.96-1.10(m，2h)。
步骤5：5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)-n-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)异噁唑-4-胺
将三氟乙酸(0.18g，1.6mmol)添加至2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(78mg，0.16mmol)的dcm(0.80ml)室温溶液中。2小时后，除去过量的溶剂并将残余物在真空中干燥2小时，得到5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)-n-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)异噁唑-4-胺的tfa盐，将其直接用于下一步骤中。
实施例5.2-(2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸
将碳酸铯(32.2mg，0.099mmol)添加至5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)-n-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)异噁唑-4-胺、tfa(20mg，0.039mmol)和2-溴-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸乙基酯(18.0mg，0.06mmol)在dma(0.2ml)中的室温溶液。将反应混合物加热至50℃。1小时后，将1.5ml的thf/水/meoh(10/4/1)和lioh(2.8mg，0.12mmol)添加至混合物中并将其加热至50℃1小时。真空除去挥发性溶剂，将混合物用dmf稀释并过滤固体。将滤液用制备型hplc提纯(phenomenexaxialunac185μ30x100mm柱，10分钟梯度从5至100％的a中的b，a＝10:90:0.1mecn：h2o：tfa，b＝90:10:0.1mecn：h2o：tfa)。将含有产物的级分合并，并浓缩得到2-(2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸(7.2mg，0.012mmol，31％产率)。ms(esi)m/z：587.1[m+h]+；1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.12(d，j＝1.54hz，1h)，7.74(dd，j＝1.43，11.11hz，1h)，7.40-7.52(m，3h)，3.47-3.78(m，6h)，2.13-2.31(m，3h)，1.61-1.78(m，6h)，1.25-1.33(m，2h)，1.11-1.24(m，2h)；hlegal-fxrec50＝60nm。
通用方法d
实施例6
2-(2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸
步骤1：2-叠氮基-1,3-二氯苯
在0℃，在30分钟内，向2,6-二氯苯胺(0.96g，5.9mmol)的tfa(10ml)和水(2ml)溶液中添加亚硝酸钠(0.41g，5.9mmol)。随后逐渐添加溶于最少量的水中的叠氮化钠(0.98g，15.0mmol)。将反应混合物在0℃搅拌10分钟，并温热至室温。2小时后，用水淬灭反应，并用etoac萃取。将有机层真空浓缩并将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-20％etoac/己烷)，得到2-叠氮基-1,3-二氯苯(1.1g，5.7mmol，97％产率)，其为油状物。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.30(d，j＝8.25hz，2h)，7.05(t，j＝8.12hz，1h)。
步骤2：(4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)甲醇
将2-叠氮基-1,3-二氯苯(3.5g，18.6mmol)和3-环丙基丙-2-炔-1-醇(1.8g，18.6mmol)在甲苯(12.4ml)中的混合物密封并在110℃加热经过周末。将粗制的反应混合物用快速色谱在sio2上提纯(0-100％etoac/己烷)，得到(4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)甲醇(1.2g，4.1mmol，22％产率)，其为棕褐色固体。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.49-7.53(m，2h)，7.42-7.47(m，1h)，4.63(s，2h)，1.96-1.99(m，1h)，1.10-1.16(m，2h)，0.99-1.04(m，2h)。
步骤3：5-(溴甲基)-4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑
向(4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)甲醇(0.33g，1.2mmol)的dcm(4.6ml)溶液中添加三苯基膦(0.79g，3.0mmol)。15分钟后，分批添加cbr4(1.0g，3.0mmol)。将所得混合物在室温搅拌1小时并将粗制的反应混合物用快速色谱在sio2上提纯(0-20％etoac/己烷)，得到5-(溴甲基)-4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑(426mg，1.2mmol，99％产率)，其为棕褐色泡沫。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.52-7.58(m，2h)，7.47-7.51(m，1h)，4.38(s，2h)，1.87-1.98(m，1h)，1.18(dd，j＝2.06，4.81hz，2h)，1.02-1.12(m，2h)。
步骤4：((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)甲基)膦酸二乙基酯
将5-(溴甲基)-4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑(1.5g，4.3mmol)和亚磷酸三乙基酯(1.3g，7.8mmol)在二噁烷(1.4ml)中的混合物在密封管中、在120℃加热搅拌过夜。将反应混合物直接装置至sio2胶柱上用于通过快速色谱提纯(0-80％etoac/己烷)，得到((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)甲基)膦酸二乙基酯(1.8g，4.3mmol，99％产率)，其为灰白色固体。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.46-7.52(m，2h)，7.39-7.46(m，1h)，3.98(ddd，j＝7.26，8.47，14.64hz，4h)，3.10-3.22(m，2h)，1.90-1.99(m，1h)，1.21(t，j＝7.04hz，6h)，1.07-1.15(m，2h)，1.00(dd，j＝2.31，8.25hz，2h)。
步骤5：2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯
在-78℃、在氮气气氛下，向((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)甲基)膦酸二乙基酯(78mg，0.19mmol)的thf(1.5ml)溶液中逐滴添加正丁基锂(2.5m，在己烷中，0.08ml，0.19mmol)。将混合物搅拌30分钟然后添加2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(46.2mg，0.19mmol)的thf(0.5ml)溶液，并将反应混合物温热至室温。30分钟后，将反应混合物用etoac稀释，用水和盐水洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩至干。将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-25％etoac/己烷)，得到2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(81mg，0.16mmol，86％产率)，其为泡沫。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.47-7.52(m，2h)，7.44(s，1h)，5.74(t，j＝2.31hz，1h)，3.30(brd，j＝5.72hz，4h)，2.44-2.53(m，4h)，1.67-1.72(m，1h)，1.52(t，j＝5.61hz，4h)，1.45(s，9h)，1.11-1.17(m，2h)，0.96-1.02(m，2h)。
步骤6：2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷
向2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(81mg，0.17mmol)的dcm(0.6ml)溶液中添加hcl(4.0m，在二噁烷中，0.41ml，1.7mmol)。将反应混合物在室温搅拌30分钟，并真空浓缩得到2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷，hcl(72mg，0.17mmol，100％产率)，其为灰白色固体。产物无需进一步提纯或表征来使用。
实施例6.2-(2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸
将2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷、hcl(23mg，0.053mmol)、2-溴-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸乙基酯(19.3mg，0.064mmol)和cs2co3(51.7mg，0.16mmol)在dmf(0.3ml)中的混合物在90℃加热2.5小时。将反应混合物冷却至室温，添加1.0mnaoh水溶液(0.27ml，0.27mmol)，并将反应在90℃加热2小时。将反应混合物过滤以除去固体，并将滤液用制备型lc/ms使用以下条件提纯：柱：xbridgec18，19x200mm，5-μm颗粒；流动相a：5:95乙腈：含10-mm乙酸铵的水；流动相b：95:5乙腈：含10-mm乙酸铵的水；梯度：经20分钟30-70％b，然后在100％b停留4分钟；流速：20ml/min。合并含所需产物的级分，并通过离心蒸发干燥，得到2-(2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸(3.8mg，6.5μmol，12％产率)。ms(esi)m/z：584.1[m+h]+；1hnmr(500mhz，dmso-d6)δ8.05-8.21(m，1h)，7.77(d，j＝8.24hz，2h)，7.64-7.72(m，1h)，7.57(brd，j＝4.58hz，1h)，5.77(brs，1h)，1.80-1.87(m，1h)，1.63(brs，4h)，0.96-1.04(m，2h)，0.91(brd，j＝2.75hz，2h)由于水抑制，其它信号丢失；hlegal-fxrec50＝402nm。
通用方法e
实施例7
2-(2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸
步骤1：3-环丙基-4-(二甲基氨基)-2-氧代丁-3-烯酸乙基酯
将3-环丙基-2-氧代丙酸乙基酯(0.50g，3.2mmol)和1,1-二甲氧基-n,n-二甲基甲胺(0.68ml，5.1mmol)在thf(1.8ml)中的混合物在密封管中、在80℃加热2小时。将反应混合物真空浓缩至干，并将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-80％etoac/己烷)，得到3-环丙基-4-(二甲基氨基)-2-氧代丁-3-烯酸乙基酯(0.52g，2.5mmol，77％产率)，其为油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.21-7.47(m，1h)，4.27(q，j＝7.04hz，2h)，3.23(brs，6h)，1.48(brt，j＝7.04hz，1h)，1.33(t，j＝7.15hz，3h)，0.79(q，j＝5.80hz，2h)，0.39-0.47(m，2h)。
步骤2：4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-羧酸乙基酯
向3-环丙基-4-(二甲基氨基)-2-氧代丁-3-烯酸乙基酯(0.40g，1.9mmol)的etoh(4.0ml)溶液中添加(2,6-二氯苯基)肼(0.34g，1.9mmol)。将反应烧瓶密封并在90℃搅拌加热3小时。将反应混合物真空浓缩，并将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-30％etoac/己烷)，得到4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-羧酸乙基酯(0.40g，1.2mmol，63％产率)，其为油状物，其静置后固化。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.20-7.30(m，3h)，7.13-7.19(m，1h)，4.03(q，j＝7.04hz，2h)，2.25(tt，j＝5.14，8.50hz，1h)，0.96(t，j＝7.15hz，3h)，0.88(dd，j＝1.87，8.47hz，2h)，0.57(dd，j＝1.76，5.28hz，2h)。
步骤3：(4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)甲醇
在0℃，在15分钟内，向4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-羧酸乙基酯(0.32g，0.97mmol)的thf(3.9ml)溶液中逐滴添加二异丁基氢化铝(3.9ml，3.9mmol，1.0m，在甲苯中)。然后将反应混合物温热至室温。1小时后，将混合物用etoac稀释，用0.1mhcl和盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并真空浓缩得到(4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)甲醇(243mg，0.86mmol，88％产率)，其为棕褐色固体。产物无需进一步提纯来使用。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.42-7.49(m，3h)，7.35-7.42(m，1h)，4.54(brs，2h)，0.95(brd，j＝7.98hz，2h)，0.62-0.74(m，2h)。
步骤4：5-(溴甲基)-4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑
向(4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)甲醇(0.15g，0.52mmol)的dcm(2.1ml)溶液中添加三苯基膦(0.34g，1.3mmol)。在搅拌混合物15分钟后，分批添加cbr4(0.43g，1.3mmol)，并将所得混合物在室温搅拌90分钟。将粗制反应混合物直接用快速色谱在sio2上提纯(0-20％etoac/己烷)，得到5-(溴甲基)-4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑(0.15g，0.44mmol，85％产率)，其为棕褐色固体。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.44-7.51(m，3h)，7.38-7.43(m，1h)，4.37(s，2h)，1.75(tt，j＝5.05，8.42hz，1h)，0.92-1.03(m，2h)，0.66-0.76(m，2h)。
步骤5：((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)甲基)膦酸二乙基酯
将5-(溴甲基)-4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑(61mg，0.18mmol)和亚磷酸三乙基酯(0.060ml，0.35mmol)的二噁烷(0.1ml)溶液在密封管中在140℃加热搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温并直接用快速色谱在sio2上提纯(0-80％etoac/己烷)，得到((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)甲基)膦酸二乙基酯(64mg，0.159mmol，90％产率)，其为薄膜。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.43-7.38(m，2h)，7.33-7.26(m，1h)，7.10(s，1h),4.10(t，j＝7.3hz，4h)，3.41(s，1h)，3.35(s，1h)，1.89(s，1h)，1.28(t，j＝7.0hz，6h)，0.94-0.87(m，2h)，0.52(dd，j＝5.1，1.8hz，2h)。
步骤6：2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯
在-78℃、在氮气气氛下，向((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)甲基)膦酸二乙基酯(65mg，0.16mmol)的thf(1.5ml)溶液中逐滴添加正丁基锂(2.5m，在己烷中，0.06ml，0.16mmol)。将反应混合物搅拌30分钟，添加2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(38.6mg，0.16mmol)的thf(0.5ml)溶液，并使反应混合物达到室温。30分钟后，将反应混合物用etoac稀释，用饱和水性nh4cl和盐水洗涤。有机层经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-20％etoac/己烷)，得到2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(42mg，0.09mmol，53％产率)，其为薄膜。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.44(d，j＝8.0hz，2h)，7.37(s，1h)，7.36-7.30(m，1h)，5.76(brs，1h)，3.45-3.37(m，1h)，3.35-3.24(m，4h)，2.46(s，4h)，1.54-1.49(m，4h)，1.45(s，9h)，0.93-0.87(m，2h)，0.68-0.60(m，2h)。
步骤7：2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷
向2-((1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(38.6mg，0.09mmol)的dcm(0.25ml)溶液中添加hcl(4.0m，在二噁烷中，0.26ml，1.0mmol)。将反应混合物在25℃搅拌1小时并真空浓缩得到2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷(41mg，0.09mmol，100％产率)，其为浅黄色固体。产物无需进一步提纯或表征来使用。
实施例7.2-(2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸
将2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷(21mg，0.054mmol)、2-溴-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸乙基酯(19.7mg，0.065mmol)和cs2co3(52.9mg，0.16mmol)在dmf(0.3ml)中的混合物在90℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温并添加1.0mnaoh水溶液(0.27ml，0.27mmol)并将反应混合物在90℃搅拌8小时。将反应混合物过滤并将滤液用制备型lc/ms使用以下条件提纯：柱：xbridgec18，19x200mm，5-μm颗粒；流动相a：5:95乙腈：含10-mm乙酸铵的水；流动相b：95:5乙腈：含10-mm乙酸铵的水；梯度：经20分钟30-70％b，然后在100％b停留4分钟；流速：20ml/min。合并含所需产物的级分，并通过离心蒸发干燥，得到2-(2-((4-环丙基-1-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸(2.3mg，3.9μmol，7％产率)。ms(esi)m/z：583.0[m+h]+；1hnmr(500mhz，dmso-d6)δ8.09-8.15(m，1h)，7.60-7.70(m，3h)，7.54(brt，j＝8.24hz，2h)，7.34(s，1h)，5.69(brs，1h)，4.23(d，j＝7.02hz，1h)，1.60(brs，4h)，1.23(t，j＝7.17hz，2h)，0.87(brd，j＝6.71hz，2h)，0.55(brd，j＝3.97hz，2h)由于水抑制，其它信号丢失；hlegal-fxrec50＝201nm。
通用方法f
实施例8
2-(2-((1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸
步骤1：1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑
将(2,6-二氯苯基)硼酸(1.9g，10.1mmol)、4-溴-1-环丙基-1h-吡唑(1.7g，9.2mmol)、pdcl2(dppf)-ch2cl2加合物(0.30g，0.34mmol)和na2co3(1.9g，18.4mmol)在thf(15ml)和水(5ml)中的混合物脱气，然后在微波辐射下在100℃加热3小时。将反应混合物用etoac稀释，用饱和水性nh4cl和盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-30％etoac/己烷)，得到1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑(1.4g，5.5mmol，60％产率)，为油状物，其静置后变为固体。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.63(s，2h)，7.35-7.43(m，2h)，7.15(t，j＝7.98hz，1h)，3.68(tt，j＝3.78，7.36hz，1h)，1.21(dt，j＝1.10，3.03hz，2h)，1.07(dd，j＝1.93，7.15hz，2h)。
步骤2：1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-甲醛
向-78℃的1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑(0.59g，2.3mmol)的thf(4.6ml)溶液逐滴添加正丁基锂(2.5m，在己烷中，1.2ml，2.9mmol)。将反应混合物搅拌60分钟，然后滴加thf(2.3ml)中的n,n-二甲基甲酰胺(0.23ml，2.9mmol)。将反应在-78℃继续额外的60分钟，并用etoac稀释，用饱和水性nh4cl和盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-10％etoac/己烷)，得到1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-甲醛(0.22g，0.79mmol，34％产率)，其为灰白色固体。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ9.70(s，1h)，7.40-7.49(m，3h)，7.25-7.33(m，1h)，4.38(tt，j＝3.82，7.51hz，1h)，1.27-1.44(m，2h)，1.10-1.21(m，2h)。
步骤3：(1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)甲醇
在0℃，在15分钟内，向1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-甲醛(0.22g，0.77mmol)的thf(3.1ml)溶液中滴加二异丁基氢化铝(1.7ml，1.7mmol，1.0m，在甲苯中)。将反应混合物温热至室温，并在1小时后用etoac稀释，用0.1mhcl和盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-30％etoac/己烷)，得到(1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)甲醇(0.20g，0.71mmol，90％产率)，其为白色固体。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.36-7.41(m，2h)，7.32(s，1h)，7.21(dd，j＝7.59，8.47hz，1h)，4.60(s，2h)，3.70(tt，j＝3.85，7.37hz，1h)，2.22(brs，1h)，1.23-1.38(m，2h)。
步骤4：5-(溴甲基)-1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑
向(1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)甲醇(0.13g，0.45mmol)的dcm(1.8ml)溶液中添加三苯基膦(0.30g，1.1mmol)。将反应混合物搅拌15分钟，然后分批添加cbr4(0.38g，1.1mmol)。将所得混合物在室温搅拌2小时并直接用快速色谱在sio2上提纯(0-20％etoac/己烷)，得到5-(溴甲基)-1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑(0.12g，0.35mmol，77％产率)，其为油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.36-7.43(m，3h)，7.22-7.29(m，1h)，4.45(s，2h)，3.61(tt，j＝3.74，7.26hz，1h)，1.26-1.41(m，2h)，1.13-1.22(m，2h)。
步骤5：((1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)甲基)膦酸二乙基酯
将5-(溴甲基)-1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑(121mg，0.35mmol)和亚磷酸三乙基酯(120μl，0.70mmol)的二噁烷(120μl)溶液在密封管中、在120℃加热搅拌过夜。将反应在140℃加热4小时，冷却至室温，并直接用快速色谱在sio2上提纯(0-80％etoac/己烷)，得到((1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)甲基)膦酸二乙基酯(160mg，0.35mmol，100％产率)，其为油状物。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.39(s，2h)，7.35-7.38(m，1h)，7.19(dd，j＝7.70，8.36hz，1h)，3.77-3.98(m，4h)，3.65-3.77(m，1h)，3.40(s，1h)，3.34(s，1h)，1.27(td，j＝1.71，3.63hz，2h)，1.12-1.20(m，6h)，1.10(dd，j＝2.20，7.26hz，2h)。
步骤6：2-((1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯
在-78℃、在氮气气氛下，向((1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)甲基)膦酸二乙基酯(60mg，0.13mmol)的thf(1.5ml)溶液中滴加正丁基锂(0.052ml，0.13mmol)。将混合物搅拌30分钟并添加2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(31.3mg，0.13mmol)的thf(0.5ml)溶液。使反应混合物到达室温并在1小时后用etoac稀释，用饱和水性nh4cl和盐水洗涤。有机层经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过快速色谱提纯(0-20％etoac/己烷)，得到2-((1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(44mg，0.090mmol，69％产率)，其为油状物。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.41-7.34(m，3h)，7.21-7.13(m，1h)，6.32-6.25(m，1h)，3.43(tt，j＝7.2，3.8hz，1h)，3.32-3.22(m，2h)，3.13-3.05(m，2h)，2.46(s，2h)，1.74-1.67(m，3h)，1.43(s，9h)，1.42-1.34(m，3h)，1.31(brdd，j＝7.2，3.9hz，2h)，1.28-1.23(m，3h)，1.09-1.03(m，2h)。
步骤7：2-((1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷
向2-((1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(44mg，0.09mmol)的dcm(0.25ml)溶液中添加hcl(4.0m，在二噁烷中，0.27ml，1.1mmol)。将反应混合物在室温搅拌1小时并真空浓缩得到2-((1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷，hcl(38mg，0.09mmol，99％产率)，其为淡色固体。产物无需进一步提纯或表征来使用。
实施例8.2-(2-((1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸
将2-((1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷、hcl(23mg，0.054mmol)、2-溴-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸乙基酯(19.8mg，0.065mmol)和cs2co3(52.9mg，0.16mmol)在dmf(0.3ml)中的混合物在90℃加热90分钟。将反应混合物冷却至室温并添加1.0mnaoh水溶液(0.27ml，0.27mmol)。将反应混合物在90℃搅拌过夜。将混合物过滤并将滤液用制备型lc/ms使用以下条件提纯：柱：xbridgec18，19x200mm，5-μm颗粒；流动相a：5:95乙腈：含10-mm乙酸铵的水；流动相b：95:5乙腈：含10-mm乙酸铵的水；梯度：经20分钟28-68％b，然后7-分钟停留在100％b；流速：20ml/min。合并含所需产物的级分，并通过离心蒸发干燥，得到2-(2-((1-环丙基-4-(2,6-二氯苯基)-1h-吡唑-5-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-氟苯并[d]噻唑-6-羧酸(14.2mg，0.024mmol，45％产率)。ms(esi)m/z：583.2[m+h]+；1hnmr(500mhz，dmso-d6)δ8.14(s，1h)，7.50-7.56(m，3h)，7.32-7.37(m，1h)，7.30(s，1h)，6.32(brs，1h)，3.55(brd，j＝3.66hz，1h)，1.70(brs，2h)，1.44-1.52(m，2h)，1.33-1.41(m，2h)，1.04(brd，j＝2.44hz，2h)，0.98-1.02(m，2h)由于水抑制，其它信号丢失；hlegal-fxrec50＝422nm。
通用方法g
实施例9
3-((2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)甲基)苯甲酸
将3-(溴甲基)苯甲酸甲基酯(8.8mg，0.039mmol)添加至dmf(1ml)中的4-((7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(15mg，0.039mmol，如通用方法a中所述)和碳酸钾(10.6mg，0.077mmol)。1小时后，将反应混合物浓缩至干，溶于甲醇(1ml)并用1.0mnaoh水溶液(0.058ml，0.058mmol)处理。1小时后，将反应混合物加热至50℃，15分钟后添加另外的1.0mnaoh水溶液(0.058ml，0.058mmol)并将反应加热至60℃。2小时后，加热降低至50℃。16小时后添加另外的1.0mnaoh水溶液(0.058ml，0.058mmol)并将反应混合物加热至70℃。24小时后，添加另外的3当量naoh。5小时后，用乙酸(0.5ml)淬灭反应，过滤并将滤液用制备型lc/ms使用以下条件提纯：柱：xbridgec18，19x200mm，5-μm颗粒；流动相a：5:95乙腈：含10-mm乙酸铵的水；流动相b：95:5乙腈：含10-mm乙酸铵的水；梯度：经20分钟17-57％b，然后在100％b停留4分钟；流速：20ml/min。合并含所需产物的级分，并通过离心蒸发干燥，得到3-((2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)甲基)苯甲酸(14.5mg，0.028mmol，72％产率)。ms(esi)m/z：523.3[m+h]+；1hnmr(500mhz，dmso-d6)δ7.84-7.75(m，2h)，7.63-7.51(m，3h)，7.38-7.26(m，2h)，5.75-5.67(m，1h)，2.54-2.48(m，2h)，2.41-2.34(m，2h)，2.28-2.11(m，4h)，2.09-2.03(m，2h)，1.83-1.72(m，1h)，1.51-1.37(m，4h)，1.18-1.11(m，2h)，1.08-0.99(m，2h)；hlegal-fxrec50＝959nm。
通用方法h
实施例10
4-((2-((3-(2-氯-6-甲基苯基)-5-环丙基异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)磺酰基)苯甲酸
将4-(氯磺酰基)苯甲酸(9.0mg，0.041mmol)添加至dcm(1ml)中的4-((7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)-3-(2-氯-6-甲基苯基)-5-环丙基异噁唑(15mg，0.041mmol，根据通用方法a合成，用2-氯-6-甲基苯甲醛替换2,6-二氯苯甲醛)和三乙胺(0.011ml，0.081mmol)。15分钟后，将反应混合物真空浓缩至干，溶于1:1dmf/甲醇(2ml)，过滤，且粗物质用制备型lc/ms使用以下条件提纯：柱：xbridgec18，19x200mm，5-μm颗粒；流动相a：5:95乙腈：含0.1％三氟乙酸的水；流动相b：95:5乙腈：含0.1％三氟乙酸的水；梯度：经20分钟45-90％b，然后在100％b停留4分钟；流速：20ml/min。合并含所需产物的级分，并通过离心蒸发干燥，得到4-((2-((3-(2-氯-6-甲基苯基)-5-环丙基异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)磺酰基)苯甲酸(9.9mg，0.018mmol，44％产率)。ms(esi)m/z：553.2[m+h]+；1hnmr(500mhz，dmso-d6)δ8.22-8.11(m，2h)，7.88-7.78(m，2h)，7.38-7.31(m，2h)，7.27-7.19(m，1h)，5.82-5.54(m，1h)，2.96-2.85(m，2h)，2.76-2.65(m，2h)，2.34-2.27(m，2h)，2.11-2.01(m，4h)，1.99-1.85(m，2h)，1.58-1.37(m，4h)，1.16-1.08(m，2h)，1.05-0.97(m，2h)；hlegal-fxrec50＝321nm。
通用方法i
实施例50
4-((7-(4-(2h-四唑-5-基)苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑
将4-(2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苄腈(实施例48，18mg，0.037mmol)、二丁基氧化锡(18.3mg，0.073mmol)和三甲基甲硅烷基叠氮化物(42.3mg，0.37mmol)在甲苯(0.5ml)中的混合物在100℃加热36小时。将反应混合物真空浓缩，溶于dmf，过滤，且粗物质用制备型lc/ms使用以下条件提纯：柱：xbridgec18，19×200mm，5-μm颗粒；流动相a：5:95乙腈：含0.1％三氟乙酸的水；流动相b：95:5乙腈：含0.1％三氟乙酸的水；梯度：经20分钟38-78％b，然后在100％b停留4分钟；流速：20ml/min。合并含所需产物的级分并通过离心蒸发干燥，得到4-((7-(4-(2h-四唑-5-基)苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(4.6mg，8.4μmol，23％产率)。ms(esi)m/z：533.2[m+h]+；1hnmr(500mhz，dmso-d6)δ7.84(brd，j＝8.9hz，2h)，7.69-7.63(m，2h)，7.63-7.45(m，1h)，7.09(brd，j＝8.5hz，2h)，5.75(brs，1h)，3.21(brd，j＝4.0hz，4h)，2.57-2.54(m，2h)，2.22-2.08(m，3h)，1.64-1.44(m，4h)，1.21-1.12(m，2h)，1.08(brd，j＝2.7hz，2h)；hlegal-fxrec50＝4334nm。
通用方法j
实施例2
6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-n-(环丙基磺酰基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-甲酰胺
在氮气下，在装有磁力搅拌子的5ml圆底烧瓶中，将6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-羧酸(实施例4，20mg，0.03mmol)溶于thf(0.32ml)。添加1,1'-羰基二咪唑(15.4mg，0.10mmol)并将混合物在60℃加热1小时，然后添加环丙烷磺酰胺(15.4mg，0.13mmol)和dbu(14.4μl，0.10mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜，并真空浓缩至干。将残余物用1:1dmf/meoh研磨得到6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-n-(环丙基磺酰基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-甲酰胺(9.0mg，0.01mmol，35％产率)，其为黄色固体。ms(esi)m/z：733.2[m+h]+；1hnmr(500mhz，dmso-d6)δ8.20(s，1h)，8.12(d，j＝9.5hz，1h)，7.96-7.87(m，2h)，7.83(t，j＝7.5hz，1h)，7.77(t，j＝7.6hz，1h)，7.57(d，j＝7.5hz，1h)，7.05(s，1h)，3.44-3.32(m，4h)，3.14(tt，j＝4.7，8.3hz，1h)，2.47(d，j＝7.7hz，2h)，2.27(ddd，j＝5.1，8.5，13.3hz，1h)，2.13(p，j＝8.1hz，1h)，1.81(td，j＝2.4，8.8hz，2h)，1.55(dt，j＝5.5，26.4hz，4h)，1.35(dd，j＝8.3，11.7hz，2h)，1.23(p，j＝4.8hz，2h)，1.16-1.08(m，4h)，1.04(dt，j＝3.1，5.3hz，2h)；hlegal-fxrec50＝11nm。
通用方法k
实施例172
4-环丁氧基-6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-n,n-二甲基喹啉-2-甲酰胺
在室温，向4-环丁氧基-6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)喹啉-2-羧酸(10mg，0.016mmol，根据通用方法b2制备)的二氯甲烷(1ml)溶液中添加2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三膦烷-2,4,6-三氧化物(0.037ml，0.063mmol)和休尼格氏碱(0.011ml，0.063mmol)，然后添加thf中的二甲基胺(0.032ml，0.063mmol)。将所得混合物在室温搅拌1小时。将反应混合物浓缩，并将残余物用制备型hplc提纯得到4-环丁氧基-6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-n,n-二甲基喹啉-2-甲酰胺(8.8mg，0.01mmol，82％产率)。ms(esi)m/z：659.6[m+h]+；1hnmr(500mhz，dmso-d6)δ7.92(brd，j＝7.9hz，1h)，7.85-7.80(m，1h)，7.78-7.74(m，1h)，7.62(brdd，j＝9.2，2.3hz，1h)，7.54(brd，j＝7.3hz，1h)，7.29(d，j＝2.3hz，1h)，6.89(s，1h)，5.17-4.99(m，1h)，3.41(brs，2h)，3.22(brd，j＝5.4hz，1h)，3.17-3.09(m，2h)，3.03(brd，j＝17.3hz，6h)，2.61-2.57(m，1h)，2.49-2.37(m，2h)，2.31-2.11(m，4h)，1.90(brd，j＝10.2hz，1h)，1.86-1.69(m，3h)，1.60(brs，2h)，1.57-1.46(m，2h)，1.33(brt，j＝10.0hz，3h)，1.19-1.07(m，2h)，1.07-0.96(m，2h)。
通用方法l
实施例185
(4-环丁氧基-6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)喹啉-2-基)(5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基)甲酮
将二噁烷(1ml)中的4-环丁氧基-6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)喹啉-2-羧酸(15mg，0.024mmol，根据通用方法b2制备)、乙酰肼(2.111mg，0.028mmol)、2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三膦烷-2,4,6-三氧化物(0.035ml，0.059mmol)和休尼格氏碱(10.4μl，0.059mmol)在60℃加热1小时。将所得n'-乙酰基-4-环丁氧基-6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)喹啉-2-碳酰肼用制备型hplc分离并溶于pocl3(0.2ml，2.1mmol)中。将反应混合物在100℃加热10小时。将反应混合物真空浓缩至干，将残余物溶于etoac,用饱和水性k2po3淬灭。分离的有机层经mgso4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用制备型hplc提纯，得到2-(4-环丁氧基-6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)喹啉-2-基)-5-甲基-1,3,4-噁二唑(4.7mg，74％产率)。ms(esi)m/z：670.4[m+h]+；1hnmr(500mhz，dmso-d6)δ7.93(brd，j＝7.9hz，1h)，7.87-7.80(m，2h)，7.79-7.74(m，1h)，7.62(brd，j＝9.8hz，1h)，7.55(brd，j＝7.3hz，1h)，7.26-7.22(m，1h)，5.07(brt，j＝6.9hz，1h)，3.89(s，1h)，3.23(brs，1h)，3.16(brd，j＝10.1hz，2h)，2.62(s，3h)，2.59-2.53(m，3h)，2.47-2.43(m，2h)，2.27-2.19(m，3h)，2.14-2.08(m，1h)，1.88(brd，j＝10.1hz，1h)，1.81-1.74(m，3h)，1.57(brs，2h)，1.51(brs，2h)，1.31(brt，j＝9.6hz，2h)，1.11(brd，j＝7.9hz，2h)，1.04-1.00(m，2h)。
实施例179
1-(6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲氧基)苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)乙-1-酮
步骤1：5-环丙基-4-((7-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)-3-(2-(三氟甲氧基)苯基)异噁唑
将三氟乙酸(0.5ml)添加至二氯甲烷(2ml)6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲氧基)苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-羧酸叔丁基酯(15mg，0.024mmol，根据通用方法a制备)中。15分钟后，将反应混合物真空浓缩，用dcm稀释，用磷酸氢二钾溶液洗涤，经na2o4干燥得到5-环丙基-4-((7-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)-3-(2-(三氟甲氧基)苯基)异噁唑(12mg，86％产率)。ms(esi)m/z：546.08[m+h]+；1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.65-7.58(m，1h)，7.56-7.42(m，3h)，6.90(d，j＝8.4hz，1h)，6.78(dd，j＝8.4，2.4hz，1h)，6.69(d，j＝2.2hz，1h)，5.85(t，j＝2.3hz，1h)，3.91-3.85(m，2h)，3.09-3.04(m，2h)，3.03-2.88(m，4h)，2.79(t，j＝6.1hz，2h)，2.52-2.46(m，2h)，2.17-2.13(m，2h)，2.12-2.02(m，1h)，1.72-1.56(m，4h)，1.17-1.08(m，4h)。
步骤2：实施例179：1-(6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲氧基)苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)乙-1-酮
将乙酸酐(1.3μl，0.014mmol)添加至二氯甲烷(1ml)中的5-环丙基-4-((7-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)-3-(2-(三氟甲氧基)苯基)异噁唑(5mg，9.3μmol)和三乙胺(2.6μl，0.019mmol)中。15分钟后，将反应混合物真空浓缩，将残余物溶于甲醇中，并使用反相hplc提纯以分离1-(6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲氧基)苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)乙-1-酮(1.9mg，35％产率)。ms(esi)m/z：578.4[m+h]；1hnmr(500mhz，dmso-d6)δ7.68-7.64(m，1h)，7.57-7.51(m，3h)，6.99-6.95(m，1h)，6.75(brt，j＝8.9hz，1h)，6.70-6.63(m，1h)，5.82(brs，1h)，4.52-4.42(m，2h)，3.62-3.53(m,1h)，3.41-3.34(m，1h)，3.07-2.98(m，2h)，2.96-2.87(m，2h)，2.79-2.73(m，1h)，2.71-2.62(m，1h)，2.47-2.42(m，2h)，2.11-2.07(m，3h)，2.05(s，3h)，1.58-1.48(m，4h)，1.13-1.13(m，1h)，1.17-1.10(m，2h)，1.05-1.01(m，2h)。
实施例180
6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲氧基)苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酰胺
将异氰酰三甲基硅烷(1.9μl，0.014mmol)添加至二氯甲烷(1ml)中的5-环丙基-4-((7-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)-3-(2-(三氟甲氧基)苯基)异噁唑(5mg，9.3μmol)和三乙胺(2.6μl，0.019mmol)中。16小时后，将反应混合物真空浓缩。将残余物溶于甲醇并使用反相hplc提纯以分离6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲氧基)苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酰胺(2.8mg，51％产率)。ms(esi)m/z：579.1[m+h]+；1hnmr(500mhz，dmso-d6)δ7.69-7.64(m，1h)，7.58-7.50(m，3h)，6.91(brd，j＝8.5hz，1h)，6.78-6.69(m，1h)，6.67(brs，1h)，5.94(brs，2h)，5.82(brs，1h)，4.39-4.27(m，2h)，3.04-2.86(m，4h)，2.73-2.60(m，2h)，2.47-2.37(m，2h)，2.17-2.04(m，3h)，1.60-1.43(m，4h)，1.17-1.10(m，2h)，1.03(brd，j＝2.4hz，2h)。
通用方法m
实施例145
(2s,3s,4s,5r,6s)-6-((6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-羰基)氧基)-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-羧酸
步骤1：6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-羧酸(2s,3r,4s,5s,6s)-6-((烯丙基氧基)羰基)-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基酯
在室温，向6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-羧酸(实施例4，39.3mg，0.062mmol)和hatu(26.1mg，0.069mmol)在乙腈(0.3ml)中的混合物中添加n-甲基吗啉(0.014ml，0.12mmol)。将反应混合物在室温搅拌5分钟，然后添加(2s,3s,4s,5r,6r)-3,4,5,6-四羟基四氢-2h-吡喃-2-羧酸烯丙基酯(17.5mg，0.075mmol)。将混合物在室温搅拌40分钟，并用氮气冲洗以除去反应溶剂。将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-100％etoac/ch2cl2，isco24g柱)，得到6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-羧酸(2s,3r,4s,5s,6s)-6-((烯丙基氧基)羰基)-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基酯(28mg，0.033mmol，53％产率)，其为橙色固体。ms(esi)m/z：846.6[m+h]+；1hnmr(500mhz，cd3cn)δ8.34(s，1h)，8.08(d，j＝9.6hz，1h)，7.91(d，j＝1.4hz，1h)，7.82-7.70(m，3h)，7.50(d，j＝7.3hz，1h)，7.18(brs，1h)，5.97(ddd，j＝5.5，10.7，17.3hz，1h)，5.89(d，j＝7.9，1h)，δ5.37(dq，j＝1.6，17.2hz，1h)，5.26(dq，j＝1.4，10.5hz，1h)，4.68(dt，j＝1.4，5.7hz，2h)，4.12(d，j＝9.4hz，1h)，3.85(brs，1h)，3.70(brs，2h)，3.69-3.54(m，3h)，3.47-3.40(m，2h)，3.39-3.33(m，2h)，2.50(d，j＝7.8hz，2h)，2.28-2.08(m，2h)，1.91-1.83(m，2h)，1.69-1.63(m，2h)，1.62-1.55(m，2h)，1.44-1.35(m，2h)，1.16-1.08(m，4h)。
实施例145.(2s,3s,4s,5r,6s)-6-((6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-羰基)氧基)-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-羧酸
在0℃，向6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-羧酸(2s,3r,4s,5s,6s)-6-((烯丙基氧基)羰基)-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基酯(26.1mg，0.031mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(3.6mg，3.1μmol)在thf(0.5ml)中的混合物中添加et3n(4.7μl，0.034mmol)。将反应混合物在0℃搅拌20分钟，用氮气冲洗以除去溶剂，然后用制备型hplc提纯(phenomenexlunaaxia5μ30×100mm柱，流动相a＝10:90乙腈：含0.1％三氟乙酸的水；流动相b＝90:10乙腈：含0.1％三氟乙酸的水)。将收集的级分减压浓缩，然后冻干得到(2s,3s,4s,5r,6s)-6-((6-(2-((5-环丙基-3-(2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-羰基)氧基)-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-羧酸tfa盐(19.8mg，0.020mmol，62％产率)，其为棕色固体。ms(esi)m/z：806.7[m+h]+；1hnmr(500mhz，cd3cn)δ8.32(s，1h)，8.05(d，j＝9.5hz，1h)，7.88(d，j＝7.6hz，1h)，7.77-7.74(m，1h)，7.74-7.71(m，1h)，7.71-7.68(m，1h)，7.47(d，j＝7.6hz，1h)，7.16(brs，1h)，5.86(d，j＝7.9hz，1h)，4.05(d，j＝9.5hz，2h)，3.65-3.61(m，1h)，3.59(d，j＝7.9hz，1h)，3.55(d，j＝8.8hz，1h)，3.40(dd，j＝6.5，4.6hz，2h)，3.35-3.30(m，2h)，2.47(d，j＝7.9hz，4h)，2.23-2.17(m，2h)，2.17-2.12(m，1h)，1.97(s，2h)，1.87-1.82(m，2h)，1.66-1.61(m，2h)，1.58-1.53(m，2h)，1.40-1.33(m，2h)，1.12-1.09(m，2h)，1.08(td，j＝4.9，2.2hz，2h)。fxrec50＝36nm。
中间体
2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯
将2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(99mg，0.20mmol)溶于meoh(6.7ml)中，且然后添加caco3上的铱(78mg，0.020mmol)。将反应混合物用h2抽真空并平衡3次。在h2气球气氛下，将混合物搅拌过夜并通过硅藻土垫过滤。将滤液真空浓缩，得到2-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(85.3mg，0.17mmol，87％产率)，其为深黄色胶。产物无需提纯使用。ms(esi)m/z：491.7[m+h]+；1hnmr(400mhz，cdcl3)δ7.47-7.31(m，3h)，3.31-3.25(m，2h)，3.25-3.17(m，2h)，2.42(d，j＝7.9hz，1h)，2.28-2.16(m，1h)，2.05-1.96(m，1h)，1.91-1.80(m，2h)，1.49-1.41(m，11h)，1.39-1.33(m，2h)，1.32-1.26(m，2h)，1.23-1.19(m，2h)，1.13-1.04(m，2h)。
6-溴-4-(环戊基氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯
将乙腈(15ml)中的6-溴-4-羟基喹啉-2-羧酸甲基酯(200mg，0.71mmol)，碘环戊烷(0.25ml，2.13mmol)和碳酸钾(300mg，2.13mmol)加热至80℃。16小时后，将反应混合物用水(25ml)稀释并用乙酸乙酯(2×25ml)萃取。有机层经na2so4干燥，过滤，真空浓缩，并用快速色谱在sio2上提纯得到6-溴-4-(环戊基氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯(211mg，85％产率)。ms(esi)m/z：352.0[m+h]+；1hnmr(500mhz，cdcl3)δ8.37(d，j＝2.2hz，1h)，8.10(d，j＝9.1hz，1h)，7.83(dd，j＝8.8，2.2hz，1h)，7.59(s，1h)，5.15(dt，j＝5.6，3.0hz，1h)，4.10(s，3h)，2.18-2.09(m，2h)，2.08-2.01(m，2h)，1.97-1.88(m，2h)，1.81-1.65(m，2h)。
6-溴-4-(2,2-二氟乙氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯
根据为制备6-溴-4-(环戊基氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯所述的程序制备6-溴-4-(2,2-二氟乙氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯，用1,1-二氟-2-碘乙烷代替碘环戊烷(60％产率)。ms(esi)m/z：345.9[m+h]+；1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.22-8.36(m，1h)，8.03(d，j＝9.02hz，1h)，7.78(dd，j＝2.20，9.02hz，1h)，7.50(s，1h)，6.00-6.48(m，1h)，4.43(dt，j＝3.96，12.76hz，2h)，4.01(s，3h)。
6-溴-4-(2-甲氧基乙氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯
根据为制备6-溴-4-(环戊基氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯所述的程序制备6-溴-4-(2-甲氧基乙氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯，用1-溴-2-甲氧基乙烷代替碘环戊烷(79％产率)。ms(esi)m/z：340.1[m+h]+；1hnmr(500mhz，cdcl3)δ8.46(d，j＝1.9hz，1h)，8.11(d，j＝9.1hz，1h)，7.85(dd，j＝9.1，2.2hz，1h)，7.63(s，1h)，4.51-4.42(m，2h)，4.10(s，3h)，3.98-3.91(m，2h)，3.54(s，3h)。
6-溴-4-(2-羟基乙氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯
根据为制备6-溴-4-(环戊基氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯所述的程序制备6-溴-4-(2-羟基乙氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯，用2-溴乙-1-醇代替碘环戊烷(88％产率)。ms(esi)m/z：326.1[m+h]+；1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ8.52(d，j＝2.2hz，1h)，8.09-8.01(m，1h)，8.00-7.94(m，1h)，7.60-7.56(m，1h)，4.36(t，j＝4.5hz，2h)，3.95(s，3h)，3.92-3.84(m，2h)。
6-溴-4-环丁氧基喹啉-2-羧酸甲基酯
根据为制备6-溴-4-(环戊基氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯所述的程序制备6-溴-4-环丁氧基喹啉-2-羧酸甲基酯，用溴环丁烷代替碘环戊烷(54％产率)。ms(esi)m/z：336.0[m+h]+；1hnmr(500mhz，cdcl3)δ8.43(d，j＝1.9hz，1h)，8.10(d，j＝9.1hz，1h)，7.84(dd，j＝8.8，2.2hz，1h)，7.45(s，1h)，5.05-4.96(m，1h)，4.09(s，3h)，2.73-2.59(m，2h)，2.44(brd，j＝9.1hz，2h)，2.07-1.95(m，1h)，1.92-1.77(m，1h)。
6-溴-4-(环丙基甲氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯
根据为制备6-溴-4-(环戊基氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯所述的程序制备6-溴-4-环丁氧基喹啉-2-羧酸甲基酯，用(溴甲基)环丙烷代替碘环戊烷(82％产率)。ms(esi)m/z：336.0[m+h]+；1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.46(d，j＝2.2hz，1h)，8.08(d，j＝8.8hz，1h)，7.82(dd，j＝9.0，2.4hz，1h)，7.54(s，1h)，4.13(d，j＝7.0hz，2h)，4.07(s，3h)，1.47-1.38(m，1h)，0.80-0.73(m，2h)，0.50-0.43(m，2h)。
6-溴-4-(二氟甲氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯
在0℃，向搅拌中的cs2co3(0.98g，3.0mmol)的dmf(5ml)悬浮液添加6-溴-4-羟基喹啉-2-羧酸甲基酯(0.28g，1.0mmol)和氯二氟乙酸钠(0.46g，3.0mmol)。将反应混合物在80℃加热搅拌30分钟。将反应混合物冷却至室温后，添加水(25ml)，并将所得悬浮液搅拌1小时。通过抽滤收集固体并用水(2×5ml)洗涤。在真空干燥过夜后，得到6-溴-4-(二氟甲氧基)喹啉-2-羧酸甲基酯(0.28g，0.81mmol，81％产率)，其为白色固体。ms(esi)m/z：333.9[m+h]+；1hnmr(500mhz，cdcl3)δ8.40(d，j＝1.9hz，1h)，8.17(d，j＝9.1hz，1h)，7.93(dd，j＝9.1，2.2hz，1h)，7.86(s，1h)，7.11-6.77(m，1h)，4.10(s，3h)。
2-氯-8-甲氧基喹啉-5-羧酸甲基酯
步骤1：8-甲氧基喹啉-5-羧酸甲基酯
将3-氨基-4-甲氧基苯甲酸(3.3g，19.7mmol)、甘油(2.9ml，39.5mmol)和3-硝基苯磺酸钠盐(13.3g，59.2mmol)的75％h2so4(47.0ml)溶液加热至100℃2小时，且然后在140℃加热1小时。将反应混合物冷却至室温，且然后添加meoh(40ml)并将反应混合物加热至60℃过夜。将反应混合物冷却至室温并倒入冰水中，并用12m水性nh4oh碱化。将所得混合物用etoac萃取。分离各层，并用etoac进一步萃取水层2次。将合并的有机层用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物干装至sio2上，并用快速色谱在sio2上提纯(0-100％etoac/己烷)得到8-甲氧基喹啉-5-羧酸甲基酯(2.2g，9.9mmol，50％产率)，其为白色固体。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ9.50(dd，j＝8.8，1.7hz，1h)，9.00(dd，j＝3.9，1.7hz，1h)，8.37(d，j＝8.3hz，1h)，7.59(dd，j＝8.8，4.1hz，1h)，7.08(d，j＝8.3hz，1h)，4.19(s，3h)，4.00(s，3h)。
步骤2：8-甲氧基-5-(甲氧基羰基)喹啉1-氧化物
将间氯过氧化苯甲酸(0.97g，4.3mmol)分批添加至8-甲氧基喹啉-5-羧酸甲基酯(0.72g，3.3mmol)的二氯甲烷(25.5ml)溶液中。将反应在室温搅拌过夜。将溶剂体积减少约25％并将粗制反应混合物直接装载在sio2柱上用于通过快速色谱在sio2上提纯(0-10％meoh/dcm，isco40g柱)，得到8-甲氧基-5-(甲氧基羰基)喹啉1-氧化物(0.6g，2.6mmol，78％产率)，其为黄色固体。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ9.02(dd，j＝8.9，1.0hz，1h)，8.47(dd，j＝6.2，1.1hz，1h)，8.31(d，j＝8.8hz，1h)，7.34(dd，j＝8.9，6.1hz，1h)，7.07(d，j＝8.8hz，1h)，4.11(s，3h)，3.99(s，3h)。
步骤3：2-氯-8-甲氧基喹啉-5-羧酸甲基酯
依次将氯氧化磷(0.29ml，3.1mmol)和dmf(0.10ml，1.3mmol)添加至0℃的8-甲氧基-5-(甲氧基羰基)喹啉1-氧化物(0.6g，2.6mmol)的二氯甲烷(26ml)溶液中。5分钟后，将反应混合物置于室温。24小时后，将粗制的反应混合物用快速色谱在sio2上提纯(0-85％etoac/己烷，然后0-10％dcm/meoh，isco40g柱)，得到2-氯-8-甲氧基喹啉-5-羧酸甲基酯(0.58g，2.3mmol，90％产率)，其为白色固体。1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ9.35(d，j＝9.0hz，1h)，8.34(d，j＝8.4hz，1h)，7.78(d，j＝9.0hz，1h)，7.38(d，j＝8.6hz，1h)，4.07(s，3h)，3.92(s，3h)。
2-溴-4-(三氟甲氧基)苯并[d]噻唑-6-羧酸甲基酯
步骤1：2-氨基-4-(三氟甲氧基)苯并[d]噻唑-6-羧酸甲基酯
将溶于乙酸(2.8ml)的溴(0.22ml，4.2mmol)添加至0℃的4-氨基-3-(三氟甲氧基)苯甲酸甲基酯(1.0g，4.2mmol)和硫氰酸钠(1.4g，17.0mmol)的乙酸(5.7ml)溶液中。将反应混合物置于室温并搅拌过夜。添加更多的溴(0.22ml，4.2mmol)并将反应混合物加热至50℃。在经过周末加热后，将反应混合物在etoac和水之间分配。收集有机层，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-100％etoac/己烷，isco24g柱)，得到2-氨基-4-(三氟甲氧基)苯并[d]噻唑-6-羧酸甲基酯(0.21g，0.72mmol，17％产率)，其为黄色固体。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.27(d，j＝1.5hz，1h)，7.94(t，j＝1.5hz，1h)，5.85(brs，2h)，3.96(s，3h)。
步骤2：2-溴-4-(三氟甲氧基)苯并[d]噻唑-6-羧酸甲基酯
将亚硝酸叔丁基酯(0.11ml，0.86mmol)添加至快速搅拌的溴化铜(ii)(0.18g，0.79mmol)在乙腈(3.6ml)中的悬浮液。5分钟后，将所得深棕色混合物添加至含悬浮于乙腈(0.5ml)中的2-氨基-4-(三氟甲氧基)苯并[d]噻唑-6-羧酸甲基酯(0.21g，0.72mmol)的烧瓶中。将反应混合物在室温搅拌2.5小时，随后用etoac稀释，并添加sio2。将混合物浓缩得到自由流动的固体，用快速色谱将其在sio2上提纯(0-40％etoac/己烷，isco24g柱)，得到2-溴-4-(三氟甲氧基)苯并[d]噻唑-6-羧酸甲基酯(0.13g，0.37mmol，51％产率)，其为白色固体。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.50(d，j＝1.5hz，1h)，8.06(quin，j＝1.4hz，1h)，4.01(s，3h)；19fnmr(377mhz，cdcl3)δ-57.69(s)。
2-溴-5-甲氧基苯并[d]噻唑-6-羧酸乙基酯
可通过针对2-溴-4-(三氟甲氧基)苯并[d]噻唑-6-羧酸甲基酯所描述的两步程序制备标题化合物，用2-氨基-4-甲氧基苯甲酸乙基酯替代4-氨基-3-(三氟甲氧基)苯甲酸甲基酯。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ8.23(s，1h)，7.55(s，1h)，4.40(q，j＝7.2hz，2h)，3.98(s，3h)，1.41(t，j＝7.0hz，3h)。
2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-5-羧酸乙基酯
在氢气气氛下(气球气压)，将2,4-二氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-5-羧酸乙基酯(1.3g，3.4mmol)、20％碳上的氢氧化钯(0.24g，0.34mmol)和乙酸钠(3.8g，45.9mmol)的混合物在etoac(80ml)和2-丙醇(16ml)中的混合物在室温搅拌。2.5小时后，将所得混合物通过硅藻土垫过滤，并将滤液减压蒸发。将粗制残余物用快速色谱在sio2上提纯(0-100％etoac/己烷，isco80g柱)，得到2-氯吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-5-羧酸乙基酯(0.47g，2.1mmol，61％产率)，其为黄色固体。ms(esi)m/z：226.1[m+h]+；1hnmr(600mhz，cdcl3)δ9.46(s，1h)，7.77(d，j＝2.6hz，1h)，7.45(d，j＝2.8hz，1h)，4.43(d，j＝7.2hz，2h)，1.44(t，j＝7.1hz，3h)。
6-溴-3-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-1-羧酸乙基酯
步骤1：2-(5-溴吡啶-2-基)-2-(羟基亚氨基)乙酸乙基酯
在0℃，将水(0.5ml)中的亚硝酸钠(28.3mg，0.41mmol)添加至2-(5-溴吡啶-2-基)乙酸乙基酯(100mg，0.41mmol)在acoh(0.5ml)中的混合物中。将反应混合物在室温搅拌1小时，并添加水(0.5ml)。保持搅拌1小时并将反应混合物用1m水性k2hpo4碱化至ph8-9。水层用etoac萃取，且有机层经mgso4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物在下一步骤中直接使用。
步骤2：6-溴-3-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-1-羧酸乙基酯
将2-(5-溴吡啶-2-基)-2-(羟基亚氨基)乙酸乙基酯(4.5g，16.5mmol)悬浮于thf(50ml)中。添加tfa(6.2ml)然后分批添加锌粉(2.2g，33.0mmol)。添加三氟乙酸酐(4.7ml，33.0mmol)并将反应混合物搅拌1小时。通过硅藻土过滤混合物并真空浓缩。将吡啶(25ml)添加至残余物中，然后缓慢添加三氟乙酸酐(4.7ml，33.0mmol)。1小时后，将反应混合物真空浓缩并用快速色谱在sio2上提纯(0-100％etoac/己烷，isco80g柱)，得到6-溴-3-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-1-羧酸乙基酯(5g，14.8mmol，90％产率)，其为黄色固体。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.38(s，1h)，8.24(dd，j＝9.7，0.9hz，1h)，7.36(dd，j＝9.6，1.4hz，1h)，4.50(q，j＝7.3hz，2h)，1.46(t，j＝7.2hz，3h)。
6-溴-3-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-1-羧酸甲基酯
将碳酸钾(0.14g，0.98mmol)添加至6-溴-3-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-1-羧酸(0.1g，0.39mmol)的dmf(0.78ml)溶液中。5分钟后，将碘甲烷(0.04ml，0.59mmol)添加至浓浆中并将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物用et2o和水稀释。将有机层用盐水洗涤并将合并的水层用et2o反萃取。合并的有机萃取物经na2so4干燥，过滤并真空浓缩，得到具有适当纯度的白色晶体用于下一步骤。1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.08(dd，j＝9.6，1.0hz，1h)，8.00-7.97(m，1h)，7.14(dd，j＝9.7，1.5hz，1h)，3.98(s，3h)，2.70(s，3h)。
6-溴-4-(2-羟基丙基)喹啉-2-羧酸甲基酯
步骤1：6-溴-4-(1-(叔丁氧基)-1,3-二氧代丁-2-基)喹啉-2-羧酸甲基酯
将dmso(0.5ml)中的3-氧代丁酸叔丁基酯(0.083ml，0.50mmol)、6-溴-4-氯喹啉-2-羧酸甲基酯(15mg，0.050mmol)和碳酸铯(33mg，0.10mmol)加热至100℃。20分钟后，将反应混合物用水(5ml)稀释，用乙酸乙酯(2x10ml)萃取，经na2so4干燥，过滤并浓缩。使用硅胶色谱提纯反应混合物以分离6-溴-4-(1-(叔丁氧基)-1,3-二氧代丁-2-基)喹啉-2-羧酸甲基酯(7.2mg，34％产率)。ms(esi)m/z：422.1[m+h]+；1hnmr(500mhz，cdcl3)δ8.23-8.17(m，1h)，8.06-8.03(m，1h)，8.03-8.00(m，1h)，7.89-7.84(m，1h)，4.13-4.10(s，3h)，4.04-4.02(m，1h)，1.85(s，3h)，1.31-1.26(m，9h)。
步骤2：6-溴-4-(2-氧代丙基)喹啉-2-羧酸甲基酯
三氟乙酸(0.5ml)添加至二氯甲烷(2ml)中的6-溴-4-(1-(叔丁氧基)-1,3-二氧代丁-2-基)喹啉-2-羧酸甲基酯(81mg，0.19mmol)。3小时后，将反应混合物浓缩，并使用硅胶色谱提纯以分离6-溴-4-(2-氧代丙基)喹啉-2-羧酸甲基酯(31mg，50％产率)。ms(esi)m/z：322.1[m+h]+；1hnmr(500mhz，cdcl3)δ8.22(d，j＝9.1hz，1h)，8.11(s，1h)，8.07(d，j＝1.9hz，1h)，7.89(dd，j＝9.1，1.9hz，1h)，4.23(s，2h)，4.11(s，3h)，2.33(s，3h)。
步骤3：6-溴-4-(2-羟基丙基)喹啉-2-羧酸甲基酯
将硼氢化钠(3.6mg，0.096mmol)添加至6-溴-4-(2-氧代丙基)喹啉-2-羧酸甲基酯(31mg，0.096mmol)的甲醇(3ml)悬浮液中。15分钟后，将反应混合物用水稀释，用dcm萃取，经na2so4干燥并真空浓缩以分离6-溴-4-(2-羟基丙基)喹啉-2-羧酸甲基酯(26mg，83％产率)。ms(esi)m/z：324.1[m+h]+；1hnmr(500mhz，cdcl3)δ8.30(d，j＝1.9hz，1h)，8.21(d，j＝9.1hz，1h)，8.15(s，1h)，7.88(dd，j＝8.9，2.1hz，1h)，4.36-4.28(m，1h)，4.11(s，3h)，3.28-3.25(m，2h)，1.41(d，j＝6.3hz，3h)。
4-((7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)-3-(3-氯-5-乙烯基吡啶-4-基)-5-环丙基异噁唑
步骤1：2-((3-(3-氯-5-乙烯基吡啶-4-基)-5-环丙基异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯
用氮气吹洗pd(dppf)2cl2(7.5mg，10μmol)、2-((5-环丙基-3-(3,5-二氯吡啶-4-基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(50mg，0.10mmol，根据通用方法a制备)、k3po4(1m)(0.31ml，0.31mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.022ml，0.13mmol)并加热至100℃。3小时后，将反应混合物用水稀释，用乙酸乙酯(2×10ml)萃取，经na2so4干燥，浓缩并使用反相hplc提纯(phenomemenxlunaaxia5微米c18，30×100mm，经10分钟30至100％b并停留5分钟，溶剂a：90％水/10％乙腈/0.1％tfa，溶剂b：90％乙腈/10％水/0.1％tfa，流速40ml/min；检测器于254处)以分离2-((3-(3-氯-5-乙烯基吡啶-4-基)-5-环丙基异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(18.8mg，38％产率)。ms(esi)m/z：482.0[m+h]+；1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.96-8.77(m，1h)，8.73-8.59(m，1h)，6.50(dd，j＝17.6，11.2hz，1h)，5.96-5.85(m，1h)，5.69-5.63(m，1h)，5.50(d，j＝11.2hz，1h)，3.43-3.21(m，4h)，2.50-2.42(m，2h)，2.27-2.16(m，2h)，2.05-1.95(m，1h)，1.55-1.42(m，13h)，1.30-1.23(m，2h)，1.19-1.14(m，2h)。
步骤2：4-((7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)-3-(3-氯-5-乙烯基吡啶-4-基)-5-环丙基异噁唑
将三氟乙酸(0.5ml)添加至dcm(1ml)中的2-((3-(3-氯-5-乙烯基吡啶-4-基)-5-环丙基异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(19mg，0.039mmol)。15分钟后，将反应混合物浓缩，用1nnaoh(4ml)稀释，用乙酸乙酯(2×10ml)萃取，经na2so4干燥，并真空浓缩以分离4-((7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)-3-(3-氯-5-乙烯基吡啶-4-基)-5-环丙基异噁唑(11mg，73％产率)。ms(esi)m/z：382.2[m+h]+；1hnmr(500mhz，cdcl3)δ8.78(s，1h)，8.60(s，1h)，6.49(dd，j＝17.6，11.3hz，1h)，5.82(d，j＝17.6hz，1h)，5.65(t，j＝2.2hz，1h)，5.39(d，j＝11.0hz，1h)，2.78-2.63(m，4h)，2.45-2.36(m，2h)，2.23-2.09(m，2h)，2.05-1.95(m，1h)，1.55-1.44(m，4h)，1.30-1.23(m，2h)，1.18-1.10(m，2h)。
2-((5-环丙基-3-(3,5-二乙烯基吡啶-4-基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯
将pd(dppf)2cl2(2.5mg，3.5μmol)添加至二噁烷(1ml)中的2-((5-环丙基-3-(3,5-二溴吡啶-4-基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(20mg，0.035mmol，根据通用方法a制备)、4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.023ml，0.14mmol)和k3po4(1m)(0.10ml，0.10mmol)中。将反应混合物在100℃加热。3小时后，将反应混合物用水(10ml)稀释，用dcm(2×10ml)萃取，经na2so4干燥，浓缩并使用反相hplc提纯(phenomemenxlunaaxia5微米c18，30×100mm，经10分钟30至100％b并停留5分钟，溶剂a：90％水/10％乙腈/0.1％tfa，溶剂b：90％乙腈/10％水/0.1％tfa，流速40ml/min；检测器于254处)以分离2-((5-环丙基-3-(3,5-二乙烯基吡啶-4-基)异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁基酯(2.9mg，18％产率)。ms(esi)m/z：474.8[m+h]+；1hnmr(500mhz，cdcl3)δ9.00-8.91(m，2h)，6.51(dd，j＝17.6，11.3hz，2h)，5.98(d，j＝17.6hz，2h)，5.64-5.58(m，2h)，5.57-5.50(m，1h)，3.42-3.33(m，2h)，3.29-3.21(m，2h)，2.47-2.43(m，2h)，2.21-2.18(m，2h)，2.06-1.99(m，1h)，1.56-1.45(m，13h)，1.33-1.28(m，2h)，1.25-1.19(m，2h)。
6-(2-((3-(3-氯-5-乙基吡啶-4-基)-5-环丙基异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-羧酸乙基酯
将10％活性炭上的钯(1.7mg)添加至乙酸乙酯(1ml)中的6-(2-((3-(3-氯-5-乙烯基吡啶-4-基)-5-环丙基异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-羧酸乙基酯(9.3mg，0.014mmol，根据通用方法a制备)。将反应烧瓶置于氢气球下。16小时后，将反应混合物通过硅藻土过滤并真空浓缩，得到6-(2-((3-(3-氯-5-乙基吡啶-4-基)-5-环丙基异噁唑-4-基)亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)-4-(三氟甲基)喹啉-2-羧酸乙基酯(8.3mg，89％产率)。ms(esi)m/z：651.3[m+h]+；1hnmr(500mhz，cdcl3)δ8.70-8.55(m，1h)，8.53-8.48(m，1h)，8.39-8.34(m，1h)，8.22(d，j＝9.4hz，1h)，7.66-7.59(m，1h)，7.25-7.22(m，1h)，5.82-5.67(m，1h)，4.60-4.52(m，2h)，3.46-3.31(m，4h)，2.71-2.60(m，1h)，2.56-2.47(m，1h)，2.39-2.27(m，2h)，2.05-1.98(m，1h)，1.81-1.70(m，4h)，1.55-1.47(m，3h)，1.33-1.23(m，2h)，1.20-1.13(m，2h)。
生物评估
在瞬时人类fxr/gal4-萤光素酶报道基因分析法中测试本发明的例示化合物，且在表1中与其它分析数据一起报道分析结果。
使用gal4-hfxr融合构建体报道基因系统作为主要分析法以表征化合物活性。包括萤火虫萤光素酶报道基因cdna上游的gal4启动子反应组件的5个副本的构建体在hek293细胞中稳定表达。将此报道基因细胞株在潮湿的5％co2氛围中，在37℃下维持于补充有1％青霉素-链霉素(p/s)溶液、500μg/ml的吉欧霉素(zeocin)及经10％碳/聚葡萄糖处理的胎牛血清(cs-fbs)的杜贝克改良伊格尔培养基(dulbecco'smodifiedeagle'smedium；dmem；gibco)中。构建另一质体，其中pcdna3.1载体中的人类巨细胞病毒启动子引导编码融合蛋白的cdna的表达，该融合蛋白包含来自gal4转录因子的dna结合域，该转录因子与来自人类fxr的配体结合域融合。
在转染前一天，用胰蛋白酶自盘剥离培养物中的报道基因细胞且以足以在第二天上午实现约90％汇合的密度涂布于t75烧瓶中。通过以下步骤制备转染试剂：分别在1.87mlopti-mem(thermo-fisher)中稀释25μgpcdna3.1-gal4-fxr质体及在1.87mlopti-mem中稀释40μllipofectamine2000(thermo-fisher)，且接着将经稀释的dna溶液添加至经稀释的lipofectamine2000溶液中且在室温下培育15-20分钟。在即将转移至细胞中之前，混合物用10ml包含dmem、10％cs-fbs及1％p/s的溶液进一步稀释。自细胞抽吸维持培养基且添加最终转染混合物，随后细胞在潮湿的5％co2氛围中，在37℃下培育过夜。此方案可按比例扩大，且经短暂转染的细胞可以分析法备用形式低温保存。
对于化合物测试，用echo声学分配器(labcyte)将100nl化合物(于dmso中的连续稀释物)分配至corning/costar透明底部384孔白色盘的孔中。收集经转染的细胞，计数且稀释，使得10-25,000个细胞(25μl)涂布至384孔化合物分析盘的各孔中。经化合物处理的细胞在潮湿的5％co2氛围中，在37℃下培育过夜。第二天上午，向盘的各孔中添加25μlsteady-glo(promega)，混合物在振荡下培育15分钟且用envision(perkinelmer)盘读取器测量荧光。来自仅用dmso处理的细胞的背景计数减去所有未经处理的计数，且将校正值转化成用8μmgw-4064实现的对照反应的百分比。针对4参数对数激动剂反应方程式拟合这些数据以计算ec50值。
活体内急性小鼠分析法：
自taconiclabs(hudson,ny)购得体重为25-28g的雄性c57bl6/ntac小鼠且保持tekladglobal啮齿类18％蛋白饮食(harlanlaboratories)。在1周的环境适应之后，基于体重将小鼠分配至各组中。向小鼠给予单次口服剂量的媒剂或实验化合物。在来源于血液的血浆中评估全身性化合物暴露，该血液为在给药后1小时及在研究终止时(6小时)经由颌下静脉收集。在研究终止时，处死动物且快速解剖。分割肝脏的内侧叶，其中一半经均质化且用于分析化合物暴露，且另一半保存于rnalater(thermo-fisherscientific)中。亦解剖回肠且保藏于rnalater中。rnalater中的组织样品用mpbiomedicals的珠粒均质化。使用magmax-96totalrnaisolation试剂盒(thermo-fisherscientific)根据制造商方案提取rna。用nano-drop8000分光亮度计(thermofisher)测定rna浓度。用invitrogen的
本发明的其它特征在例示性实施方案的以上描述中应变得清楚，提供所述例示性实施方案以用于说明本发明且不意在对其进行限制。本发明可在不偏离其精神或基本特质的情况下以其它特定形式来实施。本发明涵盖本文中所提及的本发明的优选方面的所有组合。应理解，本发明的任何及所有实施方案均可与任何其它实施方案结合以描述额外实施方案。亦应理解，实施方案中的各个别要素为其自身的独立实施方案。此外，一个实施方案的任何要素意在与来自任何实施方案的任何及所有其它要素组合以描述另一实施方案。