发明领域本发明涉及纤维素酶的新变体。本发明还涉及包含至少一种纤维素酶的新变体的酶组合物和洗涤剂，以及涉及用所述变体处理纤维素材料的方法。纤维素酶的新变体在纺织品处理和洗涤剂应用中是特别有用的。发明背景纤维素分解酶或纤维素酶是具有纤维素分解活性的酶，这意味着它们能够将纤维素底物或其衍生物水解成较小的糖。因此，纤维素分解酶包括纤维素酶和半纤维素酶二者。纤维素酶包括：(1)内切葡聚糖酶(eg,ec3.2.1.4)，其切断内部β-1,4-糖苷键；(2)外切葡聚糖酶或纤维二糖水解酶(cbh,ec3.2.1.176,ec3.2.1.91)，其从晶体纤维素聚合物链的还原或非还原端切割纤维二糖；和(3)β-1,4-葡糖苷酶(bg,ec3.2.1.21)，其将纤维二糖和其它短纤维低聚糖(cello-oligosaccharide)水解成葡萄糖。纤维素酶可包含纤维素结合模块(cbm)，其通过称为接头或连接肽的柔性间隔基与催化域分开。纤维素酶基于其性质被用于各个工业领域。在纺织行业，纤维素酶被用于例如牛仔布整理(denimfinishing)，用以在生物石磨(biostoning)过程中产生出牛仔服装的时尚的石洗外观，并且它们也被用于例如在棉制服装表面上清除绒毛并防止起球。在洗涤剂行业中，纤维素酶被用来提亮颜色，防止服装灰化和起球，并改善清洁。纤维素酶被进一步用于食品工业，包括烘焙，及动物饲料制造，并且它们在纸浆和造纸工业中，例如，在脱墨以从纤维表面释出油墨，在改善纸浆排水和纤维改性中，在溶解纸浆中，在减少能耗中，在纸、纸板和纸浆生产的精炼和干燥阶段中具有巨大的潜力。纤维素酶也被用于木质纤维素材料的水解，例如用于生物乙醇的生产。尽管在工业上表现良好的纤维素酶及其变体在例如wo2016/066896和wo2017/106676中有描述，但在不同的工业应用中，对于具有改变的性质(例如改进稳定性和改进性能)的新型纤维素分解酶仍然存在着需求。发明概述本发明的目的是提供真菌纤维素酶的新的变体，其与对其进行取代的亲本酶相比，显示出在洗涤剂中的改进的稳定性。本发明的目的是通过特征在于独立权利要求中所述内容的gh45纤维素酶多肽的变体来实现的。本发明的优选实施方案公开于从属权利要求中。本发明公开了gh45纤维素酶中的多个氨基酸残基位置，它们对稳定性以及因而对其性能而言是重要的。因此，下文定义的位置组可以被用来通过制备gh45的变体来改进gh45纤维素酶的性质。在实施例中表明这些新的变体与源于嗜热枝顶孢菌(acremoniumthermophilum)cel45a纤维素酶的亲本纤维素酶acm88相比，具有改进的稳定性。由于gh45家族的保守结构和功能，对acm88变体所获得的结果可以应用来制备其它gh45纤维素酶的变体。特别是，新的变体在颜色恢复(起球去除/脱除起球(depilling))和颜色维护/颜色护理(抗起球)方面具有改进的性能，并且已显示它们在几种洗涤剂组合物中，在蛋白酶的存在下具有优秀的稳定性。特别地，在30℃温度下的长期实验中，在含有蛋白酶的洗涤剂中所述变体显示改进的稳定性。依据本发明的第一方面，公开了包括在位置167、210、215、220和225中的取代的gh45纤维素酶多肽的变体，或其活性片段，其中氨基酸位置参考在seqidno:1中列出的氨基酸序列进行编号。依据本发明的第二方面，提供一种包含核苷酸序列的分离的核酸分子，所述核苷酸序列编码第一方面的变体。依据本发明的第三方面，提供一种包含编码第一方面的变体的核苷酸序列的重组表达载体，所述核苷酸序列与能够在合适的宿主中引导编码所述变体纤维素酶的基因表达的调控序列可操作地连接。依据本发明的第四方面，提供一种包含依据第三方面的重组表达载体的宿主细胞。依据本发明的第五方面，提供一种产生第一方面的变体的方法，所述方法包括培养第四方面的宿主细胞并任选地回收变体的步骤。依据本发明的第六方面，提供一种包含第一方面的变体的酶组合物。依据本发明的第七方面，提供一种包含第一方面的变体或第六方面的酶组合物的洗涤剂组合物。依据本发明的第八方面，提供一种处理纤维素材料的方法，其中该方法包括使纤维素材料与第一方面的变体或第六方面的酶组合物反应。依据本发明的第九方面，提供第一方面的变体或第六方面的酶组合物在洗涤剂、处理纤维、木衍生的纸浆、生物质水解、纺织应用、食品或饲料应用，或在任何涉及含有纤维素材料的改性、降解或去除的应用中的用途。依据本发明的另一方面，提供一种用于抗灰化、污渍去除、纤维和颜色护理、生物石磨或生物整理(biofinishing)的方法，其包括将第一方面的变体或第六方面的酶组合物添加到液体中的步骤，所述液体用于处理含有纤维素或纤维素衍生物的织物或服装或其它纺织材料，如织物或服装或纱线。依据另一方面，提供一种gh45纤维素酶多肽的变体，或其活性片段，其包括在位置167、210、215、215、220和225中的至少一个取代，其中氨基酸位置参考在seqidno:1中列出的氨基酸序列编号。在一个实施方案中，所述变体包括从上述位置选出的至少2、3、4或5个取代。如从测试变体的性能和稳定性的实施例中可以看出的，这些位置中的每一个可以用于改进变体的性质，并且当更多的位置被组合取代时，实现甚至更大的改进。附图简述下文将通过优选的实施方案，参照附图更详细地描述本发明，其中：图1显示了用于里氏木霉(trichodermareesei)的转化以表达目的基因(goi)的表达质粒类型的示意图。重组基因处于里氏木霉(t.reesei)cel7a启动子(pcel7a)的控制下，并在1型质粒中添加里氏木霉cel7a(tcel7a)或在2型质粒中添加里氏木霉cel6a(tcel6a)终止子而确保转录终止。amds基因(amds)被包括在内以选择转化子。氨苄青霉素耐药基因(bla)被用于质粒构建。图像使用biomatters创建的geneious版本11.0生成。图2a和2b显示在试验监测物(testmonitor)(e-253)的3次洗涤和翻滚循环后，作为暗度增加(4个条纹的-∆l*的总和)的变体与acm88相比的颜色恢复(起球去除/脱除起球)性能。launder-ometer中的洗涤条件为：40℃,60min,16°dh,洗涤剂4.4g/l,ph~8.4,酶剂量2ncu/ml。图2a显示变体d144-d148与acm88相比的颜色恢复性能。图2b显示变体d149-d152与acm88相比的颜色恢复(脱除起球)性能。图3显示在室温下(约20-22℃)，在含有蛋白酶(0.7%savinase16l)的商业液体洗涤剂中储存4天后作为颜色恢复(脱除起球)效果的剩余性能。图3a显示变体dc144-dc148与acm88相比的剩余性能。图3b显示变体dc149-dc152与acm88相比的剩余性能。图4显示在室温下(约20-22℃)，在含有蛋白酶(0.7%savinase16l)的商业液体洗涤剂中储存4天后的剩余酶活性(ncu)。图4a显示变体d144-d148与acm88相比的剩余活性(%)。图4b显示变体d149-d152与acm88相比的剩余活性(%)。图5显示在以下3种不同的洗涤剂制剂中储存(30℃,9d)后，作为颜色恢复(脱除起球)效果的dc146和acm88的剩余性能：含有商业蛋白酶的液体洗涤剂浓缩液1和2，以及液体洗涤剂基质，其中已添加了0.7%w/wsavinaseultra16l。图6显示于30℃，在含有商业蛋白酶的液体洗涤剂浓缩液1中长期(超过10周)储存期间，作为颜色恢复(脱除起球)效果的dc146和acm88的剩余性能。图7显示在含蛋白酶的商业液体洗涤剂浓缩液3中储存(30℃,11d)后，作为颜色恢复(脱除起球)效果的变体dc144、dc145、dc146和dc150与acm88的剩余性能。图8显示在商业液体洗涤剂中，在炭黑的存在下，变体dc145和dc146与acm88在单次洗涤中的抗灰化性能。洗涤条件：40℃,60min,16°dh,炭黑约0.15g/l,洗涤剂4.4g/l,酶剂量0-0,2ncu/ml。序列表seqidno:1是源于嗜热枝顶孢菌gh45-纤维素酶的成熟acm88纤维素酶的氨基酸序列，包括从leu1到leu281的氨基酸。seqidno:2是源于嗜热枝顶孢菌gh45-纤维素酶的acm88纤维素酶的全长氨基酸序列，包括从met1到leu298的氨基酸。seqidno:3是源于嗜热枝顶孢菌cel45-纤维素酶的全长acm88纤维素酶的核苷酸序列。发明详述本发明涉及纤维素酶，且特别是涉及内切葡聚糖酶。特别地，本发明涉及属于糖基水解酶家族45(gh45)的真菌内切葡聚糖酶，特别是涉及这些内切葡聚糖酶的变体。在本发明的实施方案中，公开了嗜热枝顶孢菌cel45a内切葡聚糖酶多肽的变体。“糖基水解酶家族45”指由henrissat1991，及henrissat和bairoch1993,1996定义的糖基水解酶家族。在本发明的实施方案中，所述变体与gh45纤维素酶具有至少80%序列同一性。在一个实施方案中，所述变体与gh45纤维素酶的催化核心具有至少80%序列同一性。优选所述变体与seqidno:1的氨基酸序列具有至少80%序列同一性。在另一个实施方案中，所述变体与seqidno:1的残基1-207具有至少80%、85%、90%、95%或99%序列同一性。在从变体期望与下面实施例中获得的那些非常相似的结构或性质的情况下，所述序列同一性是有利的。技术人员能够通过使用下文实施例的方法来测量变体的基本性质，如生产水平、酶活性和酶稳定性，并选择具有期望特征的变体。在第一方面的本发明变体中，取代的特定组合有利于获得变体，其具有如在下面实施例中所示的改进的性能和稳定性。然而，当使用具有与acm88(seqidno:1)稍稍不同的氨基酸序列的多肽作为依据本发明进行取代的“模板多肽”或“亲本多肽”时，所述模板多肽可能不具有在与seqidno:1的位置q167、n210、n215、n220和n225对应的位置完全相同的氨基酸。在这种情况下，反而应该取代模板多肽在相应位置的氨基酸。因为模板多肽必须属于相同的酶家族，并且具有非常相似的氨基酸序列，所以在模板多肽的相同位置的取代很可能导致与acm88序列中相同的取代相同或基本上相同或等效的效果，而不是相反。因此，对本发明的变体实现了技术效果。在本发明的实施方案中，所述变体的取代包括q167、n210、n215、n220和n225的取代。更优选地，所述取代包括取代q167y、n210s、n215r/s、n220s和n225s。当制备acm88变体或在所述位置具有相同氨基酸的另一个gh45家族成员的变体时，这样的一组取代是有利的。在本发明的实施方案中，所述取代包括取代167y、210s、215r、220s和225s。这样的一组取代在制备gh45变体时是有利的，该变体在所述位置具有不同的氨基酸，但期望在下面的实施例中对其获得的相似特征。这些实施方案对能够提供来自gh45纤维素酶的变体是有利的，所述纤维素酶具有与seqidno:1非常相似的氨基酸序列且具有在所述位置的氨基酸。取代q167y、n210s、n215r/s、n220s和n225s是特别有利的，但技术人员理解在所述位置的其它取代也可被用来实现期望的技术效果。技术人员可以使用在下面的实施例中提供的测定来确定例如变体的稳定性和性能。在本发明的实施方案中，与亲本多肽相比，所述变体具有改进的稳定性。在一个实施方案中，稳定性的含义包括储存稳定性和在使用期间的稳定性，例如在洗涤过程中的稳定性(洗涤稳定性)，并反映了作为时间函数的依据本发明的变体纤维素酶的稳定性，例如，当变体纤维素酶保持在溶液中，特别是在存在蛋白酶的洗涤剂溶液中时，保留了多少活性和/或洗涤性能。技术人员可以使用在下面的实施例中提供的测定来确定变体的稳定性。在本发明的实施方案中，所述变体还包含在位置23、44、65、66、77、193、219、242和244的一个或多个取代，优选在位置s23、k44、d65、n66、a77、t193、g219、s242和g244的一个或多个取代。在实施例中示出了每个所述位置在与第一方面的变体的取代相结合时改进变体的稳定性和/或性能。在本发明的实施方案中，进一步的取代是取代s23p、k44n、d65e、n66q、a77s、t193v、g219s、s242g和g244t中的一个或多个。在本发明的实施方案中，所述变体包含以下取代：s23p、d65e、n66q、a77s、q167y、n210s、n215r、g219s、n220s、n225s和g244t。在本发明的实施方案中，宿主细胞优选选自：真菌细胞，丝状真菌细胞，其来自子囊菌门(ascomycota)，盘菌亚门(pezizomycotina)；优选来自粪壳菌纲(sordariomycetes)，肉座菌亚纲(hypocreomycetidae)，肉座菌目(hypocreales)和小囊菌目(microascales)和曲霉属(aspergillus)、金孢属(chrysosporium)、毁丝霉属(myceliophthora)和腐质霉属(humicola)的成员；更优选来自肉座菌科(hypocreacea)、丛赤壳科(nectriaceae)、麦角菌科(clavicipitaceae)、小囊菌科(microascaceae)和木霉属(trichoderma)(无性型肉座菌(hypocrea))、镰孢霉属(fusarium)、赤霉菌属(gibberella)、丛赤壳属(nectria)、葡萄状穗霉属(stachybotrys)、麦角菌属(claviceps)、绿僵菌属(metarhizium)、villosiclava、蛇形虫草属(ophiocordyceps)、头孢霉属(cephalosporium)和足放线病菌属(scedosporium)；更优选来自里氏木霉(trichodermareesei)(红褐肉座菌(hypocreajecorina))、柠檬绿木霉(t.citrinoviridae)、长枝木霉(t.longibrachiatum)、绿木霉(t.virens)、哈茨木霉(t.harzianum)、棘孢木霉(t.asperellum)、深绿木霉(t.atroviridae)、近里氏木霉(t.parareesei)、尖镰孢霉(fusariumoxysporum)、禾谷镰孢霉(f.gramineanum)、假禾谷镰孢霉(f.pseudograminearum)、镶片镰孢霉(f.venenatum)、藤仓赤霉(gibberellafujikuroi)、串珠赤霉(g.moniliformis)、玉蜀黍赤霉(g.zeaea)、鞭毛藻丛赤壳菌(血赤壳菌)(nectria(haematonectria)haematococca)、纸葡萄穗霉(stachybotryschartarum)、s.chlorohalonata、麦角菌(clavicepspurpurea)、蚱蜢绿僵菌(metarhiziumacridum)、金龟子绿僵菌(m.anisopliae)、稻绿核菌(villosiclavavirens)、冬虫夏草(ophiocordycepssinensis)、顶头孢霉(产黄头孢霉)(acremonium(cephalosporium)chrysogenum)和尖端足分支霉(scedosporiumapiospermum)和黑曲霉(aspergillusniger)、泡盛曲霉(aspergillusawamori)、米曲霉(aspergillusoryzae)、鲁克文金孢菌(chrysosporiumlucknowense)、嗜热毁丝霉(myceliophthorathermophila)、特异腐质霉(humicolainsolens)和灰腐质霉(humicolagrisea)，细菌细胞，优选地革兰氏阳性杆菌例如枯草芽孢杆菌(b.subtilis)、地衣芽孢杆菌(b.licheniformis)、巨大芽孢杆菌(b.megaterium)、解淀粉芽孢杆菌(b.amyloliquefaciens)、短小芽孢杆菌(b.pumilus)，革兰氏阴性细菌例如大肠杆菌(escherichiacoli)、放线菌目例如链霉菌属(streptomycessp.)，和酵母，例如酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)、巴斯德毕赤酵母(pichiapastoris)、解脂耶氏酵母(yarrowialipolytica)，最优选里氏木霉或杆菌。在本发明的优选的实施方案中，酶组合物可包含本发明的变体和：a.任选地，选自丙二醇、甘油、糖、糖醇、山梨醇、己二醇的至少一种多元醇；b.任选地，优选选自以下的至少一种防腐剂：有机酸，如苯甲酸、柠檬酸、抗坏血酸、山梨酸，及其盐，苯甲酸钠、羟基苯甲酸盐、苯并异噻唑啉酮(bit)，或其组合；c.任选地，选自以下的至少一种抑制剂：甲酸、乳酸、硼酸、硼酸衍生物、芳香族硼酸酯、苯基硼酸衍生物、肽、其它可逆性枯草杆菌蛋白酶抑制剂或其组合；d.任选地，选自以下的至少一种酶：蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、角质酶、酯酶、植酸酶、核酸酶、果胶酶、果胶分解酶、果胶酸裂解酶(pectatelyase)、糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、黄原胶酶、木糖葡聚糖酶、漆酶、过氧化物酶和氧化酶(具有或不具有介体)或其组合；e.任选地，选自以下的至少一种盐：氯化钠、氯化钾、磷酸(氢)钾、磷酸(氢)钠、硫酸铵、硫酸钾或其组合；和f.任选地，选自以下的至少一种填充剂或载体：麦芽糊精、面粉、氯化钠、硫酸盐、硫酸钠、酸式焦磷酸钠、焦磷酸四钠、聚乙二醇或其组合。在一个实施方案中，酶组合物呈液体组合物或固体组合物的形式，例如溶液、分散体、糊剂、粉末、丸剂、微粒、颗粒、包衣颗粒、片剂、饼状物、结晶物、晶浆或凝胶。在一个实施方案中，洗涤剂组合物呈液体洗涤剂或固体洗涤剂的形式，优选呈条、均质片剂、具有两层或更多层的片剂、具有一个或多个隔室的囊袋、常规或致密的粉末、微粒、糊剂、凝胶或常规的、致密的或浓缩的液体的形式。在一个实施方案中，洗涤剂组合物包含一种或多种选自以下的另外的酶：蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、角质酶、酯酶、核酸酶、果胶酶、果胶酸裂解酶、果胶分解酶、糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、黄原胶酶、木糖葡聚糖酶、漆酶、过氧化物酶和氧化酶，优选选自蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶，并且其中洗涤剂组合物优选包含以下中的一种或多种：表面活性剂、助洗剂、螯合物(chelator)或螯合剂(chelatingagent)、漂白系统或漂白组分、聚合物、织物调理剂、泡沫促进剂、抑泡剂、染料、香料、鞣质抑制剂(tannishinhibitor)、荧光增白剂、杀细菌剂、杀真菌剂、污物悬浮剂、防腐蚀剂、助水溶剂、织物色调剂、分散剂、染料转移抑制剂、荧光增白剂、污物释放聚合物、抗再沉积剂、抗收缩剂、抗起皱剂、杀细菌剂、粘合剂、载体、染料、酶稳定剂、织物柔顺剂、填充剂、泡沫调节剂、香料、颜料、缓冲剂、防腐剂、sod抑制剂、溶剂和用于液体洗涤剂的结构剂、结构弹性剂、酶抑制剂或稳定剂、酶激活剂、转移酶、水解酶、氧化还原酶、上蓝剂和荧光染料、抗氧化剂和增溶剂。在本发明的实施方案中，待处理的纤维素材料是纺织材料、用于动物饲料的植物材料或木衍生的纸浆或二次纤维。在本发明的实施方案中，所述变体或酶组合物用于洗涤剂、处理纤维、木衍生的纸浆、生物质水解、纺织应用、食品或饲料应用或任何涉及含纤维素材料的改性、降解或去除的应用中。在本发明的实施方案中，该方法涉及在纺织工业或处理纤维素纺织材料中的用途，并且它包括使纺织材料与洗涤剂组合物接触。也可使用酶组合物代替洗涤剂组合物。在本发明的实施方案中，用于本发明的方法或用途的纺织材料是由含有天然纤维素的纤维或含人造纤维素的纤维制备的或它们是其混合物。在一个实施方案中，提供了包含在下表3中为每个变体名称定义的取代的变体。所述变体是特别有利的，因为它们可以在重组宿主细胞中产生，并且它们显示出作为颜色恢复性能测量的改进的稳定性。在一个实施方案中，所述变体是真菌内切葡聚糖酶，或源于真菌内切葡聚糖酶，优选真菌gh45内切葡聚糖酶。在一个特别的实施方案中，本发明涉及一种变体纤维素酶多肽，或其活性片段，其包含由seqidno:3中列出的核苷酸序列编码的氨基酸序列和至少以下取代：q167y、n210s、n215r/s、n220s和n225s，其中所述变体或其活性片段的氨基酸位置参考在seqidno:1中列出的氨基酸序列编号。在另一个实施方案中，所述变体纤维素酶多肽包含以下取代s23p、d65e、q167y、n210s、n215r、g219s、n220s、n225s和g244t。在本发明中，纤维素酶变体优选源于命名为acm88的亲本分子(wo2016/066896)。acm88包含连接于接头和源于里氏木霉cel7a的cbm区域的源于嗜热枝顶孢菌(a.thermophilum)的cel45a催化核心(核酸序列seqidno:3，对应于氨基酸序列seqidno:2)。术语"源于"包括术语"源自"、"得自"、"可自…获得"、"分离自"和"从…产生"且一般表示一种指定的材料具有其在另一种指定材料中的起源，或具有可以参考另一指定材料来描述的特征。变体多肽具有“突变”，即氨基酸序列中与起始氨基酸不同的任何改变或变化。如本文所用的，"变体"是通过取代、缺失、添加或替代一个或多个氨基酸而源自亲本的多肽。优选本发明的变体多肽具有取代。在一些实施方案中，所述变体多肽可具有一个或多个氨基酸的缺失。在一个实施方案中，所述变体可以是多肽的氨基酸序列中的取代和缺失的组合。取代用以下命名法来描述：蛋白质支架中的氨基酸残基，位置，经取代的氨基酸残基。根据这个命名法，例如在位置20用丝氨酸残基取代甘氨酸残基被表示为ser20gly或s20g。基于氨基酸序列比较和三维结构分析，通过蛋白质工程技术来设计变体。所述变体通过突变产生，即通过故意在dna中引入变化来产生突变的基因产物，即蛋白质。亲本核苷酸序列的变化或修饰可以通过几种方法来引入，所述方法包括例如定点突变和随机突变。对于定点突变，蛋白质结构和结构-功能关系的良好理解是有益的。在缺乏这样的深入理解的情况下，可以使用基于随机突变的方法。可以通过用半胱氨酸残基取代至少一个氨基酸或插入一个或多个半胱氨酸残基(这产生至少一个二硫桥)来改进变体的稳定性。例如，通过改变氢键接触，改变电荷分布，引入盐桥，引入金属结合位点，用一个或多个具有较大体积的侧基的氨基酸填充内部结构空腔(例如在结构上可移动的区域中)，用其它氨基酸取代组氨酸残基，去除脱氨基位点，或通过螺旋封端，也可以得到稳定的变体。本发明的变体优选地是重组产生的融合蛋白。采用通常已知的重组dna技术可以方便地制备它们。简言之，编码变体纤维素酶的多核苷酸被克隆并插入表达载体中，转化到宿主细胞中并表达。用重组技术在不同宿主系统中生产蛋白质的方法是本领域熟知的(sambrook和russell,2001;gellissen,2005)。优选地，变体多肽作为分泌到培养基中的细胞外蛋白而产生，从培养基中它们可容易地被回收和分离。除了形成酶的活性或功能位点的“催化核心”域外，所述变体还可包含一个或多个“纤维素结合域”(“cbd”)，也称为碳水化合物结合域/模块(cbd/cbm)，其位于催化域的n-或c-末端。cbm具有碳水化合物结合活性，并且它们介导纤维素酶与结晶纤维素的结合，但对可溶性底物上酶的水解活性的影响很小或没有影响。本发明的变体还可包含信号序列和/或接头，后者通过柔性且通常高度糖基化的区域连接cbm和催化域。如本文使用的，所谓"接头"或"间隔基"是指包含至少两个氨基酸的柔性多肽，其将两个目的分子连接在一起。例如，通过将编码酶核心的dna序列、编码接头的dna序列和编码cbm的dna序列顺序地融合到一个开放阅读框并表达该结构，提供酶核心与cbm的融合蛋白。cbm和接头区可能是异源的或同源的。本文使用的“异源的”意指变体内切葡聚糖酶多肽的cbm和/或可能的接头部分得自与纤维素分解活性核心结构域不同的生物体。本文使用的“同源的”意指变体的cbm和/或可能的接头部分来自与纤维素分解活性核心相同的生物体。“酶活性片段”或“活性片段”指氨基酸序列的一部分，其足够长以在与亲本多肽相比时，在洗涤剂和/或蛋白酶存在下，具有所需的酶活性和改进的稳定性。换言之，酶活性片段可为例如仅仅是多肽的成熟部分，或甚至是成熟部分的子序列。它可能包含也可能不包含接头和cbm域。酶活性在此是指纤维素分解活性，意思是变体纤维素酶多肽或其片段水解纤维素或其衍生物的催化能力。酶活性可以如实施例1中所述来测定。如本文所用的，“序列同一性”意指两个比对序列之间精确匹配的氨基酸残基相对于两个序列中均存在残基的位置数量的百分比。当一个序列具有残基，而在另一个序列中没有对应的残基时，在比对中允许有空隙。该位置不算在比对程序中同一性计算的分母中。同一性是使用embl-ebi网站(www.ebi.ac.uk/tools/psa/emboss_needle/)上的成对序列比对(pairwisesequencealignment)工具embossneedle使用以下参数确定的值：blosum62,空隙开口10，空隙延伸0.5。本发明进一步涉及新的多核苷酸，其包含编码本发明的酶活性变体纤维素酶的核苷酸序列，包括其互补链。本发明的多核苷酸是含有基因工程非天然存在的序列的重组分子。本文使用的“多核苷酸”指rna和dna两者，并且它可能是单链或双链的。它也可能是互补的dna(cdna)。所谓cdna是指从真核生物或原核生物中获得的信使rna模板合成的dna分子。此外，多核苷酸可由于对如上定义的任何一个序列的遗传编码所致而为简并的。这意味着不同的密码子可以编码相同的氨基酸。本发明涉及重组表达“载体”，其包含编码如上表征的变体的多核苷酸，其与调控序列可操作地连接，所述调控序列能够指导编码所述变体的基因在合适的宿主中表达。所述调控序列可源自宿主生物体，源自另一个生物体，或者可以是合成的。表达载体还可以包含用于选择转化株的标记基因，或者选择标记可以通过共转化在另一个载体构建体中引入宿主。本发明还涉及生产“宿主细胞”，其可以是任何能够表达所需多肽的生物体。宿主细胞可以是异源的或同源的。宿主细胞可为或可以不为经遗传修饰的。优选地使用重组宿主细胞，其被修饰以表达和分泌本发明的变体作为其主要活性或其主要活性之一。这可以通过缺失编码主要内源性分泌酶(例如木霉属(trichoderma)的4种主要纤维素酶)的基因并通过将异源基因整合到具有高表达和生产水平的基因座中来实现。本发明还涉及生产本发明的变体的方法。用于培养宿主细胞的生产培养基可以是适合宿主生物体生长并含有用于有效基因表达的诱导剂的培养基。本发明还涉及包含本发明的变体的酶组合物。本文中使用的"酶制剂"或“酶组合物”指任何酶产物、制剂或组合物，其包含本发明的至少一种变体。酶组合物可以是含有一种或多种变体或者一种或多种变体和一种或多种其它酶的用过的培养基或滤液。“用过的培养基”意指包含产生的酶的宿主的培养基。优选地，宿主细胞在生产后与所述培养基分离。酶制剂或组合物可以是任选地在没有任何生物质分离、下游处理或纯化所需纤维素分解酶的情况下灭活生产宿主或微生物后获得的"整个培养肉汤"，因为本发明的变体可被分泌到培养基中，并且它们在用过的培养基的环境条件下表现出活性。酶组合物可包含至少部分纯化和分离形式的酶。它甚至可能基本由所需的一种或多种酶组成。如果需要，酶组合物可以被干燥、喷雾干燥或冷冻干燥、制粒，或酶活性可以以其它方式被浓缩和/或稳定以供储存。如果需要，可以根据常规方法，如过滤、提取、沉淀、色谱、亲和色谱、电泳等，将所需的酶结晶或分离或纯化。除了本发明的一种或多种变体，酶组合物还可包含选自以下的一种或多种其它另外的酶：蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、糖酶、纤维素酶、果胶酶、果胶酸裂解酶、果胶分解酶、酯酶、植酸酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、氧化酶、黄原胶酶、木糖葡聚糖酶、核酸酶、漆酶和/或过氧化物酶，优选选自蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶。更具体地说，酶制剂可包含至少一种选自以下的另外的酶：纤维二糖水解酶、内切葡聚糖酶、β-葡聚糖酶、β-葡糖苷酶、丝氨酸蛋白酶、木聚糖酶、β-木糖苷酶、甘露聚糖酶、β-甘露糖苷酶、内切果胶裂解酶(endopectinlyase)、果胶酸裂解酶、果胶酯酶、漆酶、角质酶、过氧化物酶和铜依赖性裂解多糖单加氧酶，即糖基水解酶家族61(gh61)或辅助活性家族(auxiliaryactivityfamily)9(aa9)酶。酶组合物可以包含这些酶和本发明的变体的任何组合，但所述酶不限于在此描述的那些。例如，另外的酶也可以是商业上可获得的酶制剂。它取决于在酶组合物中包含或在酶处理中使用其它酶的应用。包含纤维素酶和另外的酶的本发明的酶组合物可以有利于提供协同作用。当将含有纤维素酶的本发明的酶组合物用于洗涤剂中时，例如当清洗污渍时，期需这样的另外的酶。与纤维素酶一起起作用的特别有利的协同酶是淀粉酶、蛋白酶和甘露聚糖酶，或其组合。酶的完美组合允许最大的性能。一般来说，所选酶的性质应与所选的洗涤剂相容(即，ph-最适，与其它酶和非酶成分的相容性等)，且酶应该以有效量存在。酶组合物可包含本发明的变体和：a.任选地，选自丙二醇、甘油、糖、糖醇、山梨醇、己二醇的至少一种多元醇；b.至少一种防腐剂，其例如选自有机酸，如苯甲酸、柠檬酸、抗坏血酸、山梨酸，及其盐，苯甲酸钠、羟基苯甲酸盐、1苯并异噻唑啉酮(bit)，或其组合；c.任选地，选自以下的至少一种抑制剂：甲酸、乳酸、硼酸、硼酸衍生物、芳香族硼酸酯、苯基硼酸衍生物、肽、其它可逆性枯草杆菌蛋白酶抑制剂或其组合；d.任选地，选自以下的至少一种酶：蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、角质酶、酯酶、植酸酶、核酸酶、果胶酶、果胶分解酶、果胶酸裂解酶、糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、黄原胶酶、木糖葡聚糖酶、漆酶、具有或不具有介体的氧化酶和过氧化物酶或其组合；e.任选地，选自以下的至少一种盐：氯化钠、氯化钾、磷酸(氢)钾、磷酸(氢)钠、硫酸铵、硫酸钾或其组合；和f.任选地，选自以下的至少一种填充剂或载体：麦芽糊精、面粉、氯化钠、硫酸盐、硫酸钠、酸式焦磷酸钠、焦磷酸四钠、聚乙二醇或其组合。另外的组分a-f为本发明的酶组合物提供了改进的性质。酶组合物与另外的组分相容，并改进了酶组合物在各种用途中的适用性。盐如氯化钠和硫酸钠起干燥助剂的作用。在一个实施方案中，本发明的酶组合物呈液体组合物或固体组合物的形式，例如溶液、分散体、糊剂、粉末、微粒、颗粒、包衣颗粒、片剂、饼状物、结晶物、晶浆、凝胶或丸剂。酶组合物可用于清洗剂或增效剂(booster)中，清洗剂或增效剂在洗涤期间或洗涤之前添加在洗涤剂之上并且呈例如液体、凝胶、粉末、颗粒或片剂的形式。酶组合物和洗涤剂组分也可以浸泡在载体如纺织品中。在一个实施方案中，酶组合物用于纺织和洗涤剂工业、生物质加工和生物质水解，优选地用于生物燃料、淀粉、纸浆和纸、食品、烘焙、饲料或饮料工业。本发明进一步涉及洗涤剂组合物，其包含至少一种新的变体纤维素酶多肽或其酶组合物。本发明还涉及本发明的变体纤维素酶多肽在洗涤剂应用中的用途。除非另有说明，术语"洗涤剂组合物"和“洗涤剂”包括任何形式的所有洗涤剂，如固体、颗粒或粉末形式，液体、凝胶或糊状形式，及其任何组合。洗涤剂组合物可以呈小袋、囊袋、片剂或条的形式，包括多隔室产品。洗涤剂组合物可以是自由流动的粉末或液体。除非另有说明，该术语包括通用或重型洗涤剂，特别是清洁洗涤剂；液体细织物、专用或轻型洗涤剂；手动洗碗剂或轻型洗碗剂，特别是高泡沫型的那些；机器洗碗剂，包括家庭和机构使用的各种片剂、颗粒、液体和漂洗助剂类型；液体清洁和消毒剂、汽车或地毯香波、浴室清洁剂；金属清洁剂；以及清洗助剂例如漂白添加剂和"染色棒(stain-stick)"或预处理类型，及洗衣助剂。术语"洗涤剂”、"洗涤剂组合物"和"洗涤剂制剂"用于指混合物，其被意图用于洗涤介质用于清洗被污染物体。在一些实施方案中，该术语被用于指清洗织物和/或服装(例如，"洗衣洗涤剂")。在备选的实施方案中，该术语指其它洗涤剂，例如用来清洗碗碟、餐具等的那些洗涤剂(例如，"洗碗洗涤剂")。本发明并不打算限于任何特定的洗涤剂制剂或组合物。意图的是，除了依据本发明的纤维素酶变体之外，该术语还涵盖可包含以下物质的洗涤剂：例如表面活性剂、助洗剂、螯合物或螯合剂、漂白系统或漂白组分、聚合物、织物调理剂、泡沫促进剂、抑泡剂、染料、香料、鞣质抑制剂、荧光增白剂、杀细菌剂、杀真菌剂、污物悬浮剂、防腐蚀剂、助水溶剂、织物色调剂、分散剂、染料转移抑制剂、荧光增白剂、污物释放聚合物、抗再沉积剂、抗收缩剂、抗起皱剂、杀细菌剂、粘合剂、载体、染料、酶稳定剂、织物柔顺剂、填充剂、泡沫调节剂、香料、颜料、缓冲剂、防腐剂、sod抑制剂、溶剂和用于液体洗涤剂的结构剂、结构弹性剂、酶抑制剂或稳定剂、酶激活剂、转移酶、水解酶、氧化还原酶、上蓝剂和荧光染料、抗氧化剂和增溶剂。本发明的洗涤剂组合物除了包含有效量的变体纤维素酶多肽或其酶制剂外，还可包含一种或多种选自阴离子表面活性剂(0-40%重量)、非离子表面活性剂(0-40%重量)和膦酸盐(0-15%重量)的组分。变体纤维素酶多肽的“有效量”这一术语指在特定的洗涤剂应用中充分发挥作用所需的酶的数量。洗涤剂组合物中的酶制剂的量可根据洗涤剂的类型和浓度而变化。优选洗涤剂组合物包含约0.000001%-约10%重量，更优选0.00005%-约1%，甚至更优选0.00001%-0.1%的本发明的变体纤维素酶多肽的洗涤剂组合物。洗涤剂组合物可以以条、均质片剂、具有两层或更多层的片剂、具有一个或多个隔室的囊袋、常规或致密的粉末、微粒、糊剂、凝胶或常规的、致密的或浓缩的液体的形式存在。在一个实施方案中，洗涤剂组合物可以是洗衣洗涤剂组合物，优选是液体或固体洗衣洗涤剂组合物。有许多洗涤剂制剂形式，如层(相同或不同相)、囊袋以及机械定量装置的形式。本发明的变体或酶组合物可以直接添加到洗涤剂中，或者它可以在洗涤期间或洗涤之前分开应用在洗涤剂之上，或者例如在液体/液体或液体/粉末小袋或多隔室小袋或瓶子中应用，其中它可以与一些洗涤剂组分或其它酶(如蛋白酶)分开，以使储存稳定性最大化。术语“稳定性”包括储存稳定性和在使用过程中的稳定性，例如在洗涤过程中的稳定性(洗涤稳定性)，并且反映了依据本发明的变体纤维素酶作为时间函数的稳定性，例如，当变体纤维素酶保持在溶液中，特别是在洗涤剂溶液中时，保留了多少活性和/或洗涤性能。稳定性受多种因素的影响，例如ph、温度、洗涤剂组成例如蛋白酶、稳定剂、助洗剂、表面活性剂等。变体纤维素酶稳定性可使用活性测定或更优选使用在实施例中描述的应用试验来测量。在一个优选的实施方案中，稳定性包括在蛋白酶存在下的稳定性的含义。本发明的变体或本发明的酶组合物也可用于清洗剂或增效剂中，清洗剂或增效剂在洗涤期间或洗涤之前添加在洗涤剂之上并且呈例如液体、凝胶、粉末、颗粒或片剂的形式。酶组合物和洗涤剂组分也可以浸泡在载体如纺织品中。本发明的变体和酶组合物可用来处理任何纤维素材料。在本文中，“纤维素材料”指含有作为重大组分的纤维素或其衍生物的任何材料。这样的材料可以是纺织材料、用于食品或动物饲料的植物或植物来源的材料、用于油提取的植物材料、或木衍生的机械或化学纸浆或二次纤维。本发明的变体在纺织材料的处理中特别有用。术语“纺织品”意指任何纺织材料，包括纱线、纱线中间体、纤维、非织造材料、天然材料、合成材料以及任何其它纺织材料、由这些材料制成的织物和由织物制成的产品(如服装、亚麻布和其它制品)。纺织品或织物可呈针织物、编织物、牛仔布、非织造布、毡、纱线和毛巾布的形式。纺织品可以是基于纤维素的，如天然纤维素材料，包括棉、亚麻(flax)/亚麻(linen)、黄麻、苎麻、剑麻或椰棕或人造纤维素材料(例如源自木浆)，包括粘胶/人造丝、苎麻、醋酸纤维素纤维(tricell)、莱赛尔纤维(lyocell)或其掺合物。纺织品或织物也可以是基于非纤维素的，例如天然聚酰胺，包括羊毛、骆驼毛、羊绒、马海毛、兔毛(rabit)和丝或合成聚合物，例如尼龙、芳族聚酰胺、聚酯、丙烯酸、聚丙烯(polypropylen)和spandex/弹性纤维(elastane)，或其掺合物，以及基于纤维素和基于非纤维素的纤维的掺合物。掺合物的实例是棉和/或人造丝/粘胶与一种或多种伴随材料诸如羊毛、合成纤维(例如聚酰胺纤维、丙烯酸纤维、聚酯纤维、聚乙烯醇纤维、聚氯乙烯纤维、聚氨酯纤维、聚脲纤维、芳族聚酰胺纤维)和含纤维素纤维(例如人造丝/粘胶、苎麻、亚麻(flax)/亚麻(linen)、黄麻、醋酸纤维素纤维、莱赛尔纤维(lyocell))的掺合物。织物可以是常规的可洗衣服，例如染色的家用衣服。当使用术语织物或服装时，也意欲包括更广泛的术语纺织品。所谓“牛仔布”与本发明相关时意指牛仔面料，通常是牛仔服装，尤其是牛仔裤。有利的是，牛仔布是靛蓝染色的牛仔布。牛仔布也可以用靛蓝的衍生物或用靛蓝与某些其它染料一起处理，例如带硫磺衬底的靛蓝染色牛仔布。纤维素材料与本发明的变体或包含所述变体的本发明的酶组合物在合适的条件下，如适当的ph和温度下反应，并且允许反应持续足够发生酶反应的时间，从而获得至少部分水解的纤维素材料。所述酶以酶有效量同时添加(例如以酶混合物的形式)，或者按顺序添加。如本文所用的，术语“抗灰化性能”或“抗灰化效果”意指抗再沉积和颜料去除性质。随着洗涤周期数量的增加，颜料、颗粒和可溶性污物、盐和其它材料可以附着在纺织纤维上，最可能附着在具有受损的棉纤维的区域中。这可导致棉纺织品的灰化作用和变暗或发黄。合适的测试方法在本领域中是众所周知的，并且通常基于在洗衣机的重复洗涤循环中使用具有标准白色试验织物的人工增重物污物系统。抗灰化效果也可以使用基于炭黑的再沉积液，通过单次洗涤作为压力试验进行测试。在一个实施方案中，依据实施例5测定抗灰化效果。所述变体可以添加到洗涤剂组合物中，以通过预防和去除绒毛和起球，导致颜色明亮或清新和软化来改善纤维和颜色护理性质，并提高纺织品的清洗。术语“脱除起球”(去除起球)和“颜色恢复”通常被用来描述纤维素酶对旧的、使用过的棉纺织品的影响。术语“抗起球”(防止起球)、“颜色维护”或“颜色护理”通常被用来描述纤维素酶对新服装的影响。如本文所用的，表述“纤维素酶性能”在洗涤剂应用中指纤维素酶对洗涤剂的纤维和颜色护理性质的影响，其可以作为可见的和可测量的亮度下降(即暗度增加)或彩色棉纺织品的颜色变化来测量。当从纱线突出而形成起球并使织物呈现“浅灰色”或磨损的外观的表面纤维和原纤维被纤维素酶去除时，织物的亮度降低，并且织物表面看起来更暗，并且颜色变得更亮。例如，通过利用实施例中描述的l*a*b*颜色空间坐标使用分光光度计来测量作为反射值的颜色，可以测量亮度或颜色值的变化。纤维素酶性能例如被计算为δl*(deltal*)，其意指酶处理的织物的亮度值l*减去用无纤维素酶的洗涤液处理的织物(酶空白，对照)的亮度值l*。当测试材料由具有不同颜色的纺织品组成(例如市售的包含4个条纹的起球监测物)时，在几个洗涤周期后，将总纤维素酶性能计算为每种颜色的δl*的总和，并且最终结果显示为暗度的增加(-δl*的总和)。本发明的变体和酶组合物在纺织工业的整理工序，如织物、服装或纱线的生物整理中特别有用。如本文所用的，表述"生物整理"(也称为脱除起球、脱除绒毛、脱毛或生物抛光)指使用变体酶受控水解纤维素纤维，以便以以下方式修饰织物或纱线表面，所述方式永久防止起球的趋势，改善织物手感如柔软度和平滑度，通过减少起毛清理表面结构。生物整理导致颜色的净化，改善织物的悬垂性并提高吸湿性，这也可进一步提高可染性。生物整理可在染色前、染色后或染色的同时进行。酶脱除起球可以在纺织品湿处理期间的任何阶段进行，优选在任选的退浆和/或漂白之后，并且可以使用与生物石磨类似的条件。此外，也可处理服装形式的纺织品。本发明的变体和酶制剂可用于牛仔布的生物石磨中。如本文所用的，织物或服装的表述"生物石磨"意指使用酶代替浮石或者与浮石一起用于处理织物或服装，特别是牛仔布，以获得老化或用旧的外观。术语“老化或用旧的外观”意思是由于染料去除不均匀，染色区域和已去除染料的区域之间存在反差。生物石磨和生物整理二者的液比(每织物重量的液体体积的比率)可以在约3:1-20:1,优选5:1-10:1范围内。处理时间可以在15min-90min之间且优选在30min-60min之间变化。应该强调的是，酶的剂量在很大程度上取决于织物的类型、机械、工艺条件(ph、温度、液比、处理时间、牛仔布负荷、工艺规模)以及酶制剂或组合物的类型。例如，用于工业生物整理的典型的工艺参数为ph4.5-8，温度40-65℃。本发明的变体纤维素酶多肽在宽泛范围的ph和温度条件下显示性能。本领域技术人员能够定义合适的剂量和条件。本发明的变体和包含它们的酶制剂/组合物或洗涤剂组合物在洗涤剂和纺织工业中使用时提供了意想不到的优势。本发明的变体在洗涤剂/洗涤剂组合物中，即使在蛋白酶的存在下，也具有比现有技术的纤维素酶好得多的稳定性。在洗涤剂应用中，本发明的变体具有显著改进的稳定性，其测量为颜色恢复(起球去除)。本发明的变体在抗灰化方面也是有效的。对于本领域技术人员来说显而易见的是，随着技术的进步，本发明的概念可以以各种方式实现。本发明及其实施方案不限于所描述的实施例，但可以在权利要求书的范围内变化。实施例实施例1.嗜热枝顶孢菌acm88纤维素酶变体在里氏木霉中的产生标准的分子生物学方法被用于dna的分离和酶处理(例如分离质粒dna，消化dna以产生dna片段)、大肠杆菌转化、测序等。所使用的基本实验室方法如酶、试剂或试剂盒制造商所述，或如标准分子生物学手册(如sambrook和russell(2001))中所述或如下面的实施例中所述。纤维素酶变体源自亲本分子，其命名为acm88(在wo2016/066896中描述)。acm88中的催化核心源自嗜热枝顶孢菌cel45a。信号序列以及接头和cbm区源自里氏木霉cel7a。acm88的全长核酸序列表示为seqidno:3，而相应的氨基酸序列表示为seqidno:2。核苷酸序列(seqidno:2)包含在位置72-130和380-502的内含子。acm88的成熟氨基酸序列(无信号序列)表示为seqidno:1。构建表达质粒用于生产重组acm88变体。这些构建体包含里氏木霉cel7a启动子和amds标记基因，如在paloheimo等人2003中所述。合成基因(表1)，包括引入亲本分子编码区的突变，通过连接作为sacii-bamhi片段与里氏木霉cel7a启动子精确融合。为了转录终止，使用了里氏木霉cel7a或里氏木霉cel6a终止子(图1)。每个变体使用的表达质粒类型列于表1中。通过noti或ecori消化从载体骨架中分离出线性表达盒，或者将环状质粒直接用于里氏木霉原生质体的转化，并且使用乙酰胺作为唯一的氮源选择转化子。宿主菌株缺乏四大内源性纤维素酶：cbhi/cel7a、cbhii/cel6a、egi/cel7b和egii/cel5a。依据penttilä等人,1987，使用karhunen等人,1993描述的修改进行转化。表1.源自亲本分子acm88的纤维素酶变体。示出用于重组纤维素酶表达的表达质粒类型(图1)。变体名称突变表达质粒类型dc1s23r,v24m1dc2s136h,v24i1dc3y146w,q184h1dc4n66q,t59i1dc5a56m,q167a1dc6s153r,a43r1dc7k44r,d48e1dc8a77s,q167y1dc9a122m,q137m1dc10g17c,v28c1dc11k21r,a43r1dc12s156r,k44r1dc13i130n,a144q1dc14s190v,t180e1dc15y69k,e191d1dc16v208d,f209w1dc17k44q,d48t1dc18s54m,t108i1dc19s30l,d40e1dc20a43r,d48t1dc21d65e,n66q1dc22t92e,q184r1dc23s23p,t193i1dc24d151s,p164q1dc25n66s,d40n,n42s1dc26t229n,s241q1dc27h249r,i256r1dc28p261h,y277w1dc29a33k,g112a1dc30q82t1dc31q82r,e116h1dc32a56c,p161c1dc33e81d,t110h1dc34k4h,s116d1dc36q252e,y258h1dc37s217q,n220q1dc38n220e,n225q1dc39y258h,a265q1dc40v263q,a265q1dc41delg781dc42a33q,a75s1dc43a99s,g133a1dc44p161s,a204n1dc45p164t,q184e1dc46a33q,a99s,p161s,p164t,q184e1dc47h249k,s248h1dc48f131h1dc49a122g1dc50a122s1dc51s23p,d65e,n66q,a77s,q82t,q167y,t193i1dc52k44q,d48t,t92e,s109n,q184r1dc53d65e,n66q,s217q,n220q,t229n,s241q1dc54s23p,d65e,n66q,q82t,t193i1dc55s23r,a77s,q82t,q167y,t193i1dc56d65e,n66q,t92e,q184r1dc57k44n,d48s1dc58s23p,a77s,h249r1dc59q167y,t193i,i256r1dc60s217t,n220e1dc61s217d,n220e,n225d,t229d,g244s1dc62s217g,n220g,n225g,g244s1dc63s248w,g254l1dc64t262r,g267a1dc65q271i,l273i1dc66v272q,s248n1dc67g254r,t262i1dc68q271r,l273q1dc69n51e,a33r1dc70s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,q167y,t193i,h249r,s15t,a22t,t92a1dc71s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,q167y,t193i,h249r,d113a1dc72s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,q167y,t193i,h249r,g143a,q145e1dc73s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,q167y,t193i,h249r,q174e,n178d1dc74n210q,n215s,n220e,n225s1dc75p211i,p216t,n220e,p226t1dc76r233s,r234s1dc77n210e,n215s,n220e,n225s1dc78n210s,n215s,n220s,n225s1dc79p211t,p216t,p221t,p226t1dc80p211t,n215s,p221t,p226t1dc81n210t,n215t,n220e,n225t1dc82n210q,p211a,n215s,p216s,n220e,p221a,n225s,p226a1dc83n210q,p211a,n215s,p216t,n220q,p221a,n225s,p226t1dc84n210s,p211t,n215s,p216t,n220s,p221t,n225s,p226t1dc85p211t,p221s,p222s1dc86p226s,p227t1dc87s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,q167y,t193i,h249r1dc88s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,q167y,t193i,h249r,a265h,q271v1dc89s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,q167y,t193i,p211t,n215s,p221t,p226t,h249r1dc90deln210-n2201dc91deln210-n2151dc92deln210,deln2151dc93deln2101dc94s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,q167y,t193i,n210t,h249r1dc95s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,q167y,t193i,n220t,p245c,h249r,p261c1dc96s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,q167y,t193i1dc97a19r1dc98q82r1dc99n210w1dc100n215r1dc101n225d1dc102r234m1dc103g244t1dc104s266e1dc105a19r,q82r1dc106n210w,n215r,n225d1dc107r234m,g244t,s266e1dc108a19r,q82r,n210w,n215r,n225d,r234m,g244t,s266e1dc109k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,q167y,t193i2dc110s23p,d48s,d65e,n66q,a77s,q167y,t193i2dc111s23p,k44n,d65e,n66q,a77s,q167y,t193i2dc112s23p,k44n,d48s,a77s,q167y,t193i2dc113s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,q167y,t193i2dc114s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,t193i2dc115s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,q167y2dc116a19r,g244t,s266e2dc117n210s,n215s,n220s,n225s,r234p,g244t2dc118n210s,n215s,n220s,n225s,r234m,g244t2dc119n210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc120n210t,n215t,n220t,n225t,g244t2dc121n210s,n215r,n220s,n225s2dc122deln210-n215,n220s,n225s,r234m,g244t2dc123deln210,n220s,n225s,r234p,g244t2dc124deln210,n220s,n225s,g244t2dc125n210s,n215s,r234m,g244t2dc126n210s,n215r,g244t2dc127n210s,n215s,g244t2dc128n210s,g244t2dc129s23p,d65e,n66q,a77s,n210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc130s23p,d65e,n66q,a77s,t108i,n210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc131s23p,q58h,d65e,n66q,a77s,n210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc132s23p,d65e,n66q,a77s,q82t,n210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc133s23p,d65e,n66q,a77s,q167y,n210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc134s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,n210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc135k44n,d48s,d65e,n66q,n210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc136s23p,k44n,d48s,a77s,n210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc137s23p,a77s,n210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc138d65e,n66q,n210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc139q167y,n210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc140s23p,k44n,d48s,a77s,q167yn210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc141s23p,k44n,d48s,d65e,n66q,a77s,q167y,n210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc142s23p,d65e,n66q,a77s,n210s,n215s,n220s,n225s,r234p,g244t2dc143s23p,k44n,q167y,n210s,n215s,n220s,n225s,g244t2dc144s23p,d65e,n66q,a77s,q167y,n210s,n215r,n220s,n225s1dc145s23p,d65e,n66q,a77s,q167y,n210s,n215r,n220s,n225s,g244t1dc146s23p,d65e,n66q,a77s,q167y,n210s,n215r,g219s,n220s,n225s,g244t1dc147s23p,d65e,n66q,a77s,q167y,n210s,n215r,n220s,n225s,s242g1dc148s23p,d65e,n66q,a77s,q167y,t193v,n210s,n215r,n220s,n225s1dc149d65e,n66q,a77s,q167y,n210s,n215r,n220s,n225s1dc150q167y,n210s,n215r,n220s,n225s1dc151s23p,q167y,n210s,n215r,n220s,n225s1dc152s23p,k44n,q167y,n210s,n215r,n220s,n225s1从摇瓶培养(50ml)的培养上清液用活性测定分析了转化子的内切葡聚糖酶的产生。转化子在用5%kh2po4(ph5.5)缓冲的复合纤维素酶诱导培养基(joutsjoki等人,1993)中生长7天。基本上如bailey和nevalainen,1981;haakana等人,2004(ncu活性)所述，在50℃下在50mmhepes缓冲液(ph7.0)中，从培养上清液测定重组蛋白的酶活性，作为从羧甲基纤维素(3%cmc)对还原糖的释放。除了ncu活性外，还使用含有底物azo-alpha-cellulose(i-acell,megazymeinternationalirelandltd)或azo-cm-cellulose(s-acmc,megazymeinternationalirelandltd)的活性测定确定了选择变体的内切葡聚糖酶活性。还通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds-page)从培养上清液中检测重组蛋白的产生。将选择的转化子和产生亲本acm88纤维素酶的参考菌株在摇瓶或生物反应器中，在复合纤维素酶诱导培养基中培养，以获得应用试验(实施例2-4)的材料。实施例2.在launder-ometer中测试嗜热枝顶孢菌cel45aacm88变体的颜色恢复性能如在实施例1中所述在木霉属(trichoderma)中产生的嗜热枝顶孢菌cel45aacm88变体的酶制剂被选择用于应用试验，所述酶制剂在高温下在短期稳定性试验中，作为使用可溶性底物cmc或azo-cm-cellulose和/或使用不溶性底物azo-alpha-cellulose时的酶活性，在洗涤剂溶液中显示出改进的稳定性。在商业洗涤剂中测试了作为颜色恢复(脱除起球)效果的变体性能。使用acm88进行比较。使用由centerfortestmaterialsbv(荷兰)供应的多色印制平针织物(jersey)(94%棉，6%dorlastan)的预起球/预损坏的监测物e-253测试了颜色恢复效果。预起球监测物e-253被用于证明从代表用过的棉纺织品的材料中去除起球(脱除起球)。相同的预损坏监测物也被用于证明用过的彩色纺织品的颜色恢复效果。织物被切成包含每种颜色(黑色、红色、绿色、蓝色)的全宽度条纹的样品(约29cmx15-16.5cm，两个样本的总重量为约24g)且使边缘整洁。纤维素酶处理在atlaslp-2launder-ometer中如下进行。先将launder-ometer预热至40℃。将60g钢球(直径0.6cm)、240ml洗涤液和稀释的酶(<1.0ml)加入到1.2升容器中。此后，将2个e-253样本放在容器中(背面对背面)，并在40℃下将launder-ometer运行60min，转速为42rpm。酶的给予量为每ml洗涤液2个活性单位(ncu)。如实施例1中所述测量活性。洗涤液含有4.4g商业液体洗涤剂(表2,实施例3)每升合成自来水(16°dh)，并且其ph为约8.5。蛋白酶savinase16l(novozymes)已被加入洗涤剂中(0.7%w/w)。对于硬度为16°dh的合成自来水，以下储备液在去离子水(milli-q或等同物)中制备：具有1000°d钙-硬度的储备液：cacl2x2h2o(1.02382.1000,merckkgaa,德国)26.22g/l具有200°d镁-硬度的储备液：mgso4x7h2o(1.05886.1000,merckkgaa,德国)8.79g/lh2onahco3储备液：nahco3(1.06329.1000merckkgaa,德国)29.6g/l。按给定顺序将13.3mlcacl2溶液、13.3mlmgso4溶液和10.0ml新鲜制得的nahco3溶液加入容量瓶中，用去离子水补足至1升并混合。水的硬度用络合滴定法测定，且发现其正确。在launder-ometer中纤维素酶处理后，将样本首先在自来水(约20℃)下分开漂洗，然后在洗衣机(whirlpool)中使用带有提取的漂洗程序漂洗。在平底玻璃杯中干燥样本。洗涤和翻滚循环重复3次。通过用konicaminoltacm-3610a分光光度计，使用l*a*b*颜色空间坐标(光源d65/10°,420nm切割)，测量作为反射值的颜色来评估洗涤剂中的纤维素酶性能。在3次洗涤循环后，测量试验监测物的各4个条纹的颜色。亮度(l*)的降低，即与无纤维素酶的处理相比的暗度增加，被用作纤维素酶效果的指示。当从纱线突出而形成起球并使织物呈现浅灰色外观的表面纤维和原纤维被纤维素酶去除时，织物的亮度降低，并且织物表面看起来更暗，并且颜色变得更亮。在纤维素酶处理之前，也从样本测量颜色，以选择均质材料进行测试。纤维素酶性能被计算为δl*(deltal*)，其意指酶处理的织物的亮度值l*减去用无纤维素酶的洗涤液处理的织物(酶空白，对照)的亮度值l*。计算了各4个条纹的δl*之和，并且最终结果显示为暗度的增加(-δl*)。变体dc144-dc148的结果示于图2a中，而变体dc149-dc152的结果示于图2b中。变体dc145、dc148、dc150、dc151且尤其是变体dc144、d146、dc147和dc152显示出更好的作为颜色恢复/脱除起球效果测量的性能。分光光度测量结果也通过视觉评估证实。用所述变体比用acm88时，显得用旧和不吸引人的预起球/预损坏织物甚至更好地恢复了其原貌。与acm88相比，变体dc133、dc139、dc140和dc141的脱除起球性能也略有改进(数据未显示)。使用变体dc146和dc150的试验也使用与上述类似的试验系统进行，但具有10个重复洗涤和翻滚循环，以及较小的酶剂量(0.05-0.2ncu/ml洗涤液)，如果剂量被计算为洗涤剂重量的%，则其代表了商业纤维素酶产品的典型剂量范围。在这些试验中，除了预起球监测物(e-253)外，还使用了未起球的原始织物(e-252，centerfortestmaterialsbv)。原始织物的监测物被用于证明新织物的颜色维护/颜色护理和/或防止起球(抗起球)效果。除了高的脱除起球效果外，与亲本acm88相比，dc146和dc150还具有改善的颜色护理/抗起球效果(数据未显示)。实施例3.测试嗜热枝顶孢菌cel45aacm88变体在洗涤剂中作为颜色恢复(脱除起球)性能测量的稳定性使用与实施例2中描述的类似的试验系统，作为颜色恢复(脱除起球效果)通过应用试验来测试在实施例1中鉴定的嗜热枝顶孢菌cel45aacm88变体的最有前景的候选物的稳定性。acm88被用于比较。将0.7%w/w量的蛋白酶savinase16l(novozymes)添加到不含酶的商业液体洗涤剂中。洗涤剂的组成描述于表2中。纤维素酶最初以使得剂量为每毫升洗涤液2(或3)个活性单位(ncu)的量加入到洗涤剂中。如在实施例1中所述测量活性，除了使用30min的延长反应时间外。在室温(约20-22℃)下，温育在带盖的塑料管中的样品4(或3)天。将储存样品的性能与洗液进行比较，在所述洗液中已将纤维素酶新鲜添加到含有洗涤剂和最初添加到储存样品中的相同量的蛋白酶的洗涤液中，对应于时间点0的初始性能。结果被计算为剩余性能(%)，其通过将储存后的样品性能除以样品的初始性能(新鲜性能)得到。表2.商用液体洗涤剂的组成成分%阴离子表面活性剂15-30非离子表面活性剂，肥皂5–15膦酸盐，肥皂<5硼酸≤1其它成分：如荧光增白剂、香料、防腐剂ph8.2-8.6相对于使用acm88获得的剩余性能，进一步计算了变体剩余性能的增加，如表3所示。用变体dc144-dc148获得的结果示于图3a中，而用变体dc149-dc152获得的结果也作为剩余性能示于图3b中。与acm88相比，所有这些变体都显示出好得多的作为颜色恢复(脱除起球)性能测量的稳定性。最好的变体(dc146、dc150、dc151和dc152)与acm88相比，显示出改进的性能(实施例2)和至少两倍的更高稳定性(表3)。包含最少取代的dc150已经显示出改进的性质，并且用变体dc146、dc151和dc152的单独取代进一步改进了性质，显示出甚至更好的作为颜色恢复性能测量的稳定性。通过分析ncu活性，也测量了变体的稳定性。结果被计算为剩余活性(%)，其通过将储存后样品的活性除以样品的初始活性而得到。用变体dc144-dc148获得的结果示于图4a中，而用变体dc149-dc152获得的结果示于图4b中。在储存在含有蛋白酶的洗涤剂中后在cmc-底物上，性能的损失远远大于分析ncu-活性的损失。发现这主要是由于用sds-page分析检测到的cbd损失引起的(数据未显示)。cbd的损失对性能的影响比对分析活性的影响更大，因此用ncu活性测定测量的变体的稳定性与acm88相比显示出较小的差异。然而，当测量为剩余活性时，变体dc144-dc152的稳定性与acm88相比也增加。表3.颜色恢复性能的稳定性。提供了在含蛋白酶(savinase16l)的商业液体洗涤剂中在20-22℃储存(3或4d)后，变体的剩余活性相对于acm88的剩余活性的增加。纤维素酶最初以使得剂量为每毫升洗涤液2或3个活性单位(ncu)的量加入到洗涤剂中。变体条件稳定性增加(%)dc1213ncu/ml,3d24dc1333ncu/ml,3d52dc1393ncu/ml,3d28dc1403ncu/ml,3d22dc1413ncu/ml,3d51dc1433ncu/ml,3d41dc1442ncu/ml,4d84dc1452ncu/ml,4d96dc1462ncu/ml,4d126dc1472ncu/ml,4d58dc1482ncu/ml,4d95dc1492ncu/ml,4d98dc1502ncu/ml,4d109dc1512ncu/ml,4d114dc1522ncu/ml,4d120实施例4.选择的acm88变体在30℃的洗涤剂中作为颜色恢复性能测量的长期稳定性将具有相似活性水平的酶制剂从如实施例1中所述产生的变体dc144、dc145、dc146、dc150和参考acm88的生物反应器培养样品制备。颜色恢复(性能)的稳定性通过类似于实施例2中描述的洗涤试验来测试。纤维素酶最初以使得剂量为每毫升洗涤液2个单位(ncu)的量加入到洗涤剂中。将dc146与acm88在3种不同洗涤剂中进行比较：含商业蛋白酶的洗涤剂浓缩液1和2和商业液体基质洗涤剂，其中加入了0.7%w/w的预稳定蛋白酶savinaseultra16l(novozymes)。除此之外，在含有与其它洗涤剂中的蛋白酶不同的商业蛋白酶的商业洗涤剂浓缩液3中，对变体dc144、dc145、dc146和dc150相对于acm88进行了测试。根据试验，将带盖塑料管中的样品在30℃下温育几天或数周。将储存样品的性能与洗液比较，在所述洗液中已将纤维素酶新鲜地添加到含有洗涤剂和蛋白酶的洗涤液中。结果被计算为剩余性能(%)，如实施例3中所述。基于图5所示的结果，在所有测试的洗涤剂中于30℃下9天后，变体dc146显示出与acm88相比好得多的作为颜色恢复(脱除起球)效果测量的稳定性。用洗涤剂浓缩液1，进行该试验几周。图6显示，即使在升高的温度如30℃下储存10周后，变体dc146在含有蛋白酶的洗涤剂制剂中也是有效的。图7显示，在储存(30℃,11d)后，在含有蛋白酶的商业洗涤剂浓缩液3中，与acm88相比，用所有变体dc144、dc145、dc146和dc150都显著改进了颜色恢复效果的稳定性。用dc146获得了最佳结果。实施例5.在launder-ometer中测试选择的acm88变体的抗灰化性能通过单次洗涤方法(40℃,60min,16°dh)，使用除了洗涤剂(4.4g/l)之外也在洗涤液中的炭黑(约0.15g/l)，测试从变体dc145和dc146和参考acm88的生物反应器培养样品制备的具有类似活性水平的酶制剂的抗灰化性能。采用由cft(centerfortestmaterialsnv，荷兰)供应的具有荧光增白剂(cn-42)的棉质双罗纹双面针织物作为试验织物。织物首先在洗衣机中预洗(15min50℃和60min60℃)并翻滚干燥，然后切成约14-14.5cm的样本(4个样本的总重量25g)。使用来自在塑料瓶中的含7g炭黑液体(约33%炭黑)的cft的rd-liq01作为炭黑来源，所述塑料瓶通常旨在用于洗衣机的全尺寸洗涤(每一次使用试验织物的单次洗涤一瓶)。在这个实施例中，该方法适用于小规模，其使用与在全尺寸中的比例大致类似比例的炭黑和水。首先，通过将一瓶打开的rd-liq01(即约2.3g炭黑)放入含有1升去离子水的倾析长颈瓶(decanterflask)中来制备炭黑储备液。用磁性搅拌器搅拌该溶液过夜，直到瓶中的内容物完全释放出来。此后，将65g储备液与935ml硬度为17.1°dh的合成自来水混合，最终达到具有16°dh的硬度和约0.15g/l(或0.45grd-liq01)的炭黑含量的稀释炭黑溶液。对于具有硬度17.1°dh的合成自来水，在去离子水(milli-q或等同物)中制备以下储备液：具有1000°d钙-硬度的储备液：cacl2x2h2o(1.02382.1000,merckkgaa,德国)26.22g/l具有200°d镁-硬度的储备液：mgso4x7h2o(1.05886.1000,merckkgaa,德国)8.79g/lh2onahco3储备液：nahco3(1.06329.1000merckkgaa,德国)29.6g/l。将14.2mlcacl2溶液、14.2mlmgso4溶液和10.0ml新鲜制得的nahco3溶液以给定顺序加入容量瓶中，用去离子水补足至1升并混合。水的硬度用络合滴定法测定，且发现其正确。在atlaslp-2launder-ometer中如下进行抗灰化试验。将launder-ometer首先预热至40℃。将60g钢球(直径0.6cm)、1.1g在实施例3的表2中描述的商业液体洗涤剂、250ml稀释的炭黑液和稀释的酶(<1.0ml)加入1.2升容器中。此后加入4个预洗涤试验织物cn-42样本，launder-ometer在40℃下运行60min，转速42rpm。每升给予0.05、0.1和0.2活性单位(ncu)的酶。对照样品不含酶。如在实施例1中所述测量活性。在launder-ometer中纤维素酶处理后，首先将样本在流动的自来水(约20℃)下快速分开漂洗，以去除钢球，然后在有孔的特定杯子中，在流动的自来水下分开漂洗3次，最后浸入装水的桶中。此后，在洗衣机中提取样本，在室温下在网格上晾干。将酶处理的织物和无酶的对照分别漂洗和提取，以避免污染。纤维素酶的抗灰化性能通过用konicaminoltacm3610a分光光度计测量试验织物的反射率作为y-值(光源d65/10°,420nm切割)来评估。抗灰化性能经计算为δy(deltay)，其意味着酶处理的织物的y值减去用无酶的含有炭黑和洗涤剂的洗涤液(酶空白，对照)处理的织物的y值。值为4个样本的平均值。y或δy值越高，织物的抗灰化效果和白度就越好。图8的结果表明，变体dc145和dc146具有优良的抗灰化性能，至少在液体洗涤剂中与参考acm88一样好。本发明的不同的非限制性实施例方面和实施方案已在上文得到说明。所述实施方案仅仅用来解释在实施本发明时可以使用的选定方面或步骤。本文可以仅参照本发明的某方面提出一些实施方案。应当意识到，这些实施方案也可以适用于本发明的其它方面。因此，可以形成这些实施方案和方面的任何适当的组合。本文公开的方面或实施方案的任何组合也可以在没有在方面或实施方案中公开的至少一个非必要特征的情况下进行。在一个实施方案中，与天然存在的对应物比较，本发明的产品的至少一种组分具有不同的结构或功能特征。在一个实施方案中，与自其获得至少一种组分的对应天然组分相比，所述至少一个组分具有不同的结构或物理特征。参考文献baileym和nevalainenh.1981.induction,isolationandtestingofstabletrichodermareeseimutantswithimprovedproductionofsolubilizingcellulase.enzymemicrob.technol.3:153-157.gellisseng.(ed.).2005.productionofrecombinantproteins.novelmicrobialandeukaryoticexpressionsystems.wiley-vchverlaggmbh&co.weinheim,germany.haakanah,miettinen-oinonena,joutsjokiv,mäntyläa,suominenp和vehmaanperäj.2004.cloningofcellulasegenesfrommelanocarpusalbomycesandtheirefficientexpressionintrichodermareesei.enzymemicrob.technol.34:159-167.henrissatb.1991.aclassificationofglycosylhydrolasesbasedonaminoacidsequencesimilarities.biochem.j.280:309-316.henrissatb.和bairocha.1993.newfamiliesintheclassificationofglycosylhydrolasesbasedonaminoacidsequencesimilarities.b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