1.一种短小蛇根草opwrky2转录因子的编码序列,其特征在于,所述opwrky2转录因子的核苷酸序列如seqidno.1所示。所述opwrky2转录因子的氨基酸序列如seqidno.2所示。
2.一种多肽,其特征在于,所述多肽的基酸序列如seqidno.2所示。
3.一种重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体包含如seqidno.1所示的核苷酸序列。
4.一种重组表达转化菌株,其特征在于,所述重组表达转化菌株包含如seqidno.1所示的核苷酸序列。
5.根据权利要求1或2所述的短小蛇根草opwrky2转录因子的编码序列在提高短小蛇根草中喜树碱含量的应用。
6.一种利用opwrky2提高短小蛇根草毛状根中喜树碱含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1、对短小蛇根草的转录组数据库进行分析,从短小蛇根草cdna文库中克隆得到短小蛇根草opwrky2基因的编码序列。
步骤2、将所述opwrky2基因可操作性地连接于表达调控序列,形成含opwrky2基因的植物过表达载体。
步骤3、将含opwrky2基因的植物过表达载体转化发根农杆菌,得到具有所述植物过表达载体的发根农杆菌菌株。
步骤4、利用步骤3中构建的所述发根农杆菌菌株转化短小蛇根草,经抗生素筛选得到抗性毛状根,再经pcr检测为阳性的毛状根株系即为转基因短小蛇根草毛状根。
步骤5、对步骤4中得到的所述转基因短小蛇根草毛状根进行喜树碱含量的测定,进而得到喜树碱含量提高的短小蛇根草毛状根株系。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述步骤3中,采用冻融法进行转入,所述发根农杆菌为c58c1菌株。