本发明涉及灵芝加工提取技术领域,具体为一种固态发酵灵芝多糖的提取方法。
背景技术:
灵芝多糖是多孔菌科灵芝属真菌菌丝体的次生代谢产物,存在于灵芝属真菌的菌丝体和子实体中。灵芝子实体粉碎加入少量培养基发酵,发酵后原料离心,上清液低温真空浓缩,透析,乙醇沉淀,丙酮洗涤,除蛋白,喷雾干燥,最后加入10%水提干粉混合而成。灵芝多糖为浅棕色至棕褐色粉末,可溶于热水。
灵芝多糖有多方面的药理活性:能提高机体免疫力,加速血液微循环,提高血液供氧能力,降低机体静止状态下的无效耗氧量,消除体内自由基,提高机体细胞膜的封闭度,抗放射,提高肝脏、骨髓、血液合成dna,rna,蛋白质的能力,延长寿命等。灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关。
传统的灵芝多糖的提取方法,提取效率低下,多糖纯度低,多糖生物活性也受到极大影响,
技术实现要素:
(一)解决的技术问题
为了解决现有技术的上述问题,本发明提供一种具有产物提取效率高,多糖纯度高,不损伤多糖生物活性,且工艺较为简单,提取成本较低。
(二)技术方案
为了达到上述目的,本发明采用的主要技术方案:一种固态发酵灵芝多糖的提取方法,包括:该方法步骤如下:
一、预处理,取适量的灵芝湿菌体,用乙醇等有机溶剂进行处理,除去湿菌体中的脂类物质,灭活糖苷酶;
二、多糖提取;
三、多糖纯化;
四、低温干燥。
优选的,所述预处理步骤一中,去除蛋白质的方法为:采用sevag法,具体流程为:取0.25倍多糖溶液体积的氯仿和0.03倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分直至氯仿与水的界面无沉淀为止,且要重复处理5-6次才能有效除去多糖中多糖纯化采用硼酸型deae纤维素柱层析法:取脱蛋白后的多糖。
优选的,所述步骤二中,多糖的提取步骤具体为:
i、取上面经预处理的灵芝湿菌体,放入2:17的70~80℃的热水4小时,连续浸提3次;
ii、合并3次的水浸提液减压、浓缩至一定体2.5倍体积的95%乙醇混合,静置15-17小时,再离心;
iii、喷雾干燥塔对多糖进行喷雾干燥;;
iv、二次醇析。
优选的,所述步骤三种多糖的纯化,采用中空纤维超滤膜,对多糖去蛋白质后的提取液通过超滤去除小分子杂质。
优选的,所述步骤三种多糖的纯化,采用的是电泳法。
(三)有益效果
本发明提供了一种固态发酵灵芝多糖的提取方法。具备以下有益效果:
(1)、本发明提取工艺简单,同时提取成本较低,适用工业上大规模生产。
(2)、多糖纯度较高,能够达到95%以上。
具体实施方式
为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解,下面结合具体实施方式,进一步阐述本发明。
实施例一:
本发明提供一种技术方案:一种固态发酵灵芝多糖的提取方法,包括:该方法步骤如下:
一、预处理,取适量的灵芝湿菌体,用乙醇等有机溶剂进行处理,除去湿菌体中的脂类物质,灭活糖苷酶;
二、多糖提取;
三、多糖纯化;
四、低温干燥。
进一步的,所述预处理步骤一中,去除蛋白质的方法为:采用sevag法,具体流程为:取0.25倍多糖溶液体积的氯仿和0.03倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分直至氯仿与水的界面无沉淀为止,且要重复处理5次才能有效除去多糖中多糖纯化采用硼酸型deae纤维素柱层析法:取脱蛋白后的多糖。
优选的,所述步骤二中,多糖的提取步骤具体为:
i、取上面经预处理的灵芝湿菌体,放入2:17的70~80℃的热水4小时,连续浸提3次;
ii、合并3次的水浸提液减压、浓缩至一定体2.5倍体积的95%乙醇混合,静置15小时,再离心;
iii、喷雾干燥塔对多糖进行喷雾干燥;;
iv、二次醇析。
进一步的,所述步骤三种多糖的纯化,采用中空纤维超滤膜,对多糖去蛋白质后的提取液通过超滤去除小分子杂质。
进一步的,所述步骤三种多糖的纯化,采用的是电泳法。
实施例二:
本发明提供一种技术方案:一种固态发酵灵芝多糖的提取方法,包括:该方法步骤如下:
一、预处理,取适量的灵芝湿菌体,用乙醇等有机溶剂进行处理,除去湿菌体中的脂类物质,灭活糖苷酶;
二、多糖提取;
三、多糖纯化;
四、低温干燥。
进一步的,所述预处理步骤一中,去除蛋白质的方法为:采用sevag法,具体流程为:取0.25倍多糖溶液体积的氯仿和0.03倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分直至氯仿与水的界面无沉淀为止,且要重复处理6次才能有效除去多糖中多糖纯化采用硼酸型deae纤维素柱层析法:取脱蛋白后的多糖。
优选的,所述步骤二中,多糖的提取步骤具体为:
i、取上面经预处理的灵芝湿菌体,放入2:17的74℃的热水4小时,连续浸提3次;
ii、合并3次的水浸提液减压、浓缩至一定体2.5倍体积的95%乙醇混合,静置16小时,再离心;
iii、喷雾干燥塔对多糖进行喷雾干燥;;
iv、二次醇析。
进一步的,所述步骤三种多糖的纯化,采用中空纤维超滤膜,对多糖去蛋白质后的提取液通过超滤去除小分子杂质。
进一步的,所述步骤三种多糖的纯化,采用的是电泳法。
实施例三:
本发明提供一种技术方案:一种固态发酵灵芝多糖的提取方法,包括:该方法步骤如下:
一、预处理,取适量的灵芝湿菌体,用乙醇等有机溶剂进行处理,除去湿菌体中的脂类物质,灭活糖苷酶;
二、多糖提取;
三、多糖纯化;
四、低温干燥。
进一步的,所述预处理步骤一中,去除蛋白质的方法为:采用sevag法,具体流程为:取0.25倍多糖溶液体积的氯仿和0.03倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分直至氯仿与水的界面无沉淀为止,且要重复处理5次才能有效除去多糖中多糖纯化采用硼酸型deae纤维素柱层析法:取脱蛋白后的多糖。
优选的,所述步骤二中,多糖的提取步骤具体为:
i、取上面经预处理的灵芝湿菌体,放入2:17的78℃的热水4小时,连续浸提3次;
ii、合并3次的水浸提液减压、浓缩至一定体2.5倍体积的95%乙醇混合,静置17小时,再离心;
iii、喷雾干燥塔对多糖进行喷雾干燥;;
iv、二次醇析。
进一步的,所述步骤三种多糖的纯化,采用中空纤维超滤膜,对多糖去蛋白质后的提取液通过超滤去除小分子杂质。
进一步的,所述步骤三种多糖的纯化,采用的是电泳法。
1.一种固态发酵灵芝多糖的提取方法,包括:该方法步骤如下:
一、预处理,取适量的灵芝湿菌体,用乙醇等有机溶剂进行处理,除去湿菌体中的脂类物质,灭活糖苷酶;
二、多糖提取;
三、多糖纯化;
四、低温干燥。
2.根据权利要求1所述的一种固态发酵灵芝多糖的提取方法,其特征在于:所述预处理步骤一中,去除蛋白质的方法为:采用sevag法,具体流程为:取0.25倍多糖溶液体积的氯仿和0.03倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分直至氯仿与水的界面无沉淀为止,且要重复处理5-6次才能有效除去多糖中多糖纯化采用硼酸型deae纤维素柱层析法:取脱蛋白后的多糖。
3.根据权利要求1所述的一种固态发酵灵芝多糖的提取方法,其特征在于:所述步骤二中,多糖的提取步骤具体为:
i、取上面经预处理的灵芝湿菌体,放入2:17的70~80℃的热水4小时,连续浸提3次;
ii、合并3次的水浸提液减压、浓缩至一定体2.5倍体积的95%乙醇混合,静置15-17小时,再离心;
iii、喷雾干燥塔对多糖进行喷雾干燥;;
iv、二次醇析。
4.根据权利要求1所述的一种固态发酵灵芝多糖的提取方法,其特征在于:所述步骤三种多糖的纯化,采用中空纤维超滤膜,对多糖去蛋白质后的提取液通过超滤去除小分子杂质。
5.根据权利要求1所述的一种固态发酵灵芝多糖的提取方法,其特征在于:所述步骤三种多糖的纯化,采用的是电泳法。