用于具有pH5-12的制剂的甘露聚糖酶的制作方法

用于具有ph 5-12的制剂的甘露聚糖酶
1.发明描述
2.半纤维素和半乳甘露聚糖的主要作用是充当结构性多糖和/或充当储备能量。除作为植物中最广泛的储备多糖的直链淀粉和支链淀粉之外，各种植物的种子、根、鳞茎和块茎中存在多样的基于甘露聚糖的多糖类群。这些类群包括甘露聚糖、半乳甘露聚糖和葡甘露聚糖。
3.甘露聚糖是具有β-1,4连接的d-吡喃甘露糖残基主链的多糖。在大多数情况下，甘露聚糖高度地不溶于水中。与未取代的甘露聚糖相反，半乳甘露聚糖为水溶性。归因于植物细胞壁的复杂结构性组成，依赖分解植物材料兴起的微生物必须拥有众多不同的能够水解这些高度聚合且大多不溶性物质的酶。两类参与半纤维素降解的主要内切作用酶是β-甘露聚糖酶和β-木聚糖酶。另外，需要外切作用酶β-甘露糖苷酶、α-半乳糖苷酶和β-葡糖苷酶以完全降解半乳葡甘露聚糖。
4.参与甘露聚糖主链降解的主要酶类型是水解甘露聚糖主链中内部糖苷键的内切-1,4-β-甘露聚糖酶(ec 3.2.1.78)。内切-1,4-β-甘露聚糖酶(ec 3.2.1.78)是本文中也称为内切-β-1,4-d-甘露聚糖酶、β-甘露聚糖酶或甘露聚糖酶的甘露聚糖降解酶。由于内切-1,4-β-甘露聚糖酶(ec 3.2.1.78)降解甘露聚糖主链，故甘露聚糖降解包括降解甘露聚糖、半乳甘露聚糖和/或葡甘露聚糖。
5.甘露聚糖酶类广泛用于食物与饲料应用、洗涤剂和纸浆与造纸业：
6.·
已经显示使用甘露聚糖酶作为饲料添加剂提供若干有益作用，原因是对于单胃动物如家禽和猪而言，甘露聚糖是充当抗营养因子的主要不可消化饲料组分。
7.·
在食品业中，描述甘露聚糖酶用于速溶咖啡生产，其中酶降低咖啡提取物因水解咖啡甘露聚糖所致的粘度。另外，甘露聚糖酶用来产生作为功能性食品成分令人感兴趣的特定甘露糖低聚物，如具有益生元功能的甘露糖低聚物。在这类应用中，将植物衍生的甘露糖聚合物用甘露聚糖酶水解。
8.·
洗涤剂用途：甘露聚糖酶促进移除食物衍生和化妆品衍生的污渍/污垢，后者经常包括含有甘露聚糖的添加物如稳定剂、乳化剂和增稠剂。在更特殊的清洁应用中，应用甘露聚糖酶从需要无微生物的表面或管件(如制药设备)移除生物膜。在这样的应用中，甘露聚糖酶经常与洗涤剂和其他酶如糖酶和蛋白酶组合使用。
9.·
纸浆和纸：甘露聚糖酶用于纸浆的酶助漂白中。甘露聚糖酶据称弥补木聚糖酶的作用。
10.·
甘露聚糖酶应用于借助水力压裂的石油和天然气井增产过程中。甘露聚糖酶降低用于该过程中的瓜尔豆溶液的粘度。
11.·
甘露聚糖酶用于从交联型半乳甘露聚糖组成的基质中控释药物或其他材料。
12.在应用条件下的活性是许多工业用酶的关键参数，因为这些酶在应用条件下经常倾向于活性不足。
13.持续需要在洗涤剂制剂苛刻的环境下发挥作用的酶。已知不同类别的酶可用于洗涤剂制剂中，如蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、甘露聚糖酶、果胶酸盐裂合酶和核酸酶。
甘露聚糖酶是洗涤制剂和/或清洁制剂的有用组分，原因是甘露聚糖酶移除部分包含半纤维素的污渍。这些类型污渍移除不充分通常导致织物发灰。
14.本文中包含甘露聚糖的污渍包含至少一种甘露聚糖、至少一种半乳甘露聚糖和/或至少一种葡甘露聚糖并且在一个实施方案中，包含其他组分如纤维素和/或半纤维素。进一步地，这类污渍可以包含蛋白质材料、淀粉和/或糖。半乳甘露聚糖通常由带半乳糖侧基团的甘露糖主链组成。本文中，半乳甘露聚糖包括具有以下甘露糖/半乳糖比率的半乳甘露聚糖：约1:1的葫芦巴胶、约2:1的瓜耳胶、约3:1的刺云实胶、约4:1的刺槐豆胶或角豆胶、约5:1的决明子胶，其中比率是甘露糖:半乳糖。半乳甘露聚糖经常用于食品和化妆品中增加液体产品的粘度。
15.在一个实施方案中，在纺织品上含有至少一种包含甘露聚糖的污渍。
16.因此，目的是找到在ph处于5-12范围、优选地6-11范围、更优选地选自6-10、7-9、7-12、8-12、8-10和7.5-8.5范围的制剂中有催化活性的甘露聚糖降解酶。优选地，在洗涤剂制剂中提供时，甘露聚糖降解酶显示洗涤性能。
17.在一个方面，本发明提供一种在酶制品中提供的与seq id no:1至少80％同一的甘露聚糖酶，所述酶制品允许灵活配制成具有任一类型酶或酶混合物的液体洗涤剂制剂或清洁制剂。“配制成”意指添加酶制品至液体制剂。
18.在一个方面，本发明提供一种通过使至少一种包含甘露聚糖的污渍接触与seq id no:1至少80％同一的甘露聚糖酶的步骤而移除包含甘露聚糖的污渍的方法。甘露聚糖酶在5-12或6-11范围的ph、更优选地6-10或7-9或7-12或8-12或8-10范围的ph和最优选地7.5-8.5范围的ph具有甘露聚糖降解活性。在所述ph，甘露聚糖酶对包含甘露聚糖的污渍显示洗涤性能。优选地，该方法是一种在≤60℃、优选地约5-60℃范围、优选地约5-40℃范围、更优地选约10-40℃范围的温度移除包含甘露聚糖的污渍的方法。
19.在一个方面，本发明将提供一种包含本发明甘露聚糖酶的制剂，其优选地具有5-12范围、优选地6-11范围、更优选地选自6-10、7-9、7-12、8-12、8-10和7.5-8.5范围的ph。优选地，该制剂是包含至少一种选自表面活性剂、助洗剂和水溶助长剂的组分的液体制剂，所述组分以有效维持液体制剂的物理特征的量和/或以有效洗涤或清洁的量存在。在一个实施方案中，该制剂是洗涤剂制剂并且甘露聚糖酶在洗涤剂制剂中提供时显示洗涤性能。
20.通常，“酶”是作用于底物并且使这些底物转化成产物的有催化活性的蛋白质或多肽。这种反应在本文中也称为酶促转化，所述酶促转化一般在酶的“活性部位”发生。发挥酶促转化的酶有酶促活性或有酶活性。本文中称作“酶”的任何多肽意指有催化活性的多肽。
21.本发明的甘露聚糖酶具有甘露聚糖降解活性并且属于酶类ec 3.2.1.78。在一个实施方案中，甘露聚糖降解活性意指降解至少一种半乳甘露聚糖。优选地，至少一种半乳甘露聚糖以约1:1、约2:1、约3:1、约4:1和/或5:1的甘露糖:半乳糖比率为特征。
22.可以根据本领域已知的标准试验程序测试甘露聚糖降解活性或甘露聚糖酶活性。例如，待测甘露聚糖酶可以施加至琼脂平板中所打出的直径4mm孔，所述孔包含0.2％azcl半乳甘露聚糖(角豆胶)，即用于分析内切-1,4-β-d-甘露聚糖酶的底物。角豆胶(carob)例如作为megazyme公司的i-azgma可获得。可以如mccleary，b.v.(1978)；carbohydrate research，67(1)，213-221中公开那样，使用remazol亮蓝染色的角豆半乳甘露聚糖在液体测定法中测试甘露聚糖降解活性。另一种测试甘露聚糖降解活性的方法是与底物(如瓜尔
胶或刺槐豆胶)温育时检测还原型糖
–
参见miller，g.l.use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of reducing sugars(使用二硝基水杨酸试剂测定还原型糖).analytical chemistry 1959；31，426
–
428。
23.酶是通常依据多肽序列(本文中也称为氨基酸序列)鉴定的多肽。通常用seq id no鉴定多肽序列。根据世界知识产权组织(wipo)标准st.25(1998)，使用三字母代码代表本文的氨基酸，其中首字母为大写或相应的一个字母。
[0024]“亲本”多肽氨基酸序列是起始序列，向该起始序列引入突变(例如通过引入一个或多个氨基酸置换、插入、缺失或其组合)，产生亲本多肽氨基酸序列之“变体”。亲本包括：作为引入(其他)变化的起始序列使用的野生型多肽氨基酸序列或合成生成的多肽氨基酸序列。
[0025]
本发明甘露聚糖酶的亲本多肽具有根据seq id no:1的多肽序列。
[0026]“变体多肽”指在氨基酸序列方面不同于其亲本的酶。
[0027]
在一个实施方案中，变体多肽序列依据与亲本序列相比时它们的“序列同一性”定义。“与seq id no:x至少x％同一”的酶或多肽意指与根据seq id no:x的多肽序列相比时具有x％同一的多肽序列的酶或多肽。
[0028]
序列同一性通常作为“％序列同一性”或“％同一性”提供。为了计算序列同一性，在第一步骤中必须生成序列比对结果。
[0029]
根据本发明，通过使用needleman和wunsch算法(j.mol.biol.(1979)48，第443-453页)生成比对结果。优选地，出于本发明目的，使用程序“needle”(欧洲分子生物学开放软件套件(the european molecular biology open software suite)(emboss))，同时使用程序的默认参数(多核苷酸：空位开放＝10.0，空位延伸＝0.5并且矩阵＝ednafull；多肽：空位开放＝10.0，空位延伸＝0.5并且矩阵＝eblosum62)。
[0030]
在比对两个序列后，在第二步骤中，从产生的比对结果确定同一性值。
[0031]
本文中，通过相同残基数目除以在其整个长度范围内显示两个已对齐序列的比对区域的长度，乘以100来计算％同一性：％同一性＝(相同残基/在其整个长度范围内显示两个对齐序列的比对区域的长度)*100。
[0032]
在一个实施方案中，本发明的甘露聚糖酶与seq id no:1至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％同一，优选地与seq id no:1的全长氨基酸序列相比时如此。甘露聚糖酶可以进一步包含一个或多个保守性置换，这意指将一个氨基酸用相似的氨基酸置换。本发明的相似氨基酸如下定义：氨基酸a相似于氨基酸s；氨基酸d相似于氨基酸e和n；氨基酸e相似于氨基酸d、k和q；氨基酸f相似于氨基酸w和y；氨基酸h相似于氨基酸n和y；氨基酸i相似于氨基酸l、m和v；氨基酸k相似于氨基酸e、q和r；氨基酸l相似于氨基酸i、m和v；氨基酸m相似于氨基酸i、l和v；氨基酸n相似于氨基酸d、h和s；氨基酸q相似于氨基酸e、k和r；氨基酸r相似于氨基酸k和q；氨基酸s相似于氨基酸a、n和t；氨基酸t相似于氨基酸s；氨基酸v相似于氨基酸i、l和m；氨基酸w相似于氨基酸f和y；氨基酸y相似于氨基酸f、h和w。
[0033]
本发明的甘露聚糖酶是“成熟多肽”，意指处于其最终形式的包含任何翻译后修饰、糖基化、磷酸化、截短作用、n端修饰、c端修饰、信号序列缺失的酶。成熟多肽可以取决于表达系统、载体、启动子和/或生产工艺变动。
[0034]
酶通常作为液体浓缩物产生，往往衍生自发酵液。本文中的“液体酶浓缩物”意指任何包含至少一种酶的液体含酶产物。酶浓缩物的语境下“液体”与20℃和101.3kpa时的物理外观有关。
[0035]
液体酶浓缩物可以因溶剂中溶解固体酶而产生。在这种情况下，溶剂优选地选自水和有机溶剂。因溶剂中溶解固体酶而产生的液体酶浓缩物包含高达饱和浓度的酶量。
[0036]
本文中溶解意指固态化合物因与至少一种溶剂接触而液化。溶解意指指定溶剂中固态化合物完全溶解直至实现饱和浓度，其中无相分离发生。
[0037]
在本发明的一个方面，酶浓缩物可以不含水，这意味着无明显量的水存在。本文中无明显量的水意指酶浓缩物包含按重量计少于25％、小于20％、小于15％、小于10％、小于7％、小于5％、小于4％、小于3％、小于2％的水，前述百分数均相对于酶浓缩物的总重量而言，或不含水。在一个实施方案中，不含水的酶浓缩物意指酶浓缩物不包含明显量的水，但以按重量计约10％至90％、按重量计20％至85％、按重量计30％-80％、按重量计40％至75％、按重量计50％至70％的量包含有机溶剂，前述百分数均相对于酶浓缩物的总重量而言。
[0038]
包含水的液体酶浓缩物可以称作“含水酶浓缩物”。在一个实施方案中，含水酶浓缩物是含酶溶液，其中固体酶产物溶解于水中。在一个实施方案中，“含水酶浓缩物”意指因发酵产生酶所致的含酶产物。
[0039]
发酵意指在允许重组宿主细胞生长并表达所需蛋白质的合适营养培养基中培养表达所需酶的重组细胞的过程。在发酵结束时，通常收集并进一步加工发酵液，其中发酵液包含液体级分和固体级分。取决于酶已经是否分泌入液体级分，从发酵液的液体级分或从细胞裂解物回收所需的蛋白质或酶。使用本领域技术人员已知的方法回收所需的酶。从发酵液回收蛋白质或酶的适合方法包括但不限于收集、离心、过滤、提取和沉淀。
[0040]
液体酶浓缩物包含按重量计0.1％至40％、或按重量计0.5％至30％、或按重量计1％至25％、或按重量计3％至25％、或按重量计5％至25％范围的酶量，前述百分数均相对于酶浓缩物的总重量而言。在一个实施方案中，液体酶浓缩物因发酵产生并且是含水的。
[0041]
因发酵产生的含水酶浓缩物以按重量计多于约50％、按重量计多于约60％、按重量计多于约70％、或按重量计多于约80重量％的量包含水，前述百分数均相对于酶浓缩物的总重量而言。在一个实施方案中，因发酵产生的含水酶浓缩物以按重量计约50％至80％、或按重量计约60％至70％范围的量包含水，前述百分数均相对于酶浓缩物的总重量而言。因发酵产生的含水酶浓缩物可以包含残余组分如源自发酵培养基的盐、源自生产宿主细胞的细胞残片、发酵期间生产宿主细胞产生的代谢物。在一个实施方案中，残余组分以按重量计少于30％、按重量计少于20％、按重量计少于10％或按重量计少于5％的量包含于液体酶浓缩物中，前述百分数均相对于含水酶浓缩物的总重量而言。
[0042]
如果留在含水环境，则酶倾向于丧失酶活性并且从而按常规惯例使其它转化成无水形式：可以将含水浓缩物(例如在载体材料存在下)冻干或喷雾干燥，以形成聚集物。通常，固体酶产物需要在使用之前“溶解”。为了使酶在液体产物中稳定，通常使用酶抑制剂，优选地可逆性酶抑制剂，来短暂抑制酶活性直至释放酶抑制剂。
[0043]
本发明的酶制品优选地为液体。酶制品的语境下“液体”与20℃和101.3kpa时的物理外观有关。
[0044]
本发明的酶制品包含这样的液体酶浓缩物，其包含至少一种本发明的甘露聚糖酶。本发明的酶制品仅包含有效使酶制品或其中所含酶稳定的组分，例如，所述组分选自至少一种酶稳定剂、至少一种稳定液体酶制品本身的化合物和至少一种溶剂。
[0045]
本发明的液体组合物优选地不含表面活性剂。不含表面活性剂意指相对于液体组合物的总重量，按重量计少于约10％、按重量计少于约7％、按重量计少于约5％、按重量计少于约3％、按重量计少于约2％或按重量计少于约1％的表面活性剂包含于液体组合物中。
[0046]
本发明的液体组合物优选地不含络合剂。不含络合剂意指相对于液体组合物的总重量，按重量计少于约10％、按重量计少于约7％、按重量计少于约5％、按重量计少于约3％、按重量计少于约2％或按重量计少于约1％的络合剂、优选地氨基羧酸酯包含于液体组合物中。
[0047]
在一个实施方案中，本发明的液体组合物不含表面活性剂且不含络合剂。
[0048]
使酶稳定涉及随时间推移的稳定性(例如储存稳定性)、热稳定性、ph稳定性和化学稳定性。本文中术语“酶稳定性”优选地涉及酶活性例如在储存或操作期间随时间函数的变化而保留。酶稳定剂使酶在液体、优选地含水环境中稳定，这意指随时间推移它减少或避免酶活性丧失。
[0049]
在一个实施方案中，本发明的至少一种酶、优选地至少一种甘露聚糖酶因酶制品中存在水溶性钙离子源和/或镁离子源而稳定。在一个实施方案中，至少一种酶稳定剂选自多元醇或水溶性盐。
[0050]
多元醇包括含有2至6个羟基的多元醇。合适的实例包括二醇、1,2-丙二醇、1,2-丁二醇、1,2-戊二醇、乙二醇、己二醇、甘油、山梨醇、甘露醇、赤藓糖醇、葡萄糖、果糖和乳糖。
[0051]
在一个实施方案中，水溶性盐选自盐如nacl或kcl，以及乳酸和甲酸的碱金属盐。
[0052]
在本发明的一个实施方案中，至少一种水溶性盐选自成品组合物中的水溶性锌(ii)离子源、钙(ii)离子源和/或镁(ii)离子源，所述来源向酶提供这类离子，以及其他金属离子(例如钡(ii)、钪(ii)、铁(ii)、锰(ii)、铝(iii)、锡(ii)、钴(ii)、铜(ii)、镍(ii)和氧钒(iv))。优选地，水溶性盐选自cacl2和mgcl2。
[0053]
在本发明的一个方面，酶制品还包含蛋白酶、优选地丝氨酸蛋白酶(ec3.4.21)，更优选地枯草杆菌蛋白酶ec 3.4.21.62；和/或脂肪酶，优选地三酰甘油脂肪酶(ec 3.1.1.3)，更优选地疏棉状嗜热丝孢菌(thermomyces lanuginose)脂肪酶。在本上下文中，酶稳定剂优选地选自含硼化合物、多元醇、肽醛、其他稳定剂及其混合物。
[0054]
含硼化合物选自硼酸或其衍生物、选自亚硼酸(boronic acid)或其衍生物如芳基亚硼酸(aryl boronic acid)或其衍生物，选自其盐，和选自其混合物。本文中硼酸也称为正硼酸。
[0055]
在一个实施方案中，至少一种含硼化合物选自芳基亚硼酸及其衍生物。在一个实施方案中，含硼化合物选自苯亚硼酸(bba)(也称为苯基亚硼酸(pba))、其衍生物及其混合物。
[0056]
在一个实施方案中，苯基亚硼酸衍生物选自4-甲酰基苯基亚硼酸(4-fpba)、4-羧基苯基亚硼酸(4-cpba)、4-(羟甲基)苯基亚硼酸(4-hmpba)和对-甲苯亚硼酸(p-tba)。
[0057]
其他合适的衍生物包括：2-噻吩基亚硼酸、3-噻吩基亚硼酸、(2-乙酰氨基苯基)亚硼酸、2-苯并呋喃基亚硼酸、1-萘基亚硼酸、2-萘基亚硼酸、2-fpba、3-fbpa、1-噻蒽基亚硼
酸、4-二苯并呋喃亚硼酸、5-甲基-2-噻吩基亚硼酸、1-苯并噻吩-2亚硼酸、2-呋喃基亚硼酸、3-呋喃基亚硼酸、4,4联苯基-二亚硼酸、6-羟基-2-萘亚硼酸、4-(甲基硫代)苯基亚硼酸、4-(三甲基甲硅烷基)苯基亚硼酸、3-溴噻吩亚硼酸、4-甲基噻吩亚硼酸、2-萘基亚硼酸、5-溴噻吩亚硼酸、5-氯噻吩亚硼酸、二甲基噻吩亚硼酸、2-溴苯基亚硼酸、3-氯苯基亚硼酸、3-甲氧基-2-噻吩亚硼酸、对甲基-苯乙基亚硼酸、2-噻蒽基亚硼酸、二苯并噻吩亚硼酸、9-蒽亚硼酸、3,5二氯苯基亚硼酸、联苯基亚硼酸酐、邻氯苯基亚硼酸、对氯苯基亚硼酸、间溴苯基亚硼酸、对-溴苯基亚硼酸、对-氟苯基亚硼酸、辛基亚硼酸、1,3,5三甲基苯基亚硼酸、3-氯-4-氟苯基亚硼酸、3-氨基苯基亚硼酸、3,5-双-(三氟甲基)苯基亚硼酸、2,4二氯苯基亚硼酸、4-甲氧苯基亚硼酸及其混合物。
[0058]
在一个实施方案中，至少一种酶稳定剂选自肽醛。肽醛选自二、三或四肽醛和醛类似物(式b1-bo-r，其中r是h、ch3、cx3、chx2或ch2x(x＝卤素)，bo是单个氨基酸残基(在一个实施方案中具有任选取代的脂族或芳族侧链)；并且b1由一个或多个氨基酸残基组成(在一个实施方案中一个、二或三个氨基酸残基组成)，任选地包含n末端保护基团，或如wo 09/118375和wo98/13459中所述，或蛋白质型蛋白酶抑制剂如rasi、basi、wasi(稻、大麦和小麦的双官能α-淀粉酶/枯草杆菌蛋白酶抑制剂)或ci2或ssi。优选地，至少一种肽醛是三肽醛。
[0059]
使液体酶制品本身稳定的化合物意指除了酶稳定剂之外的任何化合物，其中以有效确保储存稳定性的量需要所述化合物以建立液体制剂的储存稳定性。
[0060]
液体制剂语境下对本领域技术人员而言的储存稳定性通常包括产品外观方面和剂量一致性方面。
[0061]
产品的外观受产品的ph并且受化合物如防腐剂、抗氧化剂、粘度调节剂、乳化剂等的存在影响。
[0062]
剂量的一致性通常与产物的同质性有关。
[0063]
本发明的酶制品为碱性或显示出中性或略微酸性的ph值。酶制品可以具有5-12或6-11范围的ph、更优选地6-10或7-9或7-12或8-12或8-10范围的ph和最优选地7.5-8.5范围的ph。
[0064]
在一个实施方案中，本发明的液体酶制品包含至少一种防腐剂。以有效预防微生物污染液体酶制品(优选地含水酶制品)的量添加防腐剂。
[0065]
合适防腐剂的非限制性实例包括(季)铵化合物、异噻唑啉酮、有机酸和甲醛释放剂。合适的(季)铵化合物的非限制性实例包括苯扎氯铵、聚六亚甲基双胍(phmb)、双癸基二甲基氯化铵(ddac)和n-(3-氨丙基)-n-十二烷基丙烷-1,3-二胺(二胺)。合适异噻唑啉酮的非限制性实例包括1,2-苯并异噻唑啉-3-酮(bit)、2-甲基-2h-异噻唑-3-酮(mit)、5-氯-2-甲基-2h-异噻唑-3-酮(cit)、2-辛基-2h-异噻唑-3-酮(oit)和2-丁基-苯并[d]异噻唑-3-酮(bbit)。合适有机酸的非限制性实例包括苯甲酸、山梨酸、l-(+)-乳酸、甲酸和水杨酸。合适甲醛释放剂的非限制性实例包括n,n
′‑
亚甲基双吗啉(mbm)、2.2
′
,2
″‑
(六氢-1,3,5-三嗪-1,3,5-三基)三乙醇(hht)、(乙烯二氧基)二甲醇、α,α
′
,α
″‑
三甲基-1,3,5-三嗪-1,3,5(2h,4h,6h)-三乙醇(hpt)、3,3
′‑
亚甲基双[5-甲基噁唑啉](mbo)和顺-1-(3-氯烯丙基)-3,5,7-三氮杂-1-氮鎓金刚烷氯化物(ctac)。
[0066]
其他的有用防腐剂包括丁基氨基甲酸碘代丙炔酯(ipbc)、释卤素化合物如二氯-二甲基-乙内酰脲(dcdmh)、溴-氯-二甲基-乙内酰脲(bcdmh)和二溴-二甲基-乙内酰脲
(dbdmh)；溴-硝基化合物如溴硝丙二醇(2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇)、2,2-二溴-2-氰基乙酰胺(dbnpa)；醛类如戊二醛；苯氧乙醇；联苯基-2-醇；和2-巯基吡啶氧化锌或钠。
[0067]
本发明的酶制品优选地包含至少一种防腐剂，所述防腐剂选自2-苯氧乙醇、戊二醛、2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇和处于酸形式或作为其盐的甲酸，和4,4
’‑
二氯2-羟二苯醚。通常，本发明的液体酶制品以范围从2ppm至相对于液体酶制品的总重量而言以重量计5％的量包含至少一种防腐剂。更优选地，液体酶制品不含防腐剂，这意指以小于1ppm包含防腐剂。
[0068]
在一个实施方案中，本发明的酶制品是含水的，以按重量计5％至95％范围、按重量计5％至30％范围、按重量计5％至25％范围、按重量计30％至80％范围、或按重量计20％至70％范围的量包含水，前述百分数均相对于酶制品的总重量而言。
[0069]
在一个实施方案中、本发明的酶制品包含至少一种选自以下的有机溶剂：乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇、乙二醇、丙二醇、1,3-丙二醇、丁二醇、甘油、二甘醇、丙基二甘醇、丁基二乙二醇、亚己基二醇、乙二醇甲醚、乙二醇乙醚、乙二醇丙醚、和苯氧乙醇，优选乙醇、异丙醇或丙二醇。另外，本发明的酶制品可以包含至少一种选自化合物如2-丁氧基乙醇、异丙醇和d-苧烯的有机溶剂。
[0070]
在一个优选的实施方案中，本发明的酶制品包含至少一种水可溶混性有机溶剂。水可溶混性在这种语境下意指有机溶剂在水中以全部比例混合，形成均匀溶液的性能。优选地，至少一种水可溶混溶剂选自乙醇、异丙醇或1,2-丙二醇。
[0071]
在一个实施方案中，酶制品包含
[0072]
(a)范围约20％至50％的水量，以及
[0073]
(b)按重量计30％至60％范围或按重量计45％至55％范围的至少一种有机溶剂量，前述百分数均相对于酶制品的总重量而言。
[0074]
在一个实施方案中，酶制品以相对于酶制品的总重量而言，按重量计0％至20％范围的量包含有机溶剂。优选地，酶制品包含按重量计约30％至80％范围的水量并且以按重量计少于10％、按重量计少于5％、或按重量计少于1％的量包含至少一种有机溶剂，前述百分数均相对于酶制品的总重量而言。
[0075]
在一个实施方案中，酶制品以按重量计5％至15％范围的量包含水并且包含不明显量(例如按重量计1％或更少)的有机溶剂，前述百分数均相对于酶制品的总重量而言。
[0076]
本发明提供一种通过使至少一种包含甘露聚糖的污渍接触与seq id no:1至少80％同一的甘露聚糖酶的步骤，移除包含甘露聚糖的污渍的方法。该甘露聚糖酶在5-12或6-11范围的ph、更优选地6-10或7-9或7-12或8-12或8-10范围的ph和最优选地7.5-8.5范围的ph具有甘露聚糖降解活性。在所述ph，甘露聚糖酶对包含甘露聚糖的污渍显示洗涤性能。
[0077]
如本文中公开的甘露聚糖酶在选自≤60℃、≤40℃和≤25℃的温度具有甘露聚糖降解活性。因此，优选地，该方法是一种在≤60℃、优选地约5-60℃范围、优选地约5-40℃范围、更优地选约10-40℃范围的温度移除包含甘露聚糖的污渍的方法。优选地，温度是洗涤或清洁温度。
[0078]
在一个方面，本发明涉及一种通过以下步骤，在≤60℃、优选地约5-60℃范围、优选地约5-40℃范围、更优地选约10-40℃范围的温度移除包含甘露聚糖的污渍的方法
[0079]
(a)提供一种液体制剂，其包含至少一种与seq id no:1至少80％同一的甘露聚糖
酶，
[0080]
(b)使包含甘露聚糖的污渍与(a)的液体制剂接触
[0081]
(c)使酶对污渍发挥其催化活性，持续约10-90分钟、优选地20-80分钟、更优选地30-70分钟或甚至更优选地40-60分钟范围的时间。
[0082]
在一个实施方案中，移除包含甘露聚糖的污渍的方法特征在于一种洗涤方法，所述方法优选地在洗衣机中机械搅拌下进行。液体制剂优选地是液体洗涤剂制剂。
[0083]
在一个方面，本发明涉及一种优选地具有ph范围5-12的包含至少一种与seq id no:1至少80％同一的甘露聚糖酶的制剂，其中该制剂对包含甘露聚糖的污渍，优选地包含至少一种半乳甘露聚糖的污渍、更优选地包含刺槐豆胶和/或瓜耳胶的污渍具有增加的洗涤或清洁性能。对包含甘露聚糖的污渍的洗涤或清洁性能增加意指与缺少本发明甘露聚糖酶的制剂相比时或与缺少任何甘露聚糖酶的制剂相比时，洗涤或清洁性能增加。
[0084]
在一个实施方案中，该制剂具有6-11范围、更优选地选自6-10、7-9、7-12、8-12、8-10和7.5-8.5范围的ph。在一个实施方案中，该制剂为洗涤剂制剂、优选地液体洗涤剂制剂。
[0085]
本发明在一个方面涉及本发明液体酶制品配制成洗涤剂制剂如衣物和硬表面清洁用i&i制剂和家用制剂的用途，其中将组分(a)和(b)与一种或多种洗涤剂组分按非特定的顺序在一个或多个步骤中混合。“配制成”意指添加酶制品至液体制剂。
[0086]
本发明的制剂包含一种或多种洗涤剂组分。选择的组分取决于该制剂(本文中也称为洗涤剂制剂)的所需洗涤或清洁应用和/或物理形式。
[0087]
术语“洗涤剂组分”本文定义为意指适于洗涤剂制剂的任何类型成分，如表面活性剂、助洗剂、聚合物、漂白体系。认识到其已知特征的任何本领域已知组分是本发明的合适洗涤剂组分。在一个实施方案中，洗涤剂组分意指以有效量存在时提供洗涤或清洁性能或有效辅助加工(在加工、储存和使用期间维持物理特征；例如流变改性剂、水溶助长剂、干燥剂)的组分。
[0088]
通常，洗涤剂制剂是多于二种洗涤剂组分的复合制剂。
[0089]
洗涤剂组分可以在洗涤剂制剂的最终应用中具有多于一种功能，因此在本文中具体功能语境下提到的任何洗涤剂组分还可以在洗涤剂制剂的最终应用中具有另一种功能。特定洗涤剂组分在洗涤剂制剂的最终应用中的功能通常取决于其在洗涤剂制剂中的量，即洗涤剂组分的有效量。
[0090]
术语“有效量”包括各种组分提供有效污渍移除和有效清洁条件的量(例如ph、起泡量)、有效提供光学益处(例如光学增白、抑制染料转移)的某些组分的量和有效辅助加工(在加工、储存和使用期间维持物理特征；例如流变改性剂、水溶助长剂、干燥剂)的某些组分的量。
[0091]
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂制剂是多于两种洗涤剂组分的制剂，其中至少一种组分有效移除污渍，至少一种组分有效提供最佳清洁条件，并且至少一种有效的维持洗涤剂的物理特征。
[0092]
本领域技术人员已知各个洗涤剂组分和在洗涤剂制剂中的使用。合适的洗涤剂组分尤其包含表面活性剂、助洗剂、聚合物、碱、漂白系统、荧光净白剂、抑泡剂和稳定剂、水溶助长剂和腐蚀抑制剂。其他实例例如在“洗涤剂及制剂完全技术手册(洗涤块、餐具洗涤剂、液态与膏状洗涤剂、酶洗涤剂、清洁粉及喷雾剂干燥的洗衣粉(detergent cake,c13h27
、n-c
15h31
、n-c
17h35
、i-c9h
19
、i-c
12h25
。
[0104]
r2选自h、c
1-c
20-烷基和c
2-c
20-链烯基，其中烷基和/或链烯基是直链或支链的。
[0105]
r3和r4各自独立地选自c
1-c
16-烷基，其中烷基是直链或支链的；实例是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、1,2-二甲基丙基、异戊基、正己基、异己基、仲己基、正庚基、正辛基、2-乙基己基、正壬基、正癸基、异癸基。
[0106]
a-选自-rcoo-、-so
3-和rso
3-，其中r选自直链或支链的c
1-c
8-烷基和c
1-c4羟烷基，其中烷基如上定义。化合物在a-是so
3-时可称作(脂肪)醇/烷基(乙氧基/醚)硫酸盐[(f)a(e)s]，在a-是-rcoo-时可称作(脂肪)醇/烷基(乙氧基/醚)羧酸盐[(f)a(e)c]。
[0107]m+
选自h和成盐阳离子。成盐阳离子可以为单价或多价；因此m
+
等于1/v m
v+
。实例包括但不限于钠、钾、镁、钙、铵和单乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺的铵盐。
[0108]
通式(i)的整数如下定义：
[0109]
m是0至200、优选地1-80、更优选地3-20的范围；n和o各自独立地是0至100的范围；n优选地是1至10、更优选地1至6的范围；o优选地是1至50、更优选地4至25的范围。m、n和o的总和至少是1，m、n和o的总和优选地是5至100的范围，更优选地9至50的范围。
[0110]
通式(i)的阴离子型表面活性剂可以具有任何结构、属于嵌段共聚物或无规共聚物。
[0111]
其他合适的阴离子型表面活性剂包括以下者的盐(m
+
)：c
12-c
18
磺基脂肪酸烷基酯(如c
12-c
18
磺基脂肪酸甲酯)、c
10-c
18-烷基芳基磺酸(如n-c
10-c
18-烷基苯磺酸)和c
10-c
18
烷基烷氧基羧酸酯。
[0112]m+
在全部情况下均选自成盐阳离子。成盐阳离子可以为单价或多价；因此m
+
等于1/v m
v+
。实例包括但不限于钠、钾、镁、钙、铵盐和单乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺的铵盐。
[0113]
在一个实施方案中，洗涤剂制剂包含至少两种选自通式(i)化合物的阴离子型表面活性剂，其中所述阴离子型表面活性剂之一的特征在于r1是c
11
，r2是h，m是2，n和o＝0，a-是so
3-，m
+
是na
+
并且另一表面活性剂的特征在于r1是c
13
，r2是h，m是2，n和o＝0，a-是so
3-，m
+
是na
+
。
[0114]
在一个实施方案中，洗涤剂制剂包含至少一种选自通式(ii)化合物的阴离子型表面活性剂：
[0115][0116]
其中式(ii)的r1是c
10-c
13
烷基。在一个实施方案中，洗涤剂制剂包含至少两种选自通式(ii)化合物的阴离子型表面活性剂，其中所述阴离子型表面活性剂之一的特征在于r1是c
10
，并且另一表面活性剂的特征在于r1是c
13
。本文中的如此化合物也称为las(直链烷基苯磺酸酯)。
[0117]
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂制剂包含按重量计约1％至约15％范围、按重量计约3％至约12％范围、或按重量计约4％至约8％范围的非离子型表面活性剂总量，前述
百分数均相对于洗涤剂制剂的总重量而言。在一个实施方案中，本发明的洗涤剂制剂包含相对于洗涤剂制剂的总重量而言，按重量计约5.5％的非离子型表面活性剂总量。
[0118]
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂制剂包含至少一种根据通式(iii)的非离子型表面活性剂：
[0119][0120]
通式(iii)的变量如下定义：
[0121]
r1选自c
1-c
23
烷基和c
2-c
23
链烯基，其中烷基和/或链烯基是直链或支链的；实例是n-c7h
15
、n-c9h
19
、n-c
11h23
、n-c
13h27
、n-c
15h31
、n-c
17h35
、i-c9h
19
、i-c
12h25
。
[0122]
r2选自h、c
1-c
20
烷基和c
2-c
20
链烯基，其中烷基和/或链烯基是直链或支链的。
[0123]
r3和r4各自独立地选自c
1-c
16
烷基，其中烷基是直链或支链的；实例是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、1,2-二甲基丙基、异戊基、正己基、异己基、仲己基、正庚基、正辛基、2-乙基己基、正壬基、正癸基、异癸基。
[0124]
r5选自h和c
1-c
18
烷基，其中烷基是直链或支链的。
[0125]
通式(iii)的整数如下定义：
[0126]
m是0至200、优选地1-80、更优选地3-20的范围；n和o各自独立地是0至100的范围；n优选地是1至10、更优选地1至6的范围；o优选地是1至50、更优选地4至25的范围。m、n和o的总和至少是1，m、n和o的总和优选地是5至100的范围，更优选地9至50的范围。
[0127]
通式(iii)的非离子型表面活性剂可以具有任何结构，具有嵌段结构或无规结构，并且不局限于展示的式(iii)顺序。
[0128]
本文中式(iii)的化合物也称为烷基聚乙二醇醚(aeo)。
[0129]
在一个实施方案中，洗涤剂制剂包含至少一种选自通式(iii)的非离子型表面活性剂，其中m是3至11的范围，优选地不大于7；n和o是0，r1是c
12-c
14
，r5是h。在一个实施方案中，洗涤剂制剂包含至少两种选自通式(iii)化合物的非离子型表面活性剂，其中所述非离子型表面活性剂之一的特征在于r1是c
12
，r5是h，m是7，n和o＝0，并且另一表面活性剂的特征在于r1是c
14
，r5是h，m是7，n和o＝0。
[0130]
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂制剂包含一种或多种选自络合剂(螯合剂、多价螯合剂)、沉淀剂和离子交换化合物的化合物，所述化合物可以与钙和镁形成水溶性复合物。这类化合物在本文中也称为“助洗剂”或“助洗物质”，同时不意图将这类化合物在洗涤剂制剂的最终应用中限于这个功能。在一个实施方案中，本发明的洗涤剂制剂包含至少一种助洗剂，其选自基于非磷酸酯的助洗剂，如葡糖酸钠、柠檬酸盐(类)、硅酸酯(类)、碳酸盐(类)、膦酸盐(类)、氨基羧酸酯(类)、聚羧酸酯(类)、聚磺酸酯(类)和聚膦酸酯(类)。
[0131]
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂制剂包含至少一种“柠檬酸盐”，选自柠檬酸单金属盐和二金属盐，且尤其是檬酸单钠盐及优选地三钠盐、柠檬酸铵盐或取代的铵盐以
及柠檬酸本身。柠檬酸盐可以作为无水化合物或作为水合物，例如作为柠檬酸钠二水合物使用。在一个实施方案中，以按重量计0％至约20％范围、按重量计0.5％至约10％范围或按重量计1％-5％范围的总量包含柠檬酸盐，前述百分数均相对于洗涤剂制剂的总重量而言。在一个实施方案中，本发明的洗涤剂制剂包含相对于洗涤剂制剂的总重量而言约1-3％范围的柠檬酸盐总量。
[0132]
本发明的洗涤剂制剂可以包含一种或多种水溶助长剂。在一个实施方案中，洗涤剂制剂包含一种或多种水溶助长剂，其选自有机溶剂如乙醇、异丙醇、乙二醇、1,2-丙二醇和本领域已知在正常条件下水可溶混的其他有机溶剂。在一个实施方案中，本发明的洗涤剂制剂包含按重量计5％-10％范围、优选地按重量计约6％的1,2-丙二醇总量，前述百分数均相对于洗涤剂制剂的总重量而言。
[0133]
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂制剂不包含除本发明甘露聚糖酶之外的任何其他酶。
[0134]
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂制剂包含除本发明甘露聚糖酶之外的至少一种选自以下的其他酶：蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶、甘露聚糖酶和本领域已知可用于洗涤剂制剂中的任何其他酶。
[0135]
相对于本发明洗涤剂制剂中所包含的甘露聚糖酶为额外的至少一种酶本身可以用酶稳定剂稳定。在一个方面，至少一种酶稳定剂选自含硼化合物如硼酸或其衍生物和烃基亚硼酸或其衍生物，选自其盐及选自其混合物，它们均如本文所公开。在一个方面，至少一种酶稳定剂选自如本文中公开的肽醛。
[0136]
在一个实施方案中，至少一种酶稳定剂选自使蛋白酶稳定的包含2至6个羟基的多元醇。合适的实例包括二醇、1,2-丙二醇、1,2-丁二醇、1,2-戊二醇、乙二醇、己二醇、甘油、山梨醇、甘露醇、赤藓糖醇、葡萄糖、果糖和乳糖。
[0137]
在一个实施方案中，本发明的洗涤剂制剂是洗衣用洗涤剂。
[0138]
术语“洗涤”指家用洗涤和工业洗涤二者，并且意指用包含本发明洗涤剂制剂的溶液处理纺织品的过程。在一个实施方案中，通过使用技术性装置如家用或工业洗衣机实施洗涤过程。洗衣机(washing machine)本文中也称为衣物洗涤机(laundry machine)。备选地，可以手工进行洗涤过程。
[0139]
术语“纺织品”意指任何纺织材料，包括纱线(用于针织或织造的天然纤维或合成纤维制成的线)、纱线中间体、纤维、非织造材料、天然材料、合成材料，以及由这些材料制成的织物(通过纤维织造、针织或制毡产生的纺织品)如服装(由纺织品制成的衣着制品)、布匹和其他制品。
[0140]
术语“纤维”包括天然纤维、合成纤维及其混合物。天然纤维的实例为植物源(如亚麻、黄麻和棉花)或动物源，包括蛋白质如胶原蛋白、角蛋白和丝心蛋白(例如蚕丝、绵羊毛、安哥拉毛、马海毛、羊绒)。合成来源纤维的实例是聚氨酯纤维如或聚酯纤维、聚烯烃如弹性聚烯烃(elastofin)或聚酰胺纤维如尼龙。纤维意指纺织品如针织品、织造品或非织造品的单一纤维或部分。
[0141]
本发明涉及一种提供含甘露聚糖酶的液体制剂、优选地液体洗涤剂制剂、更优选地液体洗衣用洗涤剂制剂的方法，所述方法包括在一个或多个步骤中混合以下者的步骤：
[0142]
(a)至少一种与seq id no:1至少80％同一的甘露聚糖酶，和
[0143]
(b)至少一种以有效清洁和/或有效维持洗涤剂物理特征的量存在的选自表面活性剂、助洗剂和水溶助长剂的洗涤剂组分。
[0144]
在一个实施方案中，本发明涉及一种提供液体含甘露聚糖含酶的制剂的方法，所述方法包括在一个或多个步骤中按任何顺序混合以下者的步骤：
[0145]
(a)本发明的酶制品包含至少一种与seq id no:1至少80％同一的甘露聚糖酶，和
[0146]
(b)至少一种以有效清洁和/或有效维持液体制剂物理特征的量存在的选自表面活性剂、助洗剂和水溶助长剂的洗涤剂组分。
[0147]
在一个实施方案中，制剂具有5-12或6-11范围、更优选地选自6-10、7-9、7-12、8-12、8-10和7.5-8.5范围的ph。在一个实施方案中，制剂为洗涤剂制剂、优选地液体洗涤剂制剂、更优选地液体洗衣用洗涤剂制剂。
[0148]
本发明的洗衣用洗涤剂展示在有关洗涤条件下评价的洗涤性能。本文中术语“相关洗涤/清洁条件”指洗衣机中或手洗过程中实际使用的条件，特别地是温度、时间、清洁用机械、肥皂泡沫浓度、洗涤剂类型和水硬度。在一个实施方案中，洗涤性能本文中涉及移除包含甘露聚糖的污渍；优选地包含甘露聚糖的污渍选自包含半乳甘露聚糖和葡甘露聚糖的那些污渍。在一个实施方案中，洗涤性能涉及移除包含半乳甘露聚糖、更优选地刺槐豆胶和/或瓜耳胶的污渍。
[0149]
本发明涉及使用至少一种与seq id no:1至少80％同一的甘露聚糖酶增加洗涤剂制剂对包含甘露聚糖的污渍、优选地包含至少一种半乳甘露聚糖的污渍、更优选地包含刺槐豆胶和/或瓜耳胶的污渍的洗涤或清洁性能。
[0150]
在一个实施方案中，洗涤剂制剂具有5-12或6-11范围、更优选地选自6-10、7-9、7-12、8-12、8-10和7.5-8.5范围的ph。在一个实施方案中，制剂为液体洗涤剂制剂、优选地液体洗衣用洗涤剂制剂。
[0151]
在一个实施方案中，洗涤或清洁性能在≤60℃、优选地约5-60℃范围、优选地约5-40℃范围、更优地选约10-40℃范围的洗涤或清洁温度增加。
[0152]
在一个方面，本发明涉及一种洗涤或清洁方法，所述方法包括步骤
[0153]
(a)提供至少一种包含甘露聚糖的污渍；
[0154]
(b)提供本发明的洗涤剂制剂
[0155]
(c)使包含甘露聚糖的污渍与(b)的洗涤剂接触。
[0156]
优选地，包含甘露聚糖的污渍包含至少一种半乳甘露聚糖、更优选地刺槐豆胶和/或瓜耳胶。
[0157]
在一个实施方案中，步骤(a)中提供了含有包含甘露聚糖的污渍的纺织品。
[0158]
在一个实施方案中，本发明洗涤剂中所包含的甘露聚糖酶通过(c)的使包含甘露聚糖的污渍与(b)的洗涤剂接触，从(a)的纺织品移除包含甘露聚糖的污渍。
[0159]
本发明包括以下实施方案：
[0160]
1.通过使至少一种包含甘露聚糖的污渍接触与seq id no:1至少80％同一的甘露聚糖酶的步骤，移除包含甘露聚糖的污渍的方法。
[0161]
2.液体酶制品，其包含与seq id no:1至少80％同一的甘露聚糖酶、至少一种稳定液体酶制品本身的化合物、至少一种溶剂和任选地至少一种酶稳定剂。
[0162]
3.具有5-12范围ph的根据实施方案2的酶制品，其中该酶制品优选地为液体。
[0163]
4.对包含甘露聚糖的污渍、优选地对包含至少一种半乳甘露聚糖、优选地刺槐豆胶和/或瓜耳胶的污渍具有增加的洗涤或清洁性能的制剂，其中该制剂包含与seq id no:1至少80％同一的甘露聚糖酶。
[0164]
5.根据实施方案3的制剂，其中该制剂具有5-12范围的ph，优选地其中该制剂为液体。
[0165]
6.根据实施方案4和5的制剂，其中该制剂以有效维持制剂物理特征的量和/或以有效清洁的量包含至少一种选自表面活性剂、助洗剂和水溶助长剂的组分。
[0166]
7.根据实施方案4-6的制剂，其中该制剂优选地是洗涤剂制剂、更优选地洗衣用洗涤剂制剂、更优选地液体洗衣用洗涤剂。
[0167]
8.一种提供对包含甘露聚糖的污渍有效的液体洗涤剂的方法，所述方法包括在一个或多个步骤中混合以下者的步骤：
[0168]
(a)至少一种与seq id no:1至少80％同一的甘露聚糖酶，优选地其中在根据实施方案2和3的酶制品中提供该甘露聚糖酶；和
[0169]
(b)至少一种以有效清洁和/或有效维持洗涤剂物理特征的量存在的选自表面活性剂、助洗剂和水溶助长剂的组分。
[0170]
9.洗涤或清洁方法，包括步骤
[0171]
(a)提供至少一种包含甘露聚糖的污渍，优选地其中该包含甘露聚糖的污渍包含至少一种半乳甘露聚糖，更优选地其中该包含甘露聚糖的污渍包含刺槐豆胶和/或瓜耳胶；
[0172]
(b)提供根据实施方案4-6的制剂
[0173]
(c)使(a)的包含甘露聚糖的污渍与(b)的洗涤剂接触，优选地在5-60℃范围的洗涤或清洁温度接触。
[0174]
10.根据实施方案8的方法，其中在纺织品(a)上含有包含甘露聚糖的污渍；并且其中洗涤剂(b)中所包含的多肽从纺织品(a)移除包含甘露聚糖的污渍。
[0175]
11.至少一种与seq id no:1至少80％同一的甘露聚糖酶的用途，用于增加、优选地在5-60℃范围的洗涤或清洁温度增加洗涤剂制剂对包含甘露聚糖的污渍的洗涤性能。
[0176]
实施例1：在rotawash中评价甘露聚糖酶
[0177]
在液体洗涤剂es1_c(ph 8)和persil non-bio(ph 7.2)中于40℃或25℃洗涤温度测试以下甘露聚糖酶man01、man02和man03：
[0178]
man01：根据seq id no:1的甘露聚糖酶
[0179]
man02：根据seq id no:2的甘露聚糖酶
[0180]
man03：根据seq id no:3的甘露聚糖酶
[0181][0182]
在以下洗涤条件下于rotawash(rotawash m228,sdl atlas inc.,usa)中使用碱制剂es1_c的洗涤液洗涤cft c-s-43/瓜尔胶污渍指示物或cft c-s-73/刺槐豆胶污渍指示物(cft，vlaardingen，nl)连同棉质压载织物和钢球：
[0183]
[0184][0185]
在洗涤后，将织物淋洗并晾干。通过用来自epson的平台彩色图像扫描仪(flatbed color image scanner)(expression 11000xl)测量玷污织物洗涤后的平均颜色强度确定对单一污渍的洗涤性能。总体上，平均强度值越高，性能越好。下表ex1a和表ex1b及表ex1c中也概述了该结果。
[0186]
表ex1a：man01在es1_c洗涤剂制剂中40℃时对瓜耳胶污渍(c-s-43)的洗涤性能；以平均强度(rgb)计的值
[0187][0188]
表ex1b：man01在es1_c洗涤剂制剂中40℃时对刺槐豆胶污渍(c-s-73)的洗涤性能；以平均强度(rgb)计的值
[0189][0190]
表ex1c：man01在persil non-bio洗涤剂中40℃时对瓜耳胶污渍(c-s-43)的洗涤性能；平均强度(rgb)值
[0191][0192]
表ex1d：man01在persil non-bio洗涤剂中40℃时对刺槐豆胶污渍(c-s-73)的洗涤性能；平均强度(rgb)值
[0193][0194]
表ex1e：man01在persil non-bio洗涤剂中25℃时对瓜耳胶污渍(c-s-43)的洗涤性能；平均强度(rgb)值
[0195]