mcherry或mEOS纳米抗体及其制备方法和应用

文档序号:26139591发布日期:2021-08-03 14:23阅读:来源:国知局

技术特征:

1.mcherry或meos纳米抗体的编码基因,其特征在于:所述mcherry纳米抗体包括两种编码基因,其核苷酸序列分别如序列表seqidno.1、seqidno.3所示;所述meos纳米抗体包括七种编码基因,其核苷酸序列分别如序列表seqidno.5、seqidno.7、seqidno.9、seqidno.11、seqidno.13、seqidno.15、seqidno.17所示。

2.mcherry纳米抗体,其特征在于:包括两种mcherry纳米抗体,其氨基酸序列分别如序列表seqidno.2、seqidno.4所示。

3.meos纳米抗体,其特征在于:包括七种meos纳米抗体,其氨基酸序列分别如序列表seqidno.6、seqidno.8、seqidno.10、seqidno.12、seqidno.14、seqidno.16、seqidno.18所示。

4.mcherry纳米抗体的表达载体,其特征在于:所述表达载体包括两种mcherry纳米抗体的表达载体,其分别含有权利要求1所述的两种mcherry纳米抗体的编码基因。

5.meos纳米抗体的表达载体,其特征在于:所述表达载体包括七种meos纳米抗体的表达载体,其分别含有权利要求1所述的七种meos纳米抗体的编码基因。

6.根据权利要求4或5所述的mcherry纳米抗体的表达载体或meos纳米抗体的表达载体,其特征在于:所述表达载体为大肠杆菌质粒表达载体或padl-10b。

7.与权利要求2或3所述的mcherry纳米抗体或meos纳米抗体相关的生物材料,其特征在于:所述生物材料为(a1)至(a8)中的任一种:

(a1)编码权利要求2或3所述的mcherry纳米抗体或meos纳米抗体的核酸分子;

(a2)含有(a1)所述核酸分子的表达盒;

(a3)含有(a1)所述核酸分子的重组载体;

(a4)含有(a2)所述表达盒的重组载体;

(a5)含有(a1)所述核酸分子的转基因动物细胞系;

(a6)含有(a2)所述表达盒的转基因动物细胞系;

(a7)含有(a3)所述重组载体的转基因动物细胞系;

(a8)含有(a4)所述重组载体的转基因动物细胞系。

8.一种衍生抗体,其特征在于,所述衍生抗体为下述a)或b)或c)或d)或e):

a)含有权利要求2或3所述纳米抗体的单链抗体;

b)含有a)所述单链抗体的融合抗体;

c)含有权利要求2或3所述纳米抗体的融合抗体;

d)含有权利要求2或3所述纳米抗体的fab;

e)含有权利要求2或3所述纳米抗体的完整抗体。

9.根据权利要求2或3所述的mcherry纳米抗体或meos纳米抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:构建mcherry纳米抗体文库或meos纳米抗体文库然后进行筛选,富集能结合抗原的抗体文库,再通过elisa测定方法继续从能结合抗原的抗体文库中筛选出特异的阳性单克隆纳米抗体,最后通过nativebinding检测出能够与mcherry蛋白结合的mcherry纳米抗体或能够与meos蛋白结合的meos纳米抗体。

10.权利要求2或3所述的mcherry纳米抗体或meos纳米抗体在制备蛋白质标签中的应用。


技术总结
mcherry或mEOS纳米抗体及其制备方法和应用,涉及生物工程技术领域,本发明通过构建mcherry或mEOS纳米抗体文库,筛选出了特异的阳性单克隆纳米抗体,并检测出了能够与mcherry蛋白结合的两种mcherry纳米抗体,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3所示,以及能够与mEOS蛋白结合的七种mEOS纳米抗体,其核苷酸序列如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.17所示。本发明构建的mcherry或mEOS纳米抗体,相对传统抗体而言可提高产量、降低成本,并获得更好的稳定性。

技术研发人员:容益康;吴靖;李凯丽
受保护的技术使用者:南华大学
技术研发日:2021.05.13
技术公布日:2021.08.03
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