一种靶向抑制维生素K循环的小分子化合物的合成方法

一种靶向抑制维生素k循环的小分子化合物的合成方法
技术领域
1.本发明属于化学合成技术领域，具体涉一种靶向抑制维生素k循环的小分子化合物的合成方法。


背景技术：

2.抗凝血药通过影响凝血因子而阻碍血液凝固过程，临床主要用于血栓栓塞性疾病的预防与治疗。维生素k是2-甲基-1,4-萘醌的衍生物，包括天然存在的维生素k1和维生素k2。研究表明，一些凝血因子的合成依赖于维生素k，提示维生素k参与凝血系统中某些凝血因子的合成。维生素k通过调节一些凝血因子(如凝血因子ii、凝血因子vii和凝血因子ix)的翻译后修饰参与凝血。
3.目前已知两个酶在维生素k循环中发挥作用。其中γ-谷氨酰羧化酶(ggcx)利用kh2为辅因子，对维生素k依赖性凝血因子的gla结构域的谷氨酸残基进行γ羧基化修饰，同时把kh2转化成ko。为了使ggcx的催化反应可以持续进行，ko必须被还原成kh2，而这一反应主要是具有ko还原酶活性和k还原酶活性的维生素k环氧化物还原酶(vkor)催化的。
4.华法林是一种维生素k拮抗剂，最初在北美作为杀鼠剂使用，自从20世纪50年代开始被批准应用于临床以来，华法林已成为全世界范围内使用最广泛的口服抗凝药，被用于治疗和预防静脉血栓、肺栓塞以及房颤和人工心脏瓣膜置换术患者的血栓形成。vkor是临床抗凝血药物华法林(warfarin)的特异性作用靶点。华法林通过抑制维生素k环氧化物还原酶(vkor)的活性，使ko不能转化为k和kh2，从而阻断了维生素k循环，进而抑制凝血因子gla结构域的谷氨酸残基的γ羧基化修饰，达到抗凝血的目的。但是由于华法林治疗窗狭窄，用药个体差异大，影响因素复杂，华法林剂量不足可导致血栓形成而引起栓塞，抗凝过量又可导致出血。
5.目前抑制vkor活性的小分子都是香豆素类的衍生物或苯茚二酮类的衍生物，但还不清楚是否存在化学结构不同于这两类化合物的vkor抑制剂。公开号cn111239385a公开了一种靶向抑制维生素k环氧化物还原酶的小分子化合物的筛选方法及应用，该筛选方法通过构建维生素k循环小分子抑制剂筛选体系(即双报告基因细胞体系)，可以快速对药物小分子库进行高通量筛选，筛选出了十几种靶向抑制维生素k循环的小分子化合物，其中，小分子化合物hf13136-e7和hf13021-b2均为与维生素k结构类似的小分子化合物，这两种化合物的合成方法目前还没有文献报道。


技术实现要素：

6.本发明的目的是提供一种靶向抑制维生素k循环的小分子化合物的合成方法，该方法反应过程温和，简便、安全易操作，且具有原料易得、低成本、高产率的优点。
7.为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种靶向抑制维生素k循环的小分子化合物的合成方法，所述小分子化合物有两个，分别命名为hf13136-e7、hf13021-b2，对应的结构式如式(ⅰ)、式(ⅱ)所示：
[0008][0009]
小分子化合物的合成方法包括如下步骤：
[0010]
(1)将2,3-二氯-1,4-萘醌、邻甲氧基苯胺或苄胺加入到干燥乙腈中得到混合反应液ⅰ；2,3-二氯-1,4-萘醌与邻甲氧基苯胺或苄胺之间的摩尔比为1：(3-5)；
[0011]
(2)将混合反应液ⅰ通过加热回流装置，反应温度为80-85℃，室温下反应8-12h，再将反应液冷却至0℃析出固体，过滤后烘干即得到橙红色固体状的目标产物化合物hf13136-e7或中间产物，中间产物的结构式为
[0012]
(3)将中间产物与苄胺依次加入到干燥甲苯中得到混合反应液ⅱ；中间产物与苄胺之间的摩尔比为1：(1.5-2.5)；向混合反应液ⅱ中依次加入1,1
′‑
二茂铁二基-双(二苯基膦)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯和叔丁醇钾，在75-85℃反应温度下反应2.5-3.5h；所述中间产物、1,1'-二茂铁二基-双(二苯基膦)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯、叔丁醇钾之间的摩尔比为1：(0.1-0.3)：(0.05-0.15)：(1-2)；
[0013]
(4)将反应后的溶液冷却至室温，减压旋蒸去除溶剂，再用硅胶柱纯化后，即可得到呈深红色固体的目标产物化合物hf13021-b2。
[0014]
优选的，步骤(1)中，2,3-二氯-1,4-萘醌与邻甲氧基苯胺之间的摩尔比为1：4。
[0015]
优选的，步骤(1)中，2,3-二氯-1,4-萘醌与苄胺之间的摩尔比为1：4。
[0016]
优选的，步骤(3)中，中间产物与苄胺之间的摩尔比为1：2。
[0017]
优选的，步骤(3)中，所述中间产物、1,1'-二茂铁二基-双(二苯基膦)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯、叔丁醇钾之间的摩尔比为1：0.2：0.1：1.5。
[0018]
优选的，步骤(4)纯化使用的洗脱剂采用体积比为4：1的的石油醚/乙酸乙酯混合液。
[0019]
本发明得到的小分子化合物作为靶向抑制维生素k循环的小分子抑制剂能特异性抑制vkor活性，具有开发为灭鼠药和抗凝药物的潜在应用价值；另外，本发明反应过程温和，简便、安全易操作，且具有原料易得、低成本的优点，具有广阔的推广价值和应用价值。
附图说明
[0020]
图1为所制得小分子化合物hf13136-e7的核磁氢谱；
[0021]
图2为所制得小分子化合物hf13136-e7的核磁碳谱；
[0022]
图3为所制得小分子化合物hf13136-e7的lc/ms图；
[0023]
图4为所制得小分子化合物hf13021-b2的核磁氢谱；
[0024]
图5为所制得小分子化合物hf13021-b2的核磁碳谱；
[0025]
图6为所制得小分子化合物hf13021-b2的lc/ms图。
具体实施方式
[0026]
下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。
[0027]
下述实施例中，除非另有说明，2,3-二氯-1,4-萘醌、邻甲氧基苯胺、苄胺及其他试剂均可通过市售购买的方式获得。
[0028]
实施例一
[0029]
小分子化合物hf13136-e7的合成路线如下：
[0030][0031]
准确称量1.12g(4.93mmol)2,3-二氯-1,4-萘醌和2.46g(19.98mmol)邻甲氧基苯胺依次加入到50ml的干燥乙腈中得到混合反应液，干燥乙腈的用量足以使2,3-二氯-1,4-萘醌与邻甲氧基苯胺完全溶解；2,3-二氯-1,4-萘醌与邻甲氧基苯胺之间的摩尔比为1：4；将混合反应液通过加热回流装置，反应温度为80-85℃，室温下反应8-12h，再将反应液冷却至0℃析出固体，过滤后烘干得到1.2g橙红色固体状的目标产物hf13136-e7，产率达到77％。
[0032]
将得到的目标产物进行氢谱、碳谱和液质联用检测，表征结果如图1、图2和图3所示，氢谱和碳谱结构表征数据如下：
[0033]
(1)1h nmr(400mhz，cdcl3)：δ8.19(d，j＝hz，4h)，(d，j＝hz，2h)，(d，j＝hz，2h)，(d，j＝hz，2h)，(d，j＝hz，2h)，(d，j＝hz，2h)，(d，j＝hz，2h)，(d，j＝hz，2h)；(2)
13
c nmr(400mhz，cdcl3)：180.46，177.40，152.62，141.79，134.89，132.85，132.70，130.05，127.07，126.93，126.47，125.13，119.81，114.73，110.67，77.35，77.03，76.71，55.67，0.01。这些参数符合所发明的化合物的化学结构。
[0034]
实施例二
[0035]
小分子化合物hf13021-b2的合成路线如下：
[0036][0037]
准确称量2.25g(9.91mmol)2,3-二氯-1,4-萘醌和4.28g(39.94mmol)苄胺依次加入到50ml的干燥乙腈中得到混合反应液ⅰ，干燥乙腈的用量足以使2,3-二氯-1,4-萘醌与苄胺完全溶解；2,3-二氯-1,4-萘醌与苄胺之间的摩尔比为1：4；将混合反应液ⅰ通过加热回流装置，反应温度为80-85℃，室温下反应8-12h，再将反应液冷却至0℃析出固体，过滤后烘干得到2.5g浅红色固体状的中间产物，产率达到84％；
[0038]
将2.5g中间产物(8.40mmol)与1.8g苄胺(16.79mmol)依次加入到40ml干燥甲苯中得到混合反应液ⅱ，干燥甲苯的用量足以使中间产物与苄胺完全溶解；中间产物与苄胺之间的摩尔比为1：2；向混合反应液ⅱ中依次加入800mg 1,1'-二茂铁二基-双(二苯基膦)(1.44mmol)、450mg[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.61mmol)和1.2g叔丁醇钾(10.69mmol)，在80℃反应温度下反应3h；所述中间产物、1,1'-二茂铁二基-双(二苯基膦)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯、叔丁醇钾之间的摩尔比为1：0.2：0.1：1.5；将反应后的溶液冷却至室温，通过减压旋蒸的方法去除溶剂，再用硅胶柱纯化，纯化使用的洗脱剂采用体积比为4：1的的石油醚/乙酸乙酯混合液，即得到520mg呈深红色固体的目标产物化合物hf13021-b2。
[0039]
将得到的目标产物进行氢谱、碳谱和液质联用检测，表征结果如图4、图5和图6所示，氢谱和碳谱结构表征数据如下：
[0040]
(1)1h nmr(400mhz，cdcl3)：δ8.19(d，j＝hz，4h)，(d，j＝hz，2h)，(d，j＝hz，2h)，(d，j＝hz，2h)，(d，j＝hz，2h)，(d，j＝hz，2h)，(d，j＝hz，2h)，(d，j＝hz，2h)；(2)
13
c nmr(400mhz，cdcl3)：181.73，139.25，133.15，132.13，131.18，128.67，127.66，127.37，126.01，77.35，77.03，76.71，47.12，0.01。这些参数符合所发明的化合物的化学结构。