多肽注射系统及其用途

文档序号:35082403发布日期:2023-08-09 22:27阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种信号肽,其指导多肽装载到发光杆菌毒力盒(pvc)中,其中所述信号肽衍生自非共生发光杆菌(photorhabdus asymbiotica)的pvc基因簇下游的效应因子。

2.根据权利要求1所述的信号肽,其中所述非共生发光杆菌为非共生发光杆菌(photorhabdus asymbiotica)atcc43949。

3.根据权利要求1或2所述的信号肽,其中所述信号肽衍生自所述pvc基因簇下游的效应因子的n末端40-70个氨基酸,例如n末端50-70个氨基酸、例如n末端45-55个氨基酸、或n末端48-52个氨基酸,优选n末端50个氨基酸的序列。

4.一种信号肽,其中所述信号肽包含与选自seq id no:3、7、11、15、19、23或27的氨基酸序列具有至少80%、至少90%、至少92%、至少94%、至少96%、至少98%或100%同一性的氨基酸序列,或者所述信号肽包含与选自seq id no:3、7、11、15、19、23或27的氨基酸序列相比具有1-5个氨基酸取代的氨基酸序列。

5.一种核酸,其编码根据权利要求1-4中任一项所述的信号肽。

6.一种融合蛋白,其包含多肽和根据权利要求1-4中任一项所述的信号肽,其中所述信号肽与所述多肽的n末端融合。

7.根据权利要求6所述的融合蛋白,其中所述信号肽与所述多肽直接连接或通过接头连接。

8.根据权利要求6或7所述的融合蛋白,其中所述多肽的分子量为10kda至200kda。

9.根据权利要求6-8中任一项所述的融合蛋白,其中所述多肽的等电点为4-10。

10.根据权利要求6-9中任一项所述的融合蛋白,其中所述多肽选自信号通路调节蛋白、结构蛋白、转运蛋白、激素或激素调节分子、细胞毒素、抗原或免疫原、标签蛋白或报告蛋白、抗菌肽、参与细胞代谢的酶和基因编辑蛋白。

11.一种核酸,其包含编码根据权利要求6-10中任一项所述的融合蛋白的核苷酸序列。

12.一种载体,其包含根据权利要求11所述的核酸。

13.根据权利要求12所述的载体,其中所述载体还包含编码非共生发光杆菌的发光杆菌毒力盒v(pvc-v)结构蛋白的核苷酸序列,优选地,所述pvc-v结构蛋白包括pvc1、pvc2、pvc3、pvc4、pvc5、pvc6、pvc7、pvc8、pvc9、pvc10、pvc11、pvc12、pvc13、pvc14、pvc15和pvc16。

14.一种宿主细胞,其包含第一核苷酸序列和第二核苷酸序列,所述第一核苷酸序列编码根据权利要求6-10中任一项所述的融合蛋白,所述第二核苷酸序列编码非共生发光杆菌的pvc-v结构蛋白的核苷酸序列,优选地,所述pvc-v结构蛋白包括pvc1、pvc2、pvc3、pvc4、pvc5、pvc6、pvc7、pvc8、pvc9、pvc10、pvc11、pvc12、pvc13、pvc14、pvc15和pvc16,其中所述第一核苷酸序列和第二核苷酸序列在相同或不同的载体上。

15.根据权利要求14所述的宿主细胞,其中所述宿主细胞还表达lysr调控子。

16.根据权利要求14或15所述的宿主细胞,其中所述宿主细胞是原核细胞或真核细胞,优选地,所述宿主细胞是大肠杆菌细胞。

17.一种多肽注射系统,其包含非共生发光杆菌的pvc-v复合物和装载在所述pvc-v复合物中的多肽。

18.根据权利要求17所述的多肽注射系统,其中所述多肽通过在其n端与根据权利要求1-4中任一项所述的信号肽融合从而装载至所述pvc-v复合物中。

19.一种制备权利要求17或18所述的多肽注射系统的方法,包括培养根据权利要求14-16中任一项所述的宿主细胞,任选地,所述方法还包括从培养的宿主细胞或其上清液分离所述多肽注射系统。

20.一种将多肽转入靶细胞中的方法,其包括:将根据权利要求17或18所述的多肽注射系统与靶细胞接触,使得所述多肽注射系统将装载的多肽注射到所述靶细胞中。

21.一种组合物,其包含根据权利要求1-4中任一项所述的信号肽、根据权利要求5或11所述的核酸、根据权利要求6-10中任一项所述的融合蛋白,根据权利要求12或13所述的载体,根据权利要求14-16中任一项所述的宿主细胞,或根据权利要求17或18所述的多肽注射系统。


技术总结
本公开提供了用于将多肽注射到细胞中的信号肽、融合蛋白、多肽系统,及其在将多肽注射到细胞中的用途。

技术研发人员:江峰,金奇,王霞
受保护的技术使用者:中国医学科学院病原生物学研究所
技术研发日:
技术公布日:2024/1/14
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