技术特征：
1.一种酶催化合成嘌呤核苷的方法，其特征在于，所述方法利用嘌呤核苷磷酸化酶以及如下任一种酶：嘧啶核苷磷酸化酶或胸苷磷酸化酶，催化底物合成所述嘌呤核苷；所述底物包括底物核苷和底物碱基；所述嘧啶核苷磷酸化酶包括pynp，所述pynp为seq id no：1所示的蛋白质；所述胸苷磷酸化酶包括tp，所述tp为seq id no：2所示的蛋白质；所述嘌呤核苷磷酸化酶包括pnp，所述pnp为seq id no：3所示的蛋白质。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述底物核苷为式i所示的核苷，r1选自-h或-oh，r2选自-h或-ch3，优选地，所述底物核苷包括胸苷，尿苷或2'-脱氧尿苷。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述底物碱基为式ii或式iii所示的碱基，x选自-nh3或-och3，y选自-h或-nh2，优选地，所述底物碱基包括鸟嘌呤、腺嘌呤、2,6-二氨基嘌呤或6-甲氧基鸟嘌呤。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述pynp、所述tp或所述pnp中的一种或多种为纯化蛋白、粗酶液或固定化酶。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述方法中，所述底物核苷的浓度为2～400mm，所述底物碱基的浓度为1～200mm。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酶催化的催化时间为2～18h。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酶催化的催化温度为60～70℃。8.一种组合物，其特征在于，所述组合物包括嘌呤核苷磷酸化酶以及如下任一种酶：嘧啶核苷磷酸化酶或胸苷磷酸化酶，其中，所述嘧啶核苷磷酸化酶为pynp，所述pynp为seq id no：1所示的蛋白质；所述胸苷磷酸化酶为tp，所述tp为seq id no：2所示的蛋白质；所述嘌呤核苷磷酸化酶为pnp，所述pnp为seq id no：3所示的蛋白质。9.根据权利要求8所述的组合物，其特征在于，所述pynp、所述tp或所述pnp中的一种或多种为纯化蛋白、粗酶液或固定化酶。
10.根据权利要求8或9所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括底物核苷和底物碱基；所述底物核苷为式i所示的核苷，r1选自-h或-oh，r2选自-h或-ch3；所述底物碱基为式ii或式iii所示的碱基，x选自-nh3或-och3，y选自-h或-nh2；优选地，所述底物核苷的浓度为2～400mm，所述底物碱基的浓度为1～200mm。
技术总结
本发明提供了一种酶催化合成嘌呤核苷的方法及组合物。其中，该方法利用嘌呤核苷磷酸化酶以及如下任一种酶：嘧啶核苷磷酸化酶或胸苷磷酸化酶，催化底物合成嘌呤核苷；底物包括底物核苷和底物碱基；嘧啶核苷磷酸化酶包括PyNP，PyNP为SEQ ID NO：1所示的蛋白质；胸苷磷酸化酶包括TP，TP为SEQ ID NO：2所示的蛋白质；嘌呤核苷磷酸化酶包括PNP，PNP为SEQ ID NO：3所示的蛋白质。能够解决现有技术中的利用酶法合成嘌呤核苷产量低的问题，适用于酶催化领域。域。域。
技术研发人员：洪浩 詹姆斯
受保护的技术使用者：凯莱英医药集团（天津）股份有限公司
技术研发日：2022.08.24
技术公布日：2023/3/28