生产透明质酸的重组细胞的制作方法

文档序号:36869468发布日期:2024-02-02 20:50阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种生产透明质酸(ha)的重组酵母细胞,其中,所述重组细胞包含:

2.一种生产透明质酸(ha)的重组宿主细胞,其中,所述重组宿主细胞包含:

3.根据权利要求1或2所述的重组细胞,其中,所述ha的分子量在小于50kda的范围内,优选在约20kda至约50kda的范围内。

4.根据权利要求1或2所述的重组细胞,其中,所述ha的分子量在大于50kda的范围内,优选在约50kda至约250kda的范围内。

5.根据权利要求1或2所述的重组细胞,其中,所述ha的分子量在大于100kda的范围内,优选在约100kda至约1500kda的范围内。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的重组细胞,其中,编码具有谷氨酰胺合成酶活性的多肽的核酸获自或源自酿酒酵母。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的重组细胞,其中,编码具有透明质酸酶活性的多肽的核酸获自或源自以下中的至少一者:萨氏九杯蛛、居中平甲蛛、日本医蛭、大具窍蝮蛇或巴西钳蝎。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的重组细胞,其中,编码具有透明质酸合酶活性的多肽的核酸获自或源自兽瘟链球菌、小球藻属病毒pbcv1、小球藻属病毒cvikl、小球藻属病毒il-5-2s1、小球藻属病毒cz-2、小球藻属病毒cvg-1、非洲爪蟾或多杀巴斯德菌,并且特别获自或源自以下中的至少一者:兽瘟链球菌、小球藻属病毒pbcv1、小球藻属病毒cvikl、小球藻属病毒il-5-2s1、小球藻属病毒cz-2、小球藻属病毒cvg-1或非洲爪蟾。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的重组细胞,其中,编码具有udp-葡萄糖脱氢酶活性的多肽的核酸获自或源自以下中的至少一者:拟南芥、小球藻属病毒pbcv1或兽瘟链球菌,并且特别源自拟南芥或小球藻属病毒pbcv1。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的重组细胞,其中,所述重组细胞包含编码以下中的一者或多者的重组核酸:

11.根据权利要求1至10中任一项所述的重组细胞,其中,所述重组细胞包含至少一种编码以下中的一者或多者的重组核酸:

12.根据权利要求1和3至11中任一项所述的重组酵母细胞,其中,所述重组酵母细胞选自由以下组成的组:酿酒酵母、布拉氏酵母、贝酵母、奇异酵母、米卡酵母、卡氏酵母、白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、乳酸克鲁维酵母、马克斯克鲁维酵母、多孢克鲁维酵母、耐热克鲁维酵母、多形汉逊酵母、解脂耶氏酵母、汉逊德巴利酵母和棉阿舒囊霉,并且优选酿酒酵母。

13.根据权利要求2至11中任一项所述的重组酵母细胞,其中,所述重组宿主细胞属于酵母菌目,并且特别选自由以下组成的组:酿酒酵母、布拉氏酵母、贝酵母、奇异酵母、米卡酵母、卡氏酵母、白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、乳酸克鲁维酵母、马克斯克鲁维酵母、多孢克鲁维酵母、耐热克鲁维酵母、多形汉逊酵母、解脂耶氏酵母、汉逊德巴利酵母和棉阿舒囊霉,并且优选酿酒酵母。

14.一种生产具有所想要分子量的透明质酸(ha)(hamw)的方法,其包括:

15.根据权利要求14所述的方法,其中,所述ha的分子量为约20kda至约50kda,并且优选约20kda至约30kda。

16.根据权利要求15所述的方法,其中,所述ha的分子量为约30kda至约50kda。

17.根据权利要求14所述的方法,其中,所述ha的分子量为约50kda至约150kda。

18.根据权利要求14所述的方法,其中,所述ha的分子量为约150kda至约1500kda。

19.根据权利要求14至18中任一项所述的方法,其中,所述重组细胞包含编码以下中的一者或多者的至少一种重组核酸:

20.根据权利要求14至19中任一项所述的方法,其中,所述重组细胞包含编码以下中的一者或多者的至少一种重组核酸:

21.根据权利要求14至20中任一项所述的方法,其中,所述重组细胞是酵母属的成员,并且特别是酿酒酵母。

22.根据权利要求14至21中任一项所述的方法,其中,所述足以生产具有所想要分子量的透明质酸(ha)的时间是约35小时至约50小时、优选约40小时至约50小时、优选约48小时的时间段。

23.根据权利要求14至22中任一项所述的方法,其中,所述透明质酸的分子量通过调节所述培养基的ph来控制。

24.根据权利要求14至23中任一项所述的方法,其中,所述方法以工业规模进行,优选地其中所述培养基是至少约100l,更优选地在约1000l至约3000l的范围内,甚至更优选约10,000l,甚至更优选约100,000l,或甚至约250,000l。

25.一种透明质酸(ha),其是从如权利要求1至11中任一项所述的重组细胞可获得的或从根据权利要求14至24中任一项所述的方法可获得的。

26.一种培养基,其包含根据权利要求25所述的ha。

27.一种组合物,其包含根据权利要求25所述的透明质酸(ha)。

28.一种工业产品或消费产品或消费品,其包含(i)根据权利要求25所述的ha,(ii)如权利要求26所述的培养基,或(iii)如权利要求27所述的组合物。

29.根据权利要求28所述的工业产品或消费产品或消费品,其中,所述工业产品或消费产品或消费品是美容品、调味品、香料产品、食品、食物、饮料、食品定形剂、药物组合物、膳食补充剂、营养制品、清洁产品、和/或牙科和/或口腔卫生组合物。

30.根据权利要求1至13中任一项所定义的重组细胞用于生产具有约20kda至约50kda或约50kda至约1000kda范围内的分子量的透明质酸(ha)的用途。

31.一种用于生产透明质酸的方法,其包括以下步骤:


技术总结
本发明涉及透明质酸的生物生产领域。本领域需要允许透明质酸高效合成和分泌的透明质酸生产方法。本发明提出的技术方案是使用包含如本上下文所述的许多修饰的经遗传修饰的细胞。本发明进一步提出允许使用本发明的经遗传修饰的细胞生物生产具有受控分子量的透明质酸的方法。

技术研发人员:多米尼克·路易斯,V·贝维拉夸,L·杜兰特,卡琳·杰尔拉尔登,多米尼克·托马斯
受保护的技术使用者:奇华顿股份有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/2/1
当前第2页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1