1.一种猪链球菌保护性抗原espss的基因序列,其编码核苷酸序列如seq.no:1所示。
2.一种猪链球菌保护性抗原espss的制备方法,其包括如下步骤:
3.根据权利要求2所述的猪链球菌保护性抗原espss的制备方法,其特征在于,所述步骤1)中扩增体系的组成如下:lataq酶25μl,正向引物1μl,反向引物1μl;模板2μl,ddh2o 21μl,pcr扩增条件为:95℃预变性2min;95℃30s,55℃30s,72℃1min30s,35个循环,72℃延伸10min。
4.根据权利要求2所述的猪链球菌保护性抗原espss的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中目的基因pcr产物的酶切体系的组成为:10×buffer 2μl,espss基因9μl,ecorⅰ酶0.5μl,xhoⅰ酶0.5μl,ddh2o 8μl;pet-28a质粒的酶切体系的组成为10×buffer 2μl,pet-28a质粒9μl,ecorⅰ酶0.5μl,xhoⅰ酶0.5μl,ddh2o 8μl。
5.根据权利要求2所述的猪链球菌保护性抗原espss的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中连接反应体系的组成为:10×buffer 1μl,espss基因,7μl,pet-28a质粒1.5μl,t4dna连接酶0.5μl。
6.根据权利要求2所述的猪链球菌保护性抗原espss的制备方法,其特征在于,所述步骤3)中测序鉴定步骤具体包括:连接反应产物转化到感受态细胞dh5α,转化后菌液涂在卡那霉素的lb琼脂平板上培养,挑取单菌落转接到lb液体培养基,收集菌液并提取质粒进行测序,并与目的片段进行比对分析。
7.权利要求1所述的猪链球菌保护性抗原espss基因序列表达的espss蛋白。
8.权利要求7所述的espss蛋白在对2型、7型、9型血清型猪链球菌感染提供免疫保护中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述的espss蛋白能够显著提升宿主动物的抗体ig g的表达水平。
10.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述的espss蛋白能够显著提升宿主动物血清及脏器细胞因子il-4和ifn-γ的表达水平。