一种提高大豆分枝和种子数量的方法

文档序号:34977928发布日期:2023-08-02 00:57阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种提高大豆分枝和种子数量的方法,其特征在于,提高大豆分枝和种子数量的方法包括:过crispr-cas9的转基因编辑技术,构建了具有三突变体的gmsbasn1材料观察发现是能够提高大豆分枝和种子数量;获取在大豆种子和豆荚中高表达的基因gmsbasn1;在大豆gmsbasn1基因的起始密码子后选取位点进行移码突变基因编辑,使得gmsbasn1基因不表达,从而提高大豆分枝进而实现大豆分枝数量的提高。

2.如权利要求1所述提高大豆分枝和种子数量的方法,其特征在于,大豆gmsbasn1基因包括gmsbasn1a、gmsbasn1b和gmsbasn1c,gmsbasn1a的核苷酸序列为sbasn-seq-no.1,gmsbasn1b的核苷酸序列为sbasn-seq-no.2,gmsbasn1c的核苷酸序列为sbasn-seq-no.3。

3.如权利要求1所述提高大豆分枝和种子数量的方法,其特征在于,移码突变包括插入或缺失,靶位点pam序列为seq id no.4。

4.如权利要求3所述提高大豆分枝和种子数量的方法,其特征在于,靶位点的基因编辑采用crispr/cas9基因编辑技术进行实现。

5.如权利要求4所述提高大豆分枝和种子数量的方法,其特征在于,crispr/cas9基因编辑技术包括:

6.如权利要求5所述提高大豆分枝和种子数量的方法,其特征在于,步骤(1)中构建的包含靶位点基因片段重组载体为cas9mdc123-靶位点基因片段。

7.如权利要求5所述提高大豆分枝和种子数量的方法,其特征在于,步骤(2)中的gmsbasn1基因已经成功被编辑且纯合为:gmsbasn1基因中的gmsbasn1a、gmsbasn1b和gmsbasn1c均被有效编辑。

8.如权利要求7所述提高大豆分枝和种子数量的方法,其特征在于,gmsbasn1基因均被有效编辑是指gmsbasn1基因的靶位点处出现碱基缺失或插入的情况,从而发生移码,使蛋白表达提前终止。

9.如权利要求1所述提高大豆分枝和种子数量的方法,其特征在于,提高大豆分枝和种子数量的方法包括以下步骤:

10.如权利要求1所述提高大豆分枝和种子数量的方法,其特征在于,提高大豆分枝和种子数量的方法还包括:


技术总结
本发明属于作物育种和基因工程技术领域,公开了一种提高大豆分枝和种子数量的方法,构建Cas9MDC123‑GmSBASN1表达载体;Cas9MDC123‑PAM转化农杆菌;农杆菌介导Cas9MDC123‑PAM转化大豆子叶节;筛选阳性苗并进行性状分离获取不含Cas9蛋白的突变株系GmSBASN1a/b/c;对基因编辑大豆纯合三突变株系GmSBASN1a/b/c进行表型分析。本发明获得的突变位点纯合且无外源片段插入的株系的大豆增加了大豆分枝,提高了大豆种子数量,进而提高大豆分枝数量;因其未引入外源片段,安全风险极低,为后续我国将具有优良性状的转基因大豆投入商业化种植提供了更多的可行性。

技术研发人员:寿惠霞,李杰
受保护的技术使用者:浙江大学
技术研发日:
技术公布日:2024/1/13
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