一种快速提取并检测肿瘤高表达ABCB1基因mRNA的试剂盒及其检测方法

文档序号:35201065发布日期:2023-08-22 06:16阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种快速提取并检测肿瘤高表达abcb1基因mrna的试剂盒,其特征在于,其包括纳米金属有机骨架nmof、逆转录体系和荧光定量pcr反应体系;

2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,nmof为uio-66、mil-101、zif-8或cof。

3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于所述uio-66由如下步骤制备获得:将200mg1,4-对苯二甲酸溶解在2ml的dmf中,将42mg八水合氯氧化锆溶解在6ml的dmf中,将两种溶液混合在一起,加入4ml醋酸,得到的溶液放入反应釜中120℃孵育12h,形成纳米金属有机骨架uio-66。

4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述的逆转录体系由10mmdntps1μl,40u/μlrnase酶抑制剂1μl,5u/μlm-mlv逆转录酶1μl,10×rtbuffer4μl,10μm逆转录引物引物2μl构成;

5.根据权利要求1-4任意一项所述的试剂盒的检查方法,其特征在于:

6.根据权利要求5所述方法,nmofs浓度范围是:0.25mg/ml~10mg/ml。

7.根据权利要求5所述方法,mrna逆转录引物的浓度范围是:0.1μm~10μm。

8.根据权利要求5所述方法,nmof与mrna逆转录引物的组装温度范围是:4℃~30℃。

9.根据权利要求5所述方法,nmof与mrna逆转录引物的组装时间是:2min~30min。


技术总结
本发明属于检测试剂盒,其公开了一种快速提取并检测肿瘤高表达ABCB1基因mRNA的试剂盒及其检测方法,一种用纳米金属有机骨架在血液样本中快速提取mRNA类核酸,并检测ABCB1基因mRNA表达量的试剂盒。所述试剂盒包括用于提取ABCB1mRNA的纳米金属有机骨架和用于逆转录聚合酶链式反应的基因特异性逆转录引物(GSP)与特异性qPCR引物及MGB探针;该基因编码的蛋白质P糖蛋白(P‑gp)的高水平表达可见于高度固有耐药的肿瘤,如肾癌、结肠癌和肾上腺皮质癌,被认为是肿瘤标志物之一。本发明所开发的ABCB1基因mRNA检测,为mRNA类核酸的提取提供了更为简便的手段,其检测结果的特异性和灵敏度均显著提高,有助于快速提取核酸便于常规化疗耐药肿瘤的早期诊断。

技术研发人员:王怀松,丁娅,高芙涵,宋贞
受保护的技术使用者:中国药科大学
技术研发日:
技术公布日:2024/1/14
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