一种黄芩素二聚体及其制备方法与应用

本发明涉及一种黄芩素二聚体及其制备方法与作为抗癌药的应用。

背景技术：

1、黄芩素是天然黄芩的主要成分，具有抗肿瘤、抗菌、抗炎、抗氧化、抗凝、保护心脑血管等多种药理生理活性，广泛应用于临床，但其生物利用度低，应用受限。黄芩素来源广泛，高效低毒，价格低廉，有好的发展前景。现有文献主要对黄芩素的a环进行改造，如醚化、酰化、8-甲氨基化、8-磺酰化等，在一定程度上改善了黄芩素的水溶性、脂溶性和药理活性，但对其b环骨架改造报道极少。本发明报道一种抗癌活性良好的新型黄芩素二聚体及其制备方法。

技术实现思路

1、发明的目的在于提供一种黄芩素二聚体，其具有良好的抗癌活性。

2、本发明的另一目的在于提供所述黄芩素二聚体的制备方法。

3、本发明的再一目的在于提供所述黄芩素二聚体的抗癌用途。

4、以下对本发明进行详细描述。

5、本发明提供的黄芩素二聚体，如下式所示：

6、

7、式中，x独立选自o，s；z独立选自o, nh；r独立选自，clch2ch2nh，。

8、作为优选方案，本发明的黄芩素二聚体选自如下化合物：

9、

10、

11、本发明还提供了黄芩素二聚体的制备方法，步骤如下式所示：

12、

13、式中，x独立选自o，s；z独立选自o, nh；r独立选自，clch2ch2nh，。

14、本发明的黄芩素二聚体在抗癌药物中的应用。

15、通过以下实施例进一步举例说明本发明，但应注意本发明的范围并不受这些实施例的任何限制。

16、实施方式

17、实施例

18、中间体（iii）的制备

19、将5.3g（17mmol）化合物（i）溶于100ml干燥的thf中，加入4.1g（10mmol）劳威生试剂，回流反应3h，过滤，减压蒸干，制得中间体（ii），直接用于下步反应。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.12(m,2h), 7.61(m,2h), 7.56(m,2h), 7.30(s,1h),3.98(s,3h), 3.80(s,3h),3.77(s,3h)。

20、n2氛围下，将0.49g（1.48mmol）中间体（ii）溶于50ml无水二氯甲烷中，冷至-15℃，缓慢滴加3.3g（13mmol）bbr3与15ml的二氯甲烷溶液，自然升至室温，反应12h，加入50ml水，室温搅拌1h，过滤，水洗，干燥，乙醇重结晶，得中间体（iii），收率46%。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ13.62(s,1h)，10.14(s,1h)，8.29(s,1h)，7.95(d,j=6.9hz,2h), 7.56(m,3h),7.38(s,1h),6.65(s,1h)。

21、实施例

22、中间体（iva-c）的制备

23、将1.53g（10mmol）pocl3和1.11g（11mmol）et3n溶于50ml干燥的二氯甲烷中，冷至0℃，加入1.42g（10mmol）的双（氯乙基）胺，室温反应3h，减压蒸干，制得中间体（iva），直接用于下步反应。

24、分别用氯乙基胺或乙撑胺代替双（氯乙基）胺，分别制得中间体（ivb）和（ivc）。

25、实施例

26、中间体（via-f）的制备

27、将2.59g(10mmol)中间体（iva）和4.44g（44mmol）et3n溶于100ml干燥的二氯甲烷中，冷至0℃，加入1.22g（20mmol）乙醇胺，室温反应3-4h，冷至0℃，再加入3.8g（20mmol）的对甲苯磺酰氯，室温反应4-5h，减压蒸干，纯化，制得中间体（via），收率92%。

28、按上述方法，分别用中间体（ivb）、（ivc）与乙醇胺反应, 再与对甲苯磺酰氯反应，分别制得中间体（vib）和中间体（vic）。

29、按上述方法，用乙二醇代替乙醇胺，分别与中间体（iva）、中间体（ivb）、中间体（ivc）反应， 再与对甲苯磺酰氯反应，分别制得中间体（vid）、中间体（vie）和中间体（vif）。

30、实施例

31、化合物（1-3）的制备

32、n2氛围下，将2.70g(10mmol)的黄芩素溶于100 ml甲醇中，加入6.08g(44mmol)的k2co3，加入6.16g(10mmol)的中间体（via），回流反应5-6h,冷至室温，过滤，滤液减压蒸干，硅胶柱层析纯化，制得化合物（1），收率62%。1h nmr(400mhz, dmso-d6)δ12.51(s,2h),7.87-7.78(m,4h), 7.56(m,4h),7.53(s,2h), 7.39(s,2h),6.67(m,2h), 4.34(m,8h),3.68(m,8h),3.50-3.26(m,16h),3.13(s, 4h)。

33、用中间体（vib）代替中间体（via），制得化合物（2），收率63%。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.50(s,2h),7.91(m,4h),7.57(m,4h),7.50(s,2h),7.41(s,2h),6.67(m,2h),4.34(m,8h), 3.65(m,4h),3.51-3.27(m,12h),3.12(s,6h)。

34、用中间体（vic）代替中间体（via），制得化合物（3），收率60%。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.53(s,2h),8.02(m,4h),7.55(m,4h),7.51(s,2h),7.36(s,2h), 6.66(m,2h),4.36(m,8h),3.52-3.29(m,8h),3.11(s,4h),1.62(m,8h)。

35、实施例

36、化合物（4-6）的制备

37、用中间体（iii）代替黄芩素，分别与中间体（via）、中间体（vib）、中间体（vic）反应，操作同实施例4，分别制得化合物（4）、化合物（5）和化合物（6）。

38、化合物（4）收率67%。1h nmr(400mhz, dmso-d6)δ12.29(s,2h),7.56(m,4h),7.52(s,2h),7.38(m,4h),7.33(s,2h),6.65(s,2h), 4.34(m,8h),3.68(m,8h),3.50-3.30(m,16h),3.11(s,4h)。

39、化合物（5），收率63%。1h nmr(400mhz, dmso-d6)δ12.31(s,2h),7.56(m,4h),7.53(s,2h),7.38(m,4h),7.31(s,2h),6.66(m,2h), 4.35(m,8h),3.63(m,4h),3.51-3.27(m,12h),3.12(s,6h)。

40、化合物（6），收率60%。1h nmr(400mhz, dmso-d6)δ12.35(s,2h),7.57(m,4h),7.52(s,2h),7.39(m,4h),7.30(s,2h),6.66(m,2h), 4.35(m,8h),3.50-3.26(m,8h),3.10(s,4h)，1.62（m,8h）。

41、实施例

42、化合物（7-9）的制备

43、n2氛围下，将2.70g(10mmol)的黄芩素溶于100 ml甲醇中，加入6.08g(44mmol)的k2co3，分别加入10mmol的中间体（vid）或中间体（vie）或中间体（vif），回流反应5-6h,过滤，滤液减压蒸干，硅胶柱层析纯化，分别制得化合物（7-9）。

44、化合物（7）收率56%。1h nmr(400mhz, dmso-d6)δ12.36(s,2h), 7.87-7.78(m,4h),7.57(m,4h),7.50(s,2h),7.39(s,2h),6.67(m,2h),4.35(m,16h),3.68(m, 8h),3.36(m,8h)。

45、化合物（8）收率55%。1h nmr(400mhz, dmso-d6)δ12.37(s,2h), 7.87-7.78(m,4h),7.58(m,4h),7.52(s,2h),7.37(s,2h), 6.65(m,2h),4.35(m,16h),3.68(m, 4h),3.34(m,4h),3.12(s,2h)。

46、化合物（9）收率58%。1h nmr(400mhz, dmso-d6)δ12.38(s,2h), 7.88-7.78(m,4h),7.57(m,4h),7.51(s,2h),7.30(s,2h),6.67(m,2h),4.36(m,16h),1.63(m, 8h)。

47、实施例

48、化合物（10-12）的制备

49、用中间体（iii）代替黄芩素，分别与中间体（vid）、中间体（vie）、中间体（vif）反应，操作同实施例6，分别制得化合物（10）、化合物（11）和化合物（12）。

50、化合物（10）收率59%。1h nmr(400mhz, dmso-d6)δ12.36(s,2h),7.56(m, 6h),7.38(m,6h),6.66(m,2h),4.35(m,16h),3.68(m,8h),3.34(m,8h)。

51、化合物（11）收率57%。1h nmr(400mhz, dmso-d6)δ9.38(s,2h),7.57-5.55(m,6h),7.37(m,6h),6.65(m,2h),4.35(m,16h),3.68(m, 4h),3.34(m,4h),3.12(s,2h)。

52、化合物（12）收率51%。1h nmr(400mhz, dmso-d6)δ9.41(s,2h),7.57-7.56(m,6h),7.39(m,6h),6.67(m,2h),4.36(m,16h),1.62(m, 8h)。

53、实施例

54、本发明典型化合物的抗肿瘤活性实验及结果

55、将bel-7402细胞株、hela细胞株、ht-29细胞株、mcf-7细胞株和hepg-2细胞株（5×104cell / ml）分别接种于96孔培养板中（100ul/孔），置于37℃、5% co2温箱内培养4h，加入含系列递比稀释浓度的黄芩素二聚体及对照药物顺铂、黄芩素。置于37℃、5% co2的饱和湿度的温箱内培养72小时。加入5mg/ml的mtt（20ul/孔），混匀后于37℃、5% co2条件下孵育4小时。加dmso（150ul/孔）溶解，用酶标仪测定吸光度（od值）。计算黄芩素二聚体对细胞株的ic50值。

56、