技术特征:1.大熊猫精液冷冻保护添加剂外泌体的制备方法,其特征在于:
2.根据权利要求1所述的大熊猫精液冷冻保护添加剂外泌体的制备方法,其特征在于:s1所述的完全培养基为低糖dmem+10%fbs+10ng/ml bfgf+1%青霉素/链霉素。
3.根据权利要求1所述的大熊猫精液冷冻保护添加剂外泌体的制备方法,其特征在于:s4中所述去除较大的囊泡是采用4℃,10000g的离心泵,离心45min去除较大的囊泡,所述过滤是采用0.45μm滤膜过滤。
4.根据权利要求1所述的大熊猫精液冷冻保护添加剂外泌体的制备方法,其特征在于:精液冷冻方法中所述的充分预冷步骤如下:
技术总结本发明公开了大熊猫精液冷冻保护添加剂外泌体的制备方法,用于大熊猫精液的添加剂,涉及一种外泌体的制备技术领域,包括外泌体的制备、外泌体浓度筛选和精液冷冻方法,本发明所使用的外泌体是由脐带间充质干细胞培养液分离得到,不用额外采集大熊猫精液提取外泌体,对于大熊猫更加适用,使用的外泌体浓度为50ug/mL,为大熊猫精液冷冻保护的最佳浓度,本发明所用到的外泌体,其获取方式为非损伤性的,不会对大熊猫造成伤害,更加符合动物福利的要求,研究的用于大熊猫精液的冷冻保存,可实现大熊猫遗传物质的高效保存。
技术研发人员:陈佳松,刘玉良,王东辉,安俊辉,李媛,李红艳,侯蓉,张名岳,陈依姣
受保护的技术使用者:成都大熊猫繁育研究基地
技术研发日:技术公布日:2024/3/24