本发明涉及生物酶解,尤其涉及一种高活性低粘度的海参肽及其双向酶解制备方法和应用。
背景技术:
1、海参是我国传统滋补佳品,随着我国海参养殖业的繁盛,海参深加工的要求逐渐提高。海参中胶原蛋白富含多种非必须氨基酸,具有抗疲劳、抗氧化、增强免疫力、降血脂、抗血栓等生物活性。海参肽的生物活性与分子量大小密切相关,分子量较小抗氧化活性较好。当海参经过酶解得到2-10氨基酸组成的海参肽,具有分子量小、粘度小、溶解性好、稳定性高、生物利用度高等优点。
2、酶解是海参肽主要的加工形式,可显著提高海参肽的生物利用度。市场上利用酶解技术对海参进行深加工,形成一系列的海参延伸产品,但是海参酶解液通常存在酶解时间长、酶解不彻底、酶解液粘度高,会严重影响产品后期操作工艺,如脱色、浓缩、过滤等,也会严重影响产品后期稳定性,带来一系列问题。海参体壁中除了含有高活性的蛋白,还含有大量的岩藻聚糖,岩藻聚糖会导致海参酶解液粘度高,影响蛋白的水解效率,使得海参肽分子量较大,因此加工过程中糖组分在去除是否彻底,也严重影响了海参肽的品质。
3、传统糖酶与蛋白酶的协同作用,多采用加入单一糖酶,加入方式多采用分步加入,虽然解决了糖组分的干扰,但增加了操作步骤,在提高海参肽提取率的同时,使得操作繁琐,加工工艺更加复杂。本发明采用的是混合糖酶与蛋白酶同步酶解法,既提高了蛋白酶解速率,又避免了增加操作工艺的复杂,解决了生产中海参肽制备的实际问题。
技术实现思路
1、本发明提供了一种高活性低粘度的海参肽及其双向酶解制备方法和应用。本发明解决了海参抗氧化活性肽制备过程中粘度高的技术问题,并制备得到了抗氧化活性高、提取率高、品质好的海参肽。
2、为实现上述发明目的,本发明采用以下技术方案予以实现:
3、本发明提供了一种高活性低粘度的海参肽的双向酶解制备方法,其包括以下步骤:
4、(1)取新鲜海参,经清洗、切块、均质后得到海参匀浆;
5、(2)调节所述海参匀浆的ph,加入蛋白酶和混合糖酶,酶解后灭酶,得到海参酶解液;
6、(3)向所述海参酶解液中加入活性炭进行脱色,超滤后得到海参脱色液;
7、(4)将所述海参脱色液通过有机膜系统分离纯化,并浓缩,收集浓缩液干燥,得到海参肽。
8、进一步的,所述步骤(2)中蛋白酶为风味蛋白酶和菠萝蛋白酶中的至少一种。
9、进一步的,所述步骤(2)中蛋白酶的固形物含量为3000-8000u/g。
10、进一步的,所述步骤(2)中混合糖酶是纤维素酶、果胶酶、β葡聚糖酶中的两种组成的,其混合质量比为1:0-5:1。
11、进一步的,所述步骤(2)中混合糖酶是由纤维素酶与果胶酶以1:2~1:5的质量比组成的。
12、进一步的,所述步骤(2)中混合糖酶的添加量为海参匀浆体积的0.02~0.15%。
13、进一步的,所述步骤(2)中调节海参匀浆的ph至4-8;所述酶解温度为35~60℃,酶解时间为2-6h。
14、进一步的,所述步骤(3)中活性炭的添加量为海参酶解液体积的0.5~1.5%。
15、进一步的,所述步骤(3)中脱色温度为50~70℃,脱色时间为20~60min。
16、本发明还提供了所述的双向酶解制备方法制备得到的海参肽,其总蛋白含量大于90%,分子量为524da-680 da。
17、本发明还提供了所述的海参肽在制备修护皮肤屏障损伤和/或保湿的护肤品和/或化妆品中的应用。
18、本发明与现有技术相比,具有以下优点和有益效果:
19、本发明提供了一种向海参匀浆中加入混合糖酶与蛋白酶联合应用,同步酶解的方法来制备海参肽,在海参多糖被降解的同时,海参中的蛋白同步被降解,海参体壁释放大分子糖的同时,大分子蛋白不断被分解,释放出活性肽,不仅提高活性肽的释放速率,提高了酶解液澄清度,降低酶解液粘度,经过后期脱色及分级膜系统过滤,可得到澄清透明的海参抗氧化肽溶液,酶解液经纯化分级,得到的海参肽生物活性高、粘度小、品质好且制备简单。
20、另外,本发明经实验证实,经同步酶解制得的海参肽无皮肤刺激性,且可以通过上调3d皮肤细胞flg及aqp基因的表达量,起到保湿以及皮肤修护的功效,进而能够用于化妆品、护肤品的制备,具有广泛的应用价值。
1.一种高活性低粘度的海参肽的双向酶解制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的双向酶解制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中蛋白酶为风味蛋白酶和菠萝蛋白酶中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的双向酶解制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中蛋白酶的固形物含量为3000-8000u/g。
4.根据权利要求1所述的双向酶解制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中混合糖酶是纤维素酶、果胶酶、β葡聚糖酶中的两种组成的,其混合质量比为1:0-5:1。
5.根据权利要求1所述的双向酶解制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中混合糖酶的添加量为海参匀浆体积的0.02~0.15%。
6.根据权利要求1所述的双向酶解制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中调节海参匀浆的ph至4-8;所述酶解温度为35~60℃,酶解时间为2~6h。
7.根据权利要求1所述的双向酶解制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中活性炭的添加量为海参酶解液体积的0.5~1.5%。
8.根据权利要求1所述的双向酶解制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中脱色温度为50~70℃,脱色时间为20~60min。
9.权利要求1-8任一项所述的双向酶解制备方法制备得到的海参肽,其特征在于,所述海参肽的总蛋白含量大于90%,分子量为524da-680 da。
10.权利要求9所述的海参肽在制备修护皮肤屏障损伤和/或保湿的护肤品和/或化妆品中的应用。