一种含有聚乙二醇基的丹参酮iia衍生物及其制备和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及丹参酮IIA的衍生物及其在制药中的应用，属于医药技术领域。
【背景技术】
[0002] 丹参为唇形科植物丹参的根和茎，具有祛瘀止痛，活血通经、清心除烦的功效，临 床上主要用于心脑血管疾病。丹参的化学成分分为水溶性酚酸和脂溶性二萜醌。丹参酮IIA 属于丹参的脂溶性成分之一，其药理作用广泛，临床可用于多种疾病的治疗。但是，丹参酮 IIA不溶于水，在体内的生物利用度低，一直以来没有一种直接以丹参酮IIA做成的药物制 剂用于临床，限制了它的应用。
[0003] 聚乙二醇具有良好的水溶性，是常用的药用辅料。本发明用无毒无害的聚乙二醇 与丹参酮IIA进行拼接，增强了丹参酮IIA的水溶性，提高丹参酮IIA的生物利用度。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种含有聚乙二醇基的丹参酮IIA衍生物，其具有作用于 心脑血管疾病的作用。
[0005] 本发明的另一目的在于提供上述含有聚乙二醇基的丹参酮IIA衍生物的制备方 法。
[0006] 本发明的再一目的在于提供上述含有聚乙二醇基的丹参酮IIA衍生物的用途。
[0007] 以下对本发明进行详细描述。
[0008] 本发明提供以下式（I)和式（II)的含有聚乙二醇基的丹参酮IIA衍生物，结构如 下式所示：
式中，n为0-15的整数，优选0-5的整数。
[0009] 本发明通式（I)化合物包括其立体异构体和互变异构体。
[0010] 本发明还提供了上述式（I)和式（II)化合物的制备方法，步骤包括：
本发明的含有聚乙二醇基的丹参酮IIA衍生物有显著的治疗心脑血管疾病作用和抗 癌活性，还具有抗氧化、抗炎症、抗过敏、抗真菌及保肝护肝等的作用。
[0011] 通过以下实施例进一步举例说明本发明，但应注意本发明的范围并不受这些实施 例的任何限制。
【具体实施方式】
[0012] 实施例1 乙二醇基双丹参酮IIA(1)的制备 化合物（1)的结构如下所示：
丹参酮IIA(2. 94g，10mmol)溶于15mL重蒸的DMF中，冰浴冷却后，滴加P0C13(2. 28g，15mmol),撤去冰浴，室温反应过夜，反应完毕，倒入30mL冰水中，用乙酸乙 酯15mLx3萃取，用水15mLx2、NaHC03溶液15mLx2、饱和食盐水15mLx2洗涤，无水Na2S04 干燥，过滤，浓缩，硅胶柱层析纯化，得16-甲酰基丹参酮IIA，收率45%。
[0013] 16-甲酰基丹参酮IIA(3. 22g，10mmol)溶于25mL甲醇与12mL二氯甲烷混合溶剂 中，冰浴冷却下，加入NaBH4(0. 76g，20mmol)，反应20分钟，慢慢加入12mL水，整除甲醇和 二氯甲烷，水层用乙酸乙酯10mLx3萃取，无水Na2S04干燥，过滤，浓缩，硅胶柱层析纯化，得 16-羟甲基丹参酮IIA，收率85%。
[0014] 16-羟甲基丹参酮IIA(3. 24g, 10mmol)溶于20mL无水二氯甲烷中，加入乙二醇 (0. 37g，6mmol)，然后在冰盐浴冷却下，加入5滴BF3 ?Et2 0,片刻后撤去冰浴，室温搅拌 24h。用薄板色谱检测反应进程。待反应基本完成，反应液依次用15mLx2饱和碳酸氢 钠、15mLx2水、15mLx2饱和氯化钠溶液洗涤至中性，无水Na2S04干燥，过滤，减压蒸去溶 剂，残余油状物在硅胶柱上纯化，得到化合物（1)，产率57%。4NMR(400MHz，⑶Cl3)S: 7.60(d，/=8.1Hz，2H)，7.46 (d，方8.1Hz，2H)，5.07 (s，4H), 3.68 (t, /= 6.2Hz，4H)， 3. 05 (m，4H)，2. 20 (s，6H)，1. 77-1. 79 (m，4H)，1. 63-1. 66 (m，4H)，1. 29 (s，12H)。
[0015] 实施例2 一缩二乙二醇基双丹参酮IIA(2)的制备 化合物（2)的结构如下所示：
16-羟甲基丹参酮IIA(3. 24g，10mmol)溶于20mL无水二氯甲烷中，加入一 缩二乙二醇（0. 63g，6mmol)，其他操作同实施例1，得到化合物（2)，产率43%。 :HNMR(400MHz,CDC13) 8 ：7. 60(d, /= 8.1Hz, 2H) , 7. 46 (d, /=8. 1Hz, 2H), 5. 07(s, 4H), 3. 62(t, /=6. 2Hz, 8H), 3. 05 (m, 4H), 2. 20 (s, 6H), 1. 77-1. 79 (m, 4H), 1. 63-1. 66(m, 4H), 1. 29(s, 12H)。
[0016] 实施例3 二缩三乙二醇基双丹参酮IIA(3)的制备 化合物（3)的结构如下所示：
16-羟甲基丹参酮IIA(3. 24g, 10mmol)溶于20mL无水二氯甲烷中，加入二 缩三乙二醇（0.90g，6mmol)，其他操作同实施例1，得到化合物（3)，产率40%。4 NMR(400MHz，CDC13)S:7.60(d，/=8.1Hz，2H)，7.46(d，方8.1Hz，2H)，5.07(s，4H)， 3.61(t，/= 6. 2Hz，12H), 3.05 (m，4H), 2.20 (s，6H), 1.77-1. 79 (m，4H)， 1. 63-1. 66(m，4H)，1. 29(s，12H)。
[0017] 实施例4 三缩四乙二醇基双丹参酮IIA(4)的制备 化合物（4)的结构如下所示：
16-羟甲基丹参酮IIA(3. 24g，10mmol)溶于20mL无水二氯甲烷中，加入三 缩四乙二醇（1.44g，7. 5mmol)，其他操作同实施例1，得到化合物（4)，产率31%。 :HNMR(400MHz,CDC13) 8 ：7. 60(d, /= 8.1Hz, 2H) , 7. 46 (d, / = 8.lHz,2H), 5. 07(s, 4H), 3. 62(t, / = 6. 2Hz, 16H), 3. 04(m, 4H), 2. 20 (s, 6H), 1. 77-1. 79 (m, 4H), 1. 63-1. 66(m, 4H), 1. 29(s, 12H)。
[0018] 实施例5 一缩二乙二醇基丹参酮IIA(5)的制备 化合物（5)的结构如下所示：
16-轻甲基丹参酮IIA(3. 24g, 10mmol)溶于20mL无水二氯甲烧中，加入一缩二乙 二醇（1.06g，10mmol)，其他操作同实施例1，得到化合物（5)，产率56%。虫NMR(400 MHz，CDCl3)S:7.60(d，/=8.1Hz，lH)，7.46(d，^8.1Hz，lH)，5.07(s，2H)，3.79(t， /=6.2Hz，2H)，3.61(t, /= 6. 2Hz，6H), 3.04 (m, 2H), 2.20 (s，3H), 2.00 (br，lH)， 1. 77-1. 79 (m，2H)，1. 63-1. 66 (m，2H)，1. 29 (s，6H)。
[0019] 实施例6 二缩三乙二醇基丹参酮IIA(6)的制备 化合物（6)的结构如下所示：
16-羟甲基丹参酮IIA(3. 24g，10mmol)溶于20mL无水二氯甲烷中，加入二缩三乙 二醇（1.50g，10mmol)，其他操作同实施例1，得到化合物（6)，产率46%。巾NMR(400 MHz，CDC13)S:7.60(d，/=8.1Hz，lH)，7.46(d，方8.1Hz，lH)，5.07(s，2H), 3.77(t， /=6.2Hz，2H)，3.61(t, /= 6. 2Hz，8H), 3.04 (m, 2H), 2.20 (s，3H), 2.00 (br，lH)， 1. 77-1. 79 (m，2H)，1. 63-1. 66 (m，2H)，1. 29 (s，6H)。
[0020] 实施例7 含有聚乙二醇基的丹参酮IIA衍生物对糖尿病大鼠的治疗研究 1.材料 1. 1实验动物 SPF级SD大鼠，由东南大学医学院动物实验中心提供。
[0021] 1.2主要试剂 丹参酮IIA磺酸钠注射液(诺新康)，上海第一生化药业有限公司； 甘油三酯测定试剂盒，浙江东鸥生物工程有限公司； 总胆固醇测定试剂盒，上海荣盛生物技术有限公司； 链脲佐菌素（STZ)，Sigma公司。
[0022] 2实验方法 2. 1糖尿病大鼠模型的建立 正常SPF级雄性SD大鼠86只，体重200-250g，随机分为正常对照组（C0N组，6只）和 实验组（DM组，80只）。禁食18小时后，实验组腹腔注射1%STZ(60mg*Kg3冰冷柠檬酸缓 冲液（0.lmol?L\pH4. 2,诱导糖尿病模型，正常对照组注射等量的柠檬酸缓冲液。72小 时后测定空腹尾静脉血糖>12mmol?L\持续三天，确认糖尿病模型建立成功，并给予实验 组尚糖尚脂饮食。
[0023] 2. 2丹参酮IIA治疗组大鼠模型建立 将建模成功后的实验组随机分为糖尿病对照组（20只）和丹参酮IIA衍生物治疗组 (TSND组，60只），自建模成功后第二天起，丹参酮IIA治疗组大鼠每天分别肌肉注射丹参酮 IIA衍生物水溶液（lmg?Kg:)，其它两组注射等量聚乙二醇水溶液。
[0024] 2. 3大鼠血胆固醇、甘油三酯含量的测定 大鼠断尾，取尾静脉血2mL，肝素抗凝。3500rpm/min离心10分钟，得到上层透亮血清lmL，按照试剂盒说明书测定血胆固醇、甘油三酯含量。
[0025] 3 结果 3. 1大鼠实验30天后体重及血糖变化 大鼠实验30天后体重及血糖变化如表1所示。正常对照组，自由饮食30天后，体重增 大、大鼠毛色光洁柔顺。糖尿病对照组，自由饮食30天后，体重较实验前明显减轻，大鼠饮 水量及尿量均明显增加。丹参酮IIA衍生物治疗组，自由饮食30天后，体重和血糖较实验 前均无明显变化。说明，丹参酮IIA衍生物延缓了糖尿病大鼠的病程进展。
[0026]
3.2大鼠实验30天后血胆固醇及甘油三酯含量变化 大鼠实验30天后，血胆固醇及甘油三酯含量变化如表2所示。正常饲养30天后，DM3Qd 组大鼠与C0N3M组相比，血胆固醇含量明显增高（P〈0. 05)，而经过丹参酮IIA衍生物治疗30 天后，大鼠血胆固醇含量与DM3Qd组相比，明显下降。DM3Qd组大鼠与CON3Qd组相比，血甘油三 酯含量明显增高（P〈〇. 05)，而经过丹参酮IIA衍生物治疗30天后，大鼠血甘油三酯含量与 DM3(]d组相比，明显下降。
[0027]
【主权项】
1. 一种含有聚乙二醇基的丹参酮IIA衍生物，包括其立体异构体和互变异构体，如式 (I)和式（II)所示：式中，n为0-15的整数。2. 根据权利1所述式（I)和式（II)的含有聚乙二醇基的丹参酮IIA衍生物，其特征在 于，n为0-15的整数，更优选0-5的整数。3. 根据权利1所述的式（I)和式（II)的含有聚乙二醇基的丹参酮IIA衍生物，其特征 在于：所述式（I)和式（II)化合物的具体实例包括： 乙二醇基双丹参酮IIA(1); 一缩二乙二醇基双丹参酮IIA(2); 二缩三乙二醇基双丹参酮IIA(3); 三缩四乙二醇基双丹参酮IIA(4); 一缩二乙二醇基丹参酮IIA(5); 二缩三乙二醇基丹参酮IIA(6)。4. 根据权利要求1所述含有聚乙二醇基的丹参酮IIA衍生物，其制备方法包括以下步 骤：式中，n为0-150的整数。5.根据权利1所述的式（I)和式（II)的含有聚乙二醇基的丹参酮IIA衍生物，其在治 疗心脑血管疾病中的应用。
【专利摘要】本发明涉及一种含有聚乙二醇基的丹参酮IIA衍生物及其制备方法和应用。本发明的有益效果在于，提供了一种新的丹参酮衍生物，其可用于心脑血管疾病的治疗；本发明的含有聚乙二醇基的丹参酮IIA衍生物具备较好的水溶性，有利于进入血脑屏障，增加疗效，大大提高丹参酮IIA的生物利用度。
【IPC分类】C07J73/00, A61P9/00
【公开号】CN105037484
【申请号】CN201510344165
【发明人】张宝华, 史兰香, 刘斯婕, 郭瑞霞
【申请人】石家庄学院
【公开日】2015年11月11日
【申请日】2015年6月22日