046] 3. 1.固体培养基配方：
[0047] 1~4毫米大小的栓皮栋干木屑颗粒80%、教皮18%、薦糖0.8%、石膏粉1.2%， 充分混匀；含水量47%。用高压聚丙締塑料滤菌透气袋盛装，每袋装料25kg，扎紧袋口，置 于高压灭菌锅中，0. 15兆帕灭菌2小时，冷却备用。15X28cm高压聚丙締塑料滤菌透气袋 适量，用大的高压聚丙締滤菌透气袋盛装后扎紧，如上法高压灭菌后，冷却备用。
[0048] 3. 2.接种：准备一间消毒过的房间，将灭菌后的培养基及小料袋、拌料机、装袋 机，扎口机等放进接种间提前消毒；进行无菌操作；耳友菌和血耳的液体种按1. 2:1的比例 混合后与培养基边揽拌边混合，控制培养基含水量在52%;装袋；扎口。
[0049] 3. 3.将接种过混合液体菌种的培养基袋移送至23~25°C的培养室，避光培养，28 天菌丝即可长满。
[0050] 实施例3
[0051]1)、采集优良野生血耳标本，分别在无菌条件下，于血耳耳根着生处及子实体处分 离得到耳友菌与血耳担抱子菌种，24°C，进行纯化与初步培养，得到两种菌种；
[0052]上述过程所用的分离耳友菌的培养基为常规PDA培养基；血耳分离培养基为：± 豆200克、耳友菌培养基100克、葡萄糖20克、硫酸儀I克、憐酸二氨钟I克、琼脂20克、水 1000毫升，常规制备，分装于试管及250毫升=角瓶适量，灭菌备用；液体种初级培养用培 养基为：教皮微粉3克、豆巧微粉3克、玉米微粉2克、葡萄糖20克、硫酸儀1克、憐酸二氨 钟1克、水1000毫升，混均分装于1000毫升=角瓶，每瓶分装500毫升，灭菌备用。
[0053] 2)、扩大培养阶段。
[0054] 将耳友菌与血耳抱子菌种用700升的气升式发酵罐，分别进行加水、投料、灭菌、 冷却、接种、24°C下保压0. 03兆帕充气发酵培养。耳友菌扩大培养的时间为6天，血耳芽抱 扩大培养的时间为4天。 阳化5] 其中扩大培养所用液体培养基配方为：教皮微粉0. 5份、豆巧微粉0. 5份、玉米微 粉0. 3份、葡萄糖2. 5份、硫酸儀0. 15份、憐酸二氨钟0. 15份、二甲基硅油0.2份，水102 份。
[0056] 3)、混合固体菌种培养阶段。
[0057] 3. 1.固体培养基配方： 阳05引 1~4毫米大小的栓皮栋干木屑颗粒76%、教皮22%、薦糖1.2%、石膏粉0.8% ; 含水量53%。常规方法揽拌均匀后用高压聚丙締塑料滤菌透气袋盛装，每袋装料25kg，扎 紧袋口，置于高压灭菌锅中高压灭菌。
[0059] 3.2.接种：准备一间消毒过的房间。将灭菌后的培养基及小料袋、拌料机、装袋 机，扎口机等放进接种间提前消毒；进行无菌操作；血耳菌和耳友菌的液体种按1. 3:1的比 例混合后与培养基边揽拌边混合，控制培养基含水量在55% ;装袋；扎口。
[0060] 3. 3.将接种过混合液体菌种的培养基袋移送至23°C~25°C的培养室，避光培养， 28天菌丝即可长满。 W61] 实施例4
[0062]1)、采集优良野生血耳标本，分别在无菌条件下，于血耳耳根着生处及子实体处分 离得到耳友菌与血耳担抱子菌种，25°C，进行纯化与初步培养；将长满试管斜面培养基的血 耳耳友菌菌丝适量接入S角瓶液体培养基中，25 °C，170转/min摇床培养；48小时后挑取试 管中提纯后的血耳芽抱团适量于S角瓶液体培养基中，25°C，170转/min摇床培养；耳友菌 第3天取样菌检，血耳芽抱2天后菌检，无其它微生物污染即可用于扩大培养。
[0063] 上述过程中，耳友菌所用培养基为PDA培养基；血耳分离培养基配方为：马铃馨 200克、耳友菌培养基100克、葡萄糖20克、硫酸儀1克、憐酸二氨钟1克、琼脂20克、水 1000毫升；液体种初级培养用培养基为：教皮微粉3克、豆巧微粉3克、玉米微粉2克、葡萄 糖20克、硫酸儀1克、憐酸二氨钟1克、水1000毫升
[0064] 2)、扩大培养阶段。 阳0化]将耳友菌与血耳芽抱用700升的气升式发酵罐，分别进行加水、投料、灭菌、冷却、 接种、25°C下保压0. 03兆帕充气发酵培养。耳友菌扩大培养的时间为6天，血耳芽抱扩大 培养的时间为5天。
[0066] 教皮微粉0. 4份、豆巧微粉0. 4份、玉米微粉0. 3份、葡萄糖2份、硫酸儀0. 13份、 憐酸二氨钟0. 13份、聚酸型消泡剂0. 15份，水101份。
[0067] 3)、混合液体种接种木屑教皮培养基的固体血耳种培养阶段。
[0068] 3. 1.培养基配方： W例I~4毫米大小的栓皮栋干木屑颗粒77%、教皮21 %、薦糖I.I%、石膏粉0.9% ; 含水量49%。常规方法揽拌均匀后用高压聚丙締塑料滤菌透气袋盛装，每袋装料25kg，扎 紧袋口，置于高压灭菌锅中高压灭菌。
[0070] 3. 2.接种：准备一间消毒过的房间。将灭菌后的培养基及小料袋、拌料机、装袋 机，扎口机等放进接种间提前消毒；进行无菌操作；耳友菌和血耳的液体种按1.1:1的比例 混合后与培养基边揽拌边混合，控制培养基含水量在53% ;装袋；扎口。
[00川 3. 3.将接种过混合液体菌种的培养基袋移送至24°C的培养室，避光培养，28天菌 丝即可长满。 阳0巧实施例5
[0073] 培养血耳混合菌种的方法，其工艺流程包括如下步骤：
[0074] 1).分离、纯化及初步培养阶段。
[00巧]1.1.采集优良野生血耳标本。要求：朵大，开片好，干耳色黑、鲜耳红褐色，置于水 中溶液变深红如血，根小，无病虫害。将着生的木料与血耳子实体一起取回并对其表面清洁 处理后备用。
[0076] 1. 2.培养基准备：
[0077]制备PDA加富试管斜面分离培养基冯铃馨200克、葡萄糖20克、硫酸儀1克、憐 酸二氨钟1克、琼脂20克、水1000毫升，常规配置，分装于试管，灭菌备用；
[007引制备血耳分离培养基：±豆200克、耳友菌培养基100克、葡萄糖20克、硫酸儀1 克、憐酸二氨钟1克、琼脂20克、水1000毫升，分装于试管及250毫升=角瓶适量，灭菌备 用。
[0079]制备液体种培养基：教皮微粉3克、豆巧微粉3克、玉米微粉2克、葡萄糖20克、 硫酸儀1克、憐酸二氨钟1克、水1000毫升，混均分装于1000毫升=角瓶，每瓶分装500毫 升，灭菌备用。
[0080] 1. 3.菌种分离与纯化：
[0081] 在超净工作台中作业。于耳根着生处进行基内分离得到血耳"耳友菌"，接种于PDA 培养基中，多次提纯后转管，25°C培养备用。
[0082] 在超净工作台中作业。于血耳子实体处取材，置于盛有血耳分离培养基的=角瓶 中获取血耳抱子，经提纯，转接试管斜面分离培养基，25 °C培养备用。
[0083] 1. 4.常规接种。将长满斜面的耳友菌挑取适量接种于液体=角瓶培养基；耳友菌 接种48小时后，挑取试管中血耳芽抱团于另一个液体=角瓶培养基；置于25°C下，170转/ min培养。耳友菌培养3天取样无菌操作菌检，若无杂菌污染第5天使用，血耳芽抱菌种48 小时后无菌操作取样菌检，若无污染24小时后使用。
[0084] 2)、扩大培养阶段。
[0085] 将耳友菌与血耳芽抱用700升的气升式发酵罐，分别进行加水、投料、灭菌、冷却、 接种，25°C下保压0. 03兆帕充气发酵培养。时间安排上，血耳芽抱培养接种迟于耳友菌48 小时。耳友菌液体种72小时后取样菌检，若无污染第5天使用；血耳芽抱液体种48小时后 取样菌检，若无污染第3天使用。
[0086] 其中扩大培养所用液体培养基配方为：教皮微粉0. 3份、豆巧微粉0. 3份、玉米