含穿心莲萃取物或穿心莲内酯或其盐的皮肤状态改善用合成物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及含穿心莲（Andrographispaniculata)萃取物或穿心莲内酯 (Andrographolide)或其盐的皮肤细胞增殖用合成物，及还所述合成物的皮肤状态改善用 合成物。
【背景技术】
[0002] 皮肤老化首先显现在皮肤。为了延迟或预防这种现象，已在化妆品领域做了很多 相关研究。皮肤老化通常从25岁开始发生，40岁前后进入真正的皮肤老化期。皮肤老化 的典型现象为皮脂分泌量减少、皮肤发干，细胞再生迟缓，老化角质积累、皮肤变得粗糙。另 外，支撑表皮的胶原纤维（collagen)合成量减少，导致弹性蛋白（elastin:弹性纤维）变 性，产生皱纹。同时皮肤颜色会发生变化，出现痣、斑纹等色素沉积症状，表皮变薄、皮肤保 护功能下降。之外，随着皮肤的厚度变小，皮肤的屏障作用（BarrierEffect)下降，引发更 多的皮肤问题。
[0003] 皮肤老化相关研究主要涉及让皮肤免受皮肤老化主要成因紫外线与活性氧伤害 的材料，皮肤皱纹改善材料，皮肤弹性增进材料，皮肤保湿强化材料，抑制生痣的材料。
[0004] 皮肤发生老化后，真皮会发生显著的变化，70岁以后出现的真皮萎缩是典型的老 化现象。真皮的变化是起因于纤维原细胞（fibroblast)的数字减少和它们的能力下降致 使细胞外基质中的大分子量物质发生变化。其具体变化有胶原纤维束（collagenbundle) 的分离，黏多醣（mucopolysaccharide)合成减少，胶原纤维与弹力纤维（elastin)数量及 直径减少，胶原纤维与弹力纤维降解及血管的膨胀等。通常，皮肤的水分含量，胶原纤维含 量及对外部环境的免疫作用能力等各种综合因素中，对皱纹的形成影响最大的指标是纤维 母细胞活化时的纤维母细胞增殖及由纤维母细胞合成的胶原纤维弹性纤维等指标。目前为 止，穿心莲萃取物与穿心莲内酯对纤维原细胞的影响，还从未有人揭示过。
[0005] 皮肤上，干细胞所处位置大体上有三个部位。第一是存在于称为毛囊和毛囊之间 的表皮（interfollicular epidermis:滤泡间上皮）的表皮基底细胞层（the basal cell layer of epidermis)。第二是毛囊（hair follicle)。存在于该部位的干细胞是产生细胞 分化之前的细胞，在细胞表皮的再生方面，起最重要的作用。第三是存在于皮下脂肪层的脂 肪干细胞（Adipose Derived Stem Cells)。存在于皮肤的干细胞与皮肤健康息息相关，起 综合调节作用，可以说是与皮肤健康关系最密切的重要细胞群。干细胞在存活的过程中，进 行不断的细胞分裂，生成各种细胞活化物质，活化周围细胞，让细胞免受有害环境的影响， 抑制细胞的老化，可以再生或修复有问题的部位。但是干细胞同样是细胞群，随着年龄的增 长其功能会逐渐丧失。即，皮肤的干细胞也随着老化，会逐渐丧失其活性，细胞分裂能力下 降，逐渐处于非活化状态，会产生老化引起的皱纹，黑斑，伤口愈合缓慢，修复缓慢等各种问 题。如果活化存在于皮肤的干细胞，则应该能够避免干细胞的老化，恢复其活性（Journal of Dermatological Science (2004)35, 113-123)〇
[0006] 干细胞化妆品是利用来自人体或动物的细胞或其副产物制造的产品。但其安全性 受到人们的质疑，目前干细胞材料开发方式转变成开发与干细胞培养液中有益皮肤成分相 同的成分，或者探索活化干细胞的成分。
[0007] 与此相关，韩国公开专利第10-2010-0042708号公开一种作为有效成分含阿 曼托黄素（Amentoflavone)，通过提高α6整合素（a6integrin)的表达，促进皮肤表 皮干细胞（keratinocytestemcell，KSC)的增殖的皮肤再生促进用合成物，而韩国公 开专利第10-2010-0018278号公开一种通过增加人体表皮角化细胞干细胞（Epidermal KeratinocyteStemCells,KSC)数量，作为有效成分含紫花前胡素（Decursin)的药学合成 物。
[0008] 但，目前为止，穿心莲萃取物及穿心莲内酯的有关干细胞增殖及皮肤再生的功效 还未曾得到揭示。
[0009] 本发明的发明人以天然材料为对象，探查干细胞活化及皮肤细胞活化功效的结 果，发现穿心莲萃取物及从其分离的穿心莲内酯具有最优秀的活性功效，完成了本发明。
【发明内容】
[0010] 发明目的
[0011] 因此，本发明的目的在于提供一种作为有效成分含穿心莲萃取物或穿心莲内酯或 其盐的皮肤干细胞性能增进用合成物或皮肤细胞增殖用合成物。
[0012] 本发明的另一目的在于提供一种含所述合成物的皮肤状态改善用合成物。
[0013] 本发明的另一目的在于提供一种所述皮肤状态改善用合成物的在药剂、化妆材 料、及/或食品方面的用途。
[0014] 本发明的另一目的在于提供一种向个体投入所述干细胞性能增进用合成物或皮 肤细胞增殖用合成物，提高个体干细胞或皮肤细胞中的某一种以上细胞活性的方法及其用 途。
[0015] 本发明的另一目的在于提供一种向个体投入所述干细胞性能增进用合成物或皮 肤细胞增殖用合成物，改善个体皮肤状态的方法及其用途。
[0016] 本发明的另一目的在于提供一种向个体投入所述皮肤状态改善用合成物，改善个 体皮肤状态的方法及其用途。
[0017] 技术方案
[0018] 本发明提供一种作为有效成分含选自穿心莲萃取物或穿心莲内酯或穿心莲盐的 中的某一种以上物质的脂肪干细胞或表皮干细胞的干细胞性能增进用合成物。
[0019]本发明中，穿心莲（Andrographispaniculata)是爵床科（Acanthaceae)的单年 生草木，是在印度全域、特别是在南部的野外或树丛的阴凉、水分充足的地方生长的植物。 植物高为0. 3-1. 0m，茎呈深绿色、粗2-6mm，叶长8cm、宽2. 5cm，呈柳叶状，叶尖尖，花色呈白 色或淡粉红色，有紫色斑纹。穿心莲植物的所有部位味道均极苦，叫做Maha_tita(摩诃泰 坦）（Kingofbitters(比特王）），虽然远矮于印度楝（Neem)，但形状很像，而且同样很苦， 又叫做bhui-neem。据知穿心莲有抗癌、消炎、抗菌、抗病毒的作用，作为民间药材用于免疫 证、化痰、解热等。
[0020] 本发明的穿心莲萃取物是对所述穿心莲的全草、叶子、根、茎、花等，以通常的方法 进行萃取，或者从此分离的具有干细胞性能增进及皮肤细胞增殖活性，可改善皮肤状态的 物质。另外，所述萃取物不仅包括以通常方法从传勤练萃取物萃取的萃取液，还包括利用其 干燥粉末或利用此制剂化的所有形态的物质。
[0021] 本发明的穿心莲萃取物可以通过水或有机溶剂萃取，所萃取的液体，可以以液体 形式使用或，通过浓缩及/或干燥使用。所述有机溶剂是甲醇（Methanol)、乙醇（Ethanol)、 异丙醇（isopropanol)、丁醇（butanol)、乙稀（ethylene)、丙酮（acetone)、己烧（hexane)、 酿（ether)、氯仿（chloroform)、乙酸乙酯（ethylacetate)、乙酸丁酯（Butylacetate)、 二氯甲烧（dichloromethane)、N,N-二甲基甲酰胺（N,N-DimethylFormamide:DMF)二甲基 讽（dimethylsulfoxide:DMS0) 1,3-丁二醇（1,3-butyleneglycol)、丙二醇（propylene glycol)或这些物质的混合溶剂，在不破坏萃取物有效成分或最低限度降低所述破坏的条 件下，以室温或通过加热萃取。按萃取的有机溶剂，萃取物有效成分的萃取程度和损失程度 会有所差异，因此选择适当的有机溶剂进行萃取。萃取方法上没有特别限制，比如可以采用 冷浸萃取、超声波萃取、环流萃取等方法。
[0022] 过滤是从萃取液去除悬浮固体粒子的过程，利用棉、尼龙等过滤粒子或者可以采 用超滤法（Ultrafiltration)、冷冻过滤法、离心分离法等，但不限于此。另外，可以外加包 括通过多种层析法（chromatography:与大小、电荷、疏水性或亲和性相关的层析法）进行 的分离过程。干燥滤液的步骤包括冻结干燥、真空干燥、热风干燥、喷雾干燥、减压干燥、泡 沫干燥、高频干燥、紫外线干燥等，但不限于此。根据情况可以追加把最终干燥的萃取物进 行粉碎的工序。
[0023]本发明的穿心莲内酯（andrographolide)是二砲内酯（diterpenoidlactone)类 物质，具有如下化学式1的结构，其IUPAC名称为3-[2-[decahydro_6-hydroxy-5-(hydrox ymethyl)-5, 8a-dime