一种从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法
【专利摘要】本发明为一种从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，将脱脂沙棘籽用乙醇水溶液进行提取，过滤得粗提液；将所得的粗提液减压浓缩除去乙醇，得浓缩液；将浓缩液于30~60℃下搅拌、保温静置，分离出沉淀和上清液；将上清液降温至1~15℃，保温静置，再次分离出沉淀和上清液；将再次分离得到的沉淀进行干燥得沙棘籽原花青素高聚体提取物；将再次分离得到的上清液浓缩后干燥得沙棘籽原花青素低聚体提取物。通过本发明，可以将脱脂沙棘籽中的沙棘籽原花青素高聚体和低聚体分别充分地提取，并且方法简单，成本低。
【专利说明】
一种从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法
技术领域
[0001]本发明涉及花青素分离提取技术领域，尤其涉及沙棘中花青素的分离提取，具体涉及一种从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，属于植物有效成分提取分离技术领域。
[0002]
【背景技术】
[0003]沙棘籽原花青素是一类存在于沙棘籽中的天然活性物质，具有抗氧化、清除自由基、抗突变、抗癌、抗炎、抗过敏、抗病毒、降低血脂、抑制血小板聚集、抗血栓、降血糖及增强免疫力等广泛的保健药理作用。沙棘籽原花青素为不同聚合度的沙棘籽原花青素的总称，按照聚合度高低分为低聚体和高聚体，文献资料表明，比较高聚体，低聚体原花青素具有水溶性好，抗氧化活性高，肠道吸收好等优点。
[0004]现有文献已报道了多种提取沙棘籽原花青素的方法,例如中国专利CN101386615A公开了一种提取沙棘籽中原花青素的方法，其将沙棘籽用回流提取法进行提取，经过滤、吸附、洗脱后，对洗脱液进行减压浓缩、干燥后得到原花青素产品。中国专利CN103923052A公开了一种低聚原花青素的制备方法，其将含低聚体原花青素的植物原料用60~70%乙醇进行提取，同时控制提取过程的PH值，使得单体、低聚体和高聚体原花青素可有效地提取，并利用大孔树脂吸附以及不同聚合度原花青素在不同浓度乙醇中溶解性不同的原理进行洗脱，进一步获得低聚体产物。中国专利CN103910706A公开了一种低成本的低聚原花青素的制备方法，其将原花青素粗提物用冷溶、过滤、纳滤、喷雾干燥等技术，得到低聚原花青素产品。
[0005]上述已有的沙棘籽原花青素的制备方法虽然能够得到纯度较高的沙棘籽原花青素产品，但其仍存在的缺点在于:
(1)提取沙棘籽原花青素时未将高聚体和低聚体分离开来，高聚体的存在影响了最终产品的品质和低聚体的含量，使得最终产品水溶性较差，活性较低；
(2)提取得到沙棘籽原花青素粗品或者粗提物后，再对其中的低聚体进行分离，分离方法有大孔树脂吸附法和冷溶法，工艺复杂，成本高。
[0006]
【发明内容】
:
本发明所要解决的技术问题在于现有提取技术所得到的沙棘籽原花青素产品为高聚体和低聚体的混合物而影响产品性能，和粗提后续分离沙棘籽原花青素低聚体的工艺复杂，成本较高。因此本发明的目的在于提供一种方法简单，成本低，且对脱脂沙棘籽中原花青素高聚体和低聚体能进行有效分离的新方法本发明的目的是通过以下技术方案实现的:
O醇提:将脱脂沙棘籽用乙醇水溶液进行提取，过滤得粗提液；
2)浓缩:减压浓缩步骤I)所得的粗提液，除去其中的乙醇，得浓缩液； 3)热沉:将步骤2)所得的浓缩液于30~60°C下搅拌、保温静置，分离出沉淀和上清液；
4)冷沉:将步骤3)所得的上清液降温至1~15°C，保温静置，分离出沉淀和上清液；
5)干燥:将步骤4)所得的沉淀进行干燥，得沙棘籽原花青素高聚体提取物；将步骤4)所得的上清液浓缩后干燥，得沙棘籽原花青素低聚体提取物。
[0007]以上的步骤利用了浓缩液中杂质不溶于水，而沙棘籽原花青素高聚体和低聚体溶于30~60°C水的特点和沙棘籽原花青素低聚体易溶于1~15°C水而高聚体难溶于1~15°C水的特点，从而高效地从脱脂沙棘籽中分离出了原花青素高聚体和低聚体。
[0008]进一步的，在进行步骤I)时，所述乙醇水溶液的体积浓度为10~90%，提取的料液重量比为1:2~15，提取的温度为10~60°C，提取次数为1~3次，每次提取的时间为0.5~24h。
[0009]进一步的，在进行步骤I)时，所述乙醇水溶液的体积浓度为50~70%，通过此优选的提取方法，可使脱脂沙棘籽渣中原花青素尽量多的溶解出来，包括高聚体和低聚体。
[0010]进一步的，在进行步骤I)时，采用的提取方式为浸泡或先浸泡后淋洗。
[0011]进一步的，所述浸泡提取方式的辅助方式为机械搅拌或超声处理。
[0012]进一步的，在进行步骤2)时，所述减压浓缩的温度为35~50°C，所述减压浓缩的压力为0~1000 Pa，所述的浓缩液的Brix值为10~30，浓缩液浓度太高不利于后续杂质、高聚体和低聚体的分离。
[0013]进一步的，步骤3)中所述搅拌的时间为10min~60min，所述保温静置的时间为1min?60mino
[0014]进一步的，步骤4)中所述保温静置的时间为4~48h。
[0015]进一步的，步骤3)和步骤4)中所述分离沉淀和上清液的分离方式为直接倒出上清液、离心或过滤。
[0016]进一步的，步骤5)中所述沉淀干燥的方式为真空干燥或冷冻干燥，所述上清液浓缩后干燥的方式为真空干燥、冷冻干燥或喷雾干燥。
[0017]按照本发明所述的方法得到的沙棘籽原花青素高聚体提取物水溶性较差，盐酸——正丁醇法检测原花青素含量> 70%,沙棘籽原花青素低聚体提取物水溶性较好，在20°C水中溶解度> 5g/100g水，盐酸一正丁醇法检测原花青素含量> 40%,品质稳定，可用于食品、保健品和医药。以脱脂沙棘籽计，高聚体提取物的产率> 1.0%，低聚体提取物的产率彡7.0%。
[0018]本发明的有益效果:
I)本发明所述的从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，利用了沙棘籽原花青素高聚体和低聚体在不用温度水中溶解度的区别，对粗提浓缩液采用简单的热沉、冷沉的工艺，实现了沙棘籽原花青素高聚体和低聚体的分离，工艺简单，成本低，易于工业化生产。
[0019]2)利用本发明所述方法得到的沙棘籽原花青素低聚体，水溶性好，在20°C水中溶解度> 5g/100g /Jc,品质稳定，可用于食品、保健品和医药。
[0020]3)本发明提取脱脂沙棘籽中的原花青素低聚体和高聚体使用的试剂为水和乙醇，毒性小，对环境无污染，是一种绿色环保的提取方法。
【附图说明】
[0021]图1为从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的流程图。
[0022]【具体实施方式】:
实施例1
具体操作步骤为:
1)醇提:将脱脂沙棘籽用乙醇水溶液进行提取，过滤得粗提液，乙醇水溶液的体积浓度为10~90%，优选50~70%，提取的料液重量比为1:2~15，提取的温度为10~60°C，提取次数为1~3次，每次提取的时间为0.5~24h，采用的提取方式为浸泡或先浸泡后淋洗，如果选用浸泡提取，浸泡提取方式的辅助方式可以为机械搅拌或超声处理；
2)浓缩:减压浓缩步骤I)所得的粗提液，除去其中的乙醇，得浓缩液，减压浓缩的温度为35~50°C，减压浓缩的压力为0~1000 Pa，浓缩液的Brix值为10~30 ；
3)热沉:将步骤2)所得的浓缩液于30~60°C下搅拌10min~60min、保温静置10min~60min,分离出沉淀和上清液；
4)冷沉:将步骤3)所得的上清液降温至1~15°C，保温静置4~48h，分离出沉淀和上清液，分离方式可选择直接倒出上清液、离心或过滤；
5)干燥:将步骤4)所得的沉淀进行干燥，得沙棘籽原花青素高聚体提取物；将步骤4)所得的上清液浓缩后干燥，得沙棘籽原花青素低聚体提取物，沉淀干燥的方式可选择真空干燥或冷冻干燥，上清液浓缩后干燥的方式可选择真空干燥、冷冻干燥或喷雾干燥。
[0023]实施例2
在实施例1的基础上进行优化。
[0024]本实施例所述的脱脂沙棘籽为提取完沙棘籽油的下脚料，即脱脂沙棘籽渣，本实施例所述的从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，
包括如下步骤:
1)脱脂沙棘籽3kg，按照料液重量比1:3加入体积浓度60%的乙醇水溶液搅拌浸提，浸提温度为60°C，提取次数为3次，每次浸提的时间为0.5h，每次提取采用超声辅助提取，超声功率200W，超声频率20kHz，搅拌速度30r/min ；
2)减压浓缩除醇，温度35°C，绝对压力0~1000Pa，在线监测浓缩液Brix值，当浓缩液Brix值为12时，停止浓缩，趁热出料；
3)热沉，将浓缩液于30°C下搅拌60min，静置30min，直接倒出上清液；
4)冷沉，将步骤3)中所得的上清液降温至4°C，保温静置4h，直接倒出上清液；
5)干燥，将步骤4)中所得的沉淀真空干燥得沙棘籽原花青素高聚体提取物，平均聚合度为13.3，质量为30g，用盐酸——正丁醇法检测原花青素含量为72%，将(4)中所得的上清液减压浓缩，真空干燥得沙棘籽原花青素低聚体提取物，平均聚合度为2.7，质量为220g，用盐酸——正丁醇法检测原花青素含量为40%。
[0025]实施例3
在实施例1的基础上进行优化。
[0026]本实施例所述的脱脂沙棘籽为提取完沙棘籽油的下脚料，本实施例所述的从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，包括如下步骤:
I)脱脂沙棘籽56kg，按照料液重量比1:7加入体积浓度60%的乙醇水溶液浸泡12h，浸提温度为10°C，在提取过程中不断搅拌作为辅助提取，搅拌速度60r /min ； 2)减压浓缩除醇，温度40°C，绝对压力0~1000Pa，在线监测浓缩液Brix值，当浓缩液Brix值为17时，停止浓缩，趁热出料；
3)热沉，将浓缩液于40°C下搅拌30min，静置60min，直接倒出上清液；
4)冷沉，将步骤3)中所得的上清液降温至5°C，保温静置10h，直接倒出上清液；
5)干燥，将步骤4)中所得的沉淀真空干燥得沙棘籽原花青素高聚体提取物，平均聚合度为13.5,质量为580g,用盐酸-正丁醇法检测原花青素含量为78%,将步骤4)中所得的上清液减压浓缩，真空干燥得沙棘籽原花青素低聚体提取物，平均聚合度为2.7，质量为
4.0kg，用盐酸——正丁醇法检测原花青素含量为41%。
[0027]实施例4
在实施例1的基础上进行优化。
[0028]本实施例所述的脱脂沙棘籽为提取完沙棘籽油的下脚料，本实施例所述的从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，包括如下步骤:
O脱脂沙棘籽20kg，第一次提取按照料液重量比1:10加入体积浓度50%的乙醇水溶液搅拌浸提14h，浸提温度为20°C，搅拌速度60r /min,第二次提取按照料液重量比1:10用体积浓度50%的乙醇水溶液淋洗，温度为20°C ；
2)减压浓缩除醇，温度45°C，绝对压力0~1000Pa，在线监测浓缩液Brix值，当浓缩液Brix值为20时，停止浓缩，趁热出料；
3)热沉，将浓缩液于50°C下搅拌15min，静置20min，直接倒出上清液；
4)冷沉，将步骤3)中所得的上清液降温至10°C，保温静置20h，直接倒出上清液；
5)干燥，将步骤4)中所得的沉淀冷冻干燥得沙棘籽原花青素高聚体提取物，平均聚合度为13.6，质量215g，用盐酸——正丁醇法检测原花青素含量为75%，将步骤4)中所得的上清液减压浓缩，冷冻干燥得沙棘籽原花青素低聚体提取物，平均聚合度为2.8，质量1.5kg，用盐酸——正丁醇法检测原花青素含量为41%。
[0029]实施例5
在实施例1的基础上进行优化。
[0030]本实施例所述的脱脂沙棘籽为提取完沙棘籽油的下脚料，本实施例所述的从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，包括如下步骤:
1)脱脂沙棘籽15kg，按照料液重量比1:7加入体积浓度70%的乙醇水溶液浸泡24h，浸提温度为40°C ；
2)减压浓缩除醇，温度50°C，绝对压力lOOOPa，在线监测浓缩液Brix值，当浓缩液Brix值为25时，停止浓缩，趁热出料；
3)热沉，将浓缩液于60°C下搅拌60min，静置60min，过滤分离上清液和沉淀；
4)冷沉，将步骤3)中所得的上清液降温至15°C，保温静置48h，离心分离上清液和沉淀；
5)干燥，将步骤4)中所得的沉淀真空干燥得沙棘籽原花青素高聚体提取物，平均聚合度为13.6，质量200g，用盐酸——正丁醇法检测原花青素含量为70%，将步骤4)中所得的上清液减压浓缩，喷雾干燥得沙棘籽原花青素低聚体提取物，平均聚合度为3.0，质量1.1kg,用盐酸——正丁醇法检测原花青素含量为42%。
【主权项】
1.一种从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤: 1)醇提:将脱脂沙棘籽用乙醇水溶液进行提取，过滤得粗提液； 2)浓缩:减压浓缩步骤I)所得的粗提液，除去其中的乙醇，得浓缩液； 3)热沉:将步骤2)所得的浓缩液于30~60°C下搅拌、保温静置，分离出沉淀和上清液； 4)冷沉:将步骤3)所得的上清液降温至1~15°C，保温静置，分离出沉淀和上清液； 5)干燥:将步骤4)所得的沉淀进行干燥，得沙棘籽原花青素高聚体提取物；将步骤4)所得的上清液浓缩后干燥，得沙棘籽原花青素低聚体提取物。2.根据权利要求1所述的从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，其特征在于，在进行步骤I)时，乙醇水溶液的体积浓度为10~90%，提取的料液重量比为1:2~15，提取的温度为10~60°C，提取次数为1~3次，每次提取的时间为0.5~24h。3.根据权利要求2所述的从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，其特征在于，在进行步骤I)时，乙醇水溶液的体积浓度为50~70%。4.根据权利要求1所述的从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，其特征在于，在进行步骤I)时，采用的提取方式为浸泡或先浸泡后淋洗。5.根据权利要求4所述的从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，其特征在于，浸泡提取方式的辅助方式为搅拌或超声处理。6.根据权利要求1所述的从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，其特征在于，在进行步骤2)时，减压浓缩的温度为35~50°C，减压浓缩的压力为0~1000 Pa，浓缩液的Brix值为10~30。7.根据权利要求1所述的从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，其特征在于，步骤3)中搅拌的时间为10min~60min,保温静置的时间为10min~60min。8.根据权利要求1所述的从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，其特征在于，步骤4)中保温静置的时间为4~48h。9.根据权利要求1所述的从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，其特征在于，步骤3)和步骤4)中分离沉淀和上清液的分离方式为直接倒出上清液、离心或过滤。10.根据权利要求1所述的从脱脂沙棘籽中分离原花青素高聚体和低聚体的方法，其特征在于，步骤5)中沉淀干燥的方式为真空干燥或冷冻干燥，上清液浓缩后干燥的方式为真空干燥、冷冻干燥或喷雾干燥。
【文档编号】C07D311/62GK105837547SQ201510013567
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2015年1月12日
【发明人】谭志超, 张存存, 陈华, 高彦祥, 王辉斌
【申请人】北京宝得瑞食品有限公司