抗氧化剂或毛发生长促进剂的制造方法、以及利用该制造方法所制造的抗氧化剂或毛发生长促进剂与流程

本发明涉及抗氧化剂或毛发生长促进剂的制造方法、以及利用该制造方法所制造的抗氧化剂或毛发生长促进剂。

背景技术：

仙人掌是仙人掌科的常绿多年生植物。其主要作为观赏用而进行栽培，但作为药用植物的研究也正在进行。

例如，专利文献1中记载了一种毛发生长料/毛发生长促进料，其混配有利用水和/或水溶性有机溶剂从仙人镜提取而得到的提取物。另外，专利文献2中记载了一种养发剂，其混配有仙人掌类植物提取物作为必要成分。

但是，仙人掌通常用于观赏用途，对于仙人掌的提取物等使用了仙人掌的加工产品尚未进行太多的研究开发。

另外，关于专利文献1和2中记载的毛发生长剂，毛发生长效果并不太高，存在进一步改善、研究的余地。

此外，希望开发出可有效利用因损伤等而作为观赏用无法出售的仙人掌的手段和用途。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开平5-170627号公报

专利文献2：日本特开平7-082117号公报

技术实现要素：

发明所要解决的课题

本发明是鉴于上述背景技术而进行的，其课题在于解决上述问题，提供一种优异的抗氧化剂及毛发生长促进剂。另外，其课题在于有效利用仙人掌的提取物等，提供仙人掌的新用途等。

用于解决课题的手段

本发明人为了解决上述课题进行了反复深入的研究，结果发现，利用特定的固液分离方法得到的仙人掌的固体成分及来自该固体成分的提取物显示出高抗氧化性，具有比公知的毛发生长促进剂更优异的毛发生长促进效果，由此完成了本发明。

即，本发明提供一种抗氧化剂的制造方法，其为源自仙人掌的抗氧化剂的制造方法，其特征在于，具有下述工序：

不加入溶剂，将仙人掌的温度维持在10℃以上55℃以下的温度范围，并且一边加热一边减压，进行固液分离，由此得到固体成分。

另外，本发明提供上述的抗氧化剂的制造方法，其为源自仙人掌的抗氧化剂的制造方法，其具有下述工序：

不加入溶剂，将仙人掌的温度维持在10℃以上55℃以下的温度范围，并且一边加热一边减压，进行固液分离，由此得到固体成分的工序；和

利用水从该固体成分提取水溶性成分的工序。

另外，本发明提供上述的抗氧化剂的制造方法，其中，一边利用搅拌叶片将仙人掌破碎一边进行搅拌，在该破碎·搅拌下进行固液分离，由此得到固体成分。

另外，本发明提供一种毛发生长促进剂的制造方法，其为源自仙人掌的毛发生长促进剂的制造方法，其特征在于，具有下述工序：

不加入溶剂，将仙人掌的温度维持在10℃以上55℃以下的温度范围，并且一边加热一边减压，进行固液分离，由此得到固体成分。

另外，本发明提供上述的毛发生长促进剂的制造方法，其为源自仙人掌的毛发生长促进剂的制造方法，其具有下述工序：

不加入溶剂，将仙人掌的温度维持在10℃以上55℃以下的温度范围，并且一边加热一边减压，进行固液分离，由此得到固体成分的工序；和

利用水从该固体成分提取水溶性成分的工序。

另外，本发明提供上述的毛发生长促进剂的制造方法，其中，一边利用搅拌叶片将仙人掌破碎一边进行搅拌，在该破碎·搅拌下进行固液分离，由此得到固体成分。

另外，本发明提供一种抗氧化剂，其特征在于，其是使用上述的“抗氧化剂的制造方法”而制造的。

另外，本发明提供一种毛发生长促进剂，其特征在于，其是使用上述的“毛发生长促进剂的制造方法”而制造的。

发明的效果

根据本发明，可以提供一种新型的抗氧化剂及毛发生长促进剂。

通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分不使用水或有机溶剂等提取溶剂，因此，所得到的仙人掌的固体成分能够不含有源自提取溶剂的物质，而仅由天然来源的成分构成，能够极其安全且安心地进行提供，而且没有提取溶剂的气味。

另外，通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分具有现有的仙人掌的提取物和提取残渣中所没有的“成分”或“成分比例”，由此能够提供源自仙人掌的具有高品质和新颖性的固体成分(或该固体成分中的含有物)。因此，通过使用利用水从该固体成分中提取的仙人掌提取液，能够提供优异的抗氧化剂及毛发生长促进剂。

低温真空固液分离除了不使用(提取)溶剂以外，还能够抑制施加到仙人掌的热(能够抑制仙人掌的升温)，因此能够提供含有现有产品所没有的“成分”或“成分比”的、“仙人掌的固体成分或来自该固体成分的水提取物”的抗氧化剂和毛发生长促进剂。

另外，也能够使用作为观赏用无法出售或未能出售的仙人掌作为原料，能够不废弃该仙人掌而进行有效利用。

附图说明

图1是示出本发明中的低温真空固液分离中使用的装置的一个方式的示意图。

图2是示出本发明中的低温真空固液分离中使用的装置的容器的一个方式的放大截面图。

图3是示出本发明中的低温真空固液分离中使用的装置的容器内的搅拌叶片的构成的一个方式的立体图。

图4是示出对“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分”的多酚量进行测定的结果的曲线图。

图5是示出对“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的液体成分或固体成分”的抗氧化能力进行测定的结果的曲线图。

图6是示出对于“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分”的细胞毒性试验的结果的曲线图。

图7是示出对“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分”的人毛乳头细胞增殖促进作用进行测定的结果的曲线图。

图8是示出对“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分”在人毛乳头细胞中的fgf-7基因表达量进行测定的结果的曲线图。

图9是示出对“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分”在人毛乳头细胞中的vegf基因表达量进行测定的结果的曲线图。

图10是示出本发明中的低温真空固液分离中使用的装置的一个方式的示意图。

具体实施方式

下面，对本发明进行说明，但本发明不限于以下的具体方式，可以在技术思想的范围内任意变形。

本发明的抗氧化剂的制造方法的特征在于，具有下述工序：不加入溶剂，从外部将仙人掌的温度维持在10℃以上55℃以下的温度范围，并且一边加热一边减压，进行固液分离，由此得到固体成分。

本发明的毛发生长促进剂的制造方法的特征在于，具有下述工序：不加入溶剂，从外部将仙人掌的温度维持在10℃以上55℃以下的温度范围，并且一边加热一边减压，进行固液分离，由此得到固体成分。

本说明书中，“固体成分”是指利用“不加入溶剂，从外部将原料的温度维持在10℃以上55℃以下的温度范围，并且一边加热一边减压，进行固液分离的方法”得到的仙人掌的固体部分，表示液体成分以外的成分。即，在利用上述方法对仙人掌进行固液分离时，将液体侧称为“仙人掌的液体成分”，将固体侧称为“仙人掌的固体成分”。

本说明书中，有时将“不加入溶剂，从外部将原料的温度维持在10℃以上55℃以下的温度范围，并且一边加热一边减压，进行固液分离”称为“低温真空固液分离”或“低温真空提取”。

需要说明的是，本说明书中，“低温真空提取”与“低温真空固液分离”的含义相同，“提取残渣”与“固体成分”的含义相同，“提取液”是指“对该固体成分进行溶剂提取而得到的液体”。

即，换句话说，本发明的抗氧化剂或毛发生长促进剂的制造方法的特征在于，具有下述工序：制备通过对仙人掌进行低温真空提取而得到的固体成分。

在低温真空固液分离中，可以使用该仙人掌的任何组织，使用仙人掌的叶(即针)；茎(即肉)；花瓣等花冠；根；苗；等。另外，也可以使用仙人掌的多个组织，还可以不分成各组织而使用仙人掌的植物整体。

从获得优异的抗氧化能力或毛发生长促进效果的方面、体积大的方面等出发，优选从叶或茎进行提取，特别优选从茎进行提取。

低温真空固液分离中使用的物质可以是未进行干燥的物质(未加工的物质)、以某种程度进行了干燥的物质中的任一种，优选的是，未进行干燥的物质(实质上未加工的物质)充分含有细胞水中的成分，也没有变质，故优选。

另外，本发明的“通过进行固液分离而得到固体成分的工序”(低温真空提取(低温真空固液分离)的工序)中，优选不使用包括水的提取溶剂。

需要说明的是，本说明书中，“细胞水”是指植物细胞中包含的细胞内液。需要说明的是，该细胞水也被称为“细胞提取物(注册商标)”。

本发明中，使用仙人掌作为原料。仙人掌的品种没有特别限定，从与仙人掌的其他品种相比获得优异的抗氧化能力或毛发生长促进效果的方面出发，仙人掌的品种优选为锦绣玉(parodia)属、南国玉(notocactus)属、仙影拳(cereus)属、或者仙人掌(opuntia)属。

该仙人掌的品种可以单独使用任意1种，也可以合用2种以上。

此处，关于供低温真空固液分离的仙人掌的形态，只要容易投入在低温真空固液分离中使用的装置中并为适于该装置的形态就没有特别限定，优选适度被切断(参照图1-3、图10)。

在使用花瓣的情况下，没有限定，优选去除雄蕊、雌蕊、萼片等后投入装置中。

在使用茎(即仙人掌的肉)的情况下，利用一边破碎一边进行搅拌的图1-3那样的容器1时，作为切断后的体积、投入容器中时的体积没有限定，优选为0.2cm³～50cm³、更优选为1cm³～40cm³、特别优选为2cm³～30cm³。

在使用茎(即仙人掌的肉)的情况下，利用内部没有刀片的图10那样的容器1时，作为切断后的体积、投入容器中时的体积没有限定，优选为0.01cm³～30cm³、更优选为0.03cm³～20cm³、特别优选为0.1cm³～15cm³。

在低温真空固液分离中，实质上不使用有机溶剂、水、水蒸气、“超临界萃取法等中的二氧化碳”等提取介质，在低温下减压而直接提取，此时不残留溶剂，因此能够制造仅为天然成分的液体成分或固体成分，不残留溶剂的气味，含有成分不发生热分解，含有成分不发生散逸，从上述等方面出发是优选的。

此处，“低温”是指比不减压而进行溶剂提取时的一般温度低的温度，在本发明的情况下，具体而言，(不是提取容器的温度，也不是提取器内的气体的温度)，使仙人掌本身的温度为55℃以下来进行固液分离。关于提取温度，在下文中详细说明。

<<低温真空固液分离的装置和低温真空固液分离的工序>>

图1是示出在本发明中的抗氧化剂或毛发生长促进剂的制造方法中在低温真空固液分离中使用的装置的一个方式的示意图。只要在本发明的主旨的范围内，就不限定于利用图中所示的装置进行低温真空固液分离。

容器1为下述容器：其容纳仙人掌，一边利用搅拌叶片6破碎一边进行搅拌，在该破碎·搅拌下从外部将仙人掌的温度维持在10℃以上55℃以下的温度范围(该温度是指仙人掌的温度)，并且一边加热一边减压，进行固液分离；冷却器2是对从容器1出来的蒸气进行冷却的装置。

容器1包括：容纳搅拌叶片6的下部半圆筒部7；和形成于其上的上部方形部8。在下部半圆筒部7的周围具有对容器1的内部加热的蒸气室9。

在下部半圆筒部7的最下部的中央设有将低温真空固液分离后的仙人掌的破碎物即固体成分取出的排出口10。

在上述上部方形部8的上部设有被抽吸的蒸气的排气口14，在该排气口14连接有与上述冷却器2连接的配管16。

在上述上部方形部8的上部设置仙人掌的投入口17，并且设置堵住该投入口17的盖18。

在本发明中的抗氧化剂或毛发生长促进剂的制造方法中，没有限定，优选一边利用搅拌叶片将仙人掌破碎一边进行搅拌，在该破碎·搅拌下进行低温真空固液分离。通过一边如此操作一边进行低温真空固液分离，能够在形成新鲜的破碎面后立即从此处进行提取，因而能够防止有效成分的热分解、氧化等导致的变性，能够防止在投入本发明中使用的低温真空固液分离装置中前进行破碎时有效成分因蒸发等而从破碎面散逸。

为了获得上述效果，上述破碎·搅拌特别优选在具备可动刀片和/或固定刀片的装置内进行。

例如，图3是示出上述搅拌叶片6的构成的立体图，搅拌叶片6通过设置在容器1的外部的马达而旋转，由左右端板22、23与叶片体24、25构成，从而构成为不具有中心轴的结构，上述左右端板22、23以能够旋转的方式被容器1的端壁20、21支撑，上述叶片体24、25的两端被固定于上述端板22、23的前端间且大致呈“く”形。

26是粘合在下部半圆筒部7的内表面的多个固定刀片，在叶片体24、25中的与固定刀片26对应的部位形成有叶片体24、25中的用于使固定刀片26的部分通过的槽24a、25a，在该槽的两侧形成有用于在与固定刀片26之间将仙人掌31切断的可动刀片24b、25b。

需要说明的是，图3中，固定刀片26和可动刀片24b、25b在圆周方向上错开位置而进行配设，以错开时间依次进行啮合，由此不会发生搅拌叶片6的驱动马达的动力瞬间增大。

如图2所示，在下部半圆筒部的单侧上部优选具有倾斜面30，以使放置于其上的仙人掌31顺利落下。

32是测量上述容器1内的真空度的真空计，33、34是温度计，它们是为了测定低温真空固液分离工序中的容器内的压力(减压度)和温度、并间接测定低温真空固液分离时的仙人掌31的温度而设置的，另外，是为了判定低温真空固液分离的开始与终止而设置的。

该真空干燥装置的操作·工作例如如下进行。

首先，在作业开始时，向冷却器2供给冷却水。接下来，将仙人掌31从投入口17投入容器1内，关闭盖18。然后，搅拌叶片6沿着图1～图3的箭头r的方向旋转，一边搅拌容器1内的仙人掌，一边在可动刀片24b、25b与固定刀片26之间将仙人掌31细小地破碎。

通过一边破碎仙人掌一边进行低温真空固液分离，能够从新鲜的破碎面进行低温真空提取，能够防止成分或细胞水的“变性”或“散逸导致的减量”。

与上述搅拌·破碎同时地向蒸气室9内供给加热用蒸气，由此从外部施加热。施加到容器1的热被传递至仙人掌31，仙人掌31被搅拌叶片6所搅拌，由此可促进低温真空固液分离。通过仙人掌31被可动刀片24b、25b和固定刀片26破碎变小，可进一步促进该操作。

此时，调节送入蒸气室9内的加热用蒸气的温度或量，使仙人掌31本身的温度为后述优选的范围。

通过利用喷射器、真空泵等减压装置46进行抽吸，由此容器1内的气体、即液体成分的蒸气和空气通过配管16被抽吸，容器1内的仙人掌31中包含的挥发成分和细胞水开始蒸发。

此时，调节利用减压装置46抽吸的量或抽吸力，使低温真空固液分离时的压力(减压度)为后述的优选范围。另外，利用水的蒸发热导致的仙人掌的冷却，将温度范围维持在后述的优选范围。根据工业上可实施的(实际的)“排气容量与减压度的关系”，减压装置46优选为使用水的喷射器。

容器1内的“仙人掌中包含的挥发成分的蒸气”和“作为细胞水的主要成分的水的蒸气”(水蒸气)通过配管16被抽吸，并导入冷却器2中被液化，成为回收液并存积在回收槽41内。

在回收槽41内，回收液(油层50和水层51)存积至规定量后，停止利用减压装置46的抽吸，关闭阀45，打开阀49，进行回收液的回收。在必要时，使回收液静置而进行分液，去除油层50，将水层51作为液体成分(仙人掌的液体成分)而回收。

在回收了回收液后，将残留在容器1内的成分作为“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分”而回收。

图10是示出固液分离中使用的装置的一个方式的示意图，不限定于“如图3所示，一边利用搅拌叶片将仙人掌破碎一边进行搅拌，在该破碎·搅拌下进行减压”，而为下述装置：预先将仙人掌31破碎后、或者直接将仙人掌31投入容器1中，代替固定刀片26或可动刀片24b、25b而利用搅拌叶片6(例如图10中使用锚型搅拌叶片)在搅拌下进行减压。

容器1容纳仙人掌31，一边维持规定的温度范围，一边减压而进行固液分离；冷却器2是对从容器1出来的蒸气进行冷却的装置。

在容器1的周围具有加热装置61，在容器1的下部设有将固液分离后的固体取出的排出口10。在容器1的上部设有被抽吸的蒸气的排气口14，在排气口14连接有与上述冷却器2连接的配管16。

在容器1设有真空计32和温度计33，其测定固液分离工序中的容器内的压力(减压度)和温度，并间接测定固液分离时的仙人掌31的温度。另外，用于判定固液分离的开始与终止。

若开动减压装置46，则容器1内的“仙人掌中包含的蒸气”和“作为细胞水的主要成分的水的蒸气(水蒸气)”通过配管16被抽吸，并导入冷却器2中被液化，成为回收液并存积在回收槽41内。

固液分离终止后，从容器1的下方的排出口10将经固液分离的固体s取出到回收箱62中。

<<低温真空固液分离的条件>>

在本发明中使用的抗氧化剂或毛发生长促进剂的制造方法中，优选将仙人掌本身维持在10℃以上55℃以下的温度而进行上述固液分离，更优选为20℃以上50℃以下、特别优选为30℃以上40℃以下。

若下限为上述范围的值，则能够缩短提取时间，因此可抑制有效成分的分解·逸散，另外没有不必要的时间损失，经济性好。

在本发明中的抗氧化剂或毛发生长促进剂的制造方法中，一边利用搅拌叶片将仙人掌破碎一边进行搅拌，在该破碎·搅拌下进行提取，因此能够在形成新鲜破碎面的时刻较早地提取，若温度的下限为上述值，与能够缩短提取时间相应地，效果进一步被促进。

另一方面，若上限为上述以下，则能够在防止有效成分的热导致的变性·分解的同时进行固液分离而获得固体成分。

使用低温真空固液分离的情况下，上述提取的减压度没有特别限定，优选维持比101.3kpa(1个大气压)低80kpa以上的压力来进行。更优选维持比101.3kpa(1个大气压)低85kpa以上的压力来进行，特别优选为低90kpa以上的压力，进一步优选为低95kpa以上的压力。

或者，优选维持在1kpa[1个大气压(101.3kpa)-100.3kpa]以上10kpa[1个大气压(101.3kpa)-91.3kpa]以下来进行。更优选为2kpa[1个大气压-99.3kpa]以上9kpa[1个大气压-92.3kpa]以下，特别优选为3kpa[1个大气压-98.3kpa]以上8kpa[1个大气压-93.3kpa]以下。

若压力为上述值(若减压度为上述值)，则能够在低温下进行有效成分的提取，因此能够防止有效成分的热导致的变性·分解。另外，能够缩短提取时间，因此可抑制有效成分的分解·逸散，另外没有不必要的时间损失，经济性好。

在低温真空固液分离中，优选一边利用搅拌叶片将仙人掌破碎一边进行搅拌，在该破碎·搅拌下进行固液分离，若减压度如上述值那样低，则固液分离速度快，从这方面出发，抑制有效成分的分解·逸散的效果进一步被促进。

在容器的体积小时，存在能够使减压度低于上述值的真空泵。但是，在低温真空固液分离的情况下，为了利用水的蒸发热冷却仙人掌而将温度范围维持在上述范围，需要大排气容量。根据实际的“排气容量与减压度的关系”，减压度优选为上述范围。

如实施例中所示那样，本发明的抗氧化剂的有效成分即“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分”和“由该固体成分提取的成分”由于具有抗氧化作用，因此被用作抗氧化剂。

通过将仙人掌的固体成分本身、将该仙人掌的固体成分进一步(例如利用水等)进行提取处理而得到的物质、或者含有该仙人掌的固体成分的饮食品、含有将该仙人掌的固体成分进一步(例如利用水等)进行提取处理而得到的物质的饮食品摄入体内，可消除活性氧，能够发挥出抗氧化作用或抗衰老(抗老化)效果。

另外，如实施例中所示那样，本发明的毛发生长促进剂的有效成分即“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分”和“由该固体成分提取的成分”由于具有毛发生长促进作用，因此被用作毛发生长促进剂。

据认为：上述仙人掌的固体成分利用仙人掌本身所不包含的成分组成等而发挥出毛发生长促进作用。特别是，利用低温真空固液分离得到的“仙人掌的固体成分”未施加来自外部的溶剂或过度的热，因此是纯粹来自天然物质的固体成分。

上述仙人掌的固体成分或“由该固体成分(例如利用水等)进行提取处理而得到的成分”根据需要可以用水或有机溶剂等进行稀释而作为溶液使用，另外，根据需要可以加入作为药物允许混配的添加剂而以各种形态使用。

其中，为了利用该仙人掌的固体成分全部由天然物质形成这个特点，优选以原本的形态(或者加入水或天然成分)用于例如下述各种用途中。

有时将利用实施例中记载的方法从上述“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分”提取的仙人掌的提取液简称为“仙人掌提取液”。因此，实施例等本发明中的“仙人掌提取液”并不是通过低温真空固液分离从仙人掌本身直接得到的仙人掌的液体成分。

上述仙人掌的固体成分(或来自该固体成分的提取液)全部为天然来源，在低温真空固液分离工序中，无需使用溶剂，因此安全性极高，能够安心使用。

另外，该仙人掌的固体成分(或来自该固体成分的提取液)能够用于药品、准药品、气化抽吸用剂、外用组合物、调合香料、饮食品、补品、化妆品、沐浴剂、纤维等中。在这些用途中使用时，根据需要可以向其中混配各种添加剂来使用。

作为上述抗氧化剂或毛发生长促进剂中的上述“其他成分”没有特别限制，可以在无损本发明效果的范围内根据目的适当选择，例如可以举出药学上可允许的载体等。

作为该载体没有特别限制，例如可以根据后述剂形等适当选择。另外，作为上述抗氧化剂或毛发生长促进剂中的上述“其他成分”的含量也没有特别限制，可以根据目的适当选择。

作为本发明的抗氧化剂或毛发生长促进剂的剂形没有特别限制，例如可以举出口服固体制剂(片剂、包衣片剂、颗粒剂、散剂、胶囊剂等)、口服液剂(内服液剂、糖浆剂、酏剂等)、注射剂(溶剂、悬浮剂等)、软膏剂、贴剂、凝胶剂、乳膏剂、外用散剂、喷雾剂、吸入剂、撒剂等。

上述“由仙人掌的固体成分(例如利用水等)进行提取处理而得到的成分”可以通过常规方法获得。例如，可以举出利用上述进行低温真空固液分离时的温度范围的水进行浸渍提取的方法等。在提取处理后，可以进行过滤，也可以通过离心分离来分离。

本发明的抗氧化剂或毛发生长促进剂中的有效成分即“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分”相对于抗氧化剂或毛发生长促进剂整体的含量没有特别限制，可以根据目的适当选择。

本说明书中，在使用由该固体成分(例如利用水等)进行提取处理而得到的成分作为有效成分的抗氧化剂或毛发生长促进剂整体的情况下，也将换算成“成为其原料的通过本发明的制造方法得到的固体成分”的质量的数值作为上述(优选的)含量。

若利用上述或实施例中定义的本发明中的“仙人掌提取液”的含量(％(v/v))规定本发明的抗氧化剂或毛发生长促进剂中的优选含量，如实施例中证明的那样，本发明的抗氧化剂或毛发生长促进剂优选以0.00001％(v/v)以上100％(v/v)以下含有“仙人掌提取液”，更优选以0.0001％(v/v)以上10％(v/v)以下含有，进一步优选以0.001％(v/v)以上3％(v/v)以下含有，特别优选以0.01％(v/v)以上1％(v/v)以下含有。

如实施例中定义的那样，“仙人掌提取液”是指如下操作得到的上清，即，将仙人掌的固体成分1g在研钵中粉碎后，加入纯净水10ml，在30℃充分搅拌，使水溶性成分全部溶解(提取)到水中，进行离心分离，得到上清。因此，若换算成固体成分的质量，上述“优选的范围”、“特别优选的范围”等的值为[固体成分1g]/[纯净水10ml]≒0.1(g/ml)，因此是分别乘以0.1而得到的值。另外，单位为[g(固体成分)/ml(剂)]。需要说明的是，该“固体成分的质量”中包括水不溶性的成分的质量，也包括为水不溶性且并非有效成分的成分的质量。

需要说明的是，“仙人掌提取液”中的(多种)有效成分的化学结构和含量至少没有全部明确，因此，如上所述，抗氧化剂或毛发生长促进剂的优选浓度利用“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分”、“上述或实施例中定义的‘仙人掌提取液’”的量来规，仅由这些含量来表示。

作为本发明的抗氧化剂或毛发生长促进剂的给药对象动物没有特别限制，例如可以举出人；猫、狗等宠物；等。

另外，作为上述抗氧化剂或毛发生长促进剂的给药方法没有特别限制，例如可以根据剂形等适当选择，可以举出口服给药、腹腔内给药、向呼吸器中吸入、向血液中注射、向肠内注入、在皮肤上的涂布等。

另外，作为上述抗氧化剂或毛发生长促进剂的给药量没有特别限制，可以根据作为给药对象的个体的年龄、体重、所期望的效果的程度等而适当选择，例如，成人每一天的给药量以有效成分的量计优选为1mg～30g、更优选为10mg～10g、特别优选为100mg～3g。

另外，作为上述抗氧化剂或毛发生长促进剂的给药时期也没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如，可以预防性地给药，也可以治疗性地给药。

实施例

以下举出实施例和比较例来更具体地说明本发明，但本发明只要不超出其要点就不被这些实施例所限定。

实施例1

<基于低温真空固液分离的仙人掌的固体成分的制造>

将1株仙人掌(整个仙人掌)放入图1或图3所示的容器中，进行低温真空固液分离。另外，另行放入图10所示的容器中，进行低温真空固液分离。

低温真空固液分离条件如下。

(1)仙人掌的温度：30～40℃

(2)容器内的设定温度：30～40℃

(3)压力：比101.3kpa(1个大气压)低93～97kpa的压力

(4-1)搅拌叶片(可动刀片)的转速：4rpm(转/分钟)(图3的装置的情况)

(4-2)搅拌叶片的转速：40rpm(转/分钟)(图10的装置的情况)

在回收“液体成分”后，开放排出口10，将残留在容器1中的固体(粉末)回收到回收箱62中，作为目标“固体成分”。

以下，对在本发明的条件下对仙人掌进行固液分离而得到的固体成分进行评价，该评价结果在使用图1～3的装置的情况下和使用图10的装置的情况下均相同。

实施例2

<基于低温真空固液分离的仙人掌固液分离物的多酚含量的测定>

利用福林酚法测定了实施例1中得到的1株仙人掌(整体)的液体成分和固体成分中包含的多酚含量。福林酚法使用和光纯药工业株式会社制造的“folin-ciocalteu、苯酚试剂”进行测定。

将仙人掌各品种的固体成分的结果示于图4。图4中，“金晃殿(ワラシ)”为品种名金晃殿(锦绣玉属)，“荣冠”为品种名荣冠丸(锦绣玉属)，“鬼面”为品种名鬼面角(仙影拳属)，“墨乌帽子”为品种名墨乌帽子(仙人掌属)，“青王”为品种名青王丸(南国玉属)。

可知在金晃殿、荣冠丸以及青王丸的固体成分中包含多酚。另一方面，上述5个品种的仙人掌的液体成分中均几乎不含多酚。

实施例3

<基于低温真空固液分离的仙人掌的固体成分的抗氧化作用的测定>

利用bap(biologicalantioxidantpotential：生物体抗氧化测定)检测，测定了实施例1中得到的1株仙人掌(整体)的液体成分和固体成分的抗氧化作用。在bap检测中使用了diacroninternational公司制造的freecarriocuo。

关于液体成分，使用原液10μl作为bap检测的试样；关于固体成分，以10倍稀释悬浮于水中，使用离心分离后的上清10μl作为bap检测的试样。

结果示于图5。bap值在液体成分的情况下数值低，5个品种的固体成分的bap值均高。由此可知，通过低温真空固液分离进行固液分离而得到的仙人掌的固体成分具有显著高的抗氧化能力。

实施例4

<基于低温真空固液分离的仙人掌的固体成分对于人毛乳头细胞的细胞毒性的测定>

接着，对仙人掌的固体成分是否具有毛发生长·毛发生长促进效果进行验证。基于实施例3的结果，使用由抗氧化能力最高(bap值最高)的品种即青王丸得到的固体成分进行了验证。

首先，使用以下的材料或试验等，验证了仙人掌的固体成分是否对人毛乳头细胞具有细胞毒性。

<<材料>>

将实施例1中得到的仙人掌的固体成分1g在研钵中粉碎后，加入纯净水10ml，在30℃充分搅拌，使水溶性成分全部溶解(提取)到水中，之后进行离心分离，在关于毛发生长·毛发生长促进效果的验证实验(实施例4～6)中使用所得到的上清。

以下，将该得到的上清(如上所述利用水从仙人掌的固体成分中提取的液体)作为“仙人掌提取液”。该仙人掌提取液中包含仙人掌的固体成分中的全部水溶性成分。

<<人毛乳头细胞的培养条件>>

人毛乳头细胞使用了东洋纺株式会社制造的人头发毛乳头细胞(头顶部)、批号3036(白人男性、63岁)。

人毛乳头细胞使用毛乳头细胞专用培养基(东洋纺株式会社制造)在co2培育箱(5％co2、37℃)内进行培养。在细胞的传代中使用0.05％胰蛋白酶-edta(lifetechnologies公司)，将细胞从烧瓶(corning公司制造)剥离而使用。

<<细胞毒性试验>>

将上述人毛乳头细胞以5×10³细胞/0.1ml/孔接种在i型胶原蛋白包覆96孔细胞培养板(corning公司制造)上。在co2培育箱内(5％co2、37℃)培养1天后，置换成包含仙人掌提取液(最高终浓度：10％v/v，以下进行10倍系列稀释而制成6种浓度)的培养基。之后培养3天，利用活细胞数测定试剂sf(nacalaitesque株式会社制造)对细胞的增殖性(viability)进行了比较研究(n＝3)。

培养结束后，除去培养上清，添加含有10％活细胞测定试剂sf的培养基(100μl/孔)。在添加后30分钟和90分钟后，测定了培养上清的吸光度(测定波长450nm、参照波长595nm)。由测定值计算出每1小时的吸光度变化量。

结果示于图6。本实施例中使用的各浓度的相对活细胞数均多于对照(未添加仙人掌提取液)的相对活细胞数，仙人掌提取液对于人毛乳头细胞不具有毒性，暗示了具有细胞增殖促进活性的可能性。

实施例5

<基于低温真空固液分离的仙人掌的固体成分的人毛乳头细胞增殖效果的测定>

将上述人毛乳头细胞以5×10³细胞/0.1ml/孔接种在i型胶原蛋白包覆96孔板上。在co2培育箱内(5％co2、37℃)培养1天后，置换成包含仙人掌提取液(0.01％、0.1％、1％(v/v))的培养基。之后培养1或3天，利用活细胞数测定试剂sf对细胞的增殖性(viability)进行了比较研究(n＝3)。

结果示于图7。与对照(未添加仙人掌提取液)相比，通过添加仙人掌提取液，细胞数整体上增加。特别是，利用1％仙人掌提取液进行处理并培养了1天的情况下，与对照相比活细胞数显著增加(图7左)。

需要说明的是，使用与实施例4的试验同样的方法研究了细胞增殖性，但相对活细胞数比实施例4的结果低。所考虑的原因可以举出培养基的使用期限或人毛乳头细胞本身的增殖性的差异等。尽管该验证很困难，但在各试验中设定未添加仙人掌的对照区(对照)来进行比较，由此验证仙人掌提取液有效性的有无，由于为这样的体系，可知仙人掌提取液具有细胞增殖促进活性。

实施例6

<基于低温真空固液分离的仙人掌的固体成分在人毛乳头细胞中的fgf-7或vegf基因表达量的测定>

接着，使用以下的材料及试验等验证了仙人掌提取液是否具有增加由毛乳头细胞分泌的作为毛发生长促进因子而为人所知的fgf-7(纤维芽细胞增殖因子)和vegf(血管内皮细胞增殖因子)的表达量的作用。

<<材料>>

米诺地尔购入于sigma-aldrich公司，腺苷购入于和光纯药工业株式会社，二甲基亚砜(dmso)购入于sigma公司。

米诺地尔和腺苷作为毛发生长促进剂的有效成分而为人所知。dmso用作腺苷的溶剂。

<<fgf-7或vegf基因表达量的测定>>

将上述人毛乳头细胞以5×10³细胞/0.3ml/孔接种在i型胶原蛋白包覆48孔细胞培养板(corning公司制造)。

在co2培育箱内(5％co2、37℃)中培养1天后，使用仙人掌提取液(0.01％、0.1％、1％(v/v))，作为阳性对照使用了包含米诺地尔或腺苷的培养基，作为阴性对照使用了未添加仙人掌提取液的培养基而添加0.1％dmso的培养基。

之后，培养2小时或24小时，利用fastlanecellrt-pcr试剂盒(qiagen公司制造)回收总rna。逆转录为cdna后，通过rt-pcr法测定了fgf-7和vegf基因表达量。

使用gapdh基因作为内标，作为与阴性对照组的相对值而算出，以n＝3实施。

<<fgf-7或vegf基因表达量(相对表达量)的计算方法>>

首先，由各基因的扩增曲线与阈值线的交点计算出ct值(pcr循环数)。接下来，求出由目标基因(fgf-7或vegf基因)的ct值减去内标gapdh基因的ct值而得到的值(δct(样品处理区))。进而，将由δct值(样品处理区)减去空白的平均δct值(δct(空白))而得到的值作为δδct。然后，将该δδct值代入乘数项而得到的2^-δδct为相对表达量。

结果示于图8和图9中。在暴露于仙人掌提取液2小时的情况下，fgf-7基因表达与无添加区基本上没有变化，但在暴露24小时的情况下，表达上升为2倍左右(图8)。需要说明的是，在作为阳性对照的腺苷2小时处理区，表达显示出显著的表达上升，因而暗示试验本身进行得没有问题。

另外，关于vegf基因的基因表达，也是在暴露于仙人掌提取液2小时的情况下，与无添加区基本上没有变化，但在24小时的情况下，在仙人掌提取液1％处理区中表达显著上升(图9)。需要说明的是，在作为阳性对照的腺苷2小时处理区中，表达显示出显著的表达上升，因而暗示试验本身进行得没有问题。

另外，对仙人掌提取液来说，与暴露2小时相比，在暴露24小时的情况下，与作为阳性对照的米诺地尔和腺苷相比，fgf-7基因和vegf基因表达显著较高。由此暗示，仙人掌提取液所具有的毛发生长促进因子表达活化作用具有长时间持续性。

比较例1

通过低温真空提取(低温真空固液分离)以外的方法(由仙人掌的溶剂提取法、水蒸汽蒸馏法、超临界萃取法、压榨法等)得到的液体未显示出上述那样的极高的评价结果。

认为均是无法以良好的收率(例如全部量)或者良好的纯度获得有效成分，或者残存来自外部的混配物(溶剂等)，或者制造工序中具有温度高的时间(例如由于经历了高于55℃的温度)，因此混入了杂质、或者有效成分变质或减量。

由以上结果可知，“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分或利用水从该固体成分提取的仙人掌提取物”能够极其合适地用作抗氧化剂或毛发生长促进剂的有效成分。

工业实用性

本发明的抗氧化剂或毛发生长促进剂中包含的“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分”具有与迄今为止通过仙人掌的提取得到的提取物或其残渣(固体成分)明显不同的成分组成。另外，本发明中使用的“通过低温真空固液分离得到的仙人掌的固体成分”实质上全部为植物来源，在固液分离工序中无需使用溶剂，因此安全性极高。

因此，含有该仙人掌的固体成分(或来自该固体成分的提取物)作为有效成分的抗氧化剂或毛发生长促进剂当然可用于药品领域，还可广泛地用于香薰用品、芳香剂、护理用品、化妆品、食品、补品等领域中。

符号说明

1容器

2冷却器

6搅拌叶片

7下部半圆筒部

8上部方形部

9蒸气室

10排出口

14排气口

16配管

17投入口

18盖

20端壁

21端壁

22端板

23端板

24叶片体

24a槽

24b可动刀片

25叶片体

25a槽

25b可动刀片

26固定刀片

30倾斜面

31仙人掌

32真空计

33温度计

34温度计

41回收槽

45阀

46减压装置

49阀

50油层

51水层

61加热装置

62回收箱

35减压装置

s固体

r旋转方向