专利名称：一种page浓缩胶修复技术的制作方法
技术领域：
一种PAGE浓缩胶修复技术，属于生物技术领域。更具体的说是是一种将胶室内损坏的浓缩胶进行修复的技术。
背景技术：
PAGE凝胶电泳属于分子生物学常规技术，分离同工酶时采用的多为不连续凝胶系统，分为分离胶和浓缩胶。在凝胶灌注过程中，有时会由于外界温度、凝胶时间、光照强度、试剂、缓冲液PH等因素的干扰，导致浓缩胶不凝固，操作失败。一旦出现这种情况，现有的做法是清除整个胶体，返工重做，因而会大大延缓实验进程，浪费时间，也浪费药品。
发明内容
发明一种PAGE浓缩胶修复技术的目的是在出现胶体不凝固时，采取损坏部分修复的方法加以补救，既提高工作效率，又节约试验试剂。在凝胶灌注过程中，浓缩胶的灌注是在分离胶灌注后完全凝固的基础上进行的，所以当出现浓缩胶凝固不完全时，将之割去重做，就相当于节省了分离胶灌注的工耗和材料。本发明是这样实现的1.一种PAGE浓缩胶修复技术包括①分尚玻璃板与胶室；②分开玻璃板；③割除损坏胶；④装回玻璃板；⑤装回胶室封闭胶室侧缝；⑦灌注浓缩胶凝固浓缩胶。①分尚玻璃板与胶室旋松电泳槽旋钮，将胶室取出，刮去胶室与玻璃板底部、两侧结合处的琼脂凝胶，将玻璃板从胶室内取出；
②分开玻璃板用刀片插入右侧底部两块玻璃板接触部位，撬开两块玻璃板；
③割除损坏胶用刀片从分离胶和损坏的浓缩胶的分界处割开胶体，摒弃已损坏的浓缩胶，用蒸馏水将原浓缩胶处的玻璃板位置冲洗干净；
④装回玻璃板将两块玻璃板贴紧，装入胶室；
⑤装回胶室将胶室装入电泳槽，旋紧旋钮；
⑥封闭胶室侧缝用琼脂溶液封闭胶室的侧边缝隙；
⑦灌注浓缩胶将浓缩胶灌入短玻璃板最高处，插入样品梳；
⑧凝固浓缩胶将整个电泳槽转移25°C下凝固。本发明的有益效果是将浓缩胶不凝固的处理策略由完全返工改为部分返工，既节约了用工，也节约了时间和材料。
具体实施例方式 下面结合具体实施例对本发明进行进一步的描述。实施例1 :辣椒POD同工酶浓缩胶的快速修复
试验中遇到辣椒POD同工酶浓缩胶不凝固现象，采取了以下步骤进行修复
①分尚玻璃板与胶室旋松电泳槽旋钮，将胶室取出，刮去胶室与玻璃板底部、两侧结合处的琼脂凝胶，将玻璃板从胶室内取出；
②分开玻璃板用刀片插入右侧底部两块玻璃板接触部位，撬开两块玻璃板；
③割除损坏胶用刀片从分离胶和损坏的浓缩胶的分界处割开胶体，摒弃已损坏的浓缩胶，用蒸馏水将原浓缩胶处的玻璃板位置冲洗干净；
④装回玻璃板将两块玻璃板贴紧，装入胶室；
⑤装回胶室将胶室装入电泳槽，旋紧旋钮；
⑥封闭胶室侧缝用琼脂溶液封闭胶室的侧边缝隙；
⑦灌注浓缩胶将浓缩胶灌入短玻璃板最高处，插入样品梳；
⑧凝固浓缩胶将整个电泳槽转移25°C下凝固。通过以上步骤后，用提取的受盐胁迫的辣椒叶片POD同工酶进行电泳，获得了清晰分离的深蓝色POD同工酶条带。实施例2 =EST同工酶浓缩胶的快速修复
试验中遇到辣椒EST同工酶浓缩胶不凝固现象，采取了实施例1同样的步骤进行修复。修复后，用提取的受盐胁迫的辣椒叶片EST同工酶进行电泳，获得了清晰分离的淡红色EST同工酶条带。
权利要求
1.一种PAGE浓缩胶修复技术，其特征在于，针对同工酶分离时浓缩胶不凝固的故障，米取部分返工，只对浓缩胶进行修复，其程序包括:①分尚玻璃板与胶室，②分开玻璃板，③割除损坏胶，④装回玻璃板，⑤装回胶室，⑥封闭胶室侧缝，⑦灌注浓缩胶，⑧凝固浓缩胶，具体如下: ①分尚玻璃板与胶室:旋松电泳槽旋钮，将胶室取出，刮去胶室与玻璃板底部、两侧结合处的琼脂凝胶，将玻璃板从胶室内取出； ②分开玻璃板:用刀片插入右侧底部两块玻璃板接触部位，撬开两块玻璃板； ③割除损坏胶:用刀片从分离胶和损坏的浓缩胶的分界处割开胶体，摒弃已损坏的浓缩胶，用蒸馏水将原浓缩胶处的玻璃板位置冲洗干净； ④装回玻璃板:将两块玻璃板贴紧，装入胶室； ⑤装回胶室:将胶室装入电泳槽，旋紧旋钮； ⑥封闭胶室侧缝:用琼脂溶液封闭胶室的侧边缝隙； ⑦灌注浓缩胶:将浓缩胶灌入分离胶上层至短玻璃板最高限的下边Icm处，接着灌入蒸馏水至短玻璃板最高限； ⑧凝固浓缩胶:将整 个电泳槽转移25°C下凝固。
全文摘要
本发明公开了一种PAGE浓缩胶修复技术，属于生物技术领域。在同工酶分离的试验中，当出现浓缩胶不凝固的现象时，现有的做法是毁弃整个胶体，全部返工，费工，费时，也浪费试验材料。本发明提出了部分返工，针对性地修复浓缩胶的技术方案，克服了上述缺点。
文档编号B01D57/02GK103071387SQ201310000268
公开日2013年5月1日 申请日期2013年1月3日 优先权日2013年1月3日
发明者胡能兵, 隋益虎, 舒英杰, 周玉丽, 何克勤, 张子学, 崔广荣 申请人:安徽科技学院