一种可维持液面高度的层析柱的制作方法

本实用新型涉及一种层析柱，尤其是一种可维持液面高度的层析柱。

背景技术：

凝胶柱层析法是指混合物随流动相经过凝胶层析柱时，各组分按分子大小不同而被分离的技术，其可用于不同分子量的大分子物质（如蛋白质）分离。其原理是，凝胶（如葡聚糖凝胶Sephadex G-50等）在其中起分子筛的作用，利用分子量不同的物质在凝胶层析柱中移动速度不同，来分离不同分子量的大分子。大分子物质直径大于凝胶网孔，不能进入凝胶内部，只能沿着凝胶颗粒间隙随流动相向下移动，流程短、流速快，首先流出层析柱；小分子物质直径小于凝胶网孔，能自由出入，洗脱时间长，最后流出层析柱。

在进行凝胶柱层析法分离大分子物质时，流动液相的液面高度不可低于凝胶床，否则凝胶床可因没有液相浸泡而挥发变干，从而不可使用，即使重新浸入也无法有效发挥分子筛的作用。但是目前的层析柱没有维持液面高度的反馈调控机制，故当液面降低接近凝胶床时，需人工判断并加水或及时关闭凝胶柱阀门。

技术实现要素：

本实用新型目的在于解决上述不足，提供一种可维持液面高度的层析柱，使能始终保持液面高于凝胶床。

技术方案

一种可维持液面高度的层析柱,包括层析柱本体、旋转活塞、隔板、密网筛和反馈机构，所述旋转活塞位于层析柱本体下部，隔板位于层析柱本体内部下方，隔板中心设有供液相和大分子物质通过的隔板孔，隔板上方设有与隔板孔相配合的塞子；所述密网筛位于层析柱本体内隔板上方；所述反馈机构包括L型管、顶板、塑料球、镂空板、拉绳、定位滑轮和弹簧，L型管一端与层析柱本体下部连通，另一端设有顶板，顶板中心设有顶板通孔，顶板下方设有镂空板，镂空板中心设有镂空板通孔，顶板和镂空板之间设有塑料球，塑料球直径大于镂空板通孔和顶板通孔；拉绳的一端穿过镂空板通孔与塑料球连接，另一端通过两个水平设置的定位滑轮与塞子顶部连接，塞子底部设有拉线，拉线穿过隔板孔，并通过一个定位滑轮与弹簧的一端连接，弹簧的另一端与层析柱本体下部的侧壁连接。

进一步，所述镂空板与层析柱本体内的填料限高线在同一水平面上。

进一步，所述密网筛的筛孔孔径为1-10μm。

进一步，所述镂空板包括镂空板通孔和挡圈，挡圈与镂空板通孔通过四根连接杆连接。

进一步，所述顶板与镂空板的距离为塑料球直径的1.5-2倍。

有益效果：本发明有效解决了现有技术的层析柱由于没有维持液面高度的反馈调控机构，需要人工判断并加水或及时关闭凝胶柱阀门的问题，灵活利用了连通器原理和浮力作用，制作了简易的反馈机构，能够确保层析柱本体内的液面始终高于凝胶床，从而确保在使用过程中层析能够一直继续进行，而始终不会使凝胶床暴露在空气中。

附图说明

图1为本实用新型层析柱的结构示意图；

其中，1-层析柱本体；2-旋转活塞；3-隔板；4-塞子；5-L型管；6-顶板；7-塑料球；8-镂空板；9-拉绳；10-定位滑轮；11-弹簧；12-拉线；13-密网筛。

具体实施方式

下面通过附图和具体实施例对本发明作进一步说明。

如图1所示，一种可维持液面高度的层析柱,包括层析柱本体1、旋转活塞2、隔板3、密网筛13和反馈机构，所述旋转活塞2位于层析柱本体1下部，隔板3位于层析柱本体1内部下方，隔板3中心设有供液相和大分子物质通过的隔板孔，隔板上方设有与隔板孔相配合的塞子4；密网筛13位于层析柱本体1内隔板3上方，其筛孔孔径为5μm，可阻止凝胶继续下沉，但允许液相和大分子物质通过；所述反馈机构包括L型管5、顶板6、塑料球7、镂空板8、拉绳9、定位滑轮10和弹簧11，L型管5一端与层析柱本体1下部连通，另一端设有顶板6，顶板中心设有顶板通孔，顶板6下方设有镂空板8，镂空板8中心设有镂空板通孔，顶板6和镂空板8之间设有塑料球7，塑料球7直径大于镂空板通孔和顶板通孔；顶板6与镂空板8的距离为塑料球7直径的1.5倍；拉绳9的一端穿过镂空板通孔与塑料球7连接，另一端通过两个水平设置的定位滑轮10与塞子4顶部连接，塞子4底部设有拉线12，拉线12穿过隔板孔，并通过一个定位滑轮10与弹簧11的一端连接，弹簧11的另一端与层析柱本体1下部的侧壁连接；所述镂空板8与层析柱本体内的填料限高线在同一水平面上；所述镂空板8包括镂空板通孔和挡圈，挡圈与镂空板通孔通过四根连接杆连接。

使用时，将旋转活塞2关闭，从层析柱本体1上口加入凝胶+液相悬浊液至一定高度（超过L型管5中顶板6的高度），在此过程中，层析柱本体1和L型管5中液面均上升（连通器原理），当液面高过L型管5中的镂空板8后，浮力将塑料球7托起，并通过拉绳9向上拉起塞子4（同时塞子4通过拉线12将弹簧11拉长），但因旋转活塞2处于关闭状态，液面持续上升，当塑料球7被托至顶板6时，L型管5上端被封闭，液面无法上升，而层析柱本体1中液面仍可以上升。待凝胶沉淀在密网筛13上方成柱后（柱高不超过镂空板8水平，即到达层析柱本体1的填料限高线），加入待分离大分子溶液，打开旋转活塞2，液相与大分子物质向下移动，当液面高度降至镂空板8水平时，塞子4受弹簧牵引紧贴隔板3的隔板孔，封闭了层析柱本体1的底部，液面自动无法继续下降，可继续加入待分离大分子溶液，重新托起塑料球7，使层析继续进行，而始终不会使凝胶床暴露在空气中。