氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸）或乙二醇 或丙二醇或乙二醇和丙二醇的组合物。换而言之，在这些实施方案中，如果所述水性缓冲溶 液包含一种或多种氨基酸，则乙二醇和丙二醇的浓度各为O %。相反地，在这些实施方案中， 如果所述水性缓冲溶液包含乙二醇或丙二醇或两者，则所述一种或多种氨基酸的总浓度为 OmM0
[0116] 在一些实施方案中，所述水性缓冲溶液包含0% -60% (v/v)(如1% -50% (v/v)、 5%-40% (v/v)、8%-30% (v/v)、10%-25% (v/v)、15%-20% (v/v))的乙二醇。
[0117] 在那些实施方案中，其中所述水性缓冲溶液包含至少一种氨基酸，所述至少一种 氨基酸通常选自下组：丙氨酸、天冬酰胺、半胱氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、 亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸和缬氨酸。换而言之，在这些 实施方案中，通常不存在天冬氨酸、谷氨酸、色氨酸和酪氨酸。在那些实施方案中，其中所 述水性缓冲溶液包含至少一种氨基酸，所述至少一种氨基酸通常选自下组：丙氨酸、半胱氨 酸、甘氨酸、组氨酸、赖氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸和缬氨酸。换而言之，在这些实施方案 中，通常不存在天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙 氨酸、色氨酸和酪氨酸。在那些实施方案中，其中所述水性缓冲溶液包含至少一种氨基酸， 所述至少一种氨基酸通常选自下组：丙氨酸、甘氨酸、组氨酸和赖氨酸。换而言之，在这些 实施方案中，通常不存在天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、异亮氨酸、亮氨 酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸。
[0118] 在一个实施方案中，所述至少一种Good's缓冲液选自下组：MES、MOPS、Tris、ADA、 ACES、BES、Bicine、CAPS、CAPSO、CHES、HEPES、PIPES、TAPS 和 TES。在一个实施方案中，所 述至少一种Good' s缓冲液是MES，而在另一实施方案中，所述至少一种Good' s缓冲液是 MOPS0
[0119] 在一个实施方案中，所述生物分子是蛋白（例如，酶、结构蛋白、转运蛋白、信号蛋 白、跨膜蛋白、肽激素或抗体）或其片段，或核酸（例如，单链寡核苷酸、双链寡核苷酸、单 链多核苷酸或双链多核苷酸）。核酸可为，例如，DNA、RNA或由DNA和RNA形成的杂交双 链。在一个实施方案中，所述生物分子是酶（例如，氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、 异构酶或连接酶）。在一个实施方案中，所述酶是水解酶，如糖苷酶（经常称为糖苷水解 酶）。在一个实施方案中，所述糖苷酶是α-半乳糖苷酶，如选自下组的α-半乳糖苷酶： 阿加糖酶α (例如，Shire, United Kingdom制造的Replagal? )和阿加糖酶β (例如，由 Genzyme, Cambridge, MA制造的Fabrazyme? )。在一个实施方案中，所述α -半乳糖苷 酶是阿加糖酶β，而在另一实施方案中，所述生物分子是肽激素，如促甲状腺激素（也称为 TSH或促甲状腺素）。TSH是由两个亚基组成的糖蛋白，所述两个亚基为：α亚基和β亚 基。重组形式的人TSH-α可从Genzyme Corp.以商标名"Thyrogen"获得。在另一实施方 案中，所述生物分子是抗体，如单克隆抗体。在一些实施方案中，所述生物分子是糖基化的 蛋白。
[0120] 第四方面，本发明涉及水性缓冲溶液用于从多峰树脂解吸生物分子的用途，其中 所述水缓冲该溶液包含如下、基本上由如下组成或者由如下组成：
[0121] -至少15mM的至少一种Good's缓冲液，如15mM-2. 5M的至少一种Good's缓冲液， 50mM-2. 0M、75mM-l. 5M、IOOmM-L 25M、200mM-l. 0M、300mM-900mM、400mM-750mM 的至少一种 Good's缓冲液；
[0122] -总浓度为 0-400mM (如 0mM、10mM-350mM、25mM-300mM、50mM-250mM、100mM-200mM 或125mM-150mM)的丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘 氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色 氨酸、酪氨酸和缬氨酸；
[0123] -总浓度为 0-400mM (如 0mM、10mM-350mM、25mM-300mM、50mM-250mM、100mM-200mM 或125mM-150mM)的尿素、盐酸胍、硫氰酸胍、氯化铵、硫酸铵、磷酸铵、乙酸铵、氯化钠、柠檬 酸钠、辛酸钠、磷酸钠、碘化钠、氯化钾、柠檬酸钾、硫酸钾、磷酸钾、碘化钾、氯化镁、硫酸镁、 磷酸镁、氯化钙、硫酸钙、磷酸钙和牛磺酸；和
[0124] -〇 % -60 % (v/v)(如 1 % -50 % (v/v)、5 % -40 % (v/v)、8 % -30 % (v/v)、 10%-25% (v/v)或15%-20% (v/v))的乙二醇或丙二醇或乙二醇和丙二醇的混合物。
[0125] 如将在下文的实验部分阐述，本文描述的水性缓冲溶液特别适用于从多峰树脂解 吸生物分子。特别意外的是Good' s缓冲液在从多峰树脂解吸生物分子中有效至与精氨酸 具有可比性的程度。
[0126] 在一些实施方案中，所述水性缓冲溶液包含至少一种氨基酸（例如，丙氨酸、精氨 酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、 赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸）或乙二醇 或丙二醇或乙二醇和丙二醇的组合物。换而言之，在这些实施方案中，如果所述水性缓冲溶 液包含一种或多种氨基酸，则乙二醇和丙二醇的浓度各为0 %。相反地，在这些实施方案中， 如果所述水性缓冲溶液包含乙二醇或丙二醇或两者，则所述一种或多种氨基酸的总浓度为 OmM0
[0127] 在一些实施方案中，所述水性缓冲溶液包含0% -60% (v/v)(如1% -50% (v/v)、 5%-40% (v/v)、8%-30% (v/v)、10%-25% (v/v)、15%-20% (v/v))的乙二醇。
[0128] 在那些实施方案中，其中所述水性缓冲溶液包含至少一种氨基酸，所述至少一种 氨基酸通常选自下组：丙氨酸、天冬酰胺、半胱氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、 亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸和缬氨酸。换而言之，在这些 实施方案中，通常不存在天冬氨酸、谷氨酸、色氨酸和酪氨酸。在那些实施方案中，其中所 述水性缓冲溶液包含至少一种氨基酸，所述至少一种氨基酸通常选自下组：丙氨酸、半胱氨 酸、甘氨酸、组氨酸、赖氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸和缬氨酸。换而言之，在这些实施方案 中，通常不存在天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙 氨酸、色氨酸和酪氨酸。在那些实施方案中，其中所述水性缓冲溶液包含至少一种氨基酸， 所述至少一种氨基酸通常选自下组：丙氨酸、甘氨酸、组氨酸和赖氨酸。换而言之，在这些 实施方案中，通常不存在天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、异亮氨酸、亮氨 酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸。
[0129] 在一个实施方案中，所述至少一种Good's缓冲液选自下组：MES、M0PS、Tris、ADA、 ACES、BES、Bicine、CAPS、CAPS0、CHES、HEPES、PIPES、TAPS 和 TES。在一个实施方案中，所 述至少一种Good' s缓冲液是MES，而在另一实施方案中，所述至少一种Good' s缓冲液是 MOPSo
[0130] 在一个实施方案中，所述生物分子是蛋白（例如，酶、结构蛋白、转运蛋白、信号蛋 白、跨膜蛋白、肽激素或抗体）或其片段，或核酸（例如，单链寡核苷酸、双链寡核苷酸、单链 多核苷酸或双链多核苷酸）。核酸可为，例如，DNA、RNA或由DNA和RNA形成的杂交双链。 在一个实施方案中，所述生物分子是酶（例如，氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂合酶、异构 酶或连接酶）。在一个实施方案中，所述酶是水解酶，如糖苷酶（经常称为糖苷水解酶）。 在另一实施方案中，所述糖苷酶是 α-半乳糖苷酶，如阿加糖酶α (例如，Shire, United Kingdom制造的Replagal? )或阿加糖酶β (例如，由Genzyme, Cambridge, MA制造的 Fabrazyme? )。在一个实施方案中，所述α-半乳糖苷酶是阿加糖酶β。在另一实施 方案中，所述生物分子是肽激素，如促甲状腺激素（也称为TSH或促甲状腺素）。TSH是由 两个亚基组成的糖蛋白，所述两个亚基为：α亚基和β亚基。重组形式的人TSH-α可从 Genzyme Corp.以商标名"Thyrogen"获得。在另一实施方案中，所述生物分子是抗体，如单 克隆抗体。在一些实施方案中，所述生物分子是糖基化的蛋白。
[0131] 在一个实施方案中，所述多峰树脂选自下组：Capto? Adhere、Capto? MMC、Pall PPA HyperCel?、Pall HEA HyperCel?、Pall MEP HyperCel?和 Eshmuno? HCX 介质。在 本申请提交日于这些多峰树脂中使用的配体示于图4、5、6A、6B、6C和7。在一个实施方案 中，所述多峰树脂是Capto? Adhere。
[0132] 第五方面，本发明涉及水性缓冲溶液用于增加吸附在多峰树脂上的生物分子的回 收率的用途，其中通过将（a)其上已吸附所述生物分子的多峰树脂与（b)水性缓冲溶液接 触，其中所述水性缓冲溶液包含如下、基本上由如下组成或者由如下组成：
[0133] -至少15mM的至少一种Good's缓冲液，如15mM_2. 5M的至少一种Good's缓冲液， 50mM-2. 0M、75mM-l. 5M、IOOmM-L 25M、200mM-l. 0M、300mM-900mM、400mM-750mM 的至少一种 Good's缓冲液；
[0134] -总浓度为 0-400mM (如 0mM、10mM-350mM、25mM-300mM、50mM-250mM、100mM-200mM 或125mM-150mM)的丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘 氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色 氨酸、酪氨酸和缬氨酸；
[0135] -总浓度为 0-400mM (如 0mM、10mM-350mM、25mM-300mM、50mM-250mM、100mM-200mM 或125mM-150mM)的尿素、盐酸胍、硫氰酸胍、氯化铵、硫酸铵、磷酸铵、乙酸铵、氯化钠、柠檬 酸钠、辛酸钠、磷酸钠、碘化钠、氯化钾、柠檬酸钾、硫酸钾、磷酸钾、碘化钾、氯化镁、硫酸镁、 磷酸镁、氯化钙、硫酸钙、磷酸钙和牛磺酸；和
[0136] -〇 % -60 % (v/v)(如 1 % -50 % (v/v)、5 % -40 % (v/v)、8 % -30 % (v/v)、 10%-25% (v/v)或15%-20% (v/v))的乙二醇或丙二醇或乙二醇和丙二醇的混合物。
[0137] 如将在下文的实验部分阐述，本文描述的水性缓冲溶液特别适用于以很高的回收 率从多峰树脂解吸生物分子。发明人使用本发明所述的水性缓冲溶液实现了多至99%的回 收率（参见表1)。
[0138] 在一些实施方案中，所述水性缓冲溶液包含至少一种氨基酸（例如，丙氨酸、精氨 酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、 赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸）或乙二醇 或丙二醇或乙二醇和丙二醇的组合物。换而言之，在这些实施方案中，如果所述水性缓冲溶 液包含一种或多种氨基酸，则乙二醇和丙二醇的浓度各为O %。相反地，在这些实施方案中， 如果所述水性缓冲溶液包含乙二醇或丙二醇或两者，则所述一种或多种氨基酸的总浓度为 OmM0
[0139] 在第五方面的一些实施方案中，所述水性缓冲溶液包含0% -60% (v/v)(如 1%_50% (v/v)、5%_40% (v/v)、8%_30% (v/v)、10%_25% (v/v)、15%_20% (v/v)) 的乙二醇。
[0140] 在那些实施方案中，其中所述水性缓冲溶液包含至少一种氨基酸，所述至少一种