高效液相色谱仪中正相填料柱的再生方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及有机物分析领域，尤其涉及高效液相色谱仪中正相填料柱的再生方法。
【背景技术】
[0002]高效液相色谱仪的系统由储液器、栗、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压栗打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
[0003]通常，样品中含有一些对分析者来说不感兴趣的东西。盐、脂质、含脂物质、腐质酸、疏水蛋白质和其它一些生物物质是一些可能在使用时与HPLC柱发生相互作用的物质。这些物质有比分析者的目标物或少或大的保留值。那些保留值较小的物质如盐类一般来说在空体积时就被冲出色谱柱。这些非目标产物的干扰能被检测器检测到而且能形成色谱峰，气泡，基线上移或者是负峰。如果样品成分在柱子中有很强的保留而且流动相溶液成分不足以把这些物质洗脱下来，多次上样后，这些吸附在柱子表面的物质通常就会积累在柱头。这些行为通常只有通过平行实验才能发现。有着中等保留值的样品能被缓慢洗出而且表现为宽峰，基线扰动，或者基线漂移。有时候这些被吸附的样品成分累积到一定程度足以使他们开始形成新的固定相。分析物能与这些杂质作用形成一定的分离机理。保留时间会波动，拖尾会出现。如果足够的污染产生，柱子的反压能超过栗所能承受的最大压力，使柱子无法工作以及在堵塞处产生空体积。这时，我们就要对色谱柱进行再生。而现有的反相填料柱再生方法一般是通过水一甲醇一异丙醇一二氯甲烷一异丙醇一甲醇一水进行清洗，没有专门的正相填料柱再生方法。
【发明内容】
[0004]本发明要解决的技术问题是现有的高效液相色谱仪中正相填料柱再生方法效果差，无专门的再生方法，为此提供一种高效液相色谱仪中正相填料柱的再生方法。
[0005]本发明的技术方案是:高效液相色谱仪中正相填料柱的再生方法，它包括以下步骤:(I)、倒转正相填料柱，用40-44倍体积的四氢呋喃反冲正相填料柱，四氢呋喃流速控制在2-4L/min; (2)、用50-56倍体积的甲醇反冲正相冲填料柱，甲醇流速控制在2_4L/min;(3)、用48-50倍体积的四氢呋喃反冲正相填料柱，四氢呋喃流速控制在4-6 L/min; (4)、用20-30倍体积的二氯甲烷反冲正相填料柱，二氯甲烷流速控制在6-10 L/min; (5)、用10-20倍体积的无水正己烷反冲正相填料柱，无水正己烷流速控制在5-8 L/min。
[0006]本发明的有益效果是采用四氢呋喃-甲醇-四氢呋喃-二氯甲烷-无水正己烷流速逐渐提高、与正相填料柱相比的体积倍数逐渐降低的方法来再生正相填料柱，再生效果好，正相色谱柱中水分含量少。
【具体实施方式】
[0007]下面结合实施例对本发明做进一步说明。
[0008]实施例1:高效液相色谱仪中正相填料柱的再生方法，它包括以下步骤:(1)、倒转正相填料柱，用40倍体积的四氢呋喃反冲正相填料柱，四氢呋喃流速控制在2L/min; (2)、用50倍体积的甲醇反冲正相冲填料柱，甲醇流速控制在2L/min; (3)、用48倍体积的四氢呋喃反冲正相填料柱，四氢呋喃流速控制在4L/min; (4)、用20倍体积的二氯甲烷反冲正相填料柱，二氯甲烷流速控制在6L/min; (5)、用1倍体积的无水正己烷反冲正相填料柱，无水正己烷流速控制在5L/min。
[0009]实施例2:高效液相色谱仪中正相填料柱的再生方法，它包括以下步骤:(I)、倒转正相填料柱，用42倍体积的四氢呋喃反冲正相填料柱，四氢呋喃流速控制在3L/min; (2)、用52倍体积的甲醇反冲正相冲填料柱，甲醇流速控制在3L/min; (3)、用49倍体积的四氢呋喃反冲正相填料柱，四氢呋喃流速控制在5 L/min; (4)、用25倍体积的二氯甲烷反冲正相填料柱，二氯甲烷流速控制在8 L/min; (5)、用15倍体积的无水正己烷反冲正相填料柱，无水正己烧流速控制在7 L/min。
[0010]实施例3:高效液相色谱仪中正相填料柱的再生方法，它包括以下步骤:(I)、倒转正相填料柱，用44倍体积的四氢呋喃反冲正相填料柱，四氢呋喃流速控制在4L/min; (2)、用56倍体积的甲醇反冲正相冲填料柱，甲醇流速控制在4L/min; (3)、用50倍体积的四氢呋喃反冲正相填料柱，四氢呋喃流速控制在6 L/min; (4)、用30倍体积的二氯甲烷反冲正相填料柱，二氯甲烷流速控制在1 L/min; (5)、用20倍体积的无水正己烷反冲正相填料柱，无水正己烧流速控制在8 L/min。
[0011]本发明可以有效去除正相填料柱中的水分，保证固定相的水分含量变化较小，从而保持水分条件的一致性。
【主权项】
1.高效液相色谱仪中正相填料柱的再生方法，其特征是它包括以下步骤:(I)、倒转正相填料柱，用40-44倍体积的四氢呋喃反冲正相填料柱，四氢呋喃流速控制在2-4L/min;(2)、用50-56倍体积的甲醇反冲正相冲填料柱，甲醇流速控制在2-4L/min; (3)、用48-50倍体积的四氢呋喃反冲正相填料柱，四氢呋喃流速控制在4-6 L/min; (4)、用20-30倍体积的二氯甲烷反冲正相填料柱，二氯甲烷流速控制在6-10 L/min;(5)、用10-20倍体积的无水正己烷反冲正相填料柱，无水正己烷流速控制在5-8 L/min。
【专利摘要】本发明公开了高效液相色谱仪中正相填料柱的再生方法，它包括以下步骤：（1）、倒转正相填料柱，用40-44倍体积的四氢呋喃反冲正相填料柱，四氢呋喃流速控制在2-4L/min；（2）、用50-56倍体积的甲醇反冲正相冲填料柱，甲醇流速控制在2-4L/min；（3）、用48-50倍体积的四氢呋喃反冲正相填料柱，四氢呋喃流速控制在4-6L/min；（4）、用20-30倍体积的二氯甲烷反冲正相填料柱，二氯甲烷流速控制在6-10L/min；（5）、用10-20倍体积的无水正己烷反冲正相填料柱，无水正己烷流速控制在5-8L/min。本发明的有益效果是再生效果好，正相色谱柱中水分含量少。
【IPC分类】B01D15/42
【公开号】CN105561631
【申请号】CN201510929732
【发明人】袁泳
【申请人】袁泳
【公开日】2016年5月11日
【申请日】2015年12月15日