专利名称：诊断试剂条的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及医用诊断试剂条。
背景技术：
多种检测外周血或尿液HCG或LH水平的定性或定量方法已经被报道。最常用的方法是放射免疫或酶联免疫测定。它们都能对HCG、LH进行相对灵敏特异的定量。缺点是用时长，需要专业人员和专业设备进行测量。现有检测HCG或LH的快速诊断试剂条虽然能在五分钟左右的时间内检测其升高与否，但不能进行有效定量。虽然光密度扫描仪能对结合在硝酸纤维素膜表面的胶体金或彩色乳胶珠藕联抗体复合物进行扫描定量，但其不能对位于硝酸纤维素膜表面下约90％的复合物进行扫描定量，导致“定量”很不准确而且稳定性差。由于LH升高发生在很短时间内，这将会大大增加检测到LH峰值从而确定排卵时间的难度。定量检测即使无法捕捉到峰值，也可根据LH短时间内的快速升高而提供宝贵的排卵预测时间。HCG的确切定量无论对于监测孕妇体内激素水平以了解胎儿状况，还是对于监测绒癌患者对治疗的反应都有重要意义。虽然PCR方法检测荧光标记的PCR产物也可以对HCG、LH进行定量，但用荧光技术对HCG、LH的mRNA水平进行定量存在假阳性率高和数据间可比性较差的问题。此外，上述检验方法均需要复杂昂贵的设备及专业人员进行操作，且费用较高，用时较长。
多种检测外周血或尿液AFP、CEA、PSA等肿瘤标记物水平的定性或定量方法已经被报道。最常用的方法是放射免疫或酶联免疫测定。它们都能对AFP、CEA、PSA等进行相对灵敏特异的定量。其缺点是用时长，需要专业人员和专业设备进行测量。现有检测AFP、CEA、PSA等的快速诊断试剂条虽然能在五分钟左右的时间内检测其升高与否，但不能进行有效定量。虽然光密度扫描仪能对结合在硝酸纤维素膜表面的胶体金或彩色乳胶珠藕联抗体复合物进行扫描定量，但其不能对位于硝酸纤维素膜表面下约90％的复合物进行扫描定量，导致“定量”很不准确而且稳定性差。这将会使大量AFP、CEA、PSA等低浓度升高和肿瘤切除术后AFP、CEA、PSA等低浓度升高的肿瘤患者丧失宝贵的治疗时机。随着PCR技术的快速发展和普及，检测荧光技术对AFP、CEA、PSA等的mRNA水平进行定量虽然敏感，但存在假阳性率高和PCR定量技术固有的缺陷——数据间可比性较差。基因芯片虽然可以同时对成千上万的基因进行检测，但其特异性差且稳定性和重复性低而无法用于临床诊断。并且核酸水平的定量并不能真实地反映最终蛋白表达水平的差异。另外，上述检验方法均需要复杂昂贵的设备及专业人员进行操作，且费用较高，用时较长。
发明内容
本实用新型所要解决的技术问题是避免上述现有技术所存在的不足之处，提供一种方便、快捷、可获得定量检测的诊断试剂条。该诊断试剂条可针对HCG、LH进行快速定量或定性，用于诊断早早孕和确定排卵时间或监测绒癌治疗效果。该诊断试剂条也可针对AFP、CEA、PSA等肿瘤标记物进行灵敏可靠的现场定量或定性测定，从而为积极有效的治疗提供契机。
本实用新型解决技术问题所采用的技术方案是本实用新型的结构特点是在条状支持物上，自近端至远端依次邻接的是样品垫、含有磁性彩色乳胶珠标记二抗的藕联物释放垫，含有特异性抗体的硝酸纤维素膜以及吸收垫。
本实用新型还可以设置外部壳体，在所述外部壳体上，对应于样品垫所在位置处，设置样品槽，对应于结合抗体处硝酸纤维素膜所在位置，设有显示窗。
本实用新型作为定量检测血或尿或其他体液中的HCG、LH试纸条，用于诊断早早孕和确定排卵时间或监测绒癌治疗效果，用磁性彩色胶珠标记抗体I(特异性地识别HCG、LH)，将其冷冻浓缩在释放垫中。针对HCG、LH的特异抗体II和针对抗体I的抗体III固定在硝酸纤维素膜上。含有HCG、LH的体液标本如全血、血清、血浆、尿液等，滴加到样品垫上，经过吸收垫的虹吸作用通过玻璃纤维滤层过后将标记磁性彩色乳胶珠的抗体I水化，样品中的肿瘤抗原与带有磁性彩色乳胶珠的抗体I结合后，向抗体II和抗体III所在部位移动并与抗体II和抗体III结合。未与抗体II或抗体III结合的乳胶珠颗粒继续向吸收垫移动并停留在那里。含有HCG、LH的标本经过一系列反应后在显示窗出现两条彩色带，用手提磁性读数仪扫描后可直接快速定量。也可以根据显示窗出现一条带或两条带来直接定性判断结果。
本实用新型作为定量检测血或尿或其他体液中肿瘤标记物AFP、CEA、PSA等的试纸条，用于肿瘤病人的早期筛查及术后监测转移复发或监测治疗效果。用磁性彩色胶珠标记抗体I(特异性地识别AFP、CEA、PSA等)，将其冷冻浓缩在释放垫中。针对肿瘤标记物如AFP、CEA、PSA等的特异抗体II和针对抗体I的抗体III固定在硝酸纤维素膜上。含有AFP、CEA、PSA等肿瘤抗原的体液标本如全血、血清、血浆、尿液等，滴加到样品垫上，经过吸收垫的虹吸作用通过玻璃纤维滤层过后将标记磁性彩色乳胶珠的抗体I水化，样品中的肿瘤抗原与带有磁性彩色乳胶珠的抗体I结合后，向抗体II和抗体III所在部位移动并与抗体II和抗体III结合。未与抗体II或抗体III结合的乳胶珠颗粒继续向吸收垫移动并停留在那里。含有AFP、CEA、PSA等肿瘤抗原的标本经过一系列反应后在显示窗出现两条彩色带，用手提磁性读数仪扫描后可直接快速定量。不含AFP、CEA、PSA等肿瘤标记物的样品经过反应后，显示窗只出现一条带，手提磁性读数仪扫描后能精确定量，也可以根据显示窗出现一条带或两条带来直接定性判断结果。
与已有技术相比，本实用新型的有益效果体现在本实用新型选择对HCG、LH或AFP、CEA、PSA等肿瘤标记物蛋白水平进行测定，并用磁性乳胶标记抗体，用磁性读数仪进行现场扫描计数，或直接目测，从而实现了对HCG、LH或AFP、CEA、PSA进行极为灵敏可靠的现场精确定量、定性测定，方便准确快捷，为积极治疗提供了契机。
图1为本实用新型结构示意图。
图2为本实用新型外形示意图。
图中标号1支持物、2粘合剂层、3硝酸纤维素膜、4释放垫、5吸收垫、6对照线、7标靶线、8样品垫、9样品槽、10显示窗、11外部壳体。
具体实施方式
参见图1，本实施例是在条状支持物1上，自近端至远端依次邻接的是样品垫8、含有磁性彩色乳胶珠标记二抗的藕联物释放垫4，含有特异性抗体的硝酸纤维素膜3以及吸收垫5。其中，样品垫8由纤维素滤膜制成，有充分的微孔和容量，用于吸收样品及控制待测流入藕联物释放垫的速度。藕联物释放垫4由玻璃纤维制成，容纳干燥的磁性彩色乳胶珠标记二抗。硝酸纤维素膜3用于固定特异性抗体，含有待测样品和藕联物的液体能在硝酸纤维素膜3上以一定的速度流动并与对应抗体在其上的相应抗体线结合。吸收垫5由纤维素滤膜制成，能吸收容纳待测液体并控制待测液体流过藕联物释放垫4和硝酸纤维素膜3的速度。
具体实施中，在藕联物释放垫4与硝酸纤维素膜3的连接处，是以藕联物释放垫4搭接在硝酸纤维素膜3上。在吸收垫5与硝酸纤维素膜3的连接处，是以吸收垫5搭接在硝酸纤维素膜3上，这种“搭接”的方式与“拼接”的方式相比，液体的转移更充分，连接更紧密，更利于固定。包括硝酸纤维素膜3、释放垫4、吸收垫5和样品垫8在内，均以压力敏感的粘合剂形成粘合剂层2粘结在支持物1。
参见图2，设置外部壳体11，在外部壳体11上，对应于样品垫8所在位置处，设置有样品槽9，对应于硝酸纤维素膜3所在位置处，设有显示窗10。
作为HCG或LH诊断试剂条，含在藕联物释放垫4中的用彩色乳胶珠标记的是针对HCG或LH的特异性抗体I。含在硝酸纤维素膜3中的特异性抗体为针对HCG或LH的特异性抗体II和针对所述抗体I的抗体III。
具体使用为含有HCG、LH的体液如全血、血清、血浆、尿液等，滴加到样品垫上，经过吸收垫的虹吸作用通过玻璃纤维滤过层后将标记磁性彩色乳胶珠的抗体I水化。样品中的肿瘤抗原与带有磁性彩色乳胶珠的抗体I结合，向抗体II和抗体III所在部位移动并与抗体II和抗体III结合。未与抗体II或抗体III结合的乳胶珠颗粒继续向吸收垫移动并停留在那里。含有HCG、LH的标本经过一系列反应后在显示窗(抗体II和抗体III的位置处)出现两条彩色带，包括对照线6和标靶线7，用手提磁性读数仪扫描后可直接快速定量。不含HCG、LH的样品经过反应后，未结合抗原的抗体I，只与抗体III结合，在抗体III的位置处出现一条带，即对照线6，手提磁性读数仪扫描快速精确定量。也可以根据显示窗出现一条带或两条带来直接定性判断结果。
作为AFP或CEA或PSA诊断试剂条，含在藕联物释放垫4中的用彩色乳胶珠标记的是针对AFP或CEA或PSA肿瘤标记物的特异抗体I。含在硝酸纤维素膜3中的特异性抗体为针对AFP或CEA或PSA肿瘤标记物的特异性抗体II和针对所述抗体I的抗体III。
具体使用为含有AFP或CEA或PSA等肿瘤抗原的体液如全血、血清、血浆、尿液等，滴加到样品垫上，经过吸收垫的虹吸作用通过玻璃纤维滤过层后将标记磁性彩色乳胶珠的抗体I水化。样品中的肿瘤抗原与带有磁性彩色乳胶珠的抗体I结合，向抗体II和抗体III所在部位移动并与抗体II和抗体III结合。未与抗体II或抗体III结合的乳胶珠颗粒继续向吸收垫移动并停留在那里。含有AFP或CEA或PSA等肿瘤抗原的标本经过一系列反应后在显示窗(抗体II和抗体III的位置处)出现两条彩色带，包括对照线6和标靶线7，用手提磁性读数仪扫描后可直接快速定量。不含AFP或CEA或PSA和样品经过反应后，未结合抗原的抗体I，只与抗体III结合，在抗体III的位置处出现一条带，即对照线6，手提磁性读数仪扫描快速精确定量。也可以根据显示窗出现一条带或两条带来直接肉眼定性判断结果。
权利要求1.诊断试剂条，其特征是在条状支持物(1)上，自近端至远端依次邻接的是样品垫(8)、含有磁性彩色乳胶珠标记二抗的藕联物释放垫(4)，含有特异性抗体的硝酸纤维素膜(3)以及吸收垫(5)。
2.根据权利要求1所述的诊断试剂条，其特征是在所述藕联物释放垫(4)与硝酸纤维素膜(3)的连接处，藕联物释放垫(4)搭接在硝酸纤维素膜(3)上。
3.根据权利要求1所述的诊断试剂条，其特征是在所述吸收垫(5)与硝酸纤维素膜(3)的连接处，吸收垫(5)搭接在硝酸纤维素膜(3)上。
4.根据权利要求1所述的诊断试剂条，其特征是设置外部壳体(11)，在所述外部壳体(11)上，对应于样品垫(8)所在位置处，设有样品槽(9)，对应于结合抗体处硝酸纤维素膜(3)所在位置，设有显示窗(10)。
5.根据权利要求1所述的诊断试剂条，其特征是所述含在藕联物释放垫(4)中的用彩色乳胶珠标记的是针对HCG或LH的特异性抗体I；所述含在硝酸纤维素膜(3)中的特异性抗体为针对HCG或LH的特异性抗体II和针对所述抗体I的抗体III。
6.根据权利要求1所述的诊断试剂条，其特征是所述含在藕联物释放垫(4)中的用彩色乳胶珠标记的是针对AFP或CEA或PSA肿瘤标记物的特异抗体I；所述含在硝酸纤维素膜(3)中的特异性抗体为针对AFP或CEA或PSA肿瘤标记物的特异性抗体II和针对所述抗体I的抗体III。
7.根据权利要求1所述的诊断试剂条，其特征是所述样品垫(8)为纤维素滤膜。
专利摘要诊断试剂条，其特征是在条状支持物上，自近端至远端依次邻接的是样品垫、含有磁性彩色乳胶珠标记二抗的耦联物释放垫，含有特异性抗体的硝酸纤维素膜以及吸收垫。本实用新型选择对HCG、LH或AFP、CEA、PSA等肿瘤标记物蛋白水平进行测定，并用磁性乳胶标记抗体，用磁性读数仪进行现场扫描计数，或直接目测，从而实现了对HCG、LH或AFP、CEA、PSA进行极为灵敏可靠的现场精确定量、定性测定，方便准确快捷，为积极治疗提供了契机。
文档编号G01N33/544GK2672656SQ20032012365
公开日2005年1月19日 申请日期2003年12月29日 优先权日2003年12月29日
发明者牛旗, 李倩 申请人:牛旗