专利名称：烟用香精香料中香豆素和黄樟素含量的测定方法
技术领域：
本发明涉及测定香豆素和黄樟素含量的测定方法，具体是指烟用香精香料中香豆 素和黄樟素含量的测定方法。
背景技术：
目前香豆素和黄樟素已经被证明对动物体有极强的毒副作用，可能造成内部脏器 损伤，甚至诱发癌症。香豆素和黄樟素主要来源于植物。烟用香精香料在生产制造过程中， 有可能引入香豆素和黄樟素，对消费者的健康造成潜在的威胁。因此，有必要对烟用香精香 料中香豆素和黄樟素的含量加以控制。相对于食品和日用品等其他类型的香精香料，烟用香精香料有其自身的特点。烟 用香精香料成分复杂，来源广泛，多呈液态或膏态，其中的香豆素和黄樟素均不溶于水，易 溶于有机溶剂。目前，香豆素和黄樟素的样品处理方法有直接萃取法、超声萃取法、同时蒸馏萃取 法、水蒸气蒸馏法等。这些前处理方法都存在不同程度的不足之处，直接萃取法和超声萃取 法比较快捷，但会萃取出较多的干扰物质；同时蒸馏萃取法和水蒸气蒸馏法工作量较大，比 较耗时，且由于萃取过程中使用了较高温度，存在化学物质损失的潜在可能性。
发明内容
本发明的目的是提供一种烟用香精香料中香豆素和黄樟素含量的测定方法，不仅 能较完全地萃取出烟用香精香料中的香豆素和黄樟素，而且在萃取过程中，可以极大地去 除干扰物质，使样品谱图得到净化，同时也减少了样品对仪器进样口和色谱柱的污染，可满 足实际工作中大批量样品检测的需要。本发明提供烟用香精香料中香豆素和黄樟素含量的测定方法，包括以下步骤1)萃取液配制取适量丙酸苯乙酯，配制含丙酸苯乙酯的二氯甲烷溶液，作为萃 取液；2)标准工作液的配制称取香豆素和黄樟素，用萃取液溶解定容到容量瓶中， 作为标准储备液，将标准储备液通过逐级稀释配制含香豆素和黄樟素分别为lOOOng/mL、 500ng/mL、200ng/mL、100ng/mL、50ng/mL 的标准工作液；3)样品的处理取烟用香精香料加入饱和氯化钠水溶液，振荡，使香精香料均勻 分散在饱和氯化钠水溶液中，再加入萃取液，充分振荡后静置，待分层后取下层液体过滤作 为待测样；4)样品的测定取0.5 IyL待测样，注入气质联用仪，丙酸苯乙酯、香豆素和黄 樟素分别以m/z为104、146、162离子定量，使用内标法绘制标准曲线，试样与标准曲线拟 合，得出试样香豆素和黄樟素含量。所述萃取液中丙酸苯乙酯的浓度为lOOng/mL。在步骤2)中，按照每克烟用香精香料加入5mL饱和氯化钠水溶液的量，饱和氯化钠水溶液与萃取液的体积比为1 2。在步骤3)中，静置分层时可使用离心机加快分层速度。在步骤4)中，气质联用仪的色谱条件使用非极性色谱柱，载气为高纯氦，柱流速 为2mL/min恒流，不分流，进样口温度为320°C，程序升温为柱初始温度70°C，保持lmin，以 IO0C /min的速率升至160°C，保持Omin，然后以40°C /min的速率升至300°C，保持IOmin ；气质联用仪的质谱条件接口温度为280°C，离子源温度为280°C，四极杆温度为 200°C，电离能量为70eV，溶剂延迟时间为6min，时间事件为12分钟关闭检测器，全扫描质 量范围为50-200amu，选择离子监测模式黄樟素的质荷比m/z为162、135、131，丙酸苯乙酯 的质荷比m/z为104、91、77，香豆素的质荷比m/z为146、118、90。所述非极性色谱柱为DB-35MS。本发明以编号为10712的样品(该样品未检出黄樟素)为对象，添加了中等浓度 的香豆素和黄樟素，做加标回收率试验，平行测定6次，结果如表1。表1方法的回收率
权利要求
1.一种烟用香精香料中香豆素和黄樟素含量的测定方法，包括以下步骤1)萃取液配制将丙酸苯乙酯加入到二氯甲烷溶液中配制成萃取液；2)标准工作液的配制称取香豆素和黄樟素，用萃取液溶解定容到容量瓶中，作为标 准储备液，将标准储备液通过逐级稀释配制含香豆素和黄樟素的标准工作液；3)样品的处理取烟用香精香料加入饱和氯化钠水溶液，振荡，使香精香料均勻分散 在饱和氯化钠水溶液中，再加入萃取液，充分振荡后静置，待分层后取下层液体过滤作为待 测样；4)样品的测定取0.5 1 μ L待测样，注入气质联用仪，选择丙酸苯乙酯、香豆素和黄 樟素在质谱图中的质荷比m/z分别为104、146、162的离子进行定量分析，使用内标法绘制 标准曲线，试样与标准曲线拟合，得出试样香豆素和黄樟素含量。
2.根据权利要求1所述烟用香精香料中香豆素和黄樟素含量的测定方法，其特征在 于所述萃取液中丙酸苯乙酯的浓度为lOOng/mL。
3.根据权利要求1所述烟用香精香料中香豆素和黄樟素含量的测定方法，其特征在 于在步骤幻中，按照每克烟用香精香料加入5mL饱和氯化钠水溶液的量，饱和氯化钠水溶 液与萃取液的体积比为1 2。
4.根据权利要求1所述烟用香精香料中香豆素和黄樟素含量的测定方法，其特征在 于在步骤3)中，静置分层时使用离心机加快分层速度。
5.根据权利要求1所述烟用香精香料中香豆素和黄樟素含量的测定方法，其特征在 于在步骤幻中，分层后取下层液体使用微孔滤膜过滤。
6.根据权利要求1所述烟用香精香料中香豆素和黄樟素含量的测定方法，其特征在 于在步骤4)中，气质联用仪的色谱条件使用非极性色谱柱，载气为高纯氦，柱流速为 2mL/min恒流，不分流，进样口温度为320°C，程序升温为柱初始温度70°C，保持lmin，以 IO0C /min的速率升至160°C，保持Omin，然后以40°C /min的速率升至300°C，保持IOmin ；气质联用仪的质谱条件接口温度为280°C，离子源温度为280°C，四极杆温度为 200°C，电离能量为70eV，溶剂延迟时间为6min，时间事件为12分钟关闭检测器，全扫描质 量范围为50-200amu，选择离子监测模式黄樟素的质荷比m/z为162、135、131，丙酸苯乙酯 的质荷比m/z为104、91、77，香豆素的质荷比m/z为146、118、90。
7.根据权利要求6所述烟用香精香料中香豆素和黄樟素含量的测定方法，其特征在 于所述非极性色谱柱为DB-35MS。
全文摘要
本发明提供了一种烟用香精香料中香豆素和黄樟素含量的测定方法。它将烟用香精香料中香豆素和黄樟素先分散于水溶液中后，使用有机试剂加以萃取，取样过滤后使用气相色谱-质谱法进行仪器分析并测定含量。选用丙酸苯乙酯作为内标物，选择丙酸苯乙酯、香豆素和黄樟素在质谱图中的质荷比m/z分别为104、146、162的离子进行定量分析，使用内标法绘制标准曲线，试样与标准曲线拟合，得出试样香豆素和黄樟素含量。本方法不仅能较完全地萃取出烟用香精香料中的香豆素和黄樟素，而且在萃取过程中，可以极大去除干扰物质，使样品谱图得到净化，减少了样品对仪器进样口和色谱柱的污染，可满足实际工作中大批量样品检测的需要。
文档编号G01N30/02GK102072940SQ20101053973
公开日2011年5月25日 申请日期2010年11月11日 优先权日2010年11月11日
发明者俞飞, 廖晓玲, 张婷, 李韵, 汪宏毅, 王婷, 肖少红 申请人:中国烟草总公司湖北省公司