专利名称：一种口蹄疫固相竞争elisa检测方法
技术领域：
本发明涉及一种用于口蹄疫固相竞争ELISA的检测方法，属于动物疫病血清学诊断技术领域。
背景技术：
口蹄疫是国际兽医局认定I类病，对疫区经济有严重影响，口蹄疫抗体水平的检测对疫苗免疫、疫病控制有重要意义，ELISA 是 enzyme linked immuno-sorbent assay 的缩写，艮flgl连免疫吸附实验， 是当今口蹄疫抗体检测的一个重要方法，该方法分为液相阻断ELISA，即LPB-ELISA(liquid phase block，LPB)，和固相竞争 ELISA，即 SPC-ELISA(soil phase competition，SPC)。其中SPC-ELISA以其高敏感性和高相关性，正逐渐成为主流的口蹄疫抗体检测方法。但是 SPC-ELISA的弱点是操作比较复杂，即使是有经验的操作人员也得需要4-5小时才能完成。
发明内容
针对以上情况，本发明的目的，就是要解决口蹄疫固相竞争ELISA中操作复杂的问题。本发明的技术方案是把口蹄疫标准SPC-ELISA操作中必做的抗体包被和抗原结合提前完成。也就是说在进行口蹄疫抗体检测的SPC-ELISA之前，将包被口蹄疫抗体和连结口蹄疫抗原在ELISA板上提前完成，然后加入稳定剂作用一段时间后控干，干燥后形成保护膜， 再该ELISA板真空包装，然后低温保存。此板便称为口蹄疫抗原固定板，即口蹄疫 ASP(antigen-soild-plate, ASP)。当需要进行口蹄疫抗体检测时，将口蹄疫抗原固定板取出直接进行实验就行，此方法也就叫口蹄疫ASP SPC-ELISA。和口蹄疫标准SPC-ELISA相比，本发明省去了 4个步骤，S卩，口蹄疫抗体的包被与洗脱，口蹄疫抗原的结合与洗脱。这就使得整个口蹄疫ASP SPC-ELISA的实验时间缩短到 1-2小时，还可以减少试剂盒内缓冲体系的数量。用口蹄疫ASP SPC-ELISA检测口蹄疫抗体，与LPB-ELISA和标准中和抗体检测 (virus neutralizing test, VNT)方法相比较，结果见表一。在口蹄疫中和抗体阳性血清样品中，用ASP SPC-ELISA与SPC-ELISA、LPB-ELISA检测口蹄疫抗体相比较，结果见表二。表一口蹄疫 ASP SPC-ELISA 与 LPB-ELISA、VNT 比较
权利要求
1.一种口蹄疫固相竞争ELISA检测方法，其特征在于a、口蹄疫抗原通过与口蹄疫抗体结合后固定在ELISA板孔内。b、固定在ELISA板孔内的口蹄疫抗原覆盖有稳定剂保护膜。c、口蹄疫抗原固定板可以长期保存。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，被检样品可直接加入口蹄疫抗原固定板孔内进行检测。
全文摘要
本发明涉及一种口蹄疫固相竞争ELISA检测方法，属于动物疫病血清学诊断技术领域。本发明将口蹄疫抗体通过包被技术结合在ELISA板上，然后通过抗原-抗体结合反应将口蹄疫抗原牢固结合ELISA板孔内，经稳定剂处理和干燥后进行真空包装，最后置低温长期保存。当需要检测口蹄疫抗体时，可以将该ELISA板直接用于实验，它可以让实验过程变得既简单又省时。
文档编号G01N33/543GK102175852SQ201110001730
公开日2011年9月7日 申请日期2011年1月6日 优先权日2011年1月6日
发明者信爱国, 廖德芳, 李乐, 李华春, 胡骑, 苗海生, 高林 申请人:云南省畜牧兽医科学院