本发明涉及一种包含泡桐花的增强动物免疫力的药物组合物及其制备方法和用途。
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：近年来，随着畜禽养殖业向着集约化，规模化方向发展，动物疾病与以往相比也呈现出不同的变化，动物疾病变得复杂化、严重化，抗生素的不规范使用，耐药菌的不断产生，导致一些病毒性传染病如口蹄疫、狂犬病、猪瘟、鸡新城疫、小鹅瘟、鸭瘟、兔瘟等病的防制越来越困难。目前直接针对治疗该类疾病的药物很少，且疗效有限，因此有组织有计划地进行免疫接种，是预防和控制该类畜禽传染病的重要措施之一，在某些疾病防治方面，预防性治疗更具有关键性作用。近年来，随着分子生物学和免疫学的发展，运用现代免疫学的理论和技术，研究中草药增强畜禽机体的免疫功能已取得了很大成就，包括中草药对畜禽免疫器官的影响，如胸腺、脾脏、淋巴结等、中草药对单核-巨噬细胞系统功能的影响、中草药对细胞因子的影响，能显著提高机体的IL-2(白细胞介素-2)、IFN(干扰素)等水平等，这对于阐明有关中兽医理论的物质基础，指导中西兽医结合具有十分重要的意义，也为中草药在畜牧业生产中的广泛运用奠定了坚实的理论基础。黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。春、秋二季采挖，除去须根和根头，晒干。【性味与归经】甘，微温。归肺、脾经。【功能与主治】补气升阳，固表止汗，利水消肿，生津养血，行滞通痹，托毒排脓，敛疮生肌。用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，内热消渴，血虚萎黄，半身不遂，痹痛麻木，痈疽难溃，久溃不敛。泡桐花为玄参科植物兰考泡桐(PaulowniaelongataS.Y.Hu)或同属数种植物的干燥花。春季花落时采收，除去杂质，干燥。生于低海拔的山坡、林中、山谷及荒地、野生或栽培。泡桐分布于长江以南各省，陕西、山东、江南等地引种栽培。味苦、性寒。具有清肺利咽、解毒消肿等功效。主治肺热咳嗽、急性扁桃体炎、菌痢、急性肠炎、急性结膜炎、腮腺炎、疖肿、疮癣等病证。目前，未见将黄芪与泡桐花单独组合使用的报道。技术实现要素：为解决上述问题，本发明提供了一种包含泡桐花的增强动物免疫力的药物组合物，它是由黄芪和泡桐花为原料药制备而成的制剂。进一步地，所述黄芪与泡桐花的重量之比为2:1～1:2。进一步地，所述黄芪与泡桐花的重量之比为1:1。进一步地，它是由原料药的药粉、原料药的水或有机溶剂提取物为活性成分，加上药品中常用的辅料或者辅助性成分制备而成的制剂。进一步地，所述制剂是超微粉剂、颗粒剂或可溶性粉剂。本发明还提供了一种制备前述药物组合物的方法，它包括如下步骤：(1)按重量配比称取各原料；(2)取原料药的药粉或者原料药的水或有机溶剂提取物，加药品中常用的辅料或辅助性成分制备成制剂。本发明还提供了前述药物组合物在制备增强动物免疫力的药物中的用途。进一步地，所述药物是改善脾脏指数、提高γ-干扰素水平和白细胞介素-2水平的药物。本发明还提供了一种治疗猪繁殖与呼吸综合症的联合用药物，它含有相同或不同规格单位制剂的用于同时或者分别给药的前述药物组合物和抗生素，以及药学上可接受的载体。进一步地，所述抗生素为头孢噻呋钠。本发明提供的药物组合物，将黄芪和泡桐花组合使用，具有良好的免疫增强作用，其药效活性优于黄芪和泡桐花的单用组，同时药味较少，成本较低，临床应用前景优良。并且，本发明的药物组合物还能够与抗生素联用，更为有效地治疗猪繁殖与呼吸综合症，为临床用药提供了新的选择。显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。具体实施方式实施例1本发明药物组合物的制备1、处方：黄芪500g、泡桐花500g。2、取处方药材，鼓风干燥使含水量为5％以下，常规粉碎过五号筛(80目)，得药材细粉混合物，将混合物置超微粉碎机中，于-20℃的低温条件下超微粉碎20分钟以上，得粒径小于50μm的超微粉。实施例2本发明药物组合物的制备1、处方：黄芪667g、泡桐花333g。2、取处方药材，鼓风干燥使含水量为5％以下，常规粉碎过五号筛(80目)，得药材细粉混合物，将混合物置超微粉碎机中，于-20℃的低温条件下超微粉碎20分钟以上，得粒径小于50μm的超微粉。实施例3本发明药物组合物的制备1、处方：黄芪333g、泡桐花667g。2、取处方药材，鼓风干燥使含水量为5％以下，常规粉碎过五号筛(80目)，得药材细粉混合物，将混合物置超微粉碎机中，于-20℃的低温条件下超微粉碎20分钟以上，得粒径小于50μm的超微粉。实施例4本发明药物组合物的制备1、处方：黄芪500g、泡桐花500g。2、取处方药材，加20倍量水煎煮提取二次，每次提取1小时，煎液滤过，滤液合并，浓缩至相对密度为1.15～1.20(60℃)的浸膏，加乙醇使含醇量达60％，搅拌，静置24小时以上，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.30～1.35(60℃)的浸膏，加乳糖，混匀，制粒，60℃干燥12小时，制成1000g，即得。实施例5本发明药物组合物的制备1、处方：黄芪500g、泡桐花500g。2、取处方药材，加20倍量水煎煮提取二次，每次提取1小时，煎液滤过，滤液合并，浓缩至相对密度为1.10～1.12(60℃)的浸膏，浸膏喷雾干燥并收集粉末，加糊精适量至1000g，混匀，即得。以下通过具体实验证明本发明的有益效果。实验例1本发明药物组合物的药效活性研究1、试验材料环磷酰胺试剂，购于山东西亚化学工业有限公司。黄芪微粉样品：取黄芪1000g，按实施例1的方法制备微粉样品，即得。泡桐花微粉样品：取泡桐花1000g，按实施例1的方法制备微粉样品，即得。黄桐微粉样品1：实施例1制备得到的药物组合物。黄桐微粉样品2：实施例2制备得到的药物组合物。黄桐微粉样品3：实施例3制备得到的药物组合物。黄桐颗粒：实施例4制备得到的药物组合物。黄桐可溶性粉：实施例5制备得到的药物组合物。2、动物分组及给药昆明小鼠180只，雌雄各半，随机分为9组，每组20只。正常对照组：灌服生理盐水0.5ml/只，连续7天。其余8组小鼠分别于灌服第3天，腹腔注射环磷酰胺80mg/kg体重，其中模型对照组灌服生理盐水0.5ml/只，连续7天，其余各组灌服不同的药物，各组具体给药方法如表1。表1试验分组及给药序号组别给药剂量(g/kg)给药周期(天)1正常对照组/72模型对照组/73黄芪微粉组3.074泡桐花微粉组3.075黄桐微粉1组3.076黄桐微粉2组3.077黄桐微粉3组3.078黄桐颗粒组3.079黄桐可溶性粉组3.073指标测定(1)小鼠免疫器官指数的测定给药结束后称小鼠体重，颈椎脱臼处死小鼠，称其脾脏湿重，计算脾指数。脾指数＝脾重量(mg)/体重(g)(2)血清IFN-γ和IL-2的测定给药7d后，每组小鼠眼球采血，室温凝固30min，离心1000rpm15min，收集血清后-20℃冷冻保存。按小鼠IFN-γ和IL-2定量酶联检测试剂盒说明操作。4数据处理利用SPSS13.0进行统计分析，显著性分析采用单因素方差分析和多重比较。5结果及分析表2各组药物试验结果注：*，与模型组比，P<0.05；**，与模型组比，P<0.01。◇，与黄芪微粉组比，P<0.05；◇◇，与黄芪微粉组比，P<0.01。1)，与泡桐花微粉组比，P<0.05；2)，与泡桐花微粉组比，P<0.01。文献研究表明，IFN-γ能提高多种免疫细胞的活性，诱导产生细胞因子，参与机体正向免疫应答调节，抑制病毒在细胞内的复制；IL-2为重要的细胞因子之一，能增强T细胞的杀伤活性等；动物免疫器官是免疫活性细胞发育、增殖的场所，而脾脏是参与机体免疫应答的重要器官，其发育程度直接关系着机体的免疫功能和防御能力；脾脏是产生体液免疫和细胞免疫的重要器官，因此脾脏系数增加，免疫功能相应提高。由表2结果可知，正常小鼠腹腔注射环磷酰胺后，小鼠脾脏指数、IFN-γ浓度、IL-2浓度与正常对照组相比差异显著(P<0.05)，说明免疫抑制模型建立成功。除泡桐花微粉组外，各给药组均能显著提高免疫抑制小鼠脾脏指数(P<0.05)；同时，黄芪微粉、泡桐花微粉均能明显提高免疫抑制小鼠IFN-γ含量指标，与环磷酰胺组相比差异显著(P<0.05)，黄芪微粉均能明显提高免疫抑制小鼠IL-2含量指标，与环磷酰胺组相比差异极显著(P<0.01)，泡桐花微粉均能明显提高免疫抑制小鼠IL-2含量指标，与环磷酰胺组相比差异显著(P<0.05)。黄桐微粉1组、黄桐微粉2组、黄桐微粉3组、黄桐颗粒组、黄桐可溶性粉组在IFN-γ、IL-2含量指标与环磷酰胺组相比差异极其显著(P<0.01)，且黄桐微粉1组、黄桐可溶性粉组与黄芪、泡桐花两组单独给药组相比，在这两项关键指标上，有更好的活性趋势。以上实验结果表明，三种比例组方均能提高免疫抑制小鼠的免疫活性，可对抗环磷酰胺引起的免疫抑制，具有显著的调节动物免疫力的作用。黄芪药材在与泡桐花药材合用后，通过适当的处方配比筛选，疗效大大增强，优于黄芪和泡桐花单味药材，黄芪和泡桐花药材最佳的处方比例为1:1。实验例2本发明药物组合物的临床疗效研究1病例及分组：取经成都某猪场病猪，症状为呼吸困难，有时呈腹式呼吸，食欲减退，体温在40℃以上，有腹泻症状，并有死亡症状，经实验室诊断为猪蓝耳病(猪繁殖与呼吸综合症)病猪，选取病猪50头，分成三组，分别放入3个隔离猪舍内，其中空白对照组10头，两个给药组各20头。2给药治疗：空白对照组不给于药物治疗；抗生素对照组，肌肉注射头孢噻呋钠(注射量5mg/kg体重)，每天2次，连续5d；抗生素+药物组合物组，肌肉注射头孢噻呋钠(注射量5mg/kg体重)，每天2次，连续5d，并于给药前3天开始每日拌料给予药物组合物(黄桐微粉样品1组)(每日用量：1g药材/kg体重)，连续10d。3疗效判定：观察猪的精神、采食、体温、呼吸、皮肤和耳朵颜色及死亡症状，并按如下标准判断疗。治愈：呼吸平稳，精神、采食、体温、呼吸、皮肤和耳朵颜色恢复正常。有效：症状明显减轻，呼吸平稳，精神、采食、体温好转。无效：症状不减轻，甚至加重或死亡。总有效率＝治愈率+有效率。4疗效统计表3各给药组治疗效果分组治愈有效无效有效率空白0/101/109/1010％抗生素组6/205/209/2055％抗生素+拌料给药组12/203/205/2075％5结果与讨论临床试验结果表明，两个给药组均具有明显的治疗猪蓝耳病的作用，拌料给与药物组合物辅助治疗猪蓝耳病，与单纯使用抗生素治疗疗效更优，总有效率高于抗生素组，证明该药物组合物具有辅助病猪机体对抗病毒感染的作用，验证了该药物组合物起到了对动物机体的免疫调节作用。综上所述，本发明提供的药物组合物，将黄芪和泡桐花组合使用，具有良好的免疫增强作用，其药效活性优于黄芪和泡桐花的单用组，同时药味较少，成本较低，临床应用前景优良。并且，本发明的药物组合物还能够与抗生素联用，更为有效地治疗猪猪繁殖与呼吸综合症，为临床用药提供了新的选择。当前第1页1 2 3