专利名称：一种试剂及用该试剂对食品中硼砂的快速测定方法
技术领域：
本发明涉及一种试剂及用试剂对食品中硼砂的快速测定方法。
技术背景
在食品中，硼砂由于具有增加食物韧性、脆度及改善食物保水性和保存度的功能， 因此常常被添加到肉馅、肉丸、湿粉条、凉粉、面条、饺子中，从而使食品蓬松而有弹性。然而，硼砂对人体有毒害作用，硼砂通过口服进入人体后，不易排出体外，即使是含有微量硼砂的食物，长期食用也会在体内不断蓄积，严重影响人体消化道酶类发挥作用，导致有害物质不能及时排出，继而对人体的健康产生极大的危害，引起食欲减退、消化不良、抑制营养素吸收。硼砂的中毒剂量因人而异，通常常人为急性中毒剂量范围为1-3克，致死量为15 克，儿童的致死量为5克，婴儿的致死量为2-3克。中毒症状主要表现为呕吐、腹泻、皮肤过敏、昏厥甚至休克。硼中毒者的病理检查可见胃、肾脏、肝脏、脑和皮肤出现非特异性病变， 主要有肝脏充血、脂肪变性、肝细胞混浊肿胀；肾呈弥漫性水肿，肾小球和肾小管均有损害； 脑和肺出现水肿。
国家标准方法测定食品中硼砂的含量，采用的是乙基己二醇-三氯甲烷萃取姜黄比色法和电感耦合等离子体原子发射光谱法，此两种方法的检测试剂毒性大，样品操作繁琐，其中电感耦合等离子体原子发射光谱法需要特殊的检测仪器，因而也受到很大的限制。发明内容
本发明的目的在于提供一种毒性低，检测准确，操作简便、快速的试剂及用该试剂对食品中硼砂的快速测定方法。
本发明的用于检测食品中硼砂的试剂的技术方案是这样的
一种用于检测食品中硼砂的试剂，其特点在于该试剂由浓缩提取液A、提取液B、 提取液C、标准品、缓冲液、反应液A、反应液B、显色液构成，各组份用量分别如下
浓缩提取液A 浓度为3. 6%的盐酸IOOmL,使用前用蒸馏水稀释10倍；
提取液B :5. 3g亚铁氰化钾，使用前用50mL蒸馏水溶解；
提取液C :11. Og乙酸锌，使用前用50mL蒸馏水溶解；
标准品0. Olg硼酸，使用前用ImL蒸馏水溶解，此溶液相当于10mg/mL的硼酸，再用蒸馏水稀释成10mg/L的硼酸标准使用液；
缓冲液200mL乙酸-乙酸钠溶液称取20g乙酸钠，用SOOmL蒸馏水溶解后，用乙酸调pH至4. 0，再用蒸馏水定容至IOOOmL ；
反应液A :2. 5g乙二胺四乙酸二钠，使用前用50mL蒸馏水溶解；
反应液B =IOOmL无水乙醇；
显色液0. Olg铍试剂III，使用前加入25mL蒸馏水溶解。
本发明的利用上述试剂对食品中硼砂进行快速测定方法的技术方案是这样的
一种利用上述试剂对食品中硼砂的快速测定方法，其特点在于包括如下步骤
(1)样品提取
将样品绞碎均勻，取1. Og样品于15mL塑料离心管中，加入5mL0. 36 % HCl，混勻， 置于90°C水浴提取35min，若样品中含蛋白质或脂肪较多，可加入0. 25mL亚铁氰化钾溶液和0. 25mL乙酸锌溶液，再加0. 36% HCl至10mL，混勻后，4000转/min离心^iin (或滤纸过滤)，取上清液待测(若结果超出线性范围，可做适当稀释)；
(2)测试
(a)标准曲线的建立
吸取0. OOmL,0. IOmL,0. 20mL、0. 40mL、0. 60mL、l. OOmL 的标准使用液(相当于 0. O μ g、1. O μ g、2. O μ g、4. O μ g、6. O μ g、10. O μ g 硼酸)，分别置于 15mL 塑料离心管中，分别先后加入2mL的pH4. O乙酸-乙酸钠缓冲液，ImL的5%乙二胺四乙酸二钠溶液，ImL的无水乙醇，混勻，再加入0. 8mL的0. 04%铍试剂III，混勻，置于80°C水浴反应35min后在 0D567nm下，以零管调零，测定样品管的吸光值，代入标准曲线中，计算测定液的硼酸含量；
(b)样品检测
吸取ImL的样品清液，置于15mL塑料离心管中，分别先后加入2mL的pH4. O乙酸乙酸钠缓冲液，ImL的5%乙二胺四乙酸二钠溶液，ImL的无水乙醇，混勻，再加入0. 8mL的 0. 04%铍试剂III，混勻，置于80°C水浴反应35min后在0D567nm下，以零管调零，测定样品管的吸光值，代入标准曲线中，计算测定液的硼酸含量；所用的计算公式如下
权利要求
1.一种用于检测食品中硼砂的试剂，其特征在于该试剂由浓缩提取液A、提取液B、提取液C、标准品、缓冲液、反应液A、反应液B、显色液构成，各组份用量分别如下浓缩提取液A 浓度为3. 6%的盐酸IOOmL,使用前用蒸馏水稀释10倍； 提取液B :5. 3g亚铁氰化钾，使用前用50mL蒸馏水溶解； 提取液C :11. Og乙酸锌，使用前用50mL蒸馏水溶解；标准品0. Olg硼酸，使用前用ImL蒸馏水溶解，此溶液相当于lOmg/mL的硼酸，再用蒸馏水稀释成10mg/L的硼酸标准使用液；缓冲液200mL乙酸-乙酸钠溶液称取20g乙酸钠，用SOOmL蒸馏水溶解后，用乙酸调 PH至4. 0，再用蒸馏水定容至IOOOmL ；反应液A :2. 5g乙二胺四乙酸二钠，使用前用50mL蒸馏水溶解； 反应液B :100mL无水乙醇；显色液0. Olg铍试剂III，使用前加入25mL蒸馏水溶解。
2.一种利用权利要求1所述试剂对食品中硼砂的快速测定方法，其特征在于包括如下步骤(1)样品提取将样品绞碎均勻，取1. Og样品于15mL塑料离心管中，加入5mL0. 36% HC1，混勻，置于90°C水浴提取35min，若样品中含蛋白质或脂肪较多，可加入0. 25mL亚铁氰化钾溶液和0.25mL乙酸锌溶液，再加0. 36% HCl至10mL，混勻后，4000转/min离心^iin (或滤纸过滤)，取上清液待测(若结果超出线性范围，可做适当稀释)；(2)测试(a)标准曲线的建立吸取 0. OOmL,0. IOmL,0. 20mL、0. 40mL、0. 60mL、l. OOmL 的标准使用液(相当于 0. 0 μ g、1.0 μ g、2. 0 μ g、4. 0 μ g、6. 0 μ g、10. 0 μ g硼酸)，分别置于15mL塑料离心管中，分别先后加入2mL的pH4. 0乙酸-乙酸钠缓冲液，ImL的5%乙二胺四乙酸二钠溶液，ImL的无水乙醇， 混勻，再加入0. 8mL的0. 04%铍试剂III，混勻，置于80°C水浴反应3^iin后在0D567nm下， 以零管调零，测定样品管的吸光值，代入标准曲线中，计算测定液的硼酸含量；(b)样品检测吸取ImL的样品清液，置于15mL塑料离心管中，分别先后加入2mL的pH4. 0乙酸乙酸钠缓冲液，ImL的5%乙二胺四乙酸二钠溶液，ImL的无水乙醇，混勻，再加入0. 8mL的0. 04% 铍试剂III，混勻，置于80°C水浴反应35min后在0D567nm下，以零管调零，测定样品管的吸光值，代入标准曲线中，计算测定液的硼酸含量；所用的计算公式如下
全文摘要
本发明涉及一种试剂及用该试剂对食品中硼砂的快速测定方法。本发明测定原理大致这样的样品中的硼砂残留用一定浓度的盐酸酸化后，转化为硼酸。样品液经处理后，在酸性条件下，铍试剂Ⅲ能与硼离子特异结合，转化为特定颜色的螯合物，采用分光光度法可测定待测物浓度，颜色的深浅与食品中硼砂残留量成正比。在一定的温度条件下，用稀盐酸对样品进行处理，使硼砂转化为硼酸，经处理后的样品液在酸性条件下，铍试剂Ⅲ与硼离子发生特异性结合，形成特定颜色的螯合物，用分光光度计对反应结果进行定量测定。本发明具有毒性低，准确，简便等特点，适用于一般企业的检测部门使用。
文档编号G01N21/78GK102519952SQ201110401368
公开日2012年6月27日 申请日期2011年11月25日 优先权日2011年11月25日
发明者伍志权, 岑晓云, 徐思成, 徐雯映, 朱晓明, 郑荣威 申请人:佛山市中南农业科技有限公司