专利名称：加工食品中的猪肉的检测法及其检测试剂盒的制作方法
技术领域：
本发明涉及针对加工食品、特别是加热处理的加工食品中的猪肉的检测方法及其检测试剂盒。更具体地说，本发明涉及加工食品、特别是加热处理的加工食品中的来自动物种类的检测用抗原的制备方法，以及用该检测用抗原得到的抗体。
背景技术：
欧盟科学运营委员会在其意见中报告了牛脑海绵状病(BSE)等牛传染病对人传染的危险性，自此，BSE感染牛的肉骨粉在家畜饲料中使用的问题受到重视。另外，假冒品牌肉或伪装成品牌牛肉的问题以及用其它肉类伪装成牛肉的问题也是一般消费者所关心的问题。另一方面，食物变态反应患者会因食品中所含的食物变态反应原而引发哮喘、 皮炎、胃肠功能障碍、过敏性休克等各种变态反应症状，有时还有造成了非常严重的后果的病例。食物变态反应患者还有增加的倾向，消费者对于食品的安全性的关注也非常高。通常已知的含有食物变态反应原的代表性食品有谷类(荞麦、小麦等)、蛋类、肉类(牛、猪、鸡等)、鱼类(鲭鱼、沙丁鱼等)、牛乳类、甲壳类(蟹等)、软体动物类、豆类(花生、大豆等)、果实类(芒果等)、蔬菜类(蒜等)等，这些食物变态反应诱发食品中含有谷蛋白、明胶、酪蛋白、卵清蛋白、卵类粘蛋白、溶菌酶、α-乳清蛋白、β_乳球蛋白等食物变态反应诱发成分。加工食品中的很多食品或食物也含有变态反应原，目前的现状是无法简便地检测出它们。另外，对于进行了加工处理(加热、加压、酶解处理、冷冻、干燥、盐藏等)的食品，由于处理而使食品中的蛋白质成分发生分子结构性的改性或分子修饰。因此，为了简便地检测出加工食品中的这些成分，针对加工处理过的成分和未经加工处理的生鲜成分分别使用与其对应的适当的抗原或表位是非常重要的，这方面的探索和研究也得到了进展。例如，人们发现作为用于检测在高温、例如超过100°C的温度条件下加热处理过的存在于罐装食品或家畜用饲料等试样中的来自以牛、猪、鸡为代表的动物性组织的原料的检测试剂，人们已开发了一种具有标记抗体和载体的检测试剂，所述标记抗体是在120°C以上的温度下加热处理的上述来自动物性组织的原料中的血清白蛋白的抗体或其抗原结合性片段，并用标记物标记得到；所述载体具备固定有上述来自动物性组织的原料中的血清白蛋白的抗体或其抗原结合性片段的检测区域。也就是说，人们发现用加热改性的血清白蛋白作为免疫原对动物进行免疫所生产的抗体可特异性地识别该加热改性的血清白蛋白，而对非加热的血清白蛋白不显示交叉反应性，从而提供了一种用于检测试样中是否存在加热处理过的来自动物性组织的原料的方法(包含免疫层析法)。(参照专利文献I、专利文献2)将含有未改性和/或改性物质的食物变态反应原的混合物(蛋白质)对动物免疫所得到的IgE (免疫球蛋白E)抗体，以及使用该抗体检测食物变态反应原和食物变态反应诱发性食品的方法(包含免疫层析法)是公知的。(参照专利文献3)
不仅如此，将已经保藏的特定细胞(加热的猪肉中的特定蛋白质对动物免疫所得的细胞)生产的单克隆抗体用于ELISA (免疫学测定的一种)方法中以检测加热处理的食品中的猪肉也是公知的。(参照专利文献4)由于该检测方法使用了由特定细胞(加热过的猪肉中的特定蛋白质对动物免疫所得的细胞)生产的单克隆抗体，因此可以准确地进行检测。然而，单克隆抗体的制备需要高额费用，因此该方法不适合在医疗领域中针对多数患者的普及。本发明人使用多克隆抗体代替上述单克隆抗体，利用免疫层析法进行了同样的试验。结果发现，其与加热食品中的猪肉以外的原料、如牛肉等有交叉反应性，在精度方面未能得到令人满意的结果。如上所述，在使用多克隆抗体通过免疫层析法检测试样中的检测对象物一加热食品中的猪肉时，可观察到会发生非特异性反应、无法充分抑制非特异性反应的问题依然存
在。 另外，在通过免疫学测定法来检测食品中的变态反应原物质(蛋白质)时，所使用的检体稀释液含有TWeen20等表面活性剂或氯化钠等无机盐也是公知的(参照专利文献5)。现有技术文献专利文献专利文献I :日本特开2006-317226专利文献2 :日本特开2005-164583专利文献3 日本特开2003-155297专利文献4 :美国专利6288215专利文献5 :日本特开2009-08591
发明内容
本发明所要解决的问题本发明的目的在于提供一种来自检体的成分的制备方法，该成分可通过免疫测定法高性能且高灵敏度地检测加热加工食品中的猪肉，不会引发非特异性反应；还提供一种使用由该成分得到的多克隆抗体来进行的简便且高精度的检测方法，以及该检测方法使用的检查试剂盒。解决该问题的手段本发明涉及对加热加工食品中的来自猪肉的蛋白质进行免疫层析检测。本发明使用的展开液组成和试验试剂盒中使用的化学物质(生物物质以外)的组成是以往在免疫层析法中常用的试剂。例如，展开液是在纯净水或缓冲液中加入非离子性表面活性剂(例如Tween20> Triton-100等)和氯化钠,根据情况还加入酪蛋白(脱脂粉乳)等。本发明人意外地发现由生猪肉中提出的提取物、即生猪肉中所含的约50kD (分子量50，000)的蛋白质最为适合作为免疫用抗原用于制备在加热食品检测系统中使用的抗体。因此，本发明的用于检测来自加热加工食品中来自猪肉的蛋白质的免疫层析检测所使用的检测抗体(生物物质)特别适合于加热食品的检测系统。该检测抗体不仅与针对非加热食品中的来自猪肉的蛋白质的免疫层析检测系统中所用的检测抗体不同，也与以往公知的针对加热加工食品中的来自猪肉的蛋白质的免疫层析检测中所用的检测抗体(生物物质)不同。在确定了该检测抗体的基础上，本发明人首次完成了通过免疫层析法检查(探测)加热加工食品中有无猪肉的方法及其检查(检测)试剂盒。在本发明的加热食品的检测系统中，优选使用可特异性识别经过加热处理、例如在100°c以上的温度下加热处理的猪肉中所含的约23kD (分子量23，000)的蛋白质的多克隆抗体作为检测抗体。本发明提供下述(a)-(e)的免疫层析检测法、该方法中使用的抗体、检测装置，以及检测试剂盒。(a)本发明的第一方面涉及一种利用多克隆抗体作为检测抗体对来自加热加工食品中的猪肉的蛋白质进行免疫层析检测的方法，其中所述多克隆抗体可特异性识别经加热处理的猪肉中所含的分子量处于20kD (分子量20，000)到261^ (分子量26，000)范围内的 23kD (分子量23，000)附近的蛋白质，所述多克隆抗体是利用免疫用抗原对动物进行免疫得到的，所述免疫用抗原是由从生猪肉中提取的提取物的离子交换纯化组分中所含的处于40kD (分子量40，000)到601^ (分子量60，000)范围内的蛋白质，其具有在经过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的考马斯染色分析时在50kD (分子量50，000)附近显示出强显色的分子量。(b)本发明的第二方面涉及一种多克隆抗体，该多克隆抗体可特异性识别经加热处理的猪肉中所含的分子量处于20kD (分子量20，000)到26kD (分子量26，000)范围内的23kD (分子量23，000)附近的蛋白质，所述多克隆抗体是利用免疫用抗原对动物进行免疫得到的，所述免疫用抗原是由从生猪肉中提取的提取物的离子交换纯化组分中所含的处于40kD (分子量40，000)到601^ (分子量60，000)范围内的蛋白质，其具有在经过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的考马斯染色分析时在50kD (分子量50，000)附近显示出强显色的分子量。(c)本发明的第三方面涉及一种针对加热加工食品中的来自猪肉的蛋白质的免疫层析检测用装置，该装置具备标记物保持部和检测部，所述标记物保持部保持有作为用标记物标记根据(b)的多克隆抗体所得的标记抗体，所述检测部固定有根据(b)的多克隆抗体。(d)本发明的第四方面涉及根据(C)的免疫层析检测用装置，该装置基本上由试样添加部、标记物保持部、层析介质、检测部和吸收部构成。(e)本发明的第五方面涉及针对加热加工食品中的来自猪肉的蛋白质的免疫层析检测用试剂盒，该检测用试剂盒基本上由试样添加部、标记物保持部、层析介质、检测部和吸收部构成，其中所述标记物保持部保持有将根据(b)的多克隆抗体用标记物标记所得的标记抗体，所述检测部固定有根据(b)的多克隆抗体。发明效果在本发明的加热加工食品中来自猪肉的蛋白质的免疫层析检测方法中，将由生猪肉提取的提取物、即生猪肉中所含的50kD (分子量50，000)附近的蛋白质对兔或山羊(并不限于此，也可以是除此以外的其它动物，例如马、绵羊、猪、鸡、小鼠、大鼠或豚鼠等)免疫得到的多克隆抗体作为检测抗体(生物物质)使用，与使用单克隆抗体相比，其价格便宜，可以对众多需求者、例如医疗领域中的很多患者进行有效的普及。在本发明中，将由生猪肉提取的提取物、即生猪肉中所含的50kD (分子量50，000)附近的蛋白质作为免疫抗原对动物免疫，所得的多克隆抗体作为检测抗体(生物物质)使用。因此，不仅对大豆等来自植物的蛋白质没有交叉反应，对来自牛、鸡、羊等的猪以外动物的蛋白质也没有交叉反应，可正确且容易地对加热加工食品中来自猪肉的蛋白质的免疫层析法的检测结果进行判定，且灵敏度不会降低。根据本发明的针对来自加热处理猪肉的蛋白质的免疫层析检测法不仅能简便且低成本地应用于检测来自加热加工食品中的猪肉的蛋白质，而且能同样地应用于检测在会弓丨起蛋白质改性的温度条件下实施了加工处理(加热、加热/加压、干燥等)的健康食品、药品、家畜饲料、宠物食品等中的来自猪肉的蛋白质。因此，对于生猪肉可引发变态反应的患者或者基于嗜好上或饮食文化上不食用猪肉的一般消费者，本发明能够为解决这些问题作出贡献。与PCR或ELISA法相比，本发明的免疫层析检测法的装置简便，可以迅速且低成 本地检测加热加工食品中的来自猪肉的蛋白质，因此具有能够解决一般消费者的需求的优点。
图I是本发明的免疫层析检测用试剂盒的使用概略图。
具体实施例方式以下详细说明本发明。在本发明的加热食品检测系统中，优选使用可特异性识别经过加热处理、例如经过100°C以上温度加热处理的猪肉中所含的23kD (分子量23，000)附近的蛋白质的多克隆抗体作为检测抗体。 在本发明的加热加工食品中来自猪肉的蛋白质的免疫层析检测法中，使用来自生猪肉的提取物、即生猪肉中所含的50kD (分子量50，000)附近的蛋白质作为免疫用抗原，用其对动物(如兔、山羊、马、绵羊、猪肩、小鼠、大鼠、豚鼠等)进行免疫，所得的多克隆抗体作为检测抗体(生物物质)。用语“50kD (分子量50，000)附近”的含义对于本领域的技术人员来说并不会带来特别的技术性问题。特别在为了定量表示时，考虑到作为天然产物的蛋白质的不规则情况，在对由生猪肉提取的蛋白质的离子交换柱纯化组分进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、然后通过考马斯染色对蛋白质进行分析(SDS-PAGE分析)时，生猪肉中的主要的特征性蛋白质具有主要为50kD的分子量(分子量50，000)，其在经验上认为是完全处于40kD(分子量40，000)到60kD (分子量60，000)左右的范围内，S卩，“50kD (分子量50，000)附近”的蛋白质大部分集中在组分1-5的范围内。可以推定，该蛋白质并不只是单体的形式，除此之外也可为多聚体的形式，例如二聚体、三聚体等，但无论如何，在该分子量的分析中，发现具有“50kD附近”的分子量的蛋白质在猪肉中是特征性的、且适合作为免疫用抗原的主要蛋白质。在本发明中，优选生猪肉中所含的50kD (分子量50，000)附近的蛋白质作为免疫用抗原使用。该免疫用抗原可以是指在聚丙烯酰胺凝胶电泳等分析方法中显示为具有50kD附近的分子量的蛋白质组分，也可以是主要含有显示为具有50kD附近的分子量的蛋白质组分的蛋白质群。另外，在本发明中，使用将由生猪肉提取的提取物、即生猪肉中所含的50kD (分子量50，000)附近的蛋白质用作免疫抗原对动物进行免疫得到的多克隆抗体作为检测抗体(生物物质)。因此，不仅对来自大豆等植物的蛋白质没有交叉反应，对于来自牛、鸡、羊等猪以外的动物的蛋白质也完全没有交叉反应，可以正确且容易地针对加热加工食品中来自猪肉的蛋白质的免疫层析检测的结果进行判定，并且灵敏度不会降低，表现出优异的性能。本发明进一步对比较容易且可正确识别加工猪肉的方法进行了研究。结果，通过加工猪肉中所含的蛋白质而研究了该可识别的蛋白质的特性与识别抗体之间的关系。结果发现，在通过蛋白质印迹分析(以下简称为“WB分析”)对加工猪肉中所含的蛋白质进行分子量确认时，作为经验上认为可能的表示范围，发现加工猪肉中所含的可特异性识别的蛋白质是23kD (分子量23，000)附近的蛋白质。
如果从全部肉类均为天然蛋白质的特性考虑，容易预测到构成加工肉类的蛋白质的分子量是从低分子量至超高分子量。使用将生猪肉中所含的具有50kD (分子量50，000)附近的蛋白质作为免疫抗原对动物进行免疫得到多克隆抗体，然后对来自各种加工肉类提取的蛋白质进行电泳，之后对具有处于OkD (分子量O)到250kD (分子量250，000)左右范围内的各种分子量的蛋白质进行WB分析。作为经验上认为可能的表示范围，发现所述多克隆抗体对主要含有属于20kD (分子量20，000)到26kD (分子量26000)左右范围内的以23kD(分子量23，000)的分子量为主的蛋白质可强烈地识别，S卩，可以强烈地识别具有“23kD (分子量23，000)附近”的猪蛋白质，而不识别猪蛋白质以外的牛、羊、鸡的蛋白质。使用可识别猪肌钙蛋白I的单克隆抗体，同样地将由各种加工肉类中提取的蛋白质进行电泳，然后进行WB分析，得到与本发明同样的结果。在本发明中，当涉及到对23kD附近的猪蛋白质进行识别时，该用语“23kD附近”是指作为以加工猪肉为检测对象的蛋白质分子量的按照常用测定方法来确定的蛋白质的分子量。23kD这个特定值可发挥非常有效的功能，在作为检测用蛋白质的应用上没有任何特别的问题。它限定了 23kD附近的蛋白质，是用加工猪肉检测领域中的技术人员是能充分有效地测定且可识别的分子量来限定的表述。如果需要进一步定量表示该“23kD附近”的含义，考虑到加工肉这一天然产物的分子量、结构等的不规则的情况，作为数值上可能的表示范围，如果表达为大部分蛋白质的分子量集中在20kD-26kD左右的范围，则为更明确的定量表示。总之，只要通过WB分析确定具有23kD附近分子量的蛋白质，本发明的检测方法就可以正确地实施。而且，根据本发明人的发现，本发明人制作的多克隆抗体可特异性识别加工猪肉中的23kD附近的蛋白质，根据其原理，可以容易、迅速且低成本地实现该检测方法。本发明中使用的展开液组成或试验试剂盒中使用的化学物质(非生物物质)的组成是以往的免疫层析法中常用的试剂。作为上述免疫层析用试剂，可以使用各种化学物质，例如缓冲剂、非离子性表面活性剂、根据情况使用的螯合剂等，以实现其功能/作用。在本发明的免疫层析用试剂组合物如提取展开液中，缓冲剂没有特别的限定，只要它能够实现其作用(缓冲作用)，不会因试样的添加、或试样的蒸发或稀释所导致的浓度变化、也不会因为自外部混入少许杂质而产生显著的影响。
本发明的缓冲剂的例子有乙酸缓冲液(乙酸+乙酸钠)、磷酸缓冲液(磷酸+磷酸钠)、柠檬酸缓冲液(柠檬酸+柠檬酸钠)、硼酸缓冲液、Tris盐酸缓冲液(三(羟基甲基)氨基甲烷+盐酸)、TE缓冲液(Tris+乙二胺四乙酸)、TAE缓冲液(Tris+乙酸+乙二胺四乙酸)、TBE缓冲液(Tris+硼酸+乙二胺四乙酸)、HEPES缓冲液(2- [4- (2-羟基乙基)_1_哌嗪基]乙磺酸)等。优选乙酸缓冲液、磷酸缓冲液、Tris盐酸缓冲液、HEPES缓冲液。本发明的免疫层析用试剂组合物中使用的缓冲剂的浓度为O. 01-250mM的范围，优选10-200mM的范围，更优选30-180mM的范围。浓度低于O. OlmM，缓冲作用不充分。浓度为250mM以上，则浓度高于所需，不经济，浪费。可在本发明的免疫层析用试剂组合物中使用的非离子性表面活性剂的例子有聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯/聚氧丙烯烷基醚、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯(商品名“Tween”系列)、聚氧乙烯对叔辛基苯基醚(商品名“Triton”系列)、聚氧乙烯对叔壬基苯基醚(商品名“TritonN”系列)、烷基聚葡糖苷、脂肪酸二乙醇酰胺、烷基单甘油基醚等。非离子性表面活性剂可以单独地使用，或将两种以上混合使用。
在本发明的免疫层析用试剂组合物中使用的非离子性表面活性剂的含量为相对于免疫层析用试剂组合物的O. 01-10%重量的范围,优选在O. 05-5%重量的范围。含量低于O. 05%重量时，无法抑制非特异性反应，导致不正确的判定。含量为10%重量以上，则高于所需的浓度，不仅不会对非特异性反应的抑制带来有利的影响，并且不经济，浪费。非离子性表面活性剂还可以任选地配合其它非离子性表面活性剂、离子性表面活性剂等结合使用。在本发明的免疫层析用试剂组合物中，根据需要使用的螯合剂没有特别的限定，只要它可用作具有多个配位基的配位体即可。在本发明中，螯合剂的例子有乙二胺、二吡啶、乙二胺四乙酸(以下称为“EDTA”)、EDTA · 2Na、EDTA · 3Na、EDTA · 4Na、EDTA 衍生物(例如 EDTA · 2NH4、EDTA · 3K、EDTA ·特殊铵盐等)、EDTA金属盐(例如EDTA .Ca *2Na等)、羟基乙基乙二胺三乙酸(HEDTA)系、二羟基乙基乙二胺二乙酸(DHEDDA)系、1,3-丙烷二胺四乙酸(1，3-PDTA)系、二乙烯三胺五乙酸(DTPA)系、三乙烯四胺六乙酸(TTHA)系、亚硝基三乙酸(NTA)系、葡糖酸系、羟乙基亚氨基二乙酸(HMDA)系、L-天冬氨酸-N，N-二乙酸(ASDA)系、氨基三亚甲基膦酸(NTMP)系、羟基乙烷膦酸(HEDP)系、3-羟基-2，2’-亚氨基二琥珀酸四钠、菲咯啉、叶啉、冠醚等。在本发明的免疫层析用试剂组合物中，根据需要含有的螯合剂的浓度为O. Ol-IOmM的范围，优选O. l-5mM的范围，更优选O. 5_2mM的范围。浓度低于O. OlmM，则无法抑制非特异性反应，从而无法进行正确的判定。浓度为IOmM以上，则高于所需浓度，不经
济，浪费。在本发明的免疫层析用试剂组合物中，可以添加公知的能抑制基于生物学亲和性的副反应或抑制非特异性反应的添加剂，例如用于促进抗原抗体反应或抑制非特异性反应的蛋白质(例如牛血清白蛋白、酪蛋白、明胶等)、高分子化合物(例如聚乙二醇、甲基纤维素、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯基醇、葡聚糖等)、离子性表面活性剂或聚阴离子(例如硫酸葡聚糖、肝素、聚苯乙烯磺酸、硫酸软骨素等)，以及防腐剂或抗菌剂等。这些添加剂可以单独地使用，或两种以上相结合地使用，其使用有效，没有任何限制。这些用于促进抗原抗体反应或抑制非特异性反应的蛋白质、高分子化合物、离子性表面活性剂或聚阴离子以及防腐剂或抗菌剂等中的一种或多种添加剂可以保持在构成固定相的层析介质上的流动相的流路上，其使用有效，没有任何限制。本发明的免疫层析用试剂组合物的使用方法可以是将组合物涂布在免疫层析装置的样品板(试样添加部分)中，或将样品板浸溃在组合物中，然后进行干燥，由此将组合物保持在样品板上。将本发明的免疫层析用试剂组合物保持在免疫层析介质上的其它方式可以是在试样添加部位的端部和吸收部位之间的适当位置处设置添加剂保持部，以这样的方式将组合物保持在其中。例如，组合物的施加区域可以在试样添加部分的附近、标记物保持部位或其附近。其中，优选将组合物只保持在试样添加部分和/或标记物保持部上。本发明的免疫层析用试剂组合物的使用方法并不限于上述使用方式，该组合物可以提取展开液的形式使用，也可以试样的稀释液的形式使用。例如，本发明的提取展开液是超纯水或缓冲液，其中加入了非离子性表面活性剂(如Tween 20、Triton-100等)、氯化钠， 以及根据情况加入的酪蛋白(脱脂粉乳)等。提取展开液通常是使用水作为溶剂，在其中加入缓冲液、非离子表面活性剂、蛋白质和高分子化合物，还可以根据需要进一步加入螯合剂等。加入的顺序没有特别限定，也可以同时加入。在该组合物作为提取展开液使用时，可以根据所要检测的试样的状态、例如为固体状还是糊剂状来选择合适提取展开液的使用方式。可以将所要检测的试样与展开液预先混合，将混合物供给/滴加到样品板(试样添加部)上以展开，也可以先将试样供给/滴加到样品板(试样添加部)上，然后将展开液供给/滴加到样品板(试样添加部)上以展开。在该组合物作为试样稀释液使用时，将试样稀释为稀释液，然后直接以展开液的形式供给、滴加到样品板(试样添加部)上。本发明的含有检测对象物的试样(检体)的代表性例子有主要采用在可使蛋白质变性的温度下经加热加工或灭菌处理的食品、健康食品等，但并不限于此，家畜饲料或药品等也可以作为试样(检体)使用。在本发明中，优选生猪肉中所含的50kD (分子量50，000)附近的蛋白质作为免疫用抗原。该免疫用抗原可以是在聚丙酰胺凝胶电泳等分析方法中显示为分子量在50kD附近的蛋白质组分，或者也可以是主要含有显示为分子量在50kD附近的蛋白质组分的蛋白质群。本发明的免疫用抗原的制备方法如下所示。
权利要求
1.ー种利用多克隆抗体作为检测抗体对来自加热加工食品中的猪肉的蛋白质进行免疫层析检测的方法，其中所述多克隆抗体能特异性识别经加热处理的猪肉中所含的分子量处于20kD (分子量20，000)到26kD (分子量26，000)范围内的23kD (分子量23，000)附近的蛋白质，所述多克隆抗体是利用免疫用抗原对动物进行免疫得到的，所述免疫用抗原是由从生猪肉中提取的提取物的离子交換纯化组分中所含的处于40kD (分子量40，000)到.60kD (分子量60，000)范围内的蛋白质，所述蛋白质具有在经过十_■烧基硫酸纳_聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的考马斯染色分析时在50kD (分子量50，000)附近显示出强显色的分子量。
2.ー种多克隆抗体，利用免疫用抗原对动物进行免疫得到，所述免疫用抗原是由从生猪肉中提取的提取物的离子交换纯化组分中所含的处于40kD (分子量40，000)到60kD (分子量60，000)范围内的蛋白质，所述蛋白质具有在经过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的考马斯染色分析时在50kD (分子量50，000)附近显示出强显色的分子量，所述多克隆抗体能特异性识别经加热处理的猪肉中所含的分子量处于20kD (分子量.20，000)到26kD (分子量26，000)范围内的23kD (分子量23，000)附近的蛋白质。
3.ー种针对加热加工食品中的来自猪肉的蛋白质的免疫层析检测用装置，所述装置包括标记物保持部和检测部，所述标记物保持部保持有作为用标记物标记根据权利要求2所述的多克隆抗体所得的标记抗体，所述检测部固定有根据权利要求2所述的多克隆抗体。
4.根据权利要求3所述的免疫层析检测用装置，其特征在于，所述装置基本上由试样添加部、标记物保持部、层析介质、检测部和吸收部构成。
5.ー种针对加热加工食品中的来自猪肉的蛋白质的免疫层析检测用试剂盒，该检测用试剂盒基本上由试样添加部、标记物保持部、层析介质、检测部和吸收部构成,其中所述标记物保持部保持有作为用标记物标记根据权利要求2所述的多克隆抗体所得的标记抗体，所述检测部固定有根据权利要求2所述的多克隆抗体。
全文摘要
本发明提供了一种作为检测抗体使用的多克隆抗体的制备方法，该多克隆抗体适用于特异性地、高性能且高灵敏度地通过免疫测定法对加热加工食品中猪肉的进行检测，不会引发非特异性反应。本发明还提供了一种使用该多克隆抗体进行简便的、高精度的检测法以及用于该检测方法的检测试剂盒。利用免疫层析法来检测试样中的检测对象物时，在一处或两处地方使用可特异性识别加热处理的猪肉中所含的23kD(分子量23,000)附近的蛋白质的多克隆抗体作为检测抗体，检测加热加工食品中来自猪肉的蛋白质。
文档编号G01N33/53GK102687013SQ201180004959
公开日2012年9月19日 申请日期2011年2月18日 优先权日2010年2月18日
发明者岩本久彦, 榊原雄広, 首藤达也 申请人:田中贵金属工业株式会社