专利名称：一种dpph-hplc法检测白刺果汁中抗氧化成分的方法
技术领域：
本发明涉及一种果汁抗氧化成分的检测方法，尤其涉及一种DPPH-HPLC法检测白刺果汁中抗氧化成分的方法。
背景技术：
白刺果汁是以白刺属植物白刺{Ni traria sibirica )的成熟果实去除籽皮后得到的果汁，因其中含有抗氧化物质，因而具有较强的抗氧化性，呈紫红色，无毒，应用于医药、食品及化妆品。但是，目前白刺果汁抗氧化成分还没有完整的检测方法，不利于保证白刺果汁的品质
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种简单、快速、准确的DPPH-HPLC法检测白刺果汁中抗氧化成分的方法。为解决上述问题，本发明所述的一种DPPH-HPLC法检测白刺果汁中抗氧化成分的方法，其特征在于该方法首先将质量浓度为O. 0Γ5%的抗氧化剂1，I- 二苯基-2三硝基苯肼(DPPH)与白刺果汁按100: f250:1的体积比在温度为25 35°C的条件下避光反应15mirT30min，得到反应后白刺果汁；然后分别将未反应白刺果汁与所述反应后白刺果汁注入高效液相色谱(HPLC)中检测，分别得到未反应白刺果汁的色谱图与反应后白刺果汁的色谱图；最后，比较所述未反应白刺果汁的色谱图与所述反应后白刺果汁的色谱图中相应的各个峰的峰面积；若峰面积减少的峰，即说明白刺果汁中具有抗氧化成分。所述白刺果汁是指白刺原果汁或5000道尔顿有机膜过滤后的白刺果汁。所述高效液相色谱(HPLC)检测方法是指流动相A为甲醇，流动相B为纯净水；流速为O. 8 I. 5 mL/min,检测波长为210 nnT390 nm ;流动相条件为0 min 20 min,5%A 5%A，95%B 95%B ;20 min 25 min，5%A 15%A，95B% 85%B ;25 mirT50 min,15%A 25%A，85%B 75%B。本发明与现有技术相比具有以下优点
I、由于本发明采用DPPH-HPLC法测定白刺果汁中抗氧化成分，而该法具有所用试剂量少、操作简单方便、灵敏度高、精密度高稳定性好等特点，因此，适宜测定白刺果汁抗氧化成分，从而实现对白刺果汁进行保健功能的有效性评价。2、由于本发明采用DPPH-HPLC法测定白刺果汁中抗氧化成分，而该法只需比较对应峰的峰面积即可判断抗氧化成分。如图I为白刺果汁的色谱图，即未加入DPPH溶液的白刺果汁色谱图。图2为加入DPPH后的白刺果汁的色谱图。比较色谱图中各个色谱峰,其中色谱图中色谱峰A、B、C、D、E的峰面积减少，说明化合物A、B、C、D、E为抗氧化成分。3、本发明简单、快速，易于推广。
下面结合附图对本发明的具体实施方式
作进一步详细的说明。图I为未加入抗氧化剂DPPH色谱图。图2为加入抗氧化剂DPPH色谱图。
具体实施例方式实施例I 一种DPPH-HPLC法检测白刺果汁中抗氧化成分的方法，该方法首先将质量浓度为O. 01%的抗氧化剂1，I- 二苯基-2三硝基苯肼(DPPH)与5000道 尔顿有机膜过滤后的白刺果汁按100:1的体积比(mL/mL)在温度为35°C的条件下避光反应15min，得到反应后白刺果汁；然后分别将未反应白刺果汁与反应后白刺果汁注入高效液相色谱(HPLC)中检测，分别得到未反应白刺果汁的色谱图与反应后白刺果汁的色谱图；最后，比较未反应白刺果汁的色谱图与反应后白刺果汁的色谱图中相应的各个峰的峰面积；若峰面积减少的峰，即说明白刺果汁中具有抗氧化成分。其中高效液相色谱(HPLC)检测方法是指流动相A为甲醇，流动相B为纯净水；流速为I. O mL/min，检测波长为210 nm ;流动相条件为0 min 20 min，5%A 5%A，95%B 95%B ;20 min 25 min，5%A 15%A，95B9T85%B ;25 mirT50 min,15%A 25%A，85%B 75%B。实施例2 —种DPPH-HPLC法检测白刺果汁中抗氧化成分的方法，该方法首先将质量浓度为5%的抗氧化剂1，I- 二苯基-2三硝基苯肼(DPPH)与与白刺原果汁按150 1的体积比在温度为25°C的条件下避光反应30min，得到反应后白刺果汁；然后分别将未反应白刺果汁与反应后白刺果汁注入高效液相色谱(HPLC)中检测，分别得到未反应白刺果汁的色谱图与反应后白刺果汁的色谱图；最后，比较未反应白刺果汁的色谱图与反应后白刺果汁的色谱图中相应的各个峰的峰面积；若峰面积减少的峰，即说明白刺果汁中具有抗氧化成分。其中高效液相色谱(HPLC)检测方法是指流动相A为甲醇，流动相B为纯净水；流速为I. 2 mL/min，检测波长为280 nm ;流动相条件为0 min 20 min，5%A 5%A，95%B 95%B ;20 min 25 min，5%A 15%A，95B9T85%B ;25 mirT50 min,15%A 25%A，85%B 75%B。实施例3 —种DPPH-HPLC法检测白刺果汁中抗氧化成分的方法，该方法首先将质量浓度为O. 1%的抗氧化剂1，I-二苯基-2三硝基苯肼(DPPH)与5000道尔顿有机膜过滤后的白刺果汁按200 1的体积比(mL/mL)在温度为30°C的条件下避光反应20min，得到反应后白刺果汁；然后分别将未反应白刺果汁与反应后白刺果汁注入高效液相色谱(HPLC)中检测，分别得到未反应白刺果汁的色谱图与反应后白刺果汁的色谱图；最后，比较未反应白刺果汁的色谱图与反应后白刺果汁的色谱图中相应的各个峰的峰面积；若峰面积减少的峰，即说明白刺果汁中具有抗氧化成分。其中高效液相色谱(HPLC)检测方法是指流动相A为甲醇，流动相B为纯净水；流速为O. 8 mL/min，检测波长为254 nm ;流动相条件为0 min 20 min，5%A 5%A，95%B 95%B ;20 min 25 min，5%A 15%A，95B9T85%B ;25 mirT50 min,15%A 25%A，85%B 75%B。实施例4 一种DPPH-HPLC法检测白刺果汁中抗氧化成分的方法,该方法首先将质量浓度为1%的抗氧化剂1，I- 二苯基-2三硝基苯肼(DPPH)与白刺原果汁按180 1的体积比(mL/mL)在温度为28°C的条件下避光反应25min，得到反应后白刺果汁；然后分别将未反应白刺果汁与反应后白刺果汁注入高效液相色谱(HPLC)中检测，分别得到未反应白刺果汁的色谱图与反应后白刺果汁的色谱图；最后，比较未反应白刺果汁的色谱图与反应后白刺果汁的色谱图中相应的各个峰的峰面积；若峰面积减少的峰，即说明白刺果汁中具有抗氧化成分。其中高效液相色谱(HPLC)检测方法是指流动相A为甲醇，流动相B为纯净水；流速为I. 5 mL/min，检测波长为360nm ;流动相条件为0 min 20 min，5%A 5%A，95%B 95%B ；20 min 25 min，5%A 15%A，95B9T85%B ;25 mirT50 min,15%A 25%A，85%B 75%B。 实施例5 —种DPPH-HPLC法检测白刺果汁中抗氧化成分的方法，该方法首先将质量浓度为2%的抗氧化剂1，I- 二苯基-2三硝基苯肼(DPPH)与白刺原果汁按250 1的体积比(mL/mL)在温度为32°C的条件下避光反应24min，得到反应后白刺果汁；然后分别将未反应白刺果汁与反应后白刺果汁注入高效液相色谱(HPLC)中检测，分别得到未反应白刺果汁的色谱图与反应后白刺果汁的色谱图；最后，比较未反应白刺果汁的色谱图与反应后白刺果汁的色谱图中相应的各个峰的峰面积；若峰面积减少的峰，即说明白刺果汁中具有抗氧化成分。 其中高效液相色谱(HPLC)检测方法是指流动相A为甲醇，流动相B为纯净水；流速为I mL/min，检测波长为390nm ;流动相条件为0 min 20 min，5%A 5%A，95%B 95%B ;20min 25 min，5%A 15%A，95B9T85%B ;25 mirT50 min,15%A 25%A，85%B 75%B。
权利要求
1.一种DPPH-HPLC法检测白刺果汁中抗氧化成分的方法，其特征在于该方法首先将质量浓度为O. 0Γ5%的抗氧化剂1，I- 二苯基-2三硝基苯肼与白刺果汁按100:1 250:1的体积比在温度为25 35°C的条件下避光反应15mirT30min，得到反应后白刺果汁；然后分别将未反应白刺果汁与所述反应后白刺果汁注入高效液相色谱中检测，分别得到未反应白刺果汁的色谱图与反应后白刺果汁的色谱图；最后，比较所述未反应白刺果汁的色谱图与所述反应后白刺果汁的色谱图中相应的各个峰的峰面积；若峰面积减少的峰，即说明白刺果汁中具有抗氧化成分。
2.如权利要求I所述的一种DPPH-HPLC法检测白刺果汁中抗氧化成分的方法，其特征在于所述白刺果汁是指白刺原果汁或5000道尔顿有机膜过滤后的白刺果汁。
3.如权利要求I所述的一种DPPH-HPLC法检测白刺果汁中抗氧化成分的方法，其特征在于所述高效液相色谱检测方法是指流动相A为甲醇，流动相B为纯净水；流速为O. 8 I. 5 mL/min,检测波长为210 nnT390 nm;流动相条件为0 min 20 min,5%A 5%A，95%B 95%B ;20 min 25 min，5%A 15%A，95B% 85%B ;25 mirT50 min,15%A 25%A，85%B 75%B。
全文摘要
本发明涉及一种DPPH-HPLC法检测白刺果汁中抗氧化成分的方法，该方法首先将抗氧化剂1,1-二苯基-2三硝基苯肼与白刺果汁避光反应，得到反应后白刺果汁；然后分别将未反应白刺果汁与所述反应后白刺果汁注入高效液相色谱中检测，分别得到未反应白刺果汁的色谱图与反应后白刺果汁的色谱图；最后，比较所述未反应白刺果汁的色谱图与所述反应后白刺果汁的色谱图中相应的各个峰的峰面积；若峰面积减少的峰，即说明白刺果汁中具有抗氧化成分。本发明具有所用试剂量少、操作简单方便、灵敏度高、精密度高稳定性好等特点，可以实现对白刺果汁中抗氧化成分进行有效性的评价。
文档编号G01N30/06GK102879499SQ20121038183
公开日2013年1月16日 申请日期2012年10月11日 优先权日2012年10月11日
发明者陈晨, 李玉林, 陶燕铎, 邵赟, 梅丽娟, 赵晓辉, 岳会兰, 陈涛 申请人:中国科学院西北高原生物研究所